DOSSI TCNICO

Produo de chs e extratos de plantas medicinais Maria das Graas Lins Brando Fundao Centro Tecnolgico de Minas Gerais CETEC

agosto 2007

DOSSI TCNICO
Sumrio 1 INTRODUO ..................................................................................................................... 2 2 PRODUO DE CHS E EXTRATOS DE PLANTAS MEDICINAIS.................................. 5 3 OBTENO DAS MATRIAS-PRIMAS VEGETAIS........................................................... 5 3.1 Plantas exticas............................................................................................................... 6 S .............................................................................................................................................. 6 3.2 Plantas nativas................................................................................................................. 6 3.3 Plantas ruderais............................................................................................................... 6 3.4 Plantas importadas.......................................................................................................... 6 4 PREPARAO E ARMAZENAMENTO DO MATERIAL BOTNICO ................................ 6 4.1 Desidratao do material botnico ................................................................................ 7 4.2 Armazenamento de plantas medicinais ........................................................................ 7 4.3 Pulverizao do material botnico................................................................................. 8 4.4 Determinao da granulometria..................................................................................... 8 5 EXTRAO DA DROGA VEGETAL ................................................................................... 9 5.1 Chs de plantas medicinais............................................................................................ 9 5.1.1 Infuso ............................................................................................................................ 9 5.1.2 Decoco...................................................................................................................... 10 5.2 Extratos hidroalcolicos............................................................................................... 10 5.3 Tinturas e extratos......................................................................................................... 10 5.3.1 Tinturas......................................................................................................................... 10 5.3.2 Extratos-fluidos ............................................................................................................. 10 5.3.3 Extratos secos .............................................................................................................. 11 5.3.4 Extratos gliclicos ......................................................................................................... 11 6 CONTROLE DE QUALIDADE DE DROGAS VEGETAIS ................................................. 11 6.1 Amostragem................................................................................................................... 14 6.2 Estudo da autenticidade ou identidade do material................................................... 15 6.2.1 Caracterizao organolptica ....................................................................................... 15 6.2.2 Caracterizao macroscpica e microscpica ............................................................. 16 6.3 Avaliao dos caracteres de pureza............................................................................ 17 6.3.1 Pesquisa de elementos estranhos................................................................................ 17 6.3.2 Teor de umidade (determinao de gua) ................................................................... 17 6.3.3 Teor de cinzas .............................................................................................................. 18 6.3.4 Pesquisa de contaminantes microbiolgicos................................................................ 18 6.3.5 Pesquisa de agrotxicos ou pesticidas ........................................................................ 19 6.4 Determinao qualitativa e quantitativa dos constituintes qumicos caractersticos das espcies vegetais ......................................................................................................... 19 6.4.1 Testes qumicos qualitativos (anlise fitoqumica) ....................................................... 20 6.4.2 Cromatografia em Camada Delgada (CCD)................................................................. 20 6.4.3 Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (CLAE)......................................................... 21 6.4.4 Cromatografia Gasosa (CG)......................................................................................... 21 6.4.5 Determinao quantitativa dos constituintes ativos ou de marcadores qumicos ........ 22 6.5 Laudos tcnicos de qualidade ..................................................................................... 22 CONCLUSES E RECOMENDAES ............................................................................... 23 REFERNCIAS ..................................................................................................................... 23
