Manualdelaboratoriocicacmiparapublicar 130906204731

Manual de Laboratorio
MANUAL DE LABORATORIO
PARA ESTUDIANTES DE CIENCIAS DE LA SALUD
TECNICAS Y PROCEDIMIENTOS
Editor: Germn Narro Cabezas. Ilustrador: Diagramador: Editorial Universidad Nacional de Trujillo. Jr. Almagro 344 Local Central. Trujillo - Per Telfono: 044-222409 edunt@unitru.edu.pe Trujillo Per Primera Edicin, Abril 2012 HECHO EL DEPOSITO LEGAL EN LA BIBLIOTECA NACIONAL DEL PER N 2012. Impreso en: Oficina de Impresiones y publicaciones OIP Universidad Nacional de Trujillo Jr. Almagro 344 Local Central. Telfono: 044-222409
PROLOGO
El presente Manual de Laboratorio ha sido elaborado de forma simple, didctica y eminentemente prctica para que su contenido sea fcil de entender. La finalidad es desarrollar capacidades y habilidades para vincular su vida con el mundo del trabajo en Laboratorio y para afrontar los incesantes cambios en la sociedad y el conocimiento. Nuestro deseo es encender una llama en la mente de los jvenes para que tomen la decisin de hacerla crecer, por lo que se deja en sus manos este primer manual de Laboratorio, iniciando este proceso de auto educacin para la vida. Queriendo renovar nuestra gratitud a todos los que han contribuido sugerencias. con su apoyo as como sus consejos y
Los Autores.
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DEDICATORIA
A mis padres Porfirio y Olinda A mi esposa Deysi, amiga, compaera, y madre de nuestros hijos, por su abnegado esfuerzo que me ha brindado, y por su comprensin para la culminacin de mi formacin profesional, y a mis hijos Lady, Deyvi, Shander, Hirvyn y mis nietos, con quienes comparto mi vida y sobre todo, por darme su paciencia. Quienes me permiten ver al futuro con optimismo.
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AUTORES
Lic. Germn Narro Cabezas. Tecnlogo Mdico, Especialista en Laboratorio Clnico y Anatoma Patolgica. Universidad Peruana Cayetano Heredia. Lima Per. Maestra en Ciencias con Mencin en Docencia universitaria e Investigacin Educativa. Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo de Lambayeque. Per. 2001- 2003. Asistente de la ctedra de Bioqumica y anlisis clnicos de la facultad de Farmacia y Bioqumica, Laboratorio de Bioqumica. Universidad Nacional de Trujillo. Per. Docente en la facultad de Ciencias de la salud, escuela de Medicina de la Universidad Cesar Vallejo. Trujillo Per. Gerente de Laboratorio Mara Inmaculada. Chocope, Paijan. La Libertad Per. Presidente del Centro de Investigacin, capacitacin y anlisis clnicos Mara Inmaculada. germannarro54@hotmail.com
Bach. Edwin Alejandro Saldaa Ambuldegui Bachiller en Obstetricia, Profesor de Anatoma en el curso radiologa bsica. Centro de Radiologa Espaa. Trujillo Per. Docente de Primeros Auxilios, Anatomia e Inyectables y venoclisis en el CEOGNE V. R. Haya de la Torre. Trujillo Per. edisambul@gmail.com
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CONTENIDO
PROLOGO DEDICATORIA AUTORES CONTENIDO CAPITULO I MATERIALES DE LABORATORIO Materiales y entorno Materiales de uso en el Laboratorio Material de vidrio Material de porcelana Material de plstico Material de metal Material volumtrico, mediciones de volumen Utensilios bsicos de Laboratorio Material especifico del Laboratorio clnico Cmara de recuento Limpieza del material de Laboratorio Agua de laboratorio Tipos de agua Metodos de purificacin del agua CAPITULO II SEGURIDAD E HIGIENE EN EL LABORATORIO Conceptos de seguridad Smbolos internacionales de riesgo biolgico Medidas generales de seguridad Barreras de seguridad. Lavado de manos. Algunos problemas de carcter general Recomendaciones bsicas en el que hacer habitual del Laboratorio. Esterilizacin, desinfeccin y descontaminacin. Envio de muestras. Riesgos Qumicos Medidas especficas de seguridad relativas a sustancias quimicas Cabinas de gases Riesgos relativos a gases utilizados en el Laboratorio. Precaucin con las bombonas de gases Gases: precauciones especficas con O2, N2 y CO2 Riesgos relativos a los aparatos. i iii v vii
1 3 3 3 4 5 6 7 17 19 21 23 26 26 27
35 37 40 41 41 42 43 44 45 48 48 49 51 51 51 52 52
