19/02/14

4IV1
Separacin e Identificacin de Aminocidos de jugo de frutos por Cromatografa Bidimensional en Capa Fina

ALCNTARA URIBE MARA

VICTOR MANUEL MACAS MARTNEZ

OLIVIA SECCIN II

Objetivos
Separar los aminocidos presentes en el jugo de jitomate por cromatografa bidimensional en capa fina Identificar los aminocidos separados por comparacin de sus valores de Rf con los de soluciones tipo de aminocidos. Comparar el grado de resolucin de la cromatografa bidimensional, con el de la unidimensional

Fundamento
La cromatografa consiste en la separacin de una mezcla de dos o ms compuestos por distribucin diferencial que depende de la afinidad o caractersticas de polaridad que tengan los componentes entre dos fases (una fase estacionaria y una mvil).

Resultados
Tabla 1. Cromatogramas unidimensionales tipo desarrollados en las 2 fases mviles Aminocidos Frente del soluto 6.4 6.2 4.8 6.9 6.8 3.1 6.4 5.4 6.5 2.2 fase mvil Frente del disolvente 8.2 8.1 8.1 8.3 8.1 8.2 8.1 8.2 8.2 8.2 fase mvil Frente del disolvente 7.8 7.8 7.8 7.7 7.6 7.7 7.7 7.6 7.6 7.6 Rf 0.780 0.765 0.592 0.831 0.839 0.378 0.790 0.658 0.792 0.268 Frente del soluto 4.3 2.4 1.8 4.3 3.9 0.5 0.7 2.1 2.4 0.8 Rf 0.551 0.307 0.230 0.558 0.513 0.064 0.090 0.276 0.315 0.105

Tirosina Treonina Prolina Fenilalanina Metionina Lisina Histidina Glicina Glutamato Arginina

Tabla 2. Cromatograma bidimensional tipo desarrollado en las 2 fases mviles No. De Mancha 1 fase mvil Frente Frente del del disolvente soluto 2.5 7.9 3.3 7.9 5 8.1 5.6 8 6.1 7.9 6.3 8 6.4 7.2 7.9 7.89 2 fase mvil Frente Frente del del disolvente soluto 1 7.5 0.9 7.5 2.2 7.4 2 7.5 1 7.5 2.6 7.5 4.3 4.7 7.5 7.5

Rf

Rf

Aminocido correspondiente Arginina Lisina Prolina Glicina Treonina Glutamato Fenilalanina

1 2 3 4 5 6 7 8

0.316 0.417 0.617 0.7 0.772 0.787 0.810 0.912

0.133 0.12 0.297 0.266 0.133 0.346 0.573 0.626

Tabla 3. Cromatograma bidimensional problema desarrollado en las fases mviles No. De Mancha 1 fase mvil Frente Frente del Rf del disolvente soluto 4.5 8 0.562 4.6 5.3 6 6.2 6.5 7.9 8.1 8 8 7.9 0.582 0.654 0.75 0.775 0.822 2 fase mvil Aminocido Frente Frente del Rf correspondiente del disolvente soluto 2.5 7.2 0.347 3.3 1.7 2.3 1.9 4.3 7.2 7.3 7.9 7.4 7.4 0.458 0.232 0.291 0.256 0.581 Prolina Glicina Treonina Fenilalanina

1 2 3 4 5 6

Tabla 4. Cromatograma bidimensional problema (IV) desarrollada en las dos fases mviles No de Mancha 1 2 3 4 5 6 Aminocido correspondiente Arginina Tirosina Treonina Prolina Prolina Fenilalanina

0.283 0.775 0.75 0.555 0.582 0.822

0.217 0.256 0.291 0.347 0.458 0.581

Discusiones
Se utiliz la tcnica de cromatografa en capa fina, la cual se basa en la separacin de las molculas absorbidas a la capa de gel de slice de la cromatoplaca mediante el flujo de la columna de la mezcla de solventes de agua, butanol y cido actico.Segn la solubilidad que tienen los aminocidos de la muestra respecto delas dos fases as fue su movilidad Las manchas delos aminocidos se observaron sobre la placa desarrollada, por la una solucin de ninhidrina rociada y al despus ponerla en la estufa. Los aminocidos aparecieron como manchas prpura sobre un fondo ligeramente amarillento. Sin embargo, la prolina (que no produce amonio libre al reaccionar con ninhidrina) genera una mancha de color amarillo oscuro.