UNIVERSIDADE FEDERAL DO VALE DO SO FRANCISCO Curso de Cincias Farmacuticas Disciplina: Qumica Farmacutica I

Molinspiration

Petrolina, 06 de fevereiro de 2014.

Ana Pricilla Lima Andrade Jac David Souza Silva Dbora Emanuella Lima Fmela Batista da Silva Francisco Glaudson Granja Parente

Molinspiration

Trabalho

apresentado de

como da

complementao

atividades

disciplina de Qumica Farmacutica I pela Universidade Federal do Vale do So Francisco. Professor: Edilson Bezerra.

Petrolina, 06 de fevereiro de 2014.

SUMRIO

1. INTRODUO ....................................................................................................... 3 2. OBJETIVOS ............................................................................................................ 5 2.1 Objetivo Geral ....................................................................................................... 5 2.2 Objetivos Especficos ............................................................................................ 5 3. METODOLOGIA...................................................................................................... 6 4. RESULTADOS E DISCUSSES ............................................................................ 7 4.1 Propanolol ............................................................................................................. 7 4.2 Celecoxibe........................................................................................................... 14 4.3 Sildenafila ............................................................................................................ 28 4.4 Ritanovir .............................................................................................................. 34 4.5 Lidocana ............................................................................................................. 39 4.6 Meloxican ............................................................................................................ 44 5 CONCLUSO ........................................................................................................ 50 6 REFERNCIAS ...................................................................................................... 51

1.INTRODUO
A Qumica Medicinal estuda as razes moleculares da ao dos frmacos de maneira a descrever a relao entre a estrutura qumica e a atividade farmacolgica, hierarquizando as diferentes contribuies funcionais. No contexto inverso, inclui-se o planejamento e o desenho estrutural de novas substncias que possuam propriedades farmacoteraputicas teis, capazes de representarem novas entidades qumicas, candidatas a prottipos de novos frmacos de uso seguro. Esta complexa tarefa envolve mltiplos fatores, responsveis pela resposta teraputica desejada e decorrentes da complexidade dos sistemas biolgicos, abrangendo diversos conceitos de diferentes disciplinas, no podendo ser cumprida aleatoriamente. Heuristicamente para a identificao de um novo composto-prottipo ou uma nova entidade qumica que possa representar um novo candidato a frmaco, elege-se o melhor alvo-farmacolgico para aquela aplicao teraputica e, em funo do nvel de conhecimento estrutural disponvel sobre este receptor, identifica-se a melhor estratgia para a construo da arquitetura molecular do novo ligante desejado. Diversas estratgias modernas de desenho molecular de novos prottipos so conhecidas2, em funo do mecanismo de ao pretendido, seja inibio enzimtica, reversvel ou no, ou agonismo/antagonismo, competitivo ou no, do receptor, que dependem do nvel de conhecimento de sua topografia. (BARREIRO et al, 2002). A hibridizao molecular compreende a reunio de caractersticas estruturais, de dois compostos bioativos distintos, em uma nica nova estrutura, originando uma nova substncia que poder apresentar a atividade de um dos padres originais ou conjugar ambas as atividades em uma nica molcula. (BARREIRO, 2008). O conceito de bioisosterismo refere-se a compostos ou subunidades estruturais de compostos bioativos que apresentem volumes moleculares, formas, distribuies eletrnicas e propriedades fsico-qumicas semelhantes, capazes de apresentar propriedades biolgicas similares. uma estratgia de modificao molecular de um composto-prottipo, baseada na troca de determinados fragmentos moleculares, por exemplo, um grupamento funcional por outro que apresentem propriedades fsico-qumicas semelhantes, como a acidez. As motivaes para aplicao do bioisosterismo pelo qumico farmacutico medicinal podem estar relacionadas s fases farmacocinticas (PK), modulando as propriedades de

absoro, distribuies, metabolismo e eliminao (ADME), ou farmacodinmica (PD) de ao de um composto bioativo, visando sua otimizao. (SILVA, G. D. B et al., 2012). A simplificao consiste em uma estratgia de planejamento molecular de novos frmacos foi empregada em seus primrdios, empiricamente, sem o prvio conhecimento das diferentes contribuies farmacofricas das distintas subunidades estruturais do prottipo, geralmente, mas no exclusivamente, de origem natural. Consiste como o prprio nome diz, em uma simplificao molecular, com a retirada com ou no a insero de outros grupos, que venham simplificar a molcula. (BARREIRO, 2008) O termo latenciao de frmacos para o processo de obteno de prfrmacos foi proposto por Haper em 1959. Latenciao a transformao do frmaco em forma de transporte inativo que, in vivo, mediante reao qumica ou enzimtica, libera a poro ativa no local de ao ou prximo dele. Uma das formas latentes obtidas mediante este processo denomina-se pr-frmaco. (CHUNG e FERREIRA, 1999). O Molinspiration consiste em uma ferramenta online, que ofereceampla gama deferramentas de softwarede apoio quimico informtico de manipulao e processamento de molculas, incluindo SMILES e converso SDfile, a normalizao das molculas, gerao de tautomeros, fragmentao de molculas, o clculo de vrias propriedades moleculares necessrias em QSAR, modelagem moleculares, desenho de drogas, de alta qualidade molcular e representao ,ferramentas de bancos de dados moleculares de apoios para pesquisas. Essa plataforma estar na configurao JAVA, ou seja, pode ser usada em qualquer computador. Dessa forma uma ferramenta potente, tanto para a pesquisa, quanto para o ensino, onde pode ser empregadas todas as tecnicas, citadas acima, e ser testadas suas atividades biologicas de forma estatistica sem a necessidade de uso e tecnicas laboratrias, o que acarretaria em um ganho de tempo e menor custo de pesquisa. (MOLINSPIRATION, 2014)

2. OBJETIVOS
2.1. Objetivo Geral: Aplicar mtodos de modificao molecular em molculas de frmacos conhecidos para se obter diversos anlogos e avaliar suas propriedades fsicoqumicas e farmacolgicas com a utilizao da plataforma Molinspiration. 2.2. Objetivos Especficos: Conhecer e aplicar as estratgias de planejamento e modificao de molculas de frmacos; Familiarizar-se com a plataforma Molinspiration; Compreender os efeitos das modificaes realizadas usando o pensamento cientfico;

