Enzimas como dianas farmacolgicas 28 nov.

Por qu estas enzimas no son receptores fisiolgicos? Porque no median la comunicacin celular, es decir, son enzimas que no tienen un ligando endgeno. Son enzimas de las muchas, miles, que estn traba ando constituti!amente en nuestro organismo " son la diana farmacolgica ms importante de todas. #a ma"or parte de los frmacos que estn en el comercio son inhibidores enzimticos. $ntonces, lo que se hace con estas enzimas es inhibirlas " al inhibirlas e!itamos que se genere algo, algo que est modificando el funcionamiento celular " tisular, porque se est produciendo en e%ceso probablemente. Por qu creen ustedes que la ma"or parte de los frmacos son inhibidores enzimticos? Por qu no son agonistas o antagonistas de receptores? & Porque se inhibe un ligando, entonces si no ha" ligando, no ha" acti!idad sobre un determinado receptor, " no es necesario generar un antagonista sobre un receptor que ser'a mucho ms traba oso, " es mucho ms sencillo inhibir la s'ntesis del ligando. $ntonces la ma"or parte de los frmacos son inhibidores de la s'ntesis de ligandos, en algunos casos, si nosotros no tenemos un agonista que administrar, una buena estrategia tambin podr'a ser inhibir la degradacin del ligando. (ul es el problema que nos genera muchas !eces los inhibidores enzimticos? & (uando uno traba a sobre un receptor dado, puede localizar qu receptor espec'ficamente est presente en un te ido enfermo, " mu" probablemente ese receptor no !a a ser igual al receptor de otro te ido " podemos dar un agonista espec'fico sobre ese receptor " as' nos e!itamos reacciones ad!ersas. $n cambio, si nosotros inhibimos la degradacin de un ligando, !amos a tener mucho ligando en todo el cuerpo " eso implica riesgo de reacciones ad!ersas. Por esa razn muchos t%icos tambin son inhibidores enzimticos, porque es mu" fcil generar algo que into%ique por la gran !ariedad de efectos en diferentes receptores, sobre todo por inhibir la degradacin de un ligando, por e emplo, inhibidores de la acetilcolinesterasa, que ha" re!ersibles e irre!ersibles, re!ersibles) isostigmina " los irre!ersibles, organofosforados. Sin embargo la farmacolog'a, bioqu'mica, biolog'a molecular, ha aumentado su conocimiento respecto a las enzimas, lo que en la actualidad permite tener un arsenal de frmacos que act*an sobre enzimas que no tienen efectos sobre molculas que se distribu"an ampliamente, que tengan un efecto tan amplio " tan inespec'fico. +ue es algo en lo que ha" que tener en cuenta a la hora de traba ar con esos frmacos. $l inhibidor enzimtico es una molcula mu" peque,a en relacin a la enzima " es una molcula que en algunas ocasiones tiene una similitud estructural significati!a con el sustrato. -na enzima tiene distintas conformaciones, normalmente solo una de ellas es la que tiene la acti!idad catal'tica, la que e%pone el sitio catal'tico, lo que hace que el inhibidor normalmente !a"a a tener afinidad por este estado de la enzima, el que est e%presando la acti!idad catal'tica. -na enzima pasa por diferentes estados en funcin de su estructura terciaria " cuaternaria, que son estados de energ'a tambin " determinan su acti!idad catal'tica.

