CUESTIONARIO

1. Qu se entiende por modificadores en la actividad enzimtica?

Son aquellos factores que intervienen directamente en la actividad enzimtica, los cuales interactan a una determinada concentracin de sustrato, de enzima y dentro de un intervalo ptimo de temperatura y concentracin del in hidrgeno (pH).

a) Qu tipos de accin pueden ejercer?

Los tipos de acciones que pueden ejercer son: i. ii. iii. Aumento o disminucin de la velocidad de reaccin. Inhibicin, inactivacin y desnaturalizacin de la enzima. Formacin de mayor o menor cantidad de producto, etc.

Un aumento de temperatura provoca un aumento de la velocidad de reaccin hasta alcanzar cierta temperatura ptima a la cual acta con su mxima eficacia, si al temperatura se incrementa ms all de la temperatura ptima, se comienza a producir la desnaturalizacin trmica lo cual produce que la actividad enzimtica descienda bruscamente. Un aumento de la concentracin de sustrato produce un aumento rpido de la velocidad de reaccin, hasta que llegue un momento que no cambia la velocidad de reaccin, es decir se mantiene constante lo que significa que ha alcanzado su velocidad mxima. La concentracin de enzima: se conoce que cada enzima posee un pH

caracterstico donde su actividad es mxima, por encima o debajo de ese pH la actividad disminuye.

La variacin de la concentracin de in hidrgeno, pueden afectar a la ionizacin

de los grupos de lugar activo, y los grupos ionizables pueden alterar a la estructura terciaria de la enzima.

b) Cmo se les clasifica?

Su clasificacin puede ser: Modificadores positivos y Modificadores negativos

Los modificadores positivos son aquellos que ejercen un efecto beneficioso en la actividad de la enzima como por ejemplo el aumento de la velocidad de reaccin, mientras que los modificadores negativos ejercen un efecto desfavorable como la disminucin de la velocidad de reaccin. Estos modificadores de la actividad enzimtica pueden ser factores fsicos o qumicos y por ello todas las enzimas actan dentro de cada uno de los diversos factores, por lo que podemos mencionar a: Temperatura: Una enzima normalmente tiene su temperatura ptima cerca de la temperatura normal del organismo del que se procede. PH: O concentracin del in hidrgeno, todas las enzimas actan dentro de un inrvalo ptimo de pH. Concertacin de Sustrato: Si determinamos la actividad enzimtica manteniendo constantes la concentracin de enzima y las otras condiciones de reaccin excepto la concentracin de sustrato, obtendremos que se mantendr constante la velocidad de reaccin, significa que ha llegado a su velocidad mxima.

Concentracin de Enzima: Si hay una alta concentracin de enzima se ver que la

cantidad de sustrato ser saturada.

c) Cmo puede detectarse su accin?

La accin de estos modificadores puede detectarse de la siguiente manera: Si no existe la energa cintica suficiente para formar el complejo enzima sustrato, por lo que tampoco pueden actuar, detectarnos que estamos a temperaturas bajas de su temperatura ptima pero si se comienza a producir la desnaturalizacin de las enzimas estaremos a temperaturas elevadas. Cuando se observa que se mantiene la velocidad de reaccin es decir que no cambia, podemos decir que los centros activos de la enzima se encuentran saturados y por lo tanto la velocidad mxima ha sido alcanzada, entonces as detectamos que existe una gran concentracin de sustrato.

 Cuando se produce la alteracin del carcter inico de los grupos amino y carboxilo en la superficie proteica (afectando as las propiedades catalticas de una enzima), detectamos que se ha producido cualquier cambio brusco de pH, el cual puede producir la desnaturalizacin de la enzima y en consecuencia su inactivacin. Otra manera de detectar su accin seria:

Haciendo un anlisis cuantitativo del producto formado, ya que si se detecta

una elevada concentracin de producto se podr decir que los efectos de estos modificadores han sido favorables para la actividad de la enzima, caso contrario si no se detecta ningn producto formado o si la concentracin es mnima, entonces se podr decir que los efectos de estos modificadores ha sido desfavorable para la enzima.

2. Qu se entiende por un inhibidor? Cul es su mecanismo general de accin?

Un inhibidor es aquella molcula que detiene la reaccin entre una enzima y un sustrato, y su mecanismo general de accin es que siempre se une a la enzima ya sea en su centro activo o en cualquier otra parte de la enzima para disminuir su actividad enzimtica.

3. Qu relacin hay entre los trminos Inhibicin, desnaturalizacin de una enzima?

Inactivacin y

Las enzimas se inactivan al calentarse por encima de los 45 C debido que cuando se sobrepasa esa temperatura la enzima se desnaturaliza, es decir, pierde su conformacin espacial. Debido a esto se modifica la forma del centro activo y el sustrato ya no puede encajar en l y no se produce la reaccin qumica, por lo tanto la inhibicin no se realiza.

4. Qu se entiende por sitio alostrico?

5. Qu es un inhibidor competitivo?
Es aquel inhibidor que compite con el sustrato para el acceso al sitio activo de la enzima. Este inhibidor es una molcula estructuralmente similar al sustrato, esto hace que la enzima no est disponible al sustrato.