3. METODOLOGIA
1) Acessou-se o site: http://www.molinspiration.com/http://www.molinspiration.com/ 2) Foi clicado em: Calculation of Molecular Properties and Prediction of Bioactivity. 3) As estruturas foram desenhadas na regio especfica; 4) O escores de Bioatividade e valores de propriedades fsico-qumicas foram obtidos aps o clique, respectivamente, nas seguintes abas: Predicty Bioactivity e Calculate Properties, bem como o clique na aba Galaxy 3D Generator permitiu a visualizao da estrutura desenhada em 3D;

4. RESULTADOS E DISCUSSES
4.1 Propranolol O propranolol um frmaco antiarrtmico, que possui um anel naftalnico na sua estrutura. Sua atividade se deve a duas aes: Bloqueio dos beta receptores cardacos principalmente, e em concentraes acima das utilizadas clinicamente tambm causa estabilizao da membrana. Os efeitos cardacos causados pelo bloqueio de receptor beta correspondem a reduo da freqncia cardaca e contratilidade do miocrdio, prolongamento do tempo de conduo trio-ventricular e da refratariedade e supresso da automaticidade (KOROLKOVAS, 2009). adjuvante na terapia da ansiedade. O propranolol ainda possui indicaes de uso na profilaxia da enxaqueca e como

Mecanismo de ao: O Propanolol compete especificamente com agentes estimulantes de receptores b-adrenrgicos, pelos stios receptores disponveis. Quando o acesso aos stios receptores b-adrenrgicos bloqueado pelo Propanolol as respostas cronotrpicas, inotrpicas, e vasodilatadora do estmulo b-adrenrgico so proporcionalmente diminudas. O mecanismo de efeito anti-hipertensivo do Propanolol, no est totalmente elucidado. Entre os fatores que podem estar envolvidos, contribuindo para a ao anti-hipertensiva, esto: a diminuio do dbito cardaco, inibio da secreo de renina pelos rins e a diminuio do tnus simptico, provenientes dos centros vasomotores do crebro.Na angina pectoris, Propanolol geralmente reduz a necessidade de oxignio do corao, impedindo o aumento da freqncia cardaca induzida pelas catecolaminas, reduzindo a presso arterial sistlica e o ritmo cardaco (LAFEPE, 2006).

Interao da molcula com o receptor: De acordo com a proposta de Easson e Stedman,o reconhecimento molecular de um ligante com um nico centro assimtrico pelo biorreceptor envolveria a participao de ao menos trs pontos. Ento o reconhecimento do antpoda correspondente pelo mesmo stio receptor no seria to eficaz devido perda de um ou mais pontos de interao complementar (ELIEZER, 2008).

Esses autores inspiraram o modelo dos trs pontos que considera o mecanismo de reconhecimento estereoespecfico do propranolol pelos receptores beta-adrenrgicos. O enantimero (S) do propranolol reconhecido pelo receptor beta-adrenergico pelos seguintes pontos: 1) Stio de interao hidrofbica que o que reconhece o grupamento naftila; 2) Stio doador de ligao de hidrognio, que reconhece o tomo de oxignio da hidroxila lateral e 3) Stio de alta densidade eletrnica, que reconhece o grupamento amina da cadeia lateral, que se encontra ionizado em pH fisiolgico e essa interao do tipo on-dipolo (ELIEZER, 2008).

Modificaes feitas na molcula do propranolol para obteno de anlogos utilizando o Molinspiration:

Atravs da modificao de molculas utilizando princpios do bioisosterismo, latenciao, simplificao e hibridao molecular, foram obtidos anlogos do propranolol e suas caractersticas e bioatividade foram analisadas pelo molinspiration. A primeira modificao mostrada na figura acima foi feita atravs da formao de um 1,4-dioxano utilizando o ter e a hidroxila originrios da estrutura do propranolol atravs da ciclizao, sendo este um exemplo de bioisosterismo no clssico. Ainda foi adicionado um grupo trifluorometil na poro aliftica da molcula. Aps feitas essas modificaes foram observados resultados positivos em relao s caractersticas fsico-qumicas e farmacolgicas da molcula. A formao do dioxano proporcionou maior seletividade da molcula como ligante de receptor acoplado a protena G, que no caso seria pelos receptores beta-adrenrgicos, pois adio ou formao de ciclos aumenta a rigidez molecular, resultando numa maior seletividade. Nesse anlogo ainda h possibilidades de manter os trs pontos de interao da molcula com os trs pontos do receptor beta adrenrgico, pois a amina e os anis aromticos foram preservados, apenas a hidroxila foi modificada, mas foi mantido o oxignio, que pode ainda fazer ligao de hidrognio com o sitio doador de ligao de hidrognio do receptor. O score que reresenta a atividade de ligante antagonista aumentou de 0,12 do propranolol para 0,30 do anlogo, portanto isso mostra que essa modificao foi satisfatria e pode ser promissora para obteno de um frmaco potente para exercer atividades antagnicas sobre os receptores beta-adrenrgicos, e podendo ser utilizado com finalidades teraputicas. As modificaes no influenciaram com tanta intensidade em outras caractersticas avaliadas pelo molispiration, sendo importante porque dessa forma, a molcula no