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Riesgos microbiolgicos. Rutas de infeccn en el Laboratorio Transporte y recepcin de muestras infecciosas Clasificacin de los microorganismos segn de bio peligrosidad Precauciones generales en el manejo de microorganismos Precauciones especficas con Hepatitis B y SIDA Cabinas de seguridad microbiolgica Autoclaves Esterilizacin, incineracin. Fuego y electricidad. Generalidades Tipos de fuego. Extintores Recomendaciones generales para incendios Problemas debidos a electricidad Radiacin Radiacin ultravioleta Sustancias y elementos radiactivos CAPITULO III MICROSCOPIA Y APARTAJE AUXILIAR Microscopa, objetivos generales. Evolucin del Microscopio. Microscopa, tipos. Las caractersticas pticas del microscopio. Componentes bsicos de un microscopio ptico. Parte mecnica Parte tica. Empleo del microscopio. Enfoque del microscpio Enfoque con objetivos de inmersin. Microscopio de campo luminoso. Microscopio de luz ultravioleta. Microscopio de fluorescencia. Microscopio de contraste de fases. Microscopio de campo oscuro. Microscopio electrnico. Microscpio electrnico de transmisin. Microscopia electrnica de barrido Otras tecnologas de la microscopa. Preparacin para examen con el Microscopio de campo luminoso. Observacin vital Preparaciones secas. 54 55 56 56 57 58 59 60 60 61 61 61 61 62 62 62 62
65 67 67 71 72 73 73 74 76 76 77 77 78 78 79 80 80 81 81 82 84 84 85
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Aparataje auxiliar de laboratorio. Centrifuga Autoclaves Estufas y Hornos Neveras y congeladoras CAPITULO IV FOTOMETRIA DE LLAMA, ABSORCION ATOMICA, NEFELOMETRIA Y TURBIDIMETRIA. Fotometra de llama. Principios Instrumental Fotometra de llama y con estndar interno Aspectos prcticos. Espectrofotometra de absorcin Atmica. Principios Instrumental Absorcin atomica sin llama. Aspectos prcticos. Nefelometra y Turbidimetra. Principios Deteccin de la luz dispersa Instrumental Aspectos prcticos: compracin de los dos mtodos. Automatizacin. Dispensacin. CAPITULO V ELECTROFORESIS Y CROMATOGRAFIA Electroforesis. Principios Factores que afectan a la migracin de las partculas Realizacin de electroforesis Preparacin de la muestra Seleccin y preparacin del soporte Aplicacin de la muestra Revelado Lectura y evluacin Tcnicas Electroforticas. Electroforesis en papel Electroforesis en acetato de celulosa Electroforesis en gel de agarosa Electroforesis en gel de aluminio 88 88 91 94 95
99 101 101 102 103 104 104 105 105 107 107 107 107 108 108 109 110 113
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Electroforesis en gel de poliacrilamida Isoelectroenfoque Aplicaciones clnicas. Aspectos prcticos. Problemas con el tampn Fuentes de alimentacin y cubetas Soportes, electroendosmosis Aplicacin de la muestra Voltaje y calentamiento Tincin y lectura Cromatografa. Principios generales Mecanismos de la separacin CAPITULO VI EL TRABAJO DE LABORATORIO La seguridad en el Laboratorio. Incendios y explosiones. Reactivos venenosos, corrosivos y custicos. Quemaduras y escaldaduras. Quemaduras y choques elctricos. Accidentes debido a la vidriera. Cristalera del Laboratorio. Limpieza y preparacin de la cristalera bacteriolgica. Envo de muestras por correo. Archivos de Laboratorio. Aspectos de Qumica general. Algunos tpicos de qumica Orgnica. Compuestos bioqumicos importantes del organismo CAPITULO VII FUNCION RENAL Y ANALISIS DE ORINA El rin Funcin tubular Pruebas de funcin renal. Pruebas para la existencia de enfermedad urinaria Pruebas para estimar el grado de trastorno renal Estudio diferenciales de funcin renal. Anlisis de orina habitual Pruebas para las protenas en la orina Pruebas para las sustancias reductoras en la orina. Pruebas para cuerpos cetnicos en la orina 124 125 125 126 126 127 127 127 127 128 128 128 137
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Sedimento urinario Clulas. Cilindros. Huevecillos parsitos en la orina. Cristales. Medicin cuantitativa de glucosa en la orina Medicin cuantitativa de las proteinas de la orina Prueba de Sulkowich para el calcio en la orina CAPITULO VIII PRINCIPIOS DE HEMATOLOGIA Clulas de la sangre y de la mdula sea. Composicin Globulos rojos Hemoglobina Globulos blancos Plaquetas Plasma sanguineo Hematopoyesis. Anticoagulantes Oxalatos Citratos Desfibrinacin Citometra hemtica. Contadores electronicos de globulos Recuento de globulos rojos Recuento de leucocitos Recuento de plaquetas Recuento automtico de globulos Obtencin de sangre venosa. Obtencin de sangre capilar. CAPITULO IX NOCIONES DE MICROBIOLOGIA Y MICOLOGIA Historia de la Microbiologa. Bacterias. Hongos microscpicos. Esterilizacin y Desinfeccin. Los medios de cultivo en microbiologia. Evolucin de los medios de cultivo. Preparacin de medios de cultivo. Preparacin de pruebas bioqumicas. 182 182 184 186 186 189 190 192
