Sntesis de protenas Las protenas, por su tamao, no pueden atravesar la membrana plasmtica de la clula, por eso es que existe

en su interior un mecanismo que las construye (sntesis) segn las necesidades que tenga en ese momento la clula. La sntesis de protenas consta en realidad de dos etapas: A) La primera etapa (transcripcin) ocurre dentro del ncleo de las clulas eucariotas, aqu la secuencia de nucletidos que denominamos gen (segmento de ADN que determina una protena) se transcribe en una molcula de ARN. B) Posteriormente, en la segunda etapa (traduccin - sntesis de protena propiamente dicha) el ARN pasa del ncleo al citoplasma donde es traducida por los ribosomas que arman una protena. A) TRANSCRIPCION La transcripcin es el proceso durante el cual la informacin gentica contenida en el DNA es copiado a un RNA de una cadena nica llamado RNA-mensajero. De esta manera, la transcripcin del ADN tambin podra llamarse sntesis del ARN mensajero.
Etapas de la transcripcin: Iniciacin: La ARN-polimerasa reconoce y se une a una zona del ADN (delante del ADN que se quiere transcribir) denominada regin promotora o promotor. A continuacin se separan las dos cadenas del ADN, inicindose el proceso de copia del ADN a ARNm.

Elongacin: La ARN-polimerasa contina aadiendo ribonucletidos complementarios al ADN leyendo en sentido 35, la ARN-polimerasa selecciona el ribonucletido trfosfato cuya base es complementaria con la cadena de ADN que acta como molde Terminacin: La ARN-polimerasa llega a la regin terminadora que indica el final de la transcripcin. Esto implica la separacin de la ARN-polimerasa del ARN transcrito, el cierre de la doble hlice de ADN. Una vez finaliza la transcripcin, al ARN recin formado se le aade una cola de unos 200 nucletidos de adenina, la cola de poli-A, con lo que queda formado el ARN (ARN heterogeneonuclear) precursor del ARNm.

Maduracin del ARN: La mayor parte de los genes que codifican una protena estn fragmentados. Cada gen consta de varios fragmentos denominados intrones y exones. Durante la maduracin se eliminan secuencias "sin sentido" o repetitivas (Intrones), y luego se unen entre si las secuencias tiles o "con sentido" (Exones) por las ARN-ligasas. Este RNA-m maduro es el que emigra al citoplasma. Un nico gen puede codificar varias protenas si el RNA-m inicial puede ser cortado y empalmado de diversas formas. Esto ocurre, por ejemplo, durante la diferenciacin celular en donde las operaciones de corte y pegado permite producir diferentes protenas. Adems de utilizarse como molde para la sntesis del RNA-m, el DNA tambin permite la obtencin de otros dos tipos de RNA: El RNA de transferencia (t-RNA) que se une especficamente a cada uno de los 20 aminocidos y los transporte al ribosoma para incorporarlos a la cadena polipeptdica en crecimiento. El RNA ribosmico (r-RNA) que conjuntamente con las protenas ribosmicas constituye el ribosoma.

B) TRADUCCIN El m-RNA maduro contiene la informacin para que los aminocidos que constituyen una protena se vayan aadiendo segn la secuencia correcta. Para ello, cada triplete de nucletidos consecutivos (codn) especifica un aminacido. Dado que el m-RNA contiene 4 bases, el nmero de combinaciones posibles de grupos de 3 es de 64, nmero ms que suficiente para codificar los 20 aminocidos. De hecho, un aminocido puede ser coficado por varios codones.
Componentes del equipo de transduccin ARN mensajero. El ARN mensajero (ARNm) transmite la informacin gentica almacenada en el ADN. Mediante el proceso conocido como transcripcin, secuencias especficas de ADN son copiadas en forma de ARNm que transporta el mensaje contenido en el ADN a los sitios de sntesis proteica (los ribosomas). ARN de tranferencia y aminocidos. Los aminocidos (componentes de las protenas) son unidos a los ARN de transferencia (ARNt) que los llevarn hasta el lugar de sntesis proteica, donde sern encadenados uno tras otro. La enzima aminoacil-ARNt-sintetasa se encarga de dicha unin, en un proceso que consume ATP. Ribosomas. Los ribosomas son los orgnulos citoplasmticos encargados de la biosntesis proteica; ellos son los encargados de la unin de los aminocidos que transportan los ARNt siguiendo la secuencia de codones del ARNm segn las equivalencias del cdigo gentico. El ribosoma consta de tres sitios: el sitio A, el sitio P y el sitio E. El sitio A es el punto de entrada para el aminoacil-ARNt (excepto para el primer aminoacil-ARNt, fmet-ARNt, que entra en el sitio P). El sitio P es donde se forma el peptidil-ARNt. Y el sitio E es el sitio de salida del ARNt una vez descargado tras ofrecer su aminocido a la cadena peptdica en crecimiento