ter afinidade elevada por outros alvos e a ocorrncia de efeitos colaterais no ser alta, sendo mais uma das vantagens dessa modificao. Outro ponto de destaque obtido foi a elevao do logP da molcula de 2.967 para 3.444, aumentando ento a sua lipofilicidade. A lipofilicidade definida pelo coeficiente de partio de uma substncia entre uma fase aquosa e uma fase orgnica. Os frmacos que apresentam maior coeficiente de partio, ou seja, tem maior afinidade pela fase orgnica tendem a ultrapassar com maior facilidade as membranas 2008). A importncia do estudo da influncia da lipofilia no planejamento de frmacos em estudos de relaes quantitativas estrutura-atividade (QSAR) aplicadas e desenvolvidas dentro da indstria farmacutica levou um pesquisador da Pfizer, chamado Christhopher Andrew Lipinski a estabelecer uma polmica regra geral para o planejamento de frmacos, descoberta em 1995 e publicada em 1997, que conhecida como regra de Lipinski ou regra de cinco, tem-se este nome porque cada um dos quatro parmetros envolvidos usam valores que so mltiplos do nmero 5. Nesta regra o autor postula que, para as centenas de frmacos estudados neste trabalho, a baixa atividade farmacolgica devida sua baixa absoro e permeabilidade que ocorre quando: 1) h mais do que 5 centros doadores de ligao de hidrognio, 2) h mais do que 10 aceptores de ligaes de hidrognio, 3) o peso molecular maior do que 500 unidades e 4) o log P calculado maior do que 5. Mas vale ressaltar que algumas classes de frmacos no seguem esta regra. De qualquer forma, esta anlise geral feita por Lipinski considerada de grande relevncia e evidencia a importncia da lipofilicidade na atividade farmacolgica e no planejamento racional de qualquer frmaco (UFF, 2009). Portanto, a regra de Lipinski foi obedecida durante a modificao do propranolol para a obteno dos dois anlogos. Sendo o segundo, o mostrado na figura abaixo: biolgicas hidrofbicas, apresentando melhor perfil de biodisponibilidade, que pode refletir em um melhor perfil farmacolgico (ELIEZER,

Nessa estrutura um dos anis aromticos do anel naftalnico foi substitudo por um ciclopentadieno, sendo essa uma modificao bioisostrica clssica, alm desta, ainda foi formado o dioxano utilizando o ter e a hidroxila originais do propranolol (semelhante a modificao feita no primeiro anlogo) que se trata de bioisosterismo no clssico. Atravs dessas modificaes tambm foram obtidos resultados positivos em relao a atividade ligante de receptores acoplados a protena G, que uma caracterstica desejvel para esse anlogo. Em relao ao

logP, este foi diminudo de 2.967 para 2.604, mas apesar disso ainda se encontra na faixa ideal para frmaco de acordo com a regra dos cinco de Lipinski, portanto no causaria tanto impacto na atividade do frmaco, pois ainda assim ele ter facilidade em atravessar as membranas biolgicas para produzir seu efeito no organismo.

4.2 Celecoxibe ciclooxigenase 2 (COX-2) (COX reduzindo O Celecoxibe inibe a atividade da enzima ciclooxigenase-2 a formao de precursores de prostaglandinas. Contudo, ao contrrio da maioria dos anti-inflamatrios no esteroides (AINEs), o Celecoxib no inibe a ciclooxigenase-1 ciclooxigenase (COX-1), uma isoenzima, quando uando em concentraes teraputicas, dessa forma o frmaco mais seletivo. (CELECOXIBE, 2003).

(http://www.uff.br/mfl/outras_disciplinas/med_integral_infancia_adolescente/cox 2.htm) O acesso ao local cataltico da COX-2 COX 2 atravs da membrana lipdica. (CELECOXIBE, 2003).

Intera Interao do Celecoxib com a COX-2 O Celecoxib, como inibidor seletivo sele da COX-2, 2, apresenta menores reaes rea adversas, principalmente a nvel gastrointestinal, quando comparado com os outros

AINEs, pois estes tambm inibem a COX-1 (associada proteo gastrointestinal). (CELECOXIBE, 2003). O bioisosterismo vem sendo aplicado amplamente na modificao de molculas, visando ampliar suas propriedades farmacolgicas, nesse caso, podemos citar como exemplo do celecoxibe, modificaes de bioisosterismo de anis, so empregadas, como na substituio de um anel pirazolo, por um pirazolopirimidina, para a formao do pirazolo (1,5-a)pirimidina, que resultou na otimizao das propriedades farmacodinmicas do celecoxibe, entretanto comprometeu a sua biodisponibilidade oral. (BARREIRO, 2008) Outras tcnicas podem ser empregadas como a simplificao molecular, latenciao, hibridao molecular. Utilizando a ferramenta online do Molinspiration, temos a exemplificao da molcula do celecoxibe, e as suas propriedades farmacolgicas e fsico-qumicas;

Os

valores

expressos

demonstram

atravs

de

analise

estatstica,

comparatrios, de um banco de dados, com os valores aproximados e sua relao com a atividade farmacolgica contribuinte de cada grupamento qumico presente na molcula e as suas relaes. Podemos observar, sabendo que os valores do aplicativo variam de -3 +3, que os valores para ligante para receptores de protena G, esto expressos em (-0,06), modulador de canal inico, em (-0,27), Kinase inibidor (0,01), ligante para receptor nuclear em (-0,28) ou seja sua menor

predisposio, para inibidor de protease (-0,06) e para inibidor de enzima, que a sua atividade farmacolgica especfica o valor mais positivo e marcante (0,17). Em suas caractersticas fsico-qumicas, e tambm principalmente correlacionando as suas caractersticas qumico-medicinais especificas, que foi observado com maior ateno, como o LogP, temos;

Observamos que o valor do LogP estar dentro da regra de Lipinsk, e que a rea superficial da molcula apresenta (77,991), com o nmero de rotaes (4), dessa forma, foi observada quais grupamentos eram farmacofricos, ou seja, que no poderiam ser modicados, so eles;

Dessa forma, esses grupos no poderiam ser alterados, mesmo se os valores de Inibio enzimtica aumentassem muito, e em detrimento dos outros valores se tornando ainda mais seletiva como nesse exemplo;

Diante disso, necessrio fazer alteraes de forma estratgica, sem perder alguns grupamentos da molcula importantes para a sua inibio enzimtica, apesar desse valor apresentar uma boa escolha, ou mesmo a probabilidade de alosterismo, o que poderia abrir um precedente para o uso das suas molculas na mesma formulao, o que faria aumentar em muito seu efeito, j que as duas inibiriam a enzima em pontos diferentes, mas para isso seriamnecessrias outras ferramentas. Essa molcula foi descartada, diante desse trabalho.