193 195 195 195 196 196 199 200 200 205 205 206 207 207 209 209 210 211 212 213 215
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Almacenamiento de los medios de cultivo. Micologa. Clasificacin de las Micosis. Tcnicas de diagnstico de micosis profundas. Tcnicas de diagnstico de micosis superficiales. Tcnicas microscpicas bsicas. Tcnicas de diagnstico molecular de ltima generacin para micosis sistmica Diagnstico micolgico esencial Tinciones. Tcnicas de tincin: fundamentos. Examenes de muestras al microscopio Medios de cultivo para hongos Otras tinciones de uso habitual. CAPITULO X PARASITOLOGIA Definicin. Clasificacin parasitaria. Mecanismos de transmisin. Parsitos del Intestino. Parsitos de la sangre. Parsitos de la piel CAPITULO XI PRACTICA PARA ALUMNOS Exmenes en orina. Exmenes en sangre. ANEXOS Clulas sanguineas Los examenes en orina Preparacin de reactivos Lista de enzimas usadas en el diagnostico clinico Indicadores Valores normales de Laboratorio BIBLIOGRAFIA 232 234 234 237 238 239 240 240 242 244 247 250 252
255 257 257 259 260 270 273
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MATERIALES Y ENTORNO
OBJETIVOS ESPECIFICOS Reconocer el material de uso ms frecuente en el laboratorio de anlisis clnicos. Manejar correctamente las pipetas, probetas, cmaras de recuento, etc. Limpiar adecuadamente el material. Realizar un control de calidad del material de vidrio del laboratorio. Distinguir los mtodos de purificacin del agua. Recordar las aplicaciones de los distintos tipos de agua dentro del laboratorio de anlisis clnicos. MATERIALES DE USO EN EL LABORATORIO Se pueden encontrar distintos tipos de material: vidrio, Plstico Porcelana Ninguno de ellos cumple todas las exigencias del laboratorio; as pues debemos elegir entre ellos, eleccin que va a depender de la aplicacin, del tipo de producto y de la economa. Material de vidrio
Botella para lavado de gases.
Diagrama de una bureta.
Matraz de Erlenmeyer
Placa de Petri sin tapa
Probeta La base circular de plstico sirve para evitar que la probeta se caiga accidentalmente
El Vidrio Se caracteriza por tener una gran resistencia qumica frente al agua, cidos, bases, etc., superior a la que tienen la mayora de los plsticos, as como por su gran estabilidad y transparencia. Tener en cuenta que no todo tipo de vidrio es adecuado para su utilizacin en el laboratorio; por el contrario, es necesario emplear vidrios que se caractericen por su resistencia qumica, y su estabilidad trmica. Actualmente se dispone de una variedad de vidrios tcnicos con diferentes propiedades. Gran parte de los utensilios estn fabricados en vidrio de borosilicato, que se caracteriza por su elevado grado de resistencia trmica; las marcas comerciales de este tipo de vidrio son: Pyrex, Kimax, etc. Al trabajar con vidrio debemos tomar una serie de precauciones, como son: No someterlo a cambios bruscos de temperatura, ya que pueden provocar tensin trmica que conduzcan a la rotura del material. Por tanto hay que colocar el material en la estufa de secado o esterilizacin en frio, calentando despus, acabado el tiempo de secado o esterilizacin dejar enfriar el material antes de retirarlo. No aplicar fuerza sobre llaves tapones. No someter el material de vidrio a variaciones bruscas de presin. No conservar soluciones concentradas de lcalis en vidrio de borosilicato, ya que las condiciones causticas de la solucin destruyen la calibracin del vidrio. Material de Porcelana La porcelana Se usa en menor escala, en el laboratorio clnico, que los anteriores. Se utiliza principalmente cuando se necesitan materiales que resistan altas temperaturas. Estos instrumentos estn vidriados totalmente o por su parte interna, para evitar la adherencia de partculas a sus paredes. Tienen gran uso anlisis gravimtrico.
