CROMATOGRAFIA

1. Marco Terico.-

Concepto de cromatografa

La cromatografa es un mtodo fsico de separacin para la caracterizacin de mezclas complejas, la cual tiene aplicacin en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de tcnicas basadas en el principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de particin de los compuestos da como resultado una retencin diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separacin efectiva en funcin de los tiempos de retencin de cada componente de la mezcla. Terminologa conceptos de cromatografa

Absorcin: es la retencin de una especie qumica por parte de una masa y depende de la tendencia que tiene sta a formar mezcla o a reaccionar qumicamente con la misma. Adsorbente: fase estacionaria en la C. de adsorcin y de reparto. Adsorcin: Es la retencin de una especie qumica en los sitios activos de la superficie de un slido, quedando limitado el fenmeno a la superficie que separa las fases o superficie interfacial, esta retencin superficial puede ser fsica o qumica. C. en fase inversa: C. con una fase estacionaria no polar y una fase mvil polar. C. en fase normal: C. con una fase estacionaria polar y una fase mvil no polar. Disolvente o revelador: Cualquier fase mvil. Elucin: Proceso de extraer un soluto de la fase estacionaria. Eluyente: La fase mvil una vez que se extrae de la columna. Fase estacionaria: Material que permanece dentro de la columna cromatogrfica durante la cromatografa y que retiene algn componente de la muestra, posee una gran rea superficial y puede ser un slido o un lquido dispuesto sobre un slido que acta como soporte. Fase mvil: Es un fluido que puede ser lquido, gas o fluido supercrtico que se usa como portador de la mezcla y que se hace pasar a travs de la columna cromatogrfica y la fase estacionaria.

Origen: Lugar fsico donde se coloca la muestra al principio. Revelado: Proceso de separar un soluto de la muestra por medio de cromatografa. Soporte: El material slido inerte que en la C. de reparto sirve para sostener lafase estacionaria lquida en su sitio. Sorbente: Cualquier fase estacionaria.

Caractersticas de la tcnica de cromatografa

El parmetro fundamental que caracteriza a la cromatografia de columna, es la altura a la que se ha quedado determinada una especie qumica. Esta altura se relaciona directamente con el llamado tiempo de retencin: cuanto mayor sea la afinidad de absorcin entre el soluto y la especie, menor tiempo de retencin presentara. Otro parmetro caracterstico es el volumen de retencin, la cantidad necesaria de fase mvil para transportar la especie desde la parte superior de la columna hasta el detector. Cuando el transporte se ha realizado, se establece un equilibrio termodinamico entre las concentraciones de las fases mvil y estacionaria, parmetro que se conoce como coeficiente de reparticin. Este equilibro depende de forma fundamental de las propiedades fsicas y qumicas de las fases, como son la concentracin de la disolucin mvil, la porosidad de la fase estacionaria, los coeficientes de absorcin de cada especie, y la temperatura a la que se realice la mezcla. Una caracterstica importante del sistema es su eficiencia, que se expresa como una cantidad adimensional, llamada numero efectivo de platos (numero de bandas de absorcin) y que refleja el numero de veces que el soluto se reparte entre las dos fases durante su paso a travs de la columna. La calidad del experimento se caracteriza tanto por el numero de platos como por la resolucin, que se define como la separacin entre los picos de dos bandas de absorcin adyacentes. En un sistema cromatografico el tiempo de reaccin de un soluto particular es constante, y por lo tanto puede utilizarse para identificar ese soluto. En caso de no ser conocido el tiempo de retencin de una especie dada siempre se puede recurrir para su identificacin a tcnicas auxiliares, generalmente espectrografia.

Clasificacin de mtodos cromatograficos

Las distintas tcnicas cromatogrficas1 se pueden dividir segn cmo est dispuesta la fase estacionaria:

 Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o sobre

un papel. Las principales tcnicas son: Cromatografa en papel Cromatografa en capa fina
Cromatografa en columna. La fase estacionaria se sita dentro de una columna.

Segn el fluido empleado como fase mvil se distinguen: Cromatografa de lquidos Cromatografa de gases Cromatografa de fluidos supercrticos

2. Aplicaciones de la cromatografa
Tecnologa

de alimentos y Productos Naturales.- Puede realizarse la caracterizacin de Aceites Esenciales y Aromas, los cuales son empleados en la elaboracin de saborizantes, aromatizantes, licores, perfumes, artculos de aseo, y como materias primas para productos farmacuticos. Control Ambiental.- Dentro de los contaminantes posibles de ser estudiados estn: los hidrocarburos aromticos, BTEX, pesticidas organoclorados y organofosforados en muestras de aguas superficiales, subterrneas, suelos y lodos.

Qumica Forense.- Es posible la aplicacin de la cromatografa de gases y la espectrometra de masas en la deteccin y cuantificacin de analitos de inters en la qumica forense. Por ejemplo la determinacin, cuantificacin de alcohol en sangre, anlisis de licores, entre otros.

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