Dessa forma, sabendo desses conceitos, pode se destacar como alternativa a seguinte molecula;

Observa-se a conservao dos principais grupamentos em elipse vermelha, o grupo sulfoxidonitrila, dipiridina ligado a CF3 e toluidina, as quatro seguintes modificaes, foram propostas como alternativa, e os resultados observados no Molinspiration, foram satisfatrios. A insero, primeiramente de uma ligao simples entre as posies orto, dos dois benzenos ligados a dipiridina, fazendo com que a molcula, diminusse a sua rotao dos benzenos, na ligao , criando uma restrio conformacional, e dessa forma aumentando seu poder de seletividade que foi observada primeiramente. Entretanto, foi observado que na medida em que o valor de Inibidor enzimtico aumentava, o valor de modulao de canal inico tambm subia exponencialmente, em relao ao valor da inibio enzimtica, dessa forma outras modificaes deveriam ser realizadas, para equalizar a molcula, e torn-la, apenas mais seletiva para enzima, e concentrar os valores negativos nas outras atribuies de bioatividade do Molinspiration.

Durante 78 tentativas, observou que a insero de um grupamento metila, no AR, na posio meta, com o grupo sulfoxidonitrila ligado na posio para, diminua o valor de seletividade para canal inico, alterando pouco o valor conseguindo para inibidor enzimtico. O logP ficou muito prximo ao limite estabelecido pela regra de Lipinski, dessa forma esse possvel frmaco poderia ter tambm dificuldades na sua disponibilizao por via oral, e distribuio, com isso, foram inseridas duas hidroxilas, ligadas nas posies orto e meta, o que baixou muito o logP, deixando-o prximo da molcula original, e deixando a seletividade por canal inico ainda menor. Por ltimo, para aumentar o LogP, novamente de forma estratgica, foi inserido um halognio, que elevaria tanto o LogP, como seria um grupo protetor. Foram testados diferentes pontos de insero, e observou-se que a melhor posio seria em meta, do AR, com a sulfoxidonitrila, e tambm o melhor halognio seria o Bromo, que aumentaria o LogP, a seletividade por enzima, e diminuiria a seletividade por canal inico.

Diante do exposto, os valores obtidos demonstraram que a escolha dos grupos aumentou a seletividade da molcula, no de forma to explicita do que outras modificaes, que foram possveis de serem realizadas, entretanto conservou importantes grupos, restringiu conformaes da molcula, e mesmo aumentando o valor como o de modulao para canal inico, mas que foi controlada com as posteriores alteraes, a seletividade, para GPCR, quinase inibidor, receptor nuclear, e inibidor de protease, todos foram diminudos, tornando assim a molcula ainda mais seletiva, evitando portanto, de forma terica, efeitos adversos.

Se formos comparar esses dados em forma de tabela comparativa, temos; Valores GPCR Ion channel mod. Kinase I. Nuclear R.L Protease I. Enzyme I. Celecoxibe -0,06 -0,27 0,01 -0,28 -0,06 0,17 Celecoxibe Mod. -0,10 -0,02 -0,05 -0,29 -0,14 0,30 Diferena -0,04 0,25 -0,06 -0,01 -0,08 0,13

Os nicos valores aumentados foram de Ion Channel mod, e de Enzyme I., entretanto os valores de Ion channel mod, ainda continuaram negativos, enquanto que a inibio enzimtica, foi para 0,30. Enquanto destacando novamente, todos os outros valores diminuram na escala, demonstrando que a molcula se tornou ainda menos seletiva para esses alvos, mantendo seus grupos farmacofricos.

Como resultado dessa modificao, podemos constatar que o LogP foi aumentado de forma satisfatria, tal como a rea superficial da molcula o que poderia dificultar ainda mais a sua seletividade por canais inicos, o nmero de rotaes tambm partiu de 4 para 2, ou seja, maior ainda a seletividade, o nico problema nesse caso, seria uma violao da regra de Lipinski, que seria o peso molecular, que violou pouco, apenas 4,284, o que poderia ser desconsiderado. Em tabela temos esses resultados. Valores miLogP TPSA Natoms NW nON nOHNH nV. Nrotb Volume Celecoxibe 3,611 77,991 26,0 381,379 5 2 0 4 298,65 Celecoxibe Mod. 4,499 117,928 30,0 504,284 7 4 1 2 338,29 Diferena 0,888 39,937 4,0 122,905 2 2 1 -2 39,64

Podemos sugerir que em relao a esses valores obtidos, podemos ter uma boa opo para frmaco, entretanto outros parmetros devem ser observados. Pois algo a ser citado nesse trabalho que o Molinspiration no to completo nessa anlise, e se baseia apenas em ferramentas estatsticas.

Molcula modificada ArgusLab (Viso axial)

Molcula

modificada

ArgusLab

(Viso

sargital)

A latenciao, tambm pode ser escolhida, como uma tcnica de modificao molecular, e foi a segunda escolha para a molcula do celecoxibe. Outro frmaco com atividade anti-inflamatria e que tambm no esteroidal, o etodolaco, cuja estrutura est mostrada abaixo:

Observando na sua estrutura a presena de um grupamento cido carboxlico, e sabendo que sobre a presena de esterases, muito comumente, frmacos com o grupamento funcional ster, metabolizado com quebra hidroltica, em duas molculas: uma contendo o restante da cadeia carbnica, e outra contendo um cido carboxlico, como no exemplo abaixo do enalapril;

(http://www.scielo.br/scielo.php?pid=s010040422007000100029&script=sci_arttext) Tendo em vista isso, adotou-se a seguinte opo: unir a poro parametilica, do AR toluidnico da molcula original do cetocoxibe;

Com o grupamento COOH do etodolaco unindo as duas molculas em um ster, dessa maneira, o novo frmaco ficaria suscetvel ao das esterases circulantes, e esse pr-frmaco, quando metabolizado liberaria tanto o celecoxibe, quanto o etodolaco, dois frmacos anti-inflamatrios, o primeiro totalmente seletivo para a COX2, e o segundo parcialmente seletivo segundo o GOODMAN 2006, dessa maneira, a interpretao noMolinspiration, foi feita em etapas diferentes. Uma com cada molcula separada, e outra com a latenciao.

