PRINCPIOS DA TCNICA DE ELETROFORESE A eletroforese consiste na migrao de molculas ionizadas, de acordo com suas cargas eltricas e pesos moleculares

em campo eltrico (Figura 1). Molculas com carga negativa migram para o plo positivo (nodo) e molculas com carga positiva migram para o plo negativo (ctodo). A carga lquida das molculas funo somatria dos aminocidos que as constituem. Em razo das protenas serem substncias anfteras, ou seja, capazes de adquirirem carga positiva ou negativa em funo do pH, indispensvel manter constante o pH do meio durante a eletroforese, pelo uso de solues-tampo. A eletroforese pode ser conduzida em soluo com gradiente de densidade ou em diferentes meios-suporte, tais como papel de filtro, slica gel, membranas de acetato de celulose, gel de agarose, amido ou poliacrilamida, entre outros. O suporte deve ser qumica e fisicamente inerte. No caso de eletroforese em gis, especialmente de poliacrilamida, a migrao das molculas profundamente influenciada pelas malhas (poros) do gel. Gis de poliacrilamida so freqentemente usados para anlises de alta resoluo (seqenciamento de DNA/RNA) em anlises proticas e isoenzimticas que requeiram maior definio das bandas Uma vez que cada molcula possui sua prpria carga e seu prprio tamanho, ela se deslocar sempre numa determinada distncia de campo eltrico num dado espao de tempo.

Figura 1. Representao esquemtica da eletroforese.

Figura 2. Diferentes sistemas de revelao dos gis: a) brometo de etdio; b) nitrato de prata; c) raio X; d)quimiluminescncia; e) coomasie blue e f) fast blue BB salt, a e naftil acetato.

Referncia para o texto e imagens acima: BRAMMER, S. P. A tcnica de eletroforese: importncia e aplicaes em anlises genticas. Passo Fundo: Embrapa Trigo, 2001.

Tipos de eletroforese Eletroforese livre (frente mvel) Eletroforese de zona Eletroforese em papel Eletroforese em acetato de celulose - O acetato de celulose uma membrana branca com espessura de 0,1mm, composta por porosidades microscpicas por onde migram as protenas e enzimas. H baixa ao de eletroendosmose (fluxo eltrico das substncias do acetato) que impede o livre desempenho da mobilidade das fraes. Fracionamento de hemoglobinas humanas. Voltagem: 300 volts Tempo: 20 minutos Corante: Negro de amido Eletroforese em gel (SDS-PAGE) De agarose Focagem isoeltrica

1.

Eletroforese bidimensional - Eletroforese bidimensional em gel, abreviado

como 2-DE ou eletroforese 2-D, uma forma de eletroforese em gel geralmente utilizada para anlise e separao de protenasem mistura. Rocha et al.. (2005)
"Eletroforese bidimensional e anlise de proteomas" (em ). Comunicado tcnico da Embrapa 136(outubro). ISSN 9192-0099.
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Eletroforese capilar - A electroforese capilar permite a separao de biomolculas com uma eficincia muito superior que possvel em HPLC, e permite tambm a quantificao de pequenas molculas que no podem ser analisadas por electroforese em gel.