TEMA: Gluconeognesis MARCO TEORICO: Importancia Biolgica La glucosa es considerada como el combustible y bloque estructural casi universal de todos

los organismos vivos, desde los microbios hasta el hombre. La glucosa de la sangre se constituye como la nica o la principal fuente de combustible para ciertos tejidos de los mamferos. Es as que el cerebro, sistema nervioso humano, mdula renal, testculos, eritrocitos y tejidos embrionarios la utilizan como un glcido esencial para obtener energa. En el caso del cerebro, ste utiliza 120g de glucosa al da que corresponde a ms de la mitad de toda la glucosa almacenada como glucgeno en el msculo y en el hgado (160g).

Fig 1. Transporte de glucosa por el torrente sanguneo. En varias ocasiones, el suministro de glucosa a partir de depsitos, como el glucgeno, no es suficiente, puesto que en periodos entre comidas, en ayunos prolongados y despus de realizar un ejercicio vigoroso el glucgeno puede agotarse, entonces surge la necesidad por parte de los organismos de buscar una va alternativa para sintetizar glucosa. Frente a esta necesidad surge la gluconeognesis que significa formacin de un azcar nuevo, esta va se encarga de obtener glucosa a partir de precursores no glucosdicos as a partir del piruvato y compuestos relacionados de 3 y 4 carbonos se producir glucosa. Los precursores ms importantes en animales son compuestos de 3 carbonos tales como: lactato, piruvato, glicerol y ciertos aminocidos entre los cuales figura principalmente la alanina.

Fig 2. Sntesis de glcidos a partir de precursores sencillos. La gluconeognesis en mamferos tiene lugar principalmente en el hgado y en menor extensin en la mdula renal. La glucosa producida pasa a la sangre para abastecer a todos los tejidos de los organismos vivos. Es as que despus de un ejercicio vigoroso, el lactato producido por la gluclisis anaerobia en el msculo esqueltico vuelve al hgado y se convierte en glucosa, que vuelve de nuevo al msculo y es almacenado en forma de glucgeno, a este ciclo se lo conoce como ciclo de Cori.

Fig 3. Ciclo de Cori Por otro lado, en las semillas germinadas de plantas, las grasas y protenas almacenadas se convierten a travs de rutas entre las cuales se encuentra la gluconeognesis, en el disacrido sacarosa y en almidn para ser transportados por la planta en desarrollo y posteriormente ser almacenados. La glucosa y sus derivados son los precursores en la sntesis de los componentes de las paredes celulares de las plantas, nucletidos y coenzimas de un gran nmero de metabolitos esenciales. En microorganismos, la gluconeognesis se produce a partir de compuestos orgnicos sencillos tales como: acetato, lactato y propionato los cuales estn presentes en el medio de cultivo. Las reacciones de la gluconeognesis son las mismas en todos los organismos, el contexto metablico y la regulacin de la va difieren de organismo a organismo y de tejido a tejido. Gluclisis y Gluconeognesis La gluclisis y la gluconeognesis son vas metablicas que se dan en el citosol de la clula. La finalidad de la gluclisis es obtener piruvato a partir de glucosa, en cambio la gluconeognesis tiene como objetivo obtener glucosa a partir de piruvato. stas no son rutas idnticas que transcurren en direcciones opuestas, si bien es cierto, comparten la mayora de los pasos, 7 de las 10 reacciones enzimticas de la gluconeognesis son la inversa de las reacciones glucolticas. Sin embargo, existen 3 reacciones que no se pueden dar en forma inversa para la gluconeognesis, puesto que existe una razn termodinmica para stas, debido a que estn muy desplazadas en el equilibrio son irreversibles in vivo, stas reacciones de la gluclisis se muestran en la fig 4.

Fig 4. Reacciones de la glucosa que son irreversibles. En las clulas, estas 3 reacciones se catalizan por una gran variacin negativa de energa libre, mientras que otras reacciones glucolticas tienen una energa libre prxima a cero. Esto se lo puede visualizar en la Fig 5.

Fig 5. Variaciones de energa libre en la gluclisis de los eritrocitos. G hace referencia a las condiciones estndar. G presenta los clculos realizados con las concentraciones reales de los intermediarios glucolticos en condiciones fisiolgicas de los eritrocitos a pH 7.

En la gluconeognesis, los 3 pasos irreversibles se rodean mediante un conjunto diferente de enzimas que catalizan reacciones bastante exergnicas lo que las hace irreversibles.

Fig 6. Reacciones de la Gluconeognesis. A continuacin se presenta el esquema general de la gluconeognesis con los pasos comunes que tiene con la gluclisis.

G L U C L I S I S

G L U C O N E O G N E S I S

Fig 7. Esquema general de Gluclisis y Gliconeognesis.