$l sustrato puede ser, un ligando o el producto puede ser un ligando, puede ser que no queramos que se e%prese un determinado ligando o puede ser que no queramos que se metabolice un determinado ligando. .tras posibilidades que se dan tambin a parte de esto, es que se persiga disminuir la s'ntesis de alg*n determinado metabolito que sea importante en la proliferacin celular, " eso har'a que un inhibidor enzimtico actuara como un citosttico " otra situacin bastante com*n, es que un inhibidor enzimtico est actuando no sobre el husped, si no que sobre un patgeno " sobre ese patgeno est interfiriendo procesos propios del patgeno, proceso de replicacin, como el caso de los inhibidores de la /01 girasa o de la topoisomerasa, como las quinolonas " los anti!irales que son anlogos de bases nitrogenadas " de ese modo interfieren con la s'ntesis del 1/0 !iral e inhiben una enzima " !an generando un producto que no es funcional para el !irus, como el aciclo!ir, que es una guanosina en el 1/0 !iral. #as clasificaciones que ha" para los inhibidores enzimticos, estn dados en la afinidad que tienen sobre la enzima o sobre el comple o enzima sustrato, que se genera en medio de la reaccin. Inhibidor enzimtico competitivo es aquel que tiene afinidad por la enzima, independiente de en qu sitio de la enzima se una. Inhibidor no competitivo, se une a otro sitio, distinto al que se une la enzima " por lo tanto el inhibidor tiene afinidad tanto por la enzima libre, como por el comple o enzima sustrato Inhibidor acompetitivo, solo tiene afinidad por el comple o enzima&sustrato, entonces no compite de ning*n modo con el sustrato, necesita que el sustrato est unido a la enzima para poder uniones. 2odas las clasificaciones dadas, son para uniones re!ersibles. /e las inhibiciones re!ersibles e%istentes la ms posible en la inhibicin competiti!a, la ms 3popular4 de todas, es la ms abundante. Para que se produzca inhibicin tiene que haber afinidad estructural por la enzima o por el comple o enzima&sustrato, " esa afinidad estructural de inhibidor est determinada, desde el punto de !ista de conformacin de la enzima, est determinado por las cargas " cuando digo de conformacin implica distintos tipos de estructura. $%isten pocos inhibidores irre!ersibles en el mercado, a menos que tenga una particularidad, que "a !amos a !er, " es que lo que persigue la industria farmacutica en la actualidad es generar molculas que no act*en mu" drsticamente en la inhibicin enzimtica. -na inhibicin irre!ersible de una enzima, normalmente !a a generar to%icidad, una inhibicin re!ersible, !a a poder ser mane able, pero el modelo ideal que e%iste para la farmacolog'a, es una inhibicin que sea capaz de responder al uso que se le est dando a la enzima, es decir, que cuanto ms se use la enzima, ms se inhiba " si la enzima est actuando poco, se inhiba poco, cmo podemos lograr que ha"a una especie de regulacin diferencial de la inhibicin enzimtica en funcin de la acti!idad de la enzima, la forma ms fcil, " que est estudiando actualmente mucho la industria farmacutica, es generar un inhibidor que se acti!e una !ez que es metabolizado por la misma enzima, entonces un agonista es un profrmaco, ese profrmaco es metabolizado por la enzima " una !ez que es metabolizado por la enzima inhibe a la enzima, as', cuanto ms se haga traba ar a la enzima ms inhibida !a a estar la enzima " probablemente en una basal de acti!idad enzimtica no se !a a notar tanto la inhibicin, slo cuando se dispara la acti!idad enzimtica. Todo eso es una introduccin a las diapositivas.

Por q ! enzimas como dianas farmacolgicas" $se grfico demuestra que el 567 de los frmacos que e%isten en el mercado act*an sobre enzimas. $l grfico est un poco des!iado, un poco sesgado, por el hecho de que dentro del concepto de enzimas que aparece en este grfico, tambin est incluido las enzimas que son receptores, pero la !erdad es que el impacto que generan es mu" ba o en relacin a los otros, as' que podr'amos decir que efecti!amente el 587 o cerca del 567, cerca del 897 de los frmacos que estn en el mercado son inhibidores enzimticos, luego de eso, los frmacos que act*an sobre enzimas. #uego de eso tenemos aqu' en la lista receptores acoplados a prote'na :, canales inicos, receptores nucleares un ;7, miscelneos un ;7, frmacos que act*an sobre el /01 <7, integrinas <7. Estr ct ra de las prote#nas =ecordar) primaria, secundaria, terciaria.

$elacin %rmaco&Enzima 1h' aparece un frmaco " una enzima, la relacin tal como la que !imos en receptores acoplados a prote'na :, donde el ligando es una amina o un aminocido sobre una enorme prote'na, aqu' tambin es desproporcional, el inhibidor es m'nimo " tiene una afinidad estructural por una enzima. $n el caso de que sea una inhibicin competiti!a est dada por la similitud que tiene con el sustrato " ah' aparece el >etotre%ato inhibidor de la dihidrofolato

reductasa que por cierto se parece mucho al dihidrofolato. ?@ndica la unin del >etrotre%ato con la enzima, con los diferentes aminocidos de la enzima, cmo se asocia.