Por segundo, foram observados os valores do etodolaco, que apresentou alto valor para inibio enzimtica, no entanto os resultados demonstraram pouca seletividade, entretanto, de acordo com o GOODMAN 2006, no atribui muitos efeitos adversos, somente anestesia geral parcial, sendo utilizado no ps-operatrio, e como antiemtico causado pela anestesia geral tal como o cetorolaco, o que seria interessante, no que diz respeito reduo do processo inflamatrio, e aos sintomas ps-operatrios, dessa forma temos;

Com a latenciao da molcula do etodolaco com o celecoxibe temos a molcula da figura a seguir, e seus valores comprovam que ela teoricamente pouco seletiva para qualquer tipo de alvo, ou seja, um bom pr-frmaco, que s ter atividade mediante a sua metabolizao em etodolaco e celecoxibe, demonstrado o alvo de ataque da enzima esterase, como mostrado na seta em vermelho:

Os valores que fogem da regra de Lipinsk, como o LogP e tamanho molecular, podem afetar na sua distribuio e absoro, no entanto, so correspondentes ao pr-frmaco. Os frmacos liberados na sua metabolizao esto dentro desses parmetros.

4.3 Sildenafila O sildenafil ( Viagra) o frmaco empregado para o tratamento da

disfuno erctil, sendo o mesmo, mesmo inibidor de fosfodiesterase (PDEs) mais especificadamente da PDE5.[Toque,2008] As PDEs so importantes classes de enzimas que promovem a hidrlise do monofosfato cclico de adenosina e guanosina (cAMP e cGMP) [Figura 1]. Estes segundos mensageiros so responsveis pela mediao de diversas respostas fisiolgicas vitais, envolvendo diferentes hormnios, neurotransmissores ou autacides. O aumento da taxa celular destes nucleotdeos nucleotdeos cclicos, por exemplo, promove a ativao de protenas quinases (PKs) que, por sua vez, efetuam a fosforilao de diferentes tipos de substratos, regulando inmeras respostas celulares. [Toque,2008]

Figura 1: Esquema da hidrlise promovida pelas p PDEs

A fosfodiesterase atua inibindo o aumento de GMPc e consequentemente seus efeitos. A sildenafilabloqueia a ao da fosfodiesterase V (PDE-V), (PDE desta forma, atua potencializando as aes vasodilatadoras do NO - derivado do endotlio - nos corpos carvenosos do pnis o que provoca a ereo independente do desejo sexual.[Toque,2008]

Estrutura do sildenafil

Modificaes realizadas na molcula do sildenafil com intuito de descobrir anlogos empregando a plataforma molinspiration

A primeira modificao realizada do sildenafil,foi na substituio do grupo SO2-R pelo radical metila no anel benzeno, para isso foi empregada a estratgia de simplicao molecular, que inicialmente empregada na obteno de compostos estruturalmente mais simples, a partir de prottipos naturais ativos, estruturalmente complexos. Esta estratgia de planejamento molecular de novos frmacos foi empregada em seus primrdios, empiricamente, sem o prvio conhecimento das diferentes contribuies farmacofricas das distintas subunidades estruturais do

prottipo, geralmente, mas no exclusivamente, de origem natural. Atualmente, os avanos observados no estudo da relao entre a estrutura qumica e a atividade permitiram que esta estratgia passasse a ser empregada empregada de forma for racional, preservando as subunidadesfarmacofricas, unidadesfarmacofricas, previamente identificadas no compostocomposto prottipo eleito, natural ou sinttico.[Barreiro, 2002]. 2002] Outra modificao realizada foi a mudana no anel el pirrlico no qual foi modificada a posio dos nitrognios, sendo um exemplo de bioisosterismo de ciclo. Tambm houve a substituio do grupo etila por um ciclopentano na poro O-R. O Com as modificaes anteriores realizadas houve um aumento no LogP Log de 2,511 1 para 4,448, isto foi proporcionado proporci pela introduo de um anel na estrutura, estrutura fazendo com que a mesma fique mais lipoflica, como tambm mais seletiva ao receptor PDEs, comprovada atravs do aumento doscore do inibidor de quinase para 0,3 (valor do sildenafil= -0,14), mas sendo bem significativo nificativo o de inibio enzimtica do analgo para 0,56, lembrando que o valor inibio no sildenafil 0,20. A introduo de um sistema de anel muda a conformao e aumenta o tamanho global do anlogo, nlogo, o ltimo interessante, pois pode ser til no preenchimento preen de uma fenda hidrofbica num stio-alvo, stio alvo, o que pode fortalecer a ligao do frmaco ao alvo. [Thomas, 2010]. O que foi observado tambm, tambm que a modificao dos nitrognios no anel pirrlico no impediu o reconhecimento por parte do do receptor, sendo send confirmada uma maior afinidade entre PDEs e anlogo.

Estrutura do sildenafil

Nesse segundo anlogo foram conservadas as alteraes realizadas no primeiro prottipo em relao s posies dos nitrognios no anel pirrlico, as mudanas realizadas so a substituio do ligante SO2pelo PO2 na poro ligada ao benzeno, sendo utilizada a tcnica dobioisosterismono-clssico. Essa mudana foi realizada devido observao das estruturas das molculas endgenas que a PDEs

inibem (Figura 2). Possuir o PO2 e um dos critrios durante um desenvolvimento de um antagonista, que o mesmo tenha uma semelhana com a molcula endgena. No entanto, tem como finalidade impedir a ligao do ligante com o receptor[THOMAS,2010]. Atravs das modificaes realizadas foi observado que o LogP do anlogo 2 foi 2,22 (sildenafil Log de P= 2,511), logo tivemos uma pequena diminuio no LogP, isso pode ter ocorrido devido da presena do radical PO2, que um grupo bastante eletronegativo. Este fator vai interferir na absoro do frmaco na membrana plasmtica, no entanto, foi obtido um aumento no score de inibidor enzimtico, tendo um aumento significativo para 0,60 (valor do sildenafil=0,20), como tambm no inibidor quinase= 0,12 (valor do sildenafil= -0,14). Estes valores demonstram que o anlogo 2 teve um aumento na seletividade e na inibio da PDEs.