La sntesis de protenas tiene lugar de la manera siguiente: Iniciacin: Un factor de iniciacin, GPT y metionil-tRNA[Met] forman un complejo que se une a la subunidad ribosmica grande. A su vez, el m-RNA y la subunidad ribosmica pequea se unen al encontrar esta ltima el codn de iniciacin que lleva el primero. A continuacin ambas subunidades ribosmicas se unen. El metionil-tRNA[met] est posicionado enfrente del codn de iniciacin (AUG). El GPT y los factores de iniciacin de desprenden quedando el tRNA[Met] unido al ribosoma. El primer codn que se traduce es generalmente el AUG, que corresponde con el aminocido metionina en eucariotas. En procariotas es la formilmetionina

Elongacin: La elongacin de la cadena

polipeptdica consiste en la adicin de aminocidos al extremo carboxilo de la cadena. La elongacin comienza cuando el fmet-ARNt entra en el sitio P, causando un cambio de conformacin que abre el sitio A para que el nuevo aminoacil-ARNt se acople. El factor de elongacin Tu (EF-Tu), una pequea GTPasa, facilita este acoplamiento. Ahora el sitio P contiene el comienzo de la cadena peptdica de la protena a codificar y el sitio A tiene el siguiente aminocido que debe aadirse a la cadena peptdica. El polipptido creciente que est conectado al ARNt en el sitio P se desacopla del ARNt y se forma un enlace peptdico entre el ltimo de los aminocidos del polipptido y el aminocido que est acoplado al ARNt en el sitio A. Este proceso, conocido como formacin del enlace peptdico, est catalizado por una ribozima, la peptidil-transferasa, una actividad intrnseca al ARNr 23s de la unidad ribosmica 50s. En este punto, el sitio A ha formado un nuevo pptido, mientras que el sitio P tiene un ARNt descargado (ARNt sin aminocido). En la fase final de la elongacin, la traslacin, el ribosoma se mueve 3 nucletidos hacia el extremo 3' del ARNm. Como los ARNt estn enlazados al ARNm mediante el emparejamiento de bases codnanticodn, los ARNt se mueven respecto al ribosoma recibiendo el polipptido naciente del sitio A al sitio P y moviendo el ARNt descargado al sitio E de salida. Este proceso est catalizado por el factor de elongacin G (EF-G) gastando un GTP. El ribosoma contina trasladando los codones restantes del ARNm mientras siguen acoplndose ms aminoacil-ARNt al sitio A, hasta que el ribosoma alcanza un codn de parada en el ARNm (UAA, UGA o UAG

Terminacin: el m-RNA que se est traduciendo lleva un codn de terminacin (UAA, UAG y UGA). Cuando el ribosoma llega a este codn, la protena ensamblada es liberada y el ribosoma se fragmenta en sus subunidades quedando listo para un nuevo proceso.
La terminacin ocurre cuando uno de los tres codones de terminacin entra en el sitio A. Estos codones no son reconocidos por ningn ARNt. En cambio, son reconocidos por unas protenas llamadas factores de liberacin, concretamente la RF-1 (que reconoce los codones de parada UAA y UAG) o la RF-2 (que reconoce al UAA y al UGA). Un tercer factor de liberacin, el RF3, cataliza la liberacin producida por el RF-1 y el RF-2 al final del proceso de terminacin. Estos factores disparan la hidrlisis del enlace ster de la peptidil-ARNt y la liberacin del ribosoma de la protena recin sintetizada. O fin de la fase.