'aracter#sticas del sitio activo relevantes para la farmacolog#a $l sitio acti!o es relati!amente peque,o con relacin a la enzima, el sitio acti!o es tridimensional, su configuracin est dada por la estructura terciaria de la prote'na. $n la ma"or parte de los casos la interaccin inicial enzima&sustrato es no co!alente, la ma"or parte de las !eces, e%cepto en inhibiciones re!ersibles donde es mu" com*n que la inhibicin sea, que la unin sea co!alente. $n la ma"or parte de los casos son no co!alentes, tal como la que se produce entre un ligando " receptor por uniones inicas, puentes de hidrgeno " fuerzas de !an der Aaals. $l sitio acti!o est ubicado en grietas o hendiduras en la estructura terciaria de la enzima, lo que e%clu"e la interaccin con el agua, esto es algo propio de las enzimas tambin ?el sustrato est desol!atadoB, se tiene que liberar de su manto de agua para poder entrar a la reaccin. #a especificidad del reconocimiento del sustrato depende de una disposicin u ordenamiento bien definido de tomos en el sitio catal'tico que se complementa con la estructura del sustrato o inhibidor. #a acti!idad enzimtica del sitio catal'tico es regulada por di!ersas molculas, una serie de molculas que se unen a la enzima, por otros lados, generan cambios conformacionales en la enzima que determinan la acti!idad enzimtica. +u se puede unir a una enzima " regularla por otros lados? pptidos, iones metlicos, compuestos aromticos, etc. C esa es la e%plicacin de la posibilidad de que e%ista la inhibicin no competiti!a, en el sentido de que

el frmaco se une a un sitio distinto del sitio de unin del sustrato, pero que regula fuertemente la acti!idad de la enzima. /ichas molculas no act*an necesariamente en el sitio catal'tico, sino en regiones alostricas. Inhibicin competitiva $l inhibidor se une e%clusi!amente a la enzima libre. #a unin de sustrato e inhibidor es mutuamente e%clu"ente.

Puede ser alostrica tambin. +u quiero decir con esto? #a #o!astatina, las estatinas son inhibodores de una enzima que se llama

$ emplos ?puede que pregunte algo de estoB

hidro%imetilglutaril coenzima 1 reductasa que probablemente por Dioqu'mica saben que es tambin importante la s'ntesis del colesterol, por lo tanto se utilizan para disminuir el colesterol #/#, fundamentalmente o triglicridos. #a enzima con!ertidora de angiotensina, es pesada constructi!amente, que forma parte del sistema renina&angiotensina&aldosterona " que con!ierte angiotensina @ en angiotensina @@ ?la angiotensina @ !iene desde el angiotensingenoB. $ntonces tenemos el angiotensingeno pasado a angiotensina @ por la renina, luego de angiotensina @ a angiotensina @@ por la enzima con!ertidora de angiotensina " la angiotensina @@ es la acti!a " angiotensina @ es mu" poco acti!a, entonces aqu' estamos inhibiendo( q ! cosa" n ligando"la s#ntesis de n ligando" o estamos inhibiendo el metabolismo de n ligando" $stamos inhibiendo la s'ntesis de un ligando que es la angiotensina @@, que act*a su receptor. #a 1cetazolamida es un inhibidor de la anhidrasa carbnica que se utiliza normalmente en glaucoma. $l Eiagra ?SidenafilB inhibe la fosfodiesterasa " de ese modo inhibe la s#ntesis de n ligando o inhibe la degradacin de n ligando" q ! ligando es" o no estamos hablando de ligando ah#" pero el )*P es n ligando" $s un segundo mensa ero, entonces estamos inhibiendo la degradacin de un segundo mensa ero, eso se da tambin muchas !eces. $ste es el me or e emplo de la inhibicin de la degradacin de un segundo mensa ero. C el >etotre%ato es un inhibidor de la dihidrofolato reductasa tal como lo es el (otrimo%azol, pero este tiene una afinidad mucho ma"or por la dihidrofolato reductasa