I. SEGURIDAD EHIGIENE EN EL LABORATORIO
OBJETIVOS ESPECIFICOS Comprender el concepto de seguridad en el mbito del laboratorio. Saber realizar un lavado de manos correcto. Distinguir entre antispticos, desinfectantes, y mtodos de esterilizacin. Diferenciar los trminos carcingeno, teratgeno y mutgeno. Saber cules son las medias a tomar ante un vertido de un producto qumico, biolgico o radiactivo. Conocer los riesgos potenciales asociados al uso de centrifugas Conocer las vas de transmisin de infeccin en el laboratorio y los tipos de accidentes que implican un mayor peligro de infeccin. Distinguir los distintos tipos de microorganismos segn su bio-peligrosidad. Conocer que es una cabina de seguridad biolgica y los tipos que existen. Conocer las diversas clases de extintores a usar segn el tipo de fuego de que se trate.
CONCEPTO DE SEGURIDAD 1.1 La seguridad en el laboratorio El termino seguridad supone que algo est libre o exento de riesgo. Se aplica tambin a mecanismos que tienen un buen funcionamiento. Podramos pues definir la seguridad en el laboratorio como la situacin carente de riesgos, o cono un riesgo limitado que resulta del cumplimiento de un conjunto de normas y prcticas didcticas para lograr este fin. En principio, el trabajo en un laboratorio no es peligroso por si mismo. Sin embargo, existe la posibilidad de que se produzca accidentes: el trabajo est expuesto a sustancias qumicas, gases comprimidos, agentes y muestras infecciosas, maquinarias, radiaciones, etc. Todos estos elementos son factores potenciales de riesgo que pueden producir lesiones y enfermedades. Todo aquello que constituya un riego potencial debe ser adecuadamente identificado y clasificado en trminos de lo que es y no es razonablemente aceptable. En la seguridad existe un factor objetivo, relativo al peligro o riesgo de que se trate, y un factor humano: el riesgo de trabajar por ejemplo, con un determinado compuesto qumico depende de las caractersticas del mismo, su presentacin o envasado y los materiales que tenemos para manejarlos. Pero en la valoracin del riesgo debemos tambin tener en cuenta quien lo maneja y que precauciones toma. No debe pensarse que una determinada titulacin profesional ha de ir necesariamente unida a habilidades y co0nociminetos de procedimientos de seguridad sobre todo en un rea tan amplia como es el laboratorio clnico. La seguridad es a menudo un tema olvidado o fastidioso
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MICROSCOPIA Y APARATAJE AUXILIAR I.

MICROSCOPIA OBJETIVOS ESPECIFICOS
Introducir al alumno en la utilizacin del microscopio para permitirle de esta forma, con ayuda de su observacin y trabajo personal, llegar aun correcto manejo del mismo en todo tipo de situaciones. Familiarizarlo con los distintos tipos de microscopios que puedan encontrar en un laboratorio, intentndolo hacerle comprender las nociones bsicas de funcionamiento de cada uno de ellos. Introducirle de forma concisa en el montaje de preparaciones, facilitando la posterior compresin de los captulos que tratan el tema con mayor profundidad. EVOLUCIN DEL MICROSCOPIO Acontinuacin se presenta slo una parte de lo fue la evolucin del microscopio en la historia, ya que se presentaron muchos diseos y variedades, se ha visto pertinente mostrar los ms resaltantes. MICROSCOPIO COMPUESTO DE ZACHARIAS JANSSEN. 1595, MIDELBURG, HOLANDA El microscopio parece remontarse al siglo XVI cuando en 1590 loshermanos Jansen en Holanda inventaron el microscopio compuesto, constaba de un tubo con dos lentes convexas en cada extremo y ampliaba ms que las lupas.
MICROSCOPIO COMPUESTO DE GALILEO GALILEI .1612, ITALIA.
