Cintica de la utilizacin del sustrato, la formacin de producto, y la produccin de biomasa en cultivos de clulas.

Cuando se aade una pequea cantidad de clulas vivas a una solucin lquida de nutrientes esenciales a una temperatura y pH adecuados, las clulas crecern. Los procesos de crecimiento de inters para nosotros tienen dos manifestaciones diferentes de acuerdo a la morfologa de las clulas implicadas. Para los organismos unicelulares que dividen a medida que crecen, los aumentos en la biomasa (la masa de la materia viva) son acompaados por aumentos en el nmero de clulas presentes. Este caso, lo que nos enfrenta a un problema en el crecimiento de la poblacin, va a ocupar la mayor parte de nuestra atencin en este captulo. Cuando se considera el crecimiento de mohos, sin embargo, la situacin es bastante diferente. Aqu la longitud y el nmero de aumento de micelio como el organismo crecen. Por lo tanto el molde creciente aumenta en tamao y densidad, pero no necesariamente en nmeros. Asociada con el crecimiento celular son otros dos procesos: la absorcin de algo de material desde el entorno de la clula y la liberacin de productos finales metablicos en los alrededores. Como veremos ms adelante, las tasas de estos procesos varan ampliamente como se produce el crecimiento. Tiene una capacidad de prediccin en general se nos escapar, la experiencia ha demostrado que entre los muchos procesos de cultivo de clulas conocidas, algunos patrones generales de utilizacin de sustrato y formacin de producto se producen con frecuencia. Mediante la revisin de ellos, estaremos mejor preparados para hacer frente a nuevos problemas en la aplicacin de las clulas en crecimiento. La complejidad de la descripcin cintica que se requiere y apropiada depende a su vez de la complejidad de la situacin fsico y la aplicacin prevista de la cintica . Antes de considerar casos especficos y su representacin cintica, deberamos tener un cierto conocimiento de la gama de posibilidades de reacciones en las poblaciones de clulas. En esta discusin nos centramos en el crecimiento celular , pero conceptos similares , los comentarios, y la situacin se aplica a otros aspectos de las reacciones qumicas en los procesos celulares . vamos a empezar por pensar en una poblacin de clulas que crecen en la ms general y por lo tanto cuanto ms complicados. entonces, vamos a considerar simplificaciones que, sea capaz de introducirse y las situaciones en que se aplican. resumen en la figura. 7.1 son algunos de los parmetros, fenmenos, y las interacciones que influyen en el comportamiento cintico de poblaciones de clulas. en primer lugar, hay que reconocer que dos sistemas que interactan estn en fase biolgica que consiste en una poblacin de clulas y la fase del medio ambiente o el medio de crecimiento implicados. clulas consumen nutrientes y convertir sustratos del medio ambiente en los productos. las clulas generan calor y, a su vez, la temperatura del medio establece la temperatura de las clulas. interacciones mecnicas se producen a travs de presin y flujo efectos hidrostticos del medio a las clulas y de los cambios en la viscosidad del medio debido a la acumulacin de clulas y de productos metablicos celulares. Volviendo ahora a los diferentes factores importantes en el medio, debemos sealar que se trata de un sistema de componentes mltiples que debe contener todos los nutrientes requeridos para el crecimiento celular y que se acumulan, ya que la clula crezca diversos productos finales del metabolismo celular. Las reacciones pueden ocurrir en la solucin del medio de la modificacin de los formularios productos de clulas og. La hidrlisis de la penicilina es un ejemplo. Menudo, las

clulas consumen o producen componentes que influyen en la acidez del medio ambiente, y la interaccin de consumo celular con equilibrios cido-base determina el pH del medio, que a su vez influye actividades celulares y procesos de transporte. Durante el curso de las reacciones celulares, la temperatura caldo, pH, fuerzas inicas, y las propiedades reolgicas pueden cambiar con el tiempo. el entorno celular es a menudo un sistema de mltiples fases con dos lquido con burbujas de gas dispersas, de un sistema lquido-lquido en el que las fases lquidas inmiscibles estn presentes, o, a veces un sistema de tres fases con dos lquida y una fase gaseosa. Acontecimientos recientes importnat en investigacin y desarrollo biorreactor implican adicin intencionada de sustancias al envioronment con el fin de crear varias fases lquidas o slidas para llevar a cabo las separaciones deseadas simultneamente con las reacciones celulares. debido a la escala de las gracias, en las cuales se realizan las reacciones biolgicas y la alta viscosidad y la naturaleza no newtoniano del caldo en algunas situaciones, no es raro que las condiciones dentro de la reactoe biolgica difieran de punto a punto en el espacio. Todas estas variables ambientales, y los parmetros pueden influir en la cintica de clulas significativamente. Girando al lado de las caractersticas importantes de la poblacin celular, recordamos de nuestras discusiones previas que cada clula individual es un sistema multicompinent complicada que con frecuencia no es espacialmente homognea incluso en el nivel de clulas individuales. Muchas reacciones qumicas independientes ocurren simultneamente en cada celda, sujeto a un complejo conjunto de controles internos. Estos controles internos dotan a las clulas con la capacidad y la propensin a adaptar la actividad e incluso si los tipos etapas de reaccin qumicas que se producen en la clula como una funcin del entorno celular. en el cultivo a largo plazo de una poblacin celular, uno se encuentra con considerable heterogeneidad de clula a clula. Heteregeidad celula celula fisiologa diferente cada celula. Es decir, en el nivel de clulas individuales, diferentes clulas en la poblacin, las mutaciones espontneas se pueden acumular o el sistema de reactor puede imponer una presin de seleccin que da como resultado una deriva lenta en la composicin gentica de la cepa.

Como vimos en nuestro anlisis del ciclo celular en el captulo anterior, las clulas de diferentes edades se caracterizan a menudo por diferentes tipos de funciones y actividades metablicas. Reactores ideales para mediciones cinticas Es difcil obtener informacin cintica til sobre las poblaciones microbianas de los reactores que tienen condiciones espacialmente no uniformes. Por lo tanto, es deseable para estudiar la cintica en los reactores que son bien mezclado. Examinamos aqu reactores discontinuos bien mezclados y reactores de flujo continuo bien mezclados. Otras configuraciones, incluyendo reactores fedbatch y reactores con mezcla no ideal.

El reactor por lotes ideales Muchos procesos bioqumicos implican el crecimiento lote de poblaciones de clulas. despus de sembrar un medio lquido con un inculo de clulas vivas, se aade nada (excepto, posiblemente, algo de gas) al cultivo o se retira de l a medida que avanza el crecimiento. tpicamente en un reactor de este tipo, las concentraciones de nutrientes, las clulas y los productos varan con el tiempo a medida que avanza de crecimiento.