bacteriana, en cambio el >etotre%ato elimina todo lo que aparece a su paso " por lo tanto, es un anti metabolito. -n e emplo de inhibicin de la $(1. =ecuerdan ustedes que el $nalapril no es el frmaco, es un profrmaco, es un profrmaco del $nalaprilato. 1qu' !emos entonces, el sustrato en 1 " la similitud estructural que tiene con el (aptopril " el $nalaprilato saben lo que es esta figurita? $sa es la prote'na " esa, es la enzima, cada una de esas terminaciones es la enzima ?para que aprendan a interpretar estas figuritas de inhibicin enzimtica. Inhibicin competitiva de nin lenta $s la que se da en inhibidores espec'ficos de la (.F @@, esto lo !amos a repasar mucho ms en la segunda farmacolog'a, farmacolog'a de sistemas, pero un gran descubrimiento fue percatarse de que la (.F @ tiene un bolsillo donde est el sitio catal'tico al cual pueden acceder una serie de frmacos que act*an como inhibidores de la (.F @. #a (.F @ como enzima tiene una acti!idad constituti!a sobre la s'ntesis de prostaglandinas, es decir, es sumamente necesaria e importante " su inhibicin genera la ma"or parte de los efectos ad!ersos que !amos a !er despus que tienen los inhibidores de la s'ntesis de prostaglandinas que tienen los 1@0$S, porque las prostaglandinas son necesarias para regular una serie de procesos biolgicos, en cambio, e%iste una cicloo%igenasa @@ que tiene un incremento netamente en estados patolgicos " una de las b*squedas que tubo durante los a,os 69 " parte de los G9, la farmacolog'a, fue buscar inhibidores selecti!os de la cicloo%igenasa @@ " los inhibidores selecti!os de la cicloo%igenasa @@ son aquellos frmacos que se a ustan a este bolsillo " que no son capaces de inhibir a la cicloo%igenasa @ por el impedimento estrico que genera esta zona que son grupos ep%idos, en el caso del inhibidor, en el caso del que tiene la ma"or parte de los inhibidores selecti!os. Inhibicin no competitiva ?esto "a lo hablamosB $s aquella donde la afinidad es por enzima libre " por enzima&sustrato porque se supone que se est uniendo a otro sitio no en el sitio catal'tico. $s tambin denominada de inhibicin mi%ta. $s de menor trascendencia en farmacolog'a. ?Ha" algunos frmacos, pero di o que no los 'bamos a discutir " que no los preguntaba.B 1qu' ha" algunos e emplos. #o que si, el >etotre%ato tiene un

mecanismo mi%to sobre la enzima " puede ser inhibidor competiti!o " tambin inhibidor acompetiti!o.

Inhibicin acompetitiva /entro de la inhibicin acompetiti!a, tal !ez lo ms importante son los que estn relacionados al metabolismo de la testosterona, donde la esteroide&8&alfa&reductasa es inhibida por Iinasterida " $pistarida que son frmacos que son bastante utilizados en la actualidad en la hiperplasia benigna de prstata. Inhibicin irreversible 1ntiguamente se pensaba que la inhibicin irre!ersible se pensaba que era prohibiti!a en farmacolog'a, pero en la actualidad e%isten !arios frmacos que son inhibidores irre!ersibles, el e emplo ms importante de todos, desde el punto de !ista comercial, es el .mepreazol que es un inhibidor irre!ersible de la proteasa gstrica que genera protones " aqu' se da lo que mencionaba hace un momento) 1lgunas especies no reacti!as son metabolizadas por una enzima a una especie reacti!a que subsecuentemente inacti!a a la misma enzima. C estos son los frmacos que se estn buscando en la actualidad. $stos *ltimos frmacos tienen un me or perfil en teraputica que los simples inhibidores re!ersibles, porque son inhibidores uso dependientes, cuanto ms se usa la enzima ms se inhibe.

/istintos tipos de inhibicin irre!ersible, la ms com*n de todas es la que se produce por alquilacin o acilacin de la enzima, normalmente se les llama agentes alquiladores o alquilantes, o acilantes, se les llama 31ffinit" label4. $l affinit" label latente es aquel que en una solucin no reacciona con la enzima " solamente demuestra su acti!idad a ni!el biolgico, por e emplo la aspirina es un acetilador de la cicloo%igenasa " ese efecto normalmente no se determina fcilmente in !itro en una solucin " fue un efecto determinado fundamentalmente in !i!o, no obstante la aspirina