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DOSSI TCNICO
Ttulo Produo de chs e extratos de plantas medicinais Assunto Fabricao de medicamentos fitoterpicos para uso humano Resumo Neste dossi so descritos, de forma generalizada, alguns conceitos, procedimentos e tcnicas utilizadas para a obteno de chs e extratos de plantas medicinais dentro dos padres de qualidade exigidos pelos rgos oficiais, principalmente a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA). O objetivo esclarecer sobre os passos que devem ser seguidos para a obteno de matria-prima vegetal de qualidade e estimular a sua produo. Palavras chave Ch; extrato; extrato vegetal; flora medicinal; planta medicinal; produo; produto fitoterpico Contedo 1 INTRODUO A utilizao de plantas medicinais e a fitoterapia encontra-se em expanso em todo o mundo, consistindo em um mercado bastante promissor. Desde 1995, muitos esforos vm sendo empreendidos no pas visando o aprimoramento desse setor. Mais recentemente, uma resoluo instituiu e normalizou o registro de produtos fitoterpicos junto ao sistema de Vigilncia Sanitria e recomendou a preparao de medicamentos com diferentes espcies como, por exemplo, a alcachofra, alho, babosa, calndula e camomila. Produtos base de plantas medicinais tambm so comercializados no Brasil como alimentos e para esses produtos, no so exigidos teores mnimos de constituintes qumicos caractersticos da espcie vegetal, como so para a comercializao da planta como medicamento. Apesar do grande interesse e dos desenvolvimentos tecnolgicos na rea, a qualidade dos produtos comercializados no Brasil muito precria. importante, portanto, a divulgao das tcnicas disponveis para a preparao desses produtos, desde o cultivo das plantas at as formas de comercializao dos chs. O que so plantas medicinais, fitofrmacos e fitoterpicos Como medicinais so consideradas as plantas utilizadas na preparao de medicamentos. Dentro deste grupo de vegetais podem ser includos, desde as "folhas de ch", das quais se preparam os remdios caseiros, at outras plantas cultivadas por grandes empresas farmacuticas, para preparao dos medicamentos industrializados. Segundo a Organizao Mundial da Sade (OMS), devido pobreza do mundo e a falta de acesso aos medicamentos industrializados, entre 65 e 80% da populao dos pases em
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desenvolvimento depende das plantas medicinais para as suas necessidades bsicas de sade. O interesse pelos medicamentos derivados das plantas tambm cresceu nos pases industrializados na ltima dcada. Esse quadro incentivou a realizao de pesquisas para verificar a eficcia das plantas medicinais, inclusive pelas empresas farmacuticas de grande porte, que tambm passaram a se interessar neste setor. Os medicamentos preparados com plantas medicinais podem ser divididos em dois grupos: os fitofrmacos e os fitoterpicos. Ambos contm o prefixo latim comum fito, que significa planta. Fitofrmacos so as substncias qumicas que tem atividade farmacolgica isoladas das plantas, ou seja, seus princpios ativos. Alguns medicamentos so preparados a partir dos fitofrmacos e na maior parte das vezes, a composio desses produtos consiste da substncia ativa isolada planta associada adjuvantes. O custo para a preparao desses medicamentos alto, e demanda investimentos em tecnologia, especialmente para a purificao dos fitofrmacos. Exemplos de fitofrmacos utilizados na preparao dos medicamentos so: a) a pilocarpina, utilizada no tratamento do glaucoma e obtida das folhas de espcies de Pilocarpus (Rutaceae), nativas do Brasil; b) o hipnoanalgsico morfina, isolada do pio; c) os glicosdeos cardiocinticos obtidos das folhas da dedaleira (Digitalis lanata, Escrofulariaceae) e usados no tratamento de insuficincia cardaca; d) a cafena isolada da semente do guaran e e) o flavonide rutina, isolado dos frutos da fava danta (Dimorphandra sp., Fabaceae), planta nativa do cerrado brasileiro, e empregado no tratamento de insuficincia venosa (FIG. 1A e 1B). Por serem preparados com o princpio ativo isolado, esses medicamentos so considerados quimicamente definidos e a concentrao dos princpios ativos nas diferentes formulaes exatamente conhecida.