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FOTOMETRIA DE LLAMA, ABSORCION ATOMICA, NEFELOMETRIA Y TURBIDIMETRIA
OBJETIVOS ESPECIFICOS Describir el principio en que se basa la fotometra de llama. Conocer los componentes de los aparatos que maneja, su disposicin, y los aspectos relacionados con su mantenimiento. Conocer el concepto de estndar interno y su empleo. Describir el principio de medida de los espectrofotometros de A.A. y de las leyes que rigen estas medidas. Conocer los aparatos de A.A., sus componentes, las precauciones de manejo, y el mantenimiento necesario para su correcto funcionamiento. Describir el principio de dispersin de la luz, y las dos tcnicas empleadas para medir este fenmeno. Conocer el instrumental empleado en las medidas nefelometricas y turbidimetricas, y saber explicar las diferencias existentes entre los sistemas de medida en uno y otro mtodo. Conocer las caractersticas que diferencian ambas tcnicas, para comprender el porqu del empleo de una u otra en distintas circunstancias. Conocer los aspectos del mantenimiento, as como el manejo de las tcnicas (condiciones de reaccin, manejo de reactivos, etc.)
1. FOTOMETRIA DE LLAMA 1.1 Principios Esta tcnica es ampliamente usada en el laboratorio clnico para la determinacin de sodio, potasio y litio en lquidos biolgicos. Est basado en el fenmeno de la emisin de luz. Cuando un tomo en su estado fundamental es sometido a la energa calorfica de una llama, sus electrones se excitan, pasando a niveles superiores de energa. Los electrones son inestables en ese estado de excitado, y al volver a su estado inicial desprenden la energa en forma de luz. La luz desprendida puede poseer distintas longitudes de onda, (distintos niveles de energa o lneas de espectro) que son caractersticas de cada elemento.
Siendo: A+ = ion de solucin A = tomo en estado fundamental. A = tomo en estado excitado.
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ELECTROFORESIS Y CROMATOGRAFIA
ELECTROFORESIS Objetivos Especficos Definir el proceso de electroforesis. Conocer y definir los factores que condicionan la migracin de una partcula en un campo elctrico. Conocer los soportes empleados en la realizacin de procesos electroforticos. Ventajas e inconvenientes. Conocer la ejecucin de un proceso electrofortico. Eleccin de un soporte. Preparacin de la muestra. Aplicacin de la muestra. Desarrollo del proceso. Instrumenta. Tincin. Colorantes y aplicaciones. Mtodos de evaluacin. Conocer las ventajas e inconvenientes de las diferentes tcnicas de electroforesis y sus aplicaciones. Conocer los problemas ms frecuentes que se pueden presentar en la ejecucin de un proceso. 1. Principio El termino electroforesis se puede definir como una tcnica en la cual una partcula cargada se hace desplazar a travs de un medio aplicando un campo elctrico. Las velocidades de migracin son funcin de la densidad de carga, por lo que se podr separar unas partculas de otras con arreglo de esta propiedad.
1.1 movimiento de una partcula cargada en el seno de un campo elctrico Cuando una partcula cargada se coloca en el seno de un campo elctrico, se mover hacia el polo positivo o negativo en funcin de la carga que posee. Si la partcula estcargada positivamente (catin) migra hacia el polo negativo (ctodo). Si la partcula est cargada negativamente (anin) migra hacia el polo positivo (nodo). La fuerza que ejerce el campo elctrico sobre la partcula cargada es proporcional a la carga de la partcula, y al voltaje del campo elctrico aplicado.
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EL TRABAJO DE LABORATORIO LA SEGURIDAD EN EL LABORATORIO La tecnologa del laboratorio mdico es una profesin prctica; adems de realizar lo mejor posible los distintos anlisis modernos de laboratorio, el profesional debe recordar constantemente las posibles causas de accidentes, los eventuales peligros, y las medidas ms eficaces para disminuir las probabilidades de lesiones y daos materiales. Los peligros en el trabajo de laboratorio son: Incendio o explosiones al diluir solventes inflamables. Reacciones venenosos, corrosivos y custicos. Quemaduras y escaldaduras, incluyendo las quemaduras y los choques elctricos. Laceraciones por vidriera rota, cuchillas de micrtomo, etc. Infecciones, virosis o parasitosis. Mordedura de animales. Peligros de radiacin.