En el proceso que acabamos de describir, el ribosoma se desplazaba a lo largo de una hebra de mRNA leyendo los tripletes de uno en uno. La sntesis de protenas progresa a razn de 15 aminocidos/segundo. Dada la longitud del m-RNA, varios ribosomas pueden ir leyendo codones y sintetizando protenas. El conjunto se denomina poliribosoma
Polisomas La traduccin es ejecutada por varios ribosomas al mismo tiempo. Debido al gran tamao de los ribosomas, solo se pueden acoplar al ARNm a una distancia de 35 nucletidos unos de otros. El sistema consistente en un ARNm y un cierto nmero de ribosomas se llama polisoma o poliribosoma.

A partir del anterior proceso se puede definir como gen un conjunto de nucletidos de una molcula de DNA que sirve como molde para la produccin de una protena o una familia de protenas si se producen operaciones de corte y empalme en el RNA. Como usualmente una protena tiene entre 100 y 1000 aminoacidos, el m-RNA maduro contendr entre 300 y 3000 nucletidos. El tamao del gen depender, de los intrones que tenga.

Modificaciones postransduccin Algunas protenas emergen del ribosoma preparadas para ejercer su funcin de inmediato, mientras que otras experimentan diversas modificaciones postraduccin, que pueden conducir a la protena a la adquisicin de su forma funcional, a su traslado a un compartimento subcelular determinado, a su secrecin al exterior de la clula, etc. Plegamiento Muchas protenas adquieren espontneamente la correcta conformacin tridimensional, pero otras muchas solo adquieren la conformacin correcta con la ayuda de una o ms protenas chaperonas. Las chaperonas se unen reversiblemente a regiones hidrofbicas de las protenas desplegadas y a los intemediarios de plegamiento; pueden estabilizar intermediarios, mantener protenas desplegadas para que pasen con facilidad a travs de membranas, ayudar a desplegar segmentos plegados incorrectamente, impedir la formacin de intermediarios incorrectos o impedir interacciones inadecuadas con otras protenas.1 Glucosilacin La glucosilacin es la adicin de uno o ms glcidos a una protena lo que da lugar a las glucoprotenas, que son esenciales en los mecanismos de reconocimiento celular. La glucosilacin puede implicar la adicin de unas pocas molculas glucdicas o de grandes cadenas ramificadas de oligosacridos. Existe un centenar de glucosiltransferasas distintas, las enzimas encargadas de realizar este proceso. El mecanismo es bsicamente el mismo en todos los casos; un azcar es transferido desde un sustrato dador activado hasta un aceptor apropiado. 1 Protelisis parcial La protelisis parcial es una etapa frecuente en los procesos de maduracin de las protenas. Pueden eliminarse secuencias de aminocidos en ambos extremos o en el interior de la protena. La protelisis en el retculo endoplasmtico y en el aparato de Golgi son, por ejemplo, esenciales en la maduracin de la insulina; la preproinsulina codificada por el ARNm es introducida en el retculo

endoplasmtico; una peptidasa la corta y origina la proinsulina que se pliega para formar los puentes disulfuro correctamente; la proinsulina es transportada al aparato de Golgi, donde es empaquetada en grnulos de secrecin; entonces se elimina un fragmento (pptido C) por protelisis originando la insulina funcional, que es secretada. La hiperproinsulinemia familiar es una enfermedad gentica autosmica dominante causad por en defecto en el proceso de maduracin de la proinsulina, que da lugar a la presencia en el torrente circulatorio de insulina y de proinsulina en cantidades similares.1 Modificacin de aminocidos Slo 20 aminocidos estn codificados genticamente y son incorporados durante la traduccin. Sin embargo, las modificaciones postraduccin conducen a la formacin de 100 o ms derivados de los aminocidos. Las modificaciones de los aminocidos juegan con frecuencia un papel de gran importancia en la correcta funcionalidad de la protena. Son numerosos los ejemplo de modificacin postraduccin de aminocidos. La formacin postraduccin de puentes disulfuro, bsicos en la estabilizacin de la estructura terciaria de las protenas est catalizada por una disulfuro isomerasa. En las histonas tiene lugar la metilacin de las lisinas. En el colgeno abunda el aminocido 4-hidroxiprolina, que es el resultado de la hidroxilacin de la prolina. La traduccin comienza con el codn "AUG" que es adems de seal de inicio significa el aminocido metionina, que casi siempre es eliminada por protelisis.1