(a)

(b)

(c)

(a)

(b)

FIGURA 1A (a) Guaran em basto (b) Guaran em p (c) Cafena Fonte: BRANDO, 2007.

FIGURA 1B (a) Faveira (b) Rutina

J nos fitoterpicos o princpio-ativo no se encontra isolado. Os fitoterpicos so geralmente constitudos por extratos, no qual as substncias ativas encontram-se acompanhadas pelos outros constituintes qumicos das plantas. Os extratos podem se apresentar sob a forma lquida (tinturas, extratos-fluidos), slida (extratos secos) ou preparaes viscosas.

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Os fitoterpicos so preparados por macerao, percolao ou destilao (leos volteis), geralmente com solues hidroalcolicas. Os chs medicinais tambm so considerados fitoterpicos. Os custos para a preparao desses produtos so geralmente menores que os fitofrmacos, pois no h necessidade da purificao dos princpios ativos. Apesar de se tratar de uma mistura, os medicamentos fitoterpicos podem ser padronizados e apresentarem concentrao de princpios ativos definida. Desde 1995, o Ministrio da Sade vm instituindo uma srie de normas com o objetivo de organizar a produo dos medicamentos fitoterpicos comercializados no pas. Para se obter os registros de comercializao junto a ANVISA, as empresas produtoras precisam cumprir uma srie de procedimentos, indispensveis para a preparao dos produtos dentro de padres de qualidade. A legislao que rege o registro destes medicamentos a RDC 48/04, sendo complementada pelas RE 88, 89, 90 e 91/04; alm da RDC 333/03 (rotulagem); RDC 140/03 e Portaria 110/97 (bula); RE 01/05 (estabilidade) e RE 899/03 (validao de mtodo analtico), disponveis no site da ANVISA: <www.anvisa.gov.br/medicamentos/fitoterapicos/legis.htm>. Acesso em; 04 jul. 2007. Na RDC 48, os medicamentos fitoterpicos so definidos como: Medicamento fitoterpico: todo produto farmacutico obtido por processos tecnologicamente adequados, empregando-se exclusivamente matrias-primas vegetais, com finalidade profiltica, curativa, paliativa ou para fins de diagnstico. caracterizado pelo conhecimento da eficcia e dos riscos de seu uso, assim como pela reprodutibilidade e constncia de sua qualidade. No se considera medicamento fitoterpico aquele que, na sua composio, inclua substncias ativas isoladas, de qualquer origem, nem associaes destas com extratos vegetais. importante destacar o conceito de que medicamentos fitoterpicos so aqueles preparados sob condies tecnologicamente adequadas e que tenham sua eficcia e segurana devidamente estabelecidas. Preparaes com plantas medicinais que so usadas com base exclusiva na medicina tradicional no so consideradas medicamentos fitoterpicos. A existncia de matrias-primas constitudas de plantas que contam com resultados positivos em pesquisas farmacolgicas e toxicolgicas , portanto, um fator determinante para a preparao de medicamentos dentro dos padres exigidos pela ANVISA. Os estudos que buscam determinar a eficcia e segurana das plantas medicinais, possibilitando a sua utilizao em medicamentos, so chamados de estudos de validao. Estes estudos tiveram enormes avanos aps haver sido evidenciado que o uso interno de preparaes com o confrei (Symphytum officinale) (FIG. 2), uma espcie amplamente empregada na dcada de 70, pode levar ao desenvolvimento de carcinoma heptico. Esse efeito causado pela presena de alcalides pirrolizidnicos na planta. J o uso externo do confrei indicado como cicatrizante e antiinflamatrio.

FIGURA 2 - Confrei (Symphytum officinale L) Fonte: BRANDO, 2007.

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Dezenas de outras plantas medicinais j foram submetidas aos estudos de validao, estando os resultados das pesquisas descritas em vasta bibliografia, muitas disponveis em bases de dados da internet (www.pubmed.com; www.scirus.com; www.bireme.br). Alm do regulamento tcnico para a preparao de medicamentos fitoterpicos, a RE 89, complementao da RDC 48, lista uma srie de plantas medicinais que contam com resultados desses estudos, para as quais a obteno dos registros facilitada. Entre as plantas medicinais recomendadas esto a alcachofra (Cynara scolymus), alho (Allium sativum), babosa (Aloe vera), boldo-do-Chile (Peumus boldus), calndula (Calendula officinalis), camomila (Matricharia recutita), castanha-da-ndia (Aesculus hippocastanum), hortel-pimenta (Mentha piperita), gengibre (Zingiber officinale), melissa (Melissa oficinalis), sene (Senna alexandrina), maracuj (Passiflora incarnata), ginkgo (Ginkgo biloba), ginseng (Panax ginseng), espinheira-santa (Maytenus ilicifolia), hiperico (Hypericum perforatum), cscara-sagrada (Rhamnus purshiana), guaran (Paullinia cupana), cimicifuga (Cimicifuga racemosa), tanaceto (Tanacetum parthenium), saw palmeto (Serenoa repens), equincea (Echinacea purpurea), kava-kava (Piper methysticum), uva-ursina (Arctostaphyllus uva-ursi). Para cada uma dessas espcies, a RE 89 traz dados relativos s partes das plantas usadas, aos marcadores qumicos a serem empregadas para a padronizao dos produtos farmacuticos, as formas de uso, indicaes teraputicas, doses dirias e vias de administrao. Produzir matrias-primas de qualidade com essas espcies consideradas prioritrias para o Ministrio da Sade , portanto, interessante economicamente e importante para alavancar a produo de fitoterpicos no Brasil.