INCENDIOS Y EXPLOSIONES Los solventes inflamables: alcohol, ter, tolueno, xilol, se utilizan en los departamentos del laboratorio. Los vapores de los alcoholes, y sobre todo del ter, no solo pueden inflamarse sino explotar. Se recomiendan las siguientes precauciones: a. Los frascos que estn en la mesa deben contener la menor cantidad de solvente compatible con las necesidades del trabajo. b. Las grandes cantidades se deben almacenar en cuarto especial, con ventilacin, y a prueba de fuego, con extintores. c. Antes de abrir un frasco verificar que no haya mecheros a menos de 2 mt. No haber llamas directas a menos de 3 mt, del ter. d. Los solventes inflamables no usarlos en lugares cerrados, porque su acumulacin puede formar mezclas explosivas. e. Las soluciones inflamables nunca deben calentarse sobre mecheros Buncen; mejor usar baos de agua a ebullicin. De declararse un incendio por solventes en el laboratorio, hacer lo siguiente: a. Si el incendio es pequeo en un matraz, ste se cubrir con un recipiente mayor o se ahogar el fuego con un pao mojado o se combatir con extinguidor de bixido de carbono. b. Si el solvente fue derramado en la mesa o el piso se usar extinguidor de bixido ce carbono. Si no se vence el fuego, se evacuar el Laboratorio, y sin tomar riesgos innecesarios usar el extinguidor para evitar su propagacin. c. Si existe un peligro para el personal llamar a los bomberos.
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FUNCION RENAL Y ANALISIS DE ORINA
OBJETIVOS DE APRENDIZAJE Explicar la funcin renal. Describir las etapas de funcin renal, existencia de enfermedades urinarias y estimacin del grado de trastornos renales. Comentar sobre los estudios diferenciales de funcin renal. Exponer el anlisis general de orina en funcin de su color, reaccin, densidad y contenido de protenas. Citar las pruebas aplicables en el anlisis de orina habituales. EL RION: Las funciones del rin consisten en: a. Eliminar el exceso de agua del organismo. b. Eliminar los productos de desecho del metabolismo, como la urea y la creatinina. c. Eliminar las sustancias extraas, como ciertos medicamentos. d. Retener las sustancias necesarias para la fisiologa normal, como las protenas, los aminocidos y la glucosa. e. Regular el equilibrio electroltico y la presin osmtica de los lquidos del organismo.
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HEMATOLOGIA
CELULAS DE LA SANGRE Y DE LA MEDULA OSEA ORIGEN Y DESARROLLO. Las clulas medulares propiamente dichas (glbulos rojos y sus precursores, granulocitos y megacariocitos) podran provenir de un progenitor retculo endotelial comn que correspondera al hemohistioblasto Composicin de la sangre Como todo tejido, la sangre se compone de clulas y componentes extracelulares (su matriz extracelular). Estas dos fracciones tisulares vienen representadas por: Los elementos formes tambin llamados elementos figurados: son elementos semislidos (es decir, mitad lquidos y mitad slidos) y particulados (corpsculos) representados por clulas y componentes derivados de clulas. El plasma sanguneo: un fluido traslcido y amarillento que representa la matriz extracelular lquida en la que estn suspendidos los elementos formes. Los elementos formes constituyen alrededor del 45% de la sangre. Tal magnitud porcentual se conoce con el nombre de hematocrito (fraccin "celular"), adscribible casi en totalidad a la masa eritrocitaria. El otro 55% est representado por el plasma sanguneo (fraccin acelular). Los elementos formes de la sangre son variados en tamao, estructura y funcin, y se agrupan en: Las clulas sanguneas, que son los glbulos blancos o leucocitos, clulas que "estn de paso" por la sangre para cumplir su funcin en otros tejidos; Los derivados celulares, que no son clulas estrictamente sino fragmentos celulares; estn representados por los eritrocitos y las plaquetas; son los nicos componentes sanguneos que cumplen sus funciones estrictamente dentro del espacio vascular. A. Glbulos rojos Los glbulos rojos, hemates o eritrocitos constituyen aproximadamente el 96% de los elementos figurados. Su valor normal (conteo) en la mujer promedio es de alrededor de 4.800.000, y en el varn, de aproximadamente 5.400.000 hemates por mm (o microlitro). Estos corpsculos carecen de ncleo y orgnulos (solo en mamferos), por lo cual no pueden ser considerados estrictamente clulas. Contienen algunas vas enzimticas y su citoplasma est ocupado casi en su totalidad por la hemoglobina, una protena encargada de transportar oxgeno. El dixido de carbono, contrario a lo que piensa la mayora de la gente, es transportado en la sangre (libre disuelto 8%, como compuestos carbodinmicos 27%, y como bicarbonato, este ltimo regula el pH en la sangre). En la membrana plasmtica de los eritrocitos estn las glucoprotenas (CDs) que definen a los distintos grupos sanguneos y otros identificadores celulares.