Figura 2: Estrutura do cAMP e cGMP

4.4 Ritanovir O ritanovir consiste em um inibidor da protease viral do HIV peptideomimtico, planejado para completar a simetria C2 do local ativo enzimtico. (GOODMAN, 2006). Dessa maneira, foram observados os principais grupos farmacofricos marcados em vermelho, e quais poderiam ser retirados, no decorrer da estratgia.

(http://www.scielo.br/scielo.php?pid=s010040422007000100029&script=sci_arttext) Foi observado que a molcula possui o LogP muito alto, e que outras caractersticas baseadas em estudos nos artigos disponveis, demoram que esta tinha pouca biodisponibilidade oral, dessa forma, primeiramente foi realizada uma simplificao molecular, com a adio associada de um anel peridnico, no lugar de um AR. Desta maneira, obtivemos os seguintes resultados:

Molcula do Ritanovir Com as modificaes nesses grupos obtivemos:

Obtivemos a reduo do LogP que estava com valor muito alto, a conservao do grupo farmacofrico, que se acopla a sub-unidade C2 da protease, diminuio do tamanho molecular, e elevao 118,75 % do coeficiente de inibio de protease.

Para o segundo anlogo foi aplicado o mecanismo de hibridizao;

4.5 Lidocana

Figura 1 Caractersticas de Bioatividade da molcula de lidocana. Fonte: Molinspiration.

Figura 2 Propriedades fsico-qumicas da molcula de lidocana. Fonte: Molinspiration.

Molcula Prottipo A lidocana uma aminoetilamida e o prottipo dos anestsicos locais amdicos, alm de pertencer ao grupo dos antiarrtmicos da classe I. Os anestsicos locais atuam na membrana celular e impedem a gerao e conduo dos impulsos nervosos. Eles bloqueiam a conduo reduzindo ou impedindo o grande aumento transitrio da permeabilidade das membranas excitveis ao Na+, que normalmente produzido pela despolarizao suave da membrana. Essa ao decorrente de sua interao direta com os canais de Na+ regulados por voltagem. medida que a ao anestsica desenvolve-se progressivamente no nervo, o limitar da excitabilidade eltrica aumenta gradativamente, a velocidade de elevao do potencial de ao declina, a conduo dos impulsos fica mais lenta e o fator de segurana da conduo diminui. Essas alteraes reduzem as chances de propagao do potencial de ao e, por fim, a conduo nervosa impedida. (GOODMAN & GILMAN, 2012)

Os anestsicos locais mais comuns possuem componentes hidroflicos e hidrofbicos separados por uma ligao intermediria de ster ou amida (no caso da lidocana tem-se uma amida). Em geral, a poro hidroflica uma amina terciria, mas tambm pode ser uma amina secundria. A hidrofobicidade aumenta a potncia e a durao da ao dos anestsicos locais. Acredita-se que o local receptor desses frmacos nos canais de Na+ seja hidrofbico e, por esta razo, a afinidade dos agentes anestsicos por seus receptores maior com os componentes mais hidrofbicos, entretanto um aumento exacerbado neste fator pode gerar maiores efeitos txicos. (GOODMAN & GILMAN, 2012) Observando os dados fornecidos do logP da lidocana na figura 2, que de 2.13, diz-se que esta molcula est numa faixa ideal de lipofilicidade, uma vez que respeita a regra de Lipinski, onde valores ideais de logP esto entre 2-5. Este valor especfico de logP da lidocana deve-se principalmente presena do anel aromtico sob a forma de 2,6dimetilfenil, onde a adio destas metilas confere um grau mais elevado de lipofilicidade. A poro hidroflica, separada da hidrofbica por um grupamento amida, contm a amina terciria caracterstica dos anestsicos. O volume molecular da lidocana de 244.863, ou seja, no se trata de uma molcula muito volumosa. Apesar do seu escore negativo de afinidade por canais inicos demonstrado na figura 1 (-0,39), a lidocana ainda um dos anestsicos locais mais potentes e com menos efeitos txicos, at porque os valores de escore para os outros alvos (inibio proteica, enzimtica, etc) so relativamente insignificantes. Trabalhando no aspecto de logP e afinidade por canais inicos, pode-se aplicar as diversas estratgias de modificao molecular para a obteno de possveis anlogos para a lidocana, visando um aumento de potncia, durao de efeito, sem no entanto aumentar muito os seus efeitos txicos.

Anlogo 1

Figura 3 Caractersticas de Bioatividade do anlogo 1 da lidocana. Fonte: Molinspiration.

Figura 4 Propriedades fsico-qumicas do anlogo 1 da lidocana. Fonte: Molinspiration.