2 PRODUO DE CHS E EXTRATOS DE PLANTAS MEDICINAIS As plantas contm centenas de substncias qumicas em diferentes concentraes. Devido a isto, poucos so os extratos vegetais farmacologicamente ativos, que contam com sua composio qumica exatamente determinada. A preparao dos extratos padronizados para uso como medicamento um desafio constante, uma vez que vrios fatores interferem no teor dos constituintes qumicos. Fatores como temperatura, exposio luz, umidade, tempo e mtodo de coleta das plantas, mtodos de secagem, empacotamento, estocagem e transporte, por exemplo, podem afetar a matria-prima e conseqentemente, a qualidade e estabilidade dos extratos. Certos constituintes qumicos so sensveis ao calor, outros podem sofrer hidrlises enzimticas devido a armazenamentos em locais de elevada umidade. Algumas plantas necessitam ser desidratadas e armazenadas para que certos constituintes sejam convertidos (por exemplo, atravs de oxidao) nas substncias ativas. Alm desses fatores considerados intrnsicos, ou seja, provenientes do prprio vegetal, outros fatores externos como contaminaes com microorganismos e pesticidas podem tambm interferir na qualidade, segurana e eficcia dos fitoterpicos. A padronizao e o controle de qualidade so muito importantes para garantir uma constncia de atividade desses medicamentos. Aspectos tcnicos que vo desde a obteno da matria-prima vegetal at a preparao dos extratos devem ser, portanto, cuidadosamente observados.

3 OBTENO DAS MATRIAS-PRIMAS VEGETAIS Um extrato padronizado a partir dos seus constituintes ativos. Nos casos em que os princpios ativos so desconhecidos, devem ser estabelecidas outras substncias qumicas (marcadores qumicos), de forma a possibilitar as anlises. A padronizao de extratos provenientes de plantas coletadas por extrativismo muito difcil, uma vez que fatores interferentes tais como fatores genticos e ambientais so incontrolveis. Devido a isto, as grandes empresas preferem utilizar matria-prima vegetal proveniente de cultivo, por apresentar menor variedade na composio qumica.
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A ocorrncia das plantas, medicinais ou no, pode ser dividida em quatro tipos principais: 3.1 Plantas exticas So espcies nativas de outros continentes que foram introduzidas no pas desde o tempo da colonizao e muitas hoje ocorrem espontaneamente. Por serem, em grande parte, provenientes de pases com elevado grau de industrializao e desenvolvimento, onde so tambm muito utilizadas estas plantas j foram submetidas a testes de eficcia e toxicidade. Entre as plantas exticas recomendadas pela ANVISA para uso na produo de chs medicinais e fitoterpicos esto a alcachofra (Cynara scolymus), alho (Allium sativum), babosa (Aloe vera), calndula (Calendula officinalis), camomila (Matricharia recutita), hortel-pimenta (Mentha piperita), gengibre (Zingiber officinale), melissa (Melissa oficinalis) e o tanaceto (Tanacetum parthenium). 3.2 Plantas nativas So aquelas prprias do continente ou pas de origem. Normalmente so vegetais endmicos em determinada regio, ou seja, de ocorrncia restrita a uma rea. Entre as plantas recomendadas pela ANVISA so nativas do Brasil a espinheira-santa (Maytenus ilicifolia) e o guaran (Paullinia cupana). Exemplos de outras plantas nativas que contam com estudos farmacolgicos e toxicolgicos so a marcelinha (Achyrocline satureoides), carqueja (Baccharis trimera), guaco (Mikania glomerata), guaatonga (Casearia sylvestris), erva baleeira (Cordia verbenaceae) e a copaba (Copaifera sp.). A escassez de estudos de validao impede que as plantas possam ser utilizadas dentro dos padres de eficcia e segurana exigidos pelos rgos oficiais. A maior parte dessas ainda utilizada com base no uso tradicional. 3.3 Plantas ruderais So as plantas, exticas ou nativas, que crescem espontaneamente em reas urbanas. necessrio um cuidado especial no emprego dessas plantas na preparao de chs e extratos pois elas geralmente se desenvolvem em lotes vagos, beiras de estradas ou caladas, e podem ser contaminadas por metais pesados e outros rejeitos das indstrias e agrotxicos. Exemplos de plantas medicinais ruderais o pico (Bidens pilosa), melo de So Caetano (Momordica charanthia), quebra-pedra (Phyllanthus sp.), dente-de-leo (Taraxacum officinale) e a carqueja (Baccharis trimera). 3.4 Plantas importadas Trata-se de materiais que somente podem ser obtidos a partir de matrias-primas existentes em outros pases. Entre as plantas recomendadas pela ANVISA devem ser importadas o boldo-do-Chile (Peumus boldus), a castanha-da-ndia (Aesculus hippocastanum), o sene (Senna alexandrina), ginkgo (Ginkgo biloba), ginseng (Panax ginseng), hiperico (Hypericum perforatum), cscara-sagrada (Rhamnus purshiana), cimicifuga (Cimicifuga racemosa), saw palmeto (Serenoa repens), equincea (Echinacea purpurea), kava-kava (Piper methysticum) e uva-ursina (Arctostaphyllus uva-ursi). As plantas exticas e algumas nativas so passveis de cultivo, o que pode representar uma alternativa de renda dentro de projetos de agricultura familiar.