tiene los dos inhibidor, re!erible de la cicloo%igenasa por un lado " por otro lado tambin es inhibidor irre!ersible pero por su caracter'stica como 1ffinit" label porque se une irre!ersiblemente a la (.F, a una cerina de la (.F. 1ffinit" label, un caso es el .meprazol, es un profrmaco que es transformado por las condiciones biolgicas, el pH gstrico en este caso en la sulfonamida que es la que se une co!alentemente a la enzima, entonces resumiendo una !ez ms se les llama genricamente 1ffinit" label a aquellos frmacos que generan uniones co!alentes con las enzimas, que alquilan las enzimas, que acilan las enzimas, pero que demuestran su acti!idad normalmente in !i!o " no in !itro como ocurre con la ma"or parte de los inhibidores irre!ersibles. >s e emplos de 1ffinit" label) las penicilinas " las cefalosporinas son transpeptidasas de los pptidos glicanos bacterianos, act*an como transpeptidasas de pptido glicano bacteriano impidiendo que se forme la pared de la bacteria, act*an sobre la membrana bacteriana impidiendo que se forme la pared bacteriana. Inactivadores basados en mecanismo Son los ms buscados en la actualidad. Son especies meteorizadas por la enzima " luego de esto son inhibidores co!alentes o parecen ser co!alentes como los 1ffinit" label o un inhibidor irre!ersible de uniones fuertes o un anlogo de ? . $l e emplo ms importante de este tipo de frmacos es el cido cla!ulnico que es metabolizado por las beta&lactamasa bacterianas " luego de que es metabolizado por ellas se une irre!ersiblemente a beta&lactamasa por eso se le llama tambin que es un inhibidor suicida de beta&lactamasa, porque necesita cambiar de estructura, ser metabolizado por la beta&lactamasa para e!idenciar su efecto. .tros e emplos son la Eigabatrina que

es un inhibidor de la :1D1 transaminasa " aumenta la concentracin de :1D1 en la biofase " de ese modo act*a como antiepilptico. #a Selegilina es un inhibidor de la 3>1. D4 que tambin es un inhibidor basado en mecanismo, entonces tambin es metabolizada por la 3>1. D4 " luego de eso inhibe irre!ersiblemente a la 3>1. D4 se utiliza en la enfermedad de ParJinson como coad"u!ante a la administracin de le!odopa. 2enemos el 8&Iluorouracil en cncer. 2enemos tambin los inhibidores de la esteroide&8alfa&reductasa. #o que hab'a mencionado, el cido cla!ulnico est asociado a algunas aminopenicilinas para inhibir la metabolizacin de la degradacin de penicilinas por beta&lactamasa. las beta&lactamasas las hab'an o'do alguna !ez? #as penicilinas si? Ca, las penicilinas son una familia mu" inocua de antibacterianos, utilizados desde ni,os hasta personas de la tercera edad, es la que tiene menos efectos ad!ersos en general " esto es porque tiene un mecanismo de accin bastante espec'fico, que es el de la inhibicin de la s'ntesis de barreras bacterianas, el problema es que las bacterias por la misma presin que e erce el antibitico !an generando mecanismos de resistencia. #os mecanismos de resistencia de las bacterias se pueden dar de diferentes maneras se habla de un modo horizontal o !ertical. Eertical es cuando la informacin indica

mecanismos de resistencia de los cuales ha" mucho, bombas, pero la ms com*n de todas en este caso es la generacin de enzimas que !an a destruir el antibitico, as' de simple " la ma"or parte de las bacterias :ram positi!as " :ram negati!as tambin es que son cepas capaces de producir inacti!adores del antibitico, degradadores del antibitico, entonces esa resistencia que gener muchos problemas durante los *ltimos a,os son solucionadas con la introduccin al mercado de estos frmacos, el cido cla!ulnico " el sulbactam que son molculas que suplantan al antibitico, a las penicilinas, se parecen un poco a ellas, pero lo fundamental es que una !ez que la enzima beta&lactamasa degrada al sulbactam, el sulbactam se le une irre!ersiblemente " de ese modo esa enzima, esa unidad de enzima, "a no puede metabolizar ms antibitico, entonces protegen al antibitico del ataque de la enzima degradadora "

eso es lo que se les da normalmente a los ni,os peque,os amo%icilina con cido cla!ulnico, es una escala donde al ni,o peque,o normalmente se la amo%icilina porque sus bacterias normalmente no son resistentes, cuando !an a!anzando las infecciones se les administra a los ni,os cido cla!ulnico, a medida que !an a!anzando las infecciones despus se genrean resistencias tambin contra los inhibidores pero "a K? cambia el sitio diana, muta la bacteria " ah' nos pasamos a cefalosporinas. $n los hospitales normalmente "a no se indican penicilinas solas sino que en parte con cido cla!ulnico, se asume que los hospitales estn llenos de bacterias resistentes. $ntonces se parte con inhibidor enzimtico, la enzima que destru"e al antibitico que es un 1ffinit" label, es un inhibidor basado en mecanismo.