Sintesis De Fosfoenolpiruvato (PEP) A Partir De Piruvato Se da mediante dos fases en distintos sitios: a) Conversin de piruvato en oxalacetato en la mitocondria. La membrana mitocondrial no tiene un transportador para el oxalacetato por lo cual este debe reducirse a malato para ser transportado al citosol y asi generar NADH citoslico al continuar con el proceso de formacin de de PEP. b) En el citosol el malato transportado se transforma en oxalacetato al reoxidarse nuevamente: Malato +NAD+ Oxalacetato + NADH + H+

Posteriormente el oxalacetato es convertido en PEP, gracias a que un compuesto de alta energa denominado GTP proporciona el grupo fosforilo. Esta reaccin es reversible pues la formacin de un compuesto fosfato de alta energa como es el PEP se compensa con la hidrlisis de otro como es el GTP. En este proceso se usaron 2 equivalentes fosfato de alta energa: uno del ATP y otro del GTP, los cuales proporcionan 50kJ/mol cada uno en el medio celular, a diferencia de en la gluclisis donde solo se obtena ATP. Si bien la variacin de energa libre estndar de la reaccin en dos fases desde e l piruvato al PEP es de 0.9kJ/mol, en condiciones fisiolgicas su valor real es de -25kJ/mol, esto debido al alto consumo de PEP por otras reacciones que mantienen este compuesto en concentraciones relativamente bajas haciendo de esta reaccin un proceso irreversible. Podemos determinar y observar tambin que el grupo CO2 que se une al piruvato en la mitocondria para formar el oxalacetato es el mismo que se elimina en el CO2 para formar por descarboxilacin el PEP. Esta secuencia de carboxilacin-descarboxilacin permite activar al piruvato para que la descarboxilacin del oxalacetato facilite la formacin de PEP. Como sabemos el NADH citoslico ser usado posteriormente en la gluconeognesis para producir el gliceraldehdo 3-fosfato, por lo cual se comprende que la biosntesis de la glucosa se da siempre y cuando de suministre este compuesto de reduccin. El transporte de malato fuera de la mitocondria y su reconversin a oxalacetato representa una forma de transporte de este equivalente de reduccin haciendo del proceso de formacin de PEP importante para mantener el equilibrio entre el NADH producido y consumido. Biotina en Rx de la piruvato carboxilasa La biotina es una vitamina que en este caso acta como cofactor unido de forma covalente mediante un enlace amida al grupo alfa-amino de un residuo de lisina, formando la biotinil enzima. Esta reaccin ocurre en dos fases en sitios catalticos distintos. En el sitio 1 el in bicarbonato es convertido en CO2 a expensas del ATP, este CO2 se incorpora al biotinilenzima formando carboxibiotinil-enzima, Luego un largo brazo formado por la biotina y la

cadena lateral de la lisina transportan el CO2 desde el sitio cataltico 1 al 2 en la superficie enzimtica donde reacciona con el piruvato formando el oxalacetato y regenerando el biotinil-enzima. Rutas alternativas desde el piruvato a fosfoenolpiruvato Cabe especificar que la formacin de PEP tiene dos rutas alternativas que dependen del precursor disponible y se ven influenciadas por la disponibilidad del NADH citoslico. Si el precursor es el piruvato la reaccin ocurre como ya se la especific anteriormente, pero el proceso cambia si como precursor se trabaja con el lactato produccin por gluclisis en condiciones de hipoxia en eritrocitos o el msculo por ejemplo. Este lactato se convierte en piruvato en el citoplasma de hepatocitos por accin de la lactato deshidrogenasa produciendo NADH citoslico por lo que el transporte del malato fuera de la mitocondria ya no ser necesario. El piruvato obtenido entra en la mitocondri y se transforma en oxalacetato de la misma forma que en la anterior ruta especificada y dentro de dicho orgnanelo este compuesto se transforma en PEP por accin de una isozima de la PEP carboxiquinasa, posteriormente el PEP saldr de la mitocondri para continuar con el proceso de gluconeognsis. Si bien hemos hablado de la gluclisis y la gluconeognesis como opuestas debemos recalcar que tres de sus reacciones en la gluconeognesis no se realizan por simple reversin, sino que cumplen un rodeo mediante el cual se obtienen los mismos productos que en el caso de la gluclisis sera los reactantes pues la direccin es opuesta. (Segundo Fru 1,6-bifosfato Rodeo): Fru 6-fosfato

El primer rodeo es la sntesis ya analizada del PEP, el segundo rodeo es la formacin de la fructosa 6-fosfato a partir de la fructosa 1,6-bifosfato. En esta reaccin la enzima usada es la fructosa 1,6-bifosfatasa dependiente de Mg2+, la cual reemplaza a la PFK-1 usada en la gluclisis. El proceso ocurre mediante la hidrlisis del fosfato en el carbono 1 de la fru 1,6-bifosfato y no por sntesis de ATP. Fructosa 1,6-bifosfato + H2O Fructosa 6-fosfato + Pi G=-16,3kJ/mol (Tercer Glucosa 6-fosfato Rodeo): Glucosa libre

El tercer rodeo de la gluconeognesis es la reaccin final para convertir la glucosa 6fosfato en glucosa libre, catalizada por la glucosa 6-fosfatasa que reemplazara a la hexoquinasa usada en la gluclisis. En esta reaccin al igual que en la anterior se produce una hidrlisis en lugar de la fosforilacin del ADP para formar ATP en el caso de que

iramos en sentido inverso de la gluclisis, lo cual no sera factible, sera energticamente desfavorable. La enzima usada en este rodeo no se encuentra ni en el cerebro, ni en los msculos por lo que la gluconeognesis no se realiza en stos rganos y la glucosa se obtiene por los alimentos ingeridos o por su produccin en el hgado y el rin.