4 PREPARAO E ARMAZENAMENTO DO MATERIAL BOTNICO A matria-prima vegetal utilizada na preparao dos chs e extratos medicinais a droga vegetal. Segundo a RDC 48 (BRASIL, 2004): droga vegetal a planta medicinal ou suas partes, aps processo de coleta, estabilizao e secagem, podendo ser ntegra, rasurada, triturada ou pulverizada.
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Assim, aps sua obteno, a planta medicinal deve passar por processos que a transforme em uma droga vegetal, para emprego na preparao de produtos farmacuticos. 4.1 Desidratao do material botnico Logo aps a coleta, o material botnico deve ser submetido a processo de secagem ou desidratao. A desidratao visa promover: a) diminuio do volume e peso e, conseqentemente diminuio nos custos com transportes e armazenamentos; b) melhoria da estabilidade fsica, qumica (inativao de enzimas) e diminuio da incidncia de desenvolvimento de agentes microbiolgicos que comprometem a qualidade do material vegetal; O QUADRO 1 traz as faixas de teores de umidade em que possvel a atividade de enzimas e outros microorganismos capazes de deteriorar o material botnico. Um teor de umidade em torno de 15% j permite a proliferao de fungos. QUADRO 1 - Faixa de teor de umidade para a atividade de agentes biolgicos Agentes Teor % Bactrias 40-45 Enzimas 20-25 Fungos 15-20
Fonte: FARIAS, 2001.

As plantas devem ser secadas, separadamente, sombra, em ambientes arejados, por alguns dias, at que se tornem quebradias. O uso de estufas prprias para secagem (mximo 40C) e desumidificadores so recomendados, principalmente em pocas e locais no qual a umidade do ar impedem a secagem ao ar livre. Um fator importante no deixar este material exposto a luz solar direta ou locais com alta poluio do ar. A FIG. 3A e 3B ilustra a secagem de marcelinha ao ar livre e de capim-cidreira em estufa.

FIGURA 3A - Secagem de marcela ao ar livre Fonte: BRANDO, 2007.