Observaes do Anlogo 1 O anlogo 1 da lidocana foi obtido utilizando-se a tcnica de bioisosterismo no clssico, na qual duas anelaes foram realizadas, sendo uma na funo amida e outra na amina terciria, promovendo assim um aumento da restrio conformacional da molcula, o que permite maior seletividade pelo biorreceptor, bem como a adio da dupla ligao impede a rotao da molcula no ponto de adio, deixando-a ainda mais seletiva. Estas modificaes implicaram diretamente no aumento significativo do escore para afinidade por canais inicos, como demonstrado na figura 3 variando de um escore de -0.39 para outro de valor 0.10 promovendo, teoricamente, um aumento de potncia em relao ao anestsico prottipo. A amina terciria e o anel aromtico foram mantidos na estrutura da molcula, evitando modificaes muito bruscas. A anelao na poro amdica pode contribuir para uma menor taxa de metabolismo, principalmente o heptico, a nvel de citocromo P450, onde, segundo Schulman e Strichartz, ocorre hidrlise da amida, hidroxilao aromtica e N-desalquilao. A reduo do metabolismo pode permitir que o frmaco permanea por maior tempo disponvel no local de ao, prolongando seu efeito. Deve-se atentar para uma reduo muito brusca do metabolismo, a fim de se evitar nveis elevados de toxicidade. O anlogo 1 no viola a regra de Lipinski em nenhum aspecto (zero violao), sendo um fator positivo. Outra modificao percebida, apesar de no ser to significativa, um incremento de lipofilicidade que eleva o logP da molcula para 2.521 (variao de 0,391 em relao lidocana). Isso permite que o anlogo possua maior poder de penetrao nas biomembranas, e, como j foi dito, o local de ao da lidocana no biorreceptor parece ser hidrofbico, melhorando a interao entre frmaco e receptor. Tudo isso contribui tambm para uma ao mais efetiva do anlogo. Esse incremento de lipofilicidade foi dado principalmente pela adio de um cloro na posio para do anel aromtico.

O anlogo 1 no possui uma tendncia elevada para a gerao de efeitos colaterais, j que no foram observados aumentos significativos no escore de afinidade para outros alvos, como inibio enzimtica, proteica, ligao a receptores nucleares, inibidores de quinases, com exceo de um aumento um pouco mais significativo no escore de afinidade para receptores metabotrpicos, onde testes prclnicos e clnicos poderiam ser aplicados para verificao do surgimento de possveis efeitos colaterais.

Anlogo 2

Figura 5 Caractersticas de Bioatividade do anlogo 2 da lidocana. Fonte: Molinspiration.

Figura 6 Propriedades fsico-qumicas do anlogo 2 da lidocana. Fonte: Molinspiration.

Observaes do Anlogo 2 O anlogo 2 da lidocana foi obtido utilizando-se a tcnica de bioisosterismo clssico, na qual a poro amdica do anestsico foi substitudo por um grupo ster. Outra modificao tambm realizada foi a adio de um espaamento entre a

ligao com a amida do anel aromtico da lidocana, juntamente com a introduo de uma etila no carbono diretamente ligado ao anel aromtico. Os radicais etila do nitrognio tercirio foram removidos e nele adicionados duas metilas, assim como as metilas do anel aromtico tambm foram retiradas. Estas modificaes permitiram um aumento do escore do perfil de modulao de canais inicos (-0.39 0,19), como demonstrado na figura 5. O espaamento adicionado molcula da lidocana provavelmente proporcionou maiores possibilidades de interao de seus tomos com stios especficos do canal para sdio, uma vez que a estrutura ficou ligeiramente mais extensa e com isso diminuiu-se a distncia de determinados grupos de interao com seus respectivos pontos de ligao no canal, otimizando o encaixe e portanto melhorando seu perfil de afinidade. O uso do bioisosterismo clssico foi baseado no fato de que os anestsicos locais podem conter em sua estrutura um grupo ster ou amida que separa a poro hidrofbica (anel aromtico) da poro hidroflica (geralmente um nitrognio tercirio). Desta forma, j se tinha uma previso de que esta substituio poderia alterar positivamente o escore de afinidade da lidocana pelos NaV (canais para sdio regulados por voltagem). O metabolismo desse novo anlogo passa a ter como principal via a ao de esterases plasmticas, o que, dependendo da concentrao de frmaco utilizada e dos seus excipientes, pode ser bom ou ruim, e no carter negativo, possibilidade de gerao de maiores efeitos txicos. Inmeras tentativas de modificaes que no alterassem muito a estrutura da lidocana foram realizadas, entretanto, como ela j se trata de um dos tantos anlogos e molculas derivadas da cocana, essa tarefa tornou-se um pouco complicada, pois mnimas alteraes realizadas promoviam diferenas significativas no padro de afinidade da lidocana. Um exemplo de que o logP do anlogo 2 mostrou-se menor que o da lidocana (2.13 1.303), e, todas as alteraes realizadas com o intuito de compensar essa reduo tambm tornava a molcula muito pouco seletiva para o seu alvo principal, e ento aumentava o escore de vrios outros, o que poderia desencadear maiores probabilidades de efeitos colaterais.

4.6 Meloxicam

Figura 7 Caractersticas de Bioatividade da molcula do Meloxicam. Fonte: Molinspiration.

Figura 8 Propriedades fsico-qumicas da molcula do Meloxicam. Fonte: Molinspiration.

Molcula Prottipo: O Meloxicam um frmaco anti-inflamatrio no-esteroide (AINE) pertencente classe dos cidos enlicos derivados do oxicam, atuando seletivamente na inibio da ciclooxigenase-2 (COX-2), enzima no-constitutiva responsvel pela clivagem do cido araquidnico em mediadores pr-inflamatrios como prostaglandinas, prostaciclinas e tromboxanos, diferentemente dos outros constituintes da classe, como o piroxicam, que no seletivo para COX. (GOODMAN & GILMAN, 2012) Sua maior seletividade parece ser explicada por um maior volume (275.323) e pontos de interaes hidrofbicas, como por exemplo as cadeias laterais, com o bolso hidrofbico que a COX-2 apresenta em sua macroestrutura. Como a COX-1 possui um canal mais estreito para a interao com os AINEs, molculas mais volumosas no conseguiro interagir de forma eficaz com esta enzima, entretanto,

por conta do canal mais largo da COX-2, o encaixe acontecer, permitindo a seletividade.

Figura 9 Comparao da seletividade das isoenzimas COX-1 E COX-2. Fonte: RANG & DAYLE

A molcula do Meloxicam apresenta um logP de 2.237, um valor ideal proposto pela regra de Lipinski. Esse valor para lipofilicidade pode ser explicado tanto pela presena do anel aromtico como pelo contrabalano de distribuio de eltrons promovido pela proporcionalidade de tomos e grupos apolares e polares na molcula. Seu escore para inibio enzimtica de 0.05, um bom escore quando comparado com a pontuao para outros alvos, o que mostra um perfil interessante de seletividade em seu mecanismo de ao.