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NOCIONES DE MICROBIOLOGIA Y MICOLOGIA Historia La Microbiologa se puede definir, sobre la base de su etimologa, como la ciencia que trata de los seres vivos muy pequeos, concretamente de aquellos cuyo tamao se encuentra por debajo del poder resolutivo del ojo humano. Esto hace que el objeto de esta disciplina venga determinado por la metodologa apropiada para poner en evidencia, y poder estudiar, a los microorganismos. Aunque el trmino Bacteria , derivado del griego ("bastoncillo"), no fue introducido hasta el ao 1828 por Christian GottfriedEhrenberg, ya en 1676Anton van Leeuwenhoek, el cual usando un microscopio de una sola lente que l mismo haba construido basado en el modelo creado por el erudito Robert Hooke en su libro "Micrographia", fue capaz de realizar la primera observacin microbiolgica registrada de "animculos" como van Leeuwenhoek los llam y dibuj entonces. La bacteriologa (ms tarde una subdisciplina de la microbiologa) se considera fundada por el botnico FerdinandCohn (1828-1898]. Ferdinand Cohn fue tambin el primero en formular un esquema para la clasificacin taxonmica de las bacterias. Eugenio Espejo(1747-1795)public importantes trabajos de medicina, como las Reflexiones acerca de la viruela (1785), el cual se convertira en el primer texto cientfico que refera la existencia de microorganismos (inclusive antes que Louis Pasteur) y que definira como poltica de salud conceptos bsicos de la actualidad como la asepsia y antisepsia de lugares y personas. Louis Pasteur (1822-1895) considerado el padre de la Microbiologa Mdica, y Robert Koch (1843-1910) fueron contemporneos de Cohn. Quiz el mayor logro de Pasteur consisti en la refutacin mediante cuidadosos experimentos de la por aquel entonces muy respetada teora de la generacin espontnea, lo cual permiti establecer firmemente a la microbiologa dentro de las ciencias biolgicas. Pasteur tambin dise mtodos para la conservacin de los alimentos (pasteurizacin) y vacunas contra varias enfermedades como el ntrax, el clera aviar y la rabia. Robert Koch es especialmente conocido por su contribucin a la teora de los grmenes de la enfermedad, donde, mediante la aplicacin de los llamados postulados de Koch, logr demostrar que enfermedades especficas estn causadas por microorganismos patognicos especficos. Koch fue uno de los primeros cientficos en concentrarse en la obtencin de cultivos puros de bacterias, lo cual le permiti aislar y describir varias especies nuevas de bacterias, entre ellas Mycobacterium tuberculosis, el agente causal de la tuberculosis. Tipos de microbiologa El campo de la microbiologa puede ser dividido en varias subdisciplinas: Fisiologa microbiana: estudio a nivel bioqumico del funcionamiento de las clulas microbianas. Incluye el estudio del crecimiento, el metabolismo y la estructura microbianas.
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PARASITOLOGA
DEFINICIN: La parasitologa es una rama de la biologa que estudia el fenmeno del parasitismo. Por un lado, estudia a los organismos vivosparsitos, y la relacin de ellos con sus hospedadores y el medio ambiente. Convencionalmente, se ocupa slo de los parsitos eucariotas como son los protozoos, helmintos (trematodos, cestodos, nematodos) y artrpodos; el resto de los organismos parsitos (virus, procariotas y hongos) tradicionalmente se consideran una materia propia de la microbiologa. Por otro lado, estudia las parasitosis o enfermedades causadas en el hombre, animales y plantas por los organismos parsitos. PARSITOS Etimologa: Del latnparastus, y este del griego, "comensal". 1. Adjetivo Biologa Dicho de un organismo animal o vegetal: Que vive a costa de otro de distinta especie, alimentndose de l y depauperndolo sin llegar a matarlo. Usado tambin como sustantivo. 2. Un parsito es aquel ser vivo que se nutre a expensas de otro ser vivo de distinta especie sin aportar ningn beneficio a este ltimo. Este otro ser vivo, recibe el nombre de husped u hospedador, a expensas del cual se nutre el parsito, pudiendo producir en algunos casos dao o lesiones. Parsitos Seres eucariontes que viven a expensas de otro de distinta especie y le produce dao Se caracterizan por desarrollar ciclos evolutivos simples o complejos Se reconoce como ciclo evolutivo o biolgico a las etapas secuenciales del desarrollo de un parsito. CLASIFICACIN PARASITARIA 1. SEGN SU MORFOLOGIA a. Protozoos b. Helmintos c. Artropodos 2. SEGN SU GRADO DE PARASITISMO a. Temporales o facultativas b. Permanentes y obligatorias 3. SEGN SU TOPOGRAFIA a. Ectoparasitos b. Endoparasitos 4. SEGN SU LOCALIZACION a. Enteroparasitos