FIGURA 3B - Secagem de capim cidreira em estufa

4.2 Armazenamento de plantas medicinais As drogas vegetais devem ser armazenadas em local apropriado at o momento de serem empregadas. A armazenagem deve ser feita ao abrigo da luz, umidade, insetos e roedores. O material deve ser acondicionado em frascos de vidro hermeticamente fechados ou em pacotes de papel. No aconselhvel o contato direto da planta com material plstico, j que este pode contaminar o material com produtos sintticos. Aps o acondicionamento, necessrio identificar o material atravs de seus nomes cientfico e popular e da data da
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coleta, que devem ser colocados em rtulos. Estes dados, alm de evitar confuses, impedem a utilizao de plantas vencidas, pois os materiais vegetais armazenados por longos perodos de tempo, perdem seus efeitos teraputicos. As drogas vegetais podem ser armazenadas sob a forma ntegra, fragmentada, rasurada ou em p. desaconselhado o armazenamento de drogas vegetais ricas em leos essenciais sob a forma de ps, uma vez que a exposio do tecido vegetal ao ar leva perda desses constituintes qumicos. 4.3 Pulverizao do material botnico De uma forma geral, as drogas vegetais a serem submetidas aos processos de extrao devem estar sob a forma de ps, pois assim h um aumento da superfcie de contato da droga vegetal com o solvente. necessrio muito cuidado na pulverizao de materiais ricos em constituintes volteis (leos essenciais) uma vez que esse processo promove o rompimento das glndulas produtoras dessas substncias, levando sua perda. Essas drogas devem ser armazenadas de forma ntegra ou rasurada, e submetida a processo de moagem no prazo mais prximo possvel do processo extrativo. O processo de pulverizao realizado por meio de moinhos. H alguns tipos de moinhos utilizados nesse processo, sendo os mais comuns os moinhos de facas (FIG. 4) e os de martelos. A eficincia do processo vai depender do tipo de moinho e de cada material a ser triturado. Algumas folhas so facilmente fraturveis, por exemplo, o capim cidreira e o confrei e podem ser pulverizadas em moinhos de facas. O mesmo pode ser aplicado a algumas folhas duras, mas fraturveis, como o abacate, o eucalipto e a espinheira santa. Dificuldades em fraturar o material em moinhos convencionais ocorrem quando o material consiste de folhas moles e fibrosas como a malva ou a slvia, por exemplo. Folhas com gorduras e resinas podem apresentar resistncia moagem, como por exemplos as do jaborandi e do boldo-do-Chile. Drogas vegetais constitudas por tecidos lignificados, como cascas de caule, o prprio caule e razes devem ser so submetidas moagem em moinhos de martelos.

FIGURA 4 - Moinho de facas Fonte: BRANDO, 2007.

4.4 Determinao da granulometria Aps a moagem e antes de se proceder extrao dos ps com os solventes, necessrio determinar a granulometria dos ps. A determinao da granulometria importante para homogeneizar as partculas, o que leva a um processo de extrao mais eficiente. Na determinao da granulometria dos ps, utiliza-se uma bateria de tamises (peneiras) com diferentes aberturas nominais de malha (m). Os tamizes mais utilizados so os de abertura 2000, 710, 500, 355, 250, 180, 125 e 90, que so organizados um sobre os outros como uma bateria.
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Uma quantidade determinada da droga vegetal em p ento colocada sobre o primeiro tamis da bateria. A bateria ento agitada (em aparelhos ou mesmo manualmente) com movimentos horizontais rotativos e movimentos verticais, por 20 minutos, no mnimo, de forma a promover a passagem do p nas diferentes malhas. O material remanescente em cada tamis pesado e a granulometria calculada como porcentagem da quantidade total. A granulometria do material a ser utilizado vai depender do tipo de extrao que ser empregado. Para chs medicinais, por exemplo, as partculas devem ter dimenses maiores, enquanto que para a extrao alcolica, o material deve ser constitudo, preferencialmente de p fino. O QUADRO 2 apresenta a granulometria recomendada para a obteno de medicamentos fitoterpicos (chs medicinais e ps para a preparao de extratos), a partir de cada parte das plantas medicinais. QUADRO 2 Granulometria recomendada para a obteno de medicamentos fitoterpicos a partir de cada droga vegetal Chs medicinais Flores, folhas e ervas Flores, folhas e ervas com vasos e nervuras menor que 300um Frutos sementes madeiras, cascas rizomas e razes Ps para obteno de extratos Folhas, flores e ervas Madeiras, cascas e razes Frutos e sementes Drogas contendo alcalides Granulometria m 500 3150 3150

4000 2800 2000 710

Fonte: BRANDO, 2007.

As aberturas bem definidas entre os furos de tamises e a granulometria do p so indicadas em mm ou m. Outra maneira comum de caracterizar um p atravs do mesh que designa o nmero de malhas por polegada do tamis.