Anlogo 1

Figura 10 Caractersticas de Bioatividade do anlogo 1 do Meloxicam. Fonte: Molinspiration.

Figura 11 Propriedades fsico-qumicas do anlogo 1 do Meloxicam. Fonte: Molinspiration.

Observaes do Anlogo 1 A obteno do anlogo 1 para o Meloxicam foi possvel a partir da utilizao da tcnica de modificao molecular denominada bioisosterismo no clssico, mais especificamente, nesse caso, a anelao. A hidroxila presente na estrutura foi retirada e nesse ponto foi construdo um ciclohexeno contendo duas metilas, promovendo assim restrio conformacional, o que aumenta a seletividade, alm de que aumenta tambm o carter lipoflico da estrutura. A adio de dois cloros no anel tiazol teve maior papel no aumento do logP presenciado no anlogo (2.237 4.139), contribuindo para a farmacocintica do medicamento, aumentando a biodisponibilidade deste, uma vez que ele conseguir penetrar mais facilmente nas biomembranas e chegar mais rapidamente no seu local de ao. Houve uma variao interessante do escore de afinidade por ao de inibio enzimtica, (0,05-0,20), demonstrando que as alteraes realizadas melhorou o perfil desejado do frmaco, que justamente a inibio da COX-2. No houve nenhuma violao da regra de Lipinski. Entretanto, assim como outros frmacos seletivos COX-2, como os coxibes, os valores aumentados para inibio enzimtica podem representar riscos de efeitos colaterais mais acentuados, sobretudo os cardiovasculares. Segundo Goodman & Gilman, estes efeitos cardiovasculares (Infarto Agudo do Miocrdio - IAM) promovidos pelos coxibes e outros frmacos COX-2 seletivos, deve-se ao fato de que, quando h a formao de placas de ateroma nos vasos sanguneos, inicia-se um processo inflamatrio, e, neste momento a ciclooxigenase2 exerce um papel muito importante: a quebra do cido araquidnico em agentes como prostaglandinas, bradicinina, NO, promovem uma vasodilatao compensatria, evitando que a placa de ateroma se desprenda do vaso e venha a obstru-lo, o que poderia gerar isquemia e morte do tecido, resultando em um IAM.

Anlogo 2

Figura 12 Caractersticas de Bioatividade do anlogo 2 do Meloxicam. Fonte: Molinspiration.

Figura 13 Propriedades fsico-qumicas qumicas do anlogo 2 do Meloxicam. Meloxicam. Fonte: Molinspiration.

Figura 14 Molcula da Hidralazina.

Observaes do Anlogo 2 A criao do anlogo 2 foi possvel a partir da aplicao de duas estratgias de modificao molecular: hibridao e bioisosterismo no clssico (anelao). No caso da hibridao, a poro B (figura 12) do meloxicam foi mantida, enquanto que a

poro A (figura 12) da hidralazina foi utilizada para a juno com a poro do meloxicam, obtendo-se assim o hbrido, ou molcula mista. A inteno inicial era unir a propriedade vasodilatadora da hidralazina com a ao inibidora de COX-2 do meloxicam, visando a possvel reduo dos efeitos colaterais cardiovasculares promovido por este ltimo. Durante as tentativas de modificaes, definiu-se pores consideradas importantes para o aumento da potncia farmacolgica dos dois frmacos, unindo-as em uma nica molcula. Alm deste mtodo, uma anelao foi realizada na poro C (figura 12) do meloxicam Ao se aplicar tais estratgias, foi percebido que a ao de inibio enzimtica aumentou bastante, variando de um escore de 0.05 para um de 0.39 (variao de 0.34). Vrias tentativas de explicao para este fato podem ser dadas, como um aumento em pontos para interaes do tipo ligao de hidrognio com o biorreceptor, ou uma restrio conformacional provocada pela anelao, aumento de pontos para interao com o bolso hidrofbico da COX-2. Contudo, estas explicaes so inconclusivas, uma vez que os dois frmacos so de classes teraputicas totalmente distintas, tornando pouco trivial uma possvel explicao com base na comparao de grupos farmacofricos, sendo necessrio portanto uma maior quantidade de informaes detalhadas sobre a estrutura da ciclooxigenase-2. Uma pequena variao do logP tambm foi observada (2.237--2.312), no entanto no pode ser considerada muito significativa. Outra observao interessante que o escore de afinidade com receptores metabotrpicos aumentou (-0.73 -- 0,19), o que pode promover uma ao vasodilatadora (como pretendido inicialmente), j que a hidralazina age como um bloqueador 1-adrenrgico, que, via protena Gq/11, promove vasodilatao, sendo utilizada no tratamento da hipertenso arterial. O anlogo 2 tambm no violou nenhuma das regras de Lipinski.

5CONCLUSO
Com base na anlise dos resultados obtidos durante a utilizao da plataforma Molinspiration, pode-se afirmar que o planejamento que realizado para a modificao e sntese de frmacos (sintticos ou naturais) trata-se de um exerccio que agrega inmeras possibilidades, e que necessita de um conhecimento ideal de vrias reas das cincias farmacuticas e exatas, como farmacologia, qumica geral, qumica orgnica e inorgnica, bioqumica, biologia molecular, fsica, matemtica e vrias outras. A plataforma Molinspiration um meio de estimar caractersticas farmacolgicas e fsico-qumicas de molculas bioativas, e assim propor alteraes que melhorem esses perfis. Entretanto, nada mais do que uma estimativa, e que apesar de ajudar bastante no incio da etapa de obteno de um novo frmaco, no deve ser utilizada como nico meio de obteno de resultados, pois ela no analisa tantas outras variveis que comprometem a eficcia e segurana de um medicamento. Em suma, as molculas propostas neste trabalho apresentaram alteraes interessantes nas suas caractersticas, e podem ser estudadas mais a fundo para fins de procedimentos sintticos inseridos na qumica medicinal.

REFERNCIAS

BARREIRO,

Eliezer

J..Estratgia

de

simplificao

molecular

no

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