6. Qu efecto tiene el aumento de la concentracin del sustrato sobre la inhibicin competitiva de una reaccin enzimtica?
Al aumentar la concentracin del sustrato mientras la concentracin del inhibidor permanece constante, este dejara fuera de competencia al inhibidor y se invertir la inhibicin competitiva.

7. Cmo se explica que la reaccin competitiva sea reversible?

En este caso de inhibicin competitiva es reversible debido que puede invertirse si se eleva la concentracin del sustrato a niveles suficientemente altos mientras la concentracin del inhibidor se mantiene constante.

8. Existen corrientemente alguna relacin entre la estructura qumica del sustrato y del inhibidor competitivo de una reaccin enzimtica? Es esta una condicin necesaria para este tipo de inhibidores?
Si existe relacin, pues los inhibidores competitivos son, frecuentemente, compuestos que se parecen al sustrato. Debido a que el inhibidor se une de manera reversible, se puede cambiar el sentido de la competicin en favor del sustrato simplemente aadiendo ms sustrato, as este tendra ms posibilidad de unirse a la enzima.

9. Cmo puede reconocerse experimentalmente que la inhibicin de una reaccin enzimtica competitiva?
La inhibicin de una reaccin enzimtica puede reconocerse cuando el inhibidor participa de teniendo la reaccin sin dejar que acte la enzima. En el experimento realizado en el laboratorio obtuvimos que en el tubo 3 hubo una mayor cantidad de sustrato la cual reaccion con el inhibidor dejando prcticamente fuera de la reaccin a la enzima (esto lo comprobamos en el espectro fotocolormetro)

10. De qu factores depende el grado de inhibicin logrado por un inhibidor competitivo?

Depende de la concentracin de sustrato. Este tipo de inhibicin depende de la concentracin relativa que exista de inhibidor en relacin del sustrato, Adems tambin depende de los valores de Km y Ki (mientras ms bajo sea el Ki y tendr mayor potencial)

11. En qu circunstancia puede el sustrato de una enzima actuar como inhibidor competitivo de la misma enzima?
En realidad el sustrato de una enzima nunca podr actuar como inhibidor de esta misma enzima, pero hay un caso especial en que la accin del sustrato se considera como un tipo de inhibicin y es cuando la reaccin alcanza su velocidad mxima. Pero no es que inhiba, lo que pasa es que los centros activos estn saturados, es decir por ms que se les agregue mayor cantidad de sustrato su velocidad mxima se mantiene constante (ya no se forma ms producto).

12. Qu tipo d inhibidor es el bisulfito de sodio 0.1M?

El bisulfito de sodio 0.1 M es un inhibidor no competitivo.

13. Qu tipo de inhibidor es el malonato 0.1M?

El malonato es un inhibidor competitivo.

14. Qu se entiende por un inhibidor no competitivo?

Es cuando el inhibidor se fija a la enzima independientemente de que lo haga o no el Substrato; el inhibidor, por tanto, no impide la fijacin del substrato a la enzima, pero s impide la accin cataltica.

15. Qu efecto tiene el aumento de la concentracin del sustrato sobre la inhibicin no competitiva de una reaccin enzimtica? Cmo puede explicar este fenmeno?
La inhibicin no competitiva normalmente se aplica a enzimas y difiere de la inhibicin competitiva en que el inhibidor siempre se une a la enzima por un sitio diferente al centro activo de la enzima (este otro sitio se denomina sitio alostrico).

Esto afecta a la tasa de la reaccin catalizada por la enzima ya que la presencia del inhibidor produce un cambio en la estructura y la forma de la enzima. Este cambio en la forma implica que la enzima deja de ser capaz de unirse correctamente al sustrato. Esto reduce la concentracin de enzima "activa" resultando en una disminucin de la Vmax. En este tipo de inhibicin, no hay competicin entre en inhibidor y el sustrato, as que incrementar la concentracin del sustrato no produce un aumento de la tasa de actividad enzimtica.

16. Qu podra decir respecto a la especificidad de los inhibidores no competitivos?

Existen algunos inhibidores no competitivos que muestran cierta especificidad. Algunas de ellas muestran requerimientos estrictos tanto para el sustrato (o los sustratos si se trata de reacciones biomoleculares) como para el tipo de unin qumica sobre el que van a actuar; pequeos cambios en cualquiera de ellos bastan para inactivar la reaccin; tal es el caso de los agentes bloqueadores del radical sulfhidrilo, -SH, presente en las cadenas laterales del aminocido cistena, comn a todas las molculas protenicas y y, por lo tanto, a las enzimas.

17. Existe corrientemente segn algn tipo de similitud entre la estructura qumica del inhibidor no competitivo y la del sustrato natural de la enzima? Esta es una condicin necesaria para este tipo de inhibidores?
No ya que este no se va a fijar al centro activo de la enzima como lo hace el sustrato sino que se une a un lugar distinto de la molcula enzimtica. No, sencillamente porque no hay competencia.

18. Cmo puede reconocerse experimentalmente que la inhibicin de una reaccin enzimtica es no competitiva?
Podemos reconocer si una reaccin enzimtica es no competitiva si a pesar de aadir mayor sustrato que inhibidor, nos damos cuenta que no existe reaccin, es decir no se forman productos (si al agregar nesler al tubo de ensayo, este no toma un color naranja, quiere decir que no existe formacin de productos).