5 EXTRAO DA DROGA VEGETAL Os medicamentos fitoterpicos consistem basicamente de produtos obtidos da extrao das drogas vegetais. Esses produtos podem ser preparados a partir de chs ou solues hidroalcolicas (tinturas, extratos-fluidos, extratos-secos ou extratos gliclicos). Os processos extrativos podem ser efetivados por meio da infuso e decoco no caso de chs medicinais, percolao e macerao para a obteno de solues hidroalcolicas, alm de esmagamento, destilao por arraste de vapor ou extrao usados para a obteno de leos essenciais. Todos os processos extrativos devem buscar a obteno de preparaes enriquecidas de princpios ativos das plantas, com economia de tempo e solvente. 5.1 Chs de plantas medicinais 5.1.1 Infuso usada na preparao de chs de plantas medicinais. A infuso consiste em se verter gua fervente sobre o material botnico, tampar o recipiente, esperar o resfriamento (10 a 15 minutos) e coar o lquido. A preparao denominada infuso. Se no houver especificao para a proporo planta e solvente, deve-se utilizar de 1:5 (ou 20%).
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A infuso a tcnica mais aconselhada para o preparo dos chs medicinais constitudos de plantas que contenham leos essenciais. Os leos essenciais volatilizam-se a temperaturas elevadas e se perdem facilmente com o calor. 5.1.2 Decoco Consiste em se adicionar gua ao material botnico e lev-lo junto fervura, em recipiente tampado. Depois de resfriado, o lquido coado. Se no houver especificao da proporo planta e solvente, deve-se utilizar de 1:5 (ou 20%). Este mtodo recomendado para os casos em que os princpios ativos no sejam facilmente perdidos pelo calor, ou se encontram em partes da planta com mais resistncia como razes ou cascas. Deve-se, no entanto, evitar um aquecimento prolongado pois este pode levar a degradao das substncias ativas. 5.2 Extratos hidroalcolicos Os extratos hidroalcolicos podem ser preparados por meio de macerao esttica da droga vegetal pulverizada, seguida de percolao, com mistura de lcool e gua. Antes de serem introduzidos nos percoladores (FIG. 5), os ps devem ser misturados a 10% de areia com o objetivo de se evitar a formao de canais preferenciais e permitir a passagem do solvente extrator atravs da droga, de forma homognea. A droga a ser extrada umedecida com q.s.p. de solvente extrator e deixada macerar em percolador por 48 horas. Aps este tempo, inicia-se o processo de percolao que consiste na passagem do solvente at uma concentrao determinada para a obteno de tinturas, extratos-fluidos e outras preparaes. 5.3 Tinturas e extratos 5.3.1 Tinturas So obtidas geralmente por percolao da droga vegetal com solues hidroalcolicas. As tinturas so preparadas a partir de uma relao droga vegetal/ solvente de 1:5 ou mesmo 1:10. Elas so consideradas medicamentos fitoterpicos e podem ser utilizadas diretamente, a partir da sua diluio em gua.

FIGURA 5 - Percolador industrial Fonte: BRANDO, 2007.

5.3.2 Extratos-fluidos So obtidos pela ao de soluo hidroalcolica sobre a droga vegetal e posterior concentrao (pela evaporao do lquido extrator). O processo de extrao efetuado quase sempre por percolao. A relao extrato: droga de 1:1, ou seja, so cinco vezes mais concentrados que as tinturas. Os extratos-fluidos so considerados como produtos intermedirios, ou seja, so utilizados na preparao de outras formas farmacuticas.
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5.3.3 Extratos secos Os extratos secos so obtidos a partir da extrao exaustiva do material vegetal, por macerao ou percolao, seguida de eliminao completa do solvente. Para a eliminao do solvente utiliza-se geralmente equipamentos como o spray-dryer, utilizado para eliminar solventes hidroalcolicos. A liofilizao um mtodo de secagem de extratos, principalmente os aquosos, que consiste no congelamento da gua e sua posterior sublimao. Aps a eliminao completa dos solventes extratores os extratos secos se transformam em ps. Ambos os equipamentos so de elevado custo, o que tem representado o impedido para que as indstrias de fitoterpicos nacionais desenvolvam maior nmero de produtos com os extratos-secos.