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EXAMENES EN ORINA
EXAMEN DIRECTO DE FROTIS DE ORINA El sedimento urinario se usa para preparar frotis. El examen microscpico directo de frotis teidos constituye una manera eficiente para estudiar la presencia de bacterias y otras veces, para establecer el diagnostico de una enfermedad, ejm. TBC. Es importante que se anote una descripcin detallada de los microorganismos que se observan y de los dems elementos encontrados (leucocitos, eritrocitos, clulas epiteliales) MATERIALES: Un recipiente estril, para la obtencin de la muestra. Una centrifuga. Tubos cnicos para centrifugacin, estriles, con tapa rosca o tapn. Un portaobjetos. Un asa de siembra. Un mechero de Bunsen. Reactivos para las tinciones de Gram y Ziehl Neelsen. Aceite de inmersin. Un microscopio.
METODOS: 1. Verter 10 ml de la orina obtenida en el tubo cnico para centrifugacin, estril, de preferencia con tapa rosca o taponado con un taco de algodn estril que se fijar en la boca del tubo con gasa y un hilo. 2. Centrifugar a 2500 rpm durante 10 min. 3. Eliminar el sobrenadante de la orina centrifugada. 4. Mezclar el sedimento, que queda en el fondo del tubo, usando un asa de siembra estril (flameado) hasta que se forme una suspensin homognea (uniforme). 5. Hacer frotis de esta suspensin. 6. Teir el frotis del portaobjetos 1 con tincin Gram y el portaobjetos 2 con tincin Ziehl Neelsen. LECTURA E INFORME: A. Frotis con tincin Gram: 1. Examinar el frotis en el microscopio usando el objetivo 100x (antes aplicar una gota de aceite de inmersin sobre el portaobjetos). 2. Buscar pus, es decir, numerosos leucocitos teidos de rojo. 3. Buscar microrganismos como: Bacilos gramnegativos. Cocos gram positivos. Levaduras grampositivas.
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Manual de Laboratorio CELULAS SANGUINEAS
GLOBULOS ROJOS
Esferocitos: note la forma esfrica de los glbulos rojos que le hace perder el halo claro central que aparece cuando son bicncavos. Aumento: 400 veces Coloracin: May Grunwald - Giemsa
Eliptocitos: note la forma oval de los glbulos rojos. Aumento: 400 veces Coloracin: May Grunwald - Giemsa
Dacriocitos: note la forma de "lgrima" de los glbulos. Son indicadores de sufrimiento medular. Aumento: 400 veces Coloracin: May Grunwald - Giemsa
Target Cell: note la forma de "Blanco de tiro" de los glbulos. Aparecen en las talasemias. Aumento: 400 veces Coloracin: May Grunwald - Giemsa
Cuerpos de Howell-Jolly Aumento: 400 veces Coloracin: May Grunwald - Giemsa
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GERMAN NARRO CABEZAS
Nacio en el Distrito de Paijan, Provincia Ascope en el Departamento de la Libertad, realiz sus estudios primarios y secundarios (Colegio Leonci Prado) los realiz en el Distrito de Paijan, sus estudios superiores los realiz en la ciudad de Trujillo. Ostenta el ttulo de Licenciado en Tecnologa mdica, especialista en Laboratorio clnico y anatoma patolgica, egresado de la Universidad Peruana Cayetano Heredia. En la actualidad se desempea como asistente de la catedra de Bioqumica y anlisis clnicos en la Universidad Nacional de Trujillo, en la Facultad de Farmacia y Bioqumica.

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PARA ESTUDIANTES DE CIENCIAS DE LA SALUD

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Botella para lavado de gases.

Diagrama de una bureta.

Placa de Petri sin tapa

MICROSCOPIA Y APARATAJE AUXILIAR I.

MICROSCOPIO COMPUESTO DE GALILEO GALILEI .1612, ITALIA.

Siendo: A+ = ion de solucin A = tomo en estado fundamental. A = tomo en estado excitado.

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