FIGURA 6 - Extrato seco Fonte: BRANDO, 2007.

5.3.4 Extratos gliclicos O propilenoglicol um lcool viscoso utilizado em formulaes de uso tpico, devido sua propriedade emoliente. Apesar da ampla utilizao e comercializao destes extratos, pouco se conhece sobre os melhores mtodos de obteno dos mesmos e sobre a adequada proporo de gua necessria para extrair os constituintes qumicos ativos das diferentes plantas. Os extratos gliclicos podem ser preparados por percolao esttica do material vegetal.

6 CONTROLE DE QUALIDADE DE DROGAS VEGETAIS Antes de se utilizar qualquer matria-prima vegetal no preparo de produtos farmacuticos ou cosmticos, elas devem ser submetidas a uma anlise rigorosa de qualidade. Isto muito importante, pois inmeros estudos j constataram o quanto a qualidade de da matria-prima vegetal no Brasil precria. Muitas pesquisas vem sendo desenvolvidas no Brasil buscando identificar os pontos mais problemticos na produo e preparao dos chs e extratos de plantas medicinais, estando vrias delas publicadas na Revista Brasileira de Farmacognosia, editada pela Sociedade Brasileira de Farmacognosia (www.sbfgnosia.org.br/revista) e Revista Brasileira de Plantas Medicinais (http://www.ibb.unesp.br/servicos/publicacoes/rbpm/html/index.htm). Em um estudo que buscou avaliar a qualidade dos chs de plantas medicinais comercializados em Belo Horizonte, por exemplo, foram analisadas amostras de boldo (19 amostras), erva doce e funcho (16), camomila (14), ervas-cidreiras (12), hortels (8), eucalipto (6), jaborandi (4), tanchagem (4) e carqueja (2) adquiridas em farmcias/ drogarias, ervanrias e mercados/ supermercados.

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Inmeros problemas foram detectados, entre eles: Cinqenta por cento das amostras provenientes de ervanarias foram reprovadas no estudo da autenticidade, por consistirem em falsificao; Um tero das amostras procedentes tanto de farmcias/drogarias quanto de ervanarias continham algum tipo de contaminante, especialmente outras partes das plantas que no contm as substncias ativas; o teor deste tipo de elemento estranho para o hortel e as ervas-cidreiras chegou a 80% em algumas amostras; a alta incidncia de insetos e pednculos de captulos nas amostras de camomila tambm foi observada; a verificao da presena de elementos estranhos nas amostras provenientes de supermercados foi prejudicada, pois nestes estabelecimentos as plantas so comercializadas sob a forma pulverizada Apesar de apresentarem teor de umidade dentro do limite mximo permitido, as amostras encontravam-se excessivamente dessecadas.O excesso de calor para secagem de materiais botnicos prejudicial, especialmente para espcies cujos componentes ativos so leos essenciais; Quase a totalidade das amostras apresentou os marcadores qumicos caractersticos das espcies mas os mesmos encontravam-se em concentrao abaixo do limite mnimo estabelecido em cerca de metade das amostras provenientes de farmcias/ drogarias (45%) e em quase todas as de supermercados (82,1%).

A comercializao de amostras com teor de princpios ativos abaixo do necessrio para a atividade farmacolgica pelas farmcias/ drogarias um fato preocupante e compromete a real eficcia das drogas vegetais como medicamentos. O baixo teor de princpios ativos observados nas amostras provenientes de supermercados pode ser explicado devido forma pulverizada com que so comercializadas. Muitos componentes ativos das drogas analisadas so leos essenciais e os processos de pulverizao contribuem para a sua volatilizao. Alm disto, sob a forma pulverizada, o tecido vegetal se encontra exposto ao ar o que tambm promove perda dos leos essenciais, com o tempo. As amostras comercializadas desta forma esto, portanto, inadequadas para uso como medicamento. Esses exemplos ilustram a situao precria do comrcio de chs de plantas medicinais e a necessidade de se proceder anlise de qualidade, antes da sua comercializao. As anlises de qualidade de drogas vegetais envolvem procedimentos botnicos, fsicoqumicos e qumicos. Os parmetros de qualidade das matrias-primas utilizadas na preparao dos produtos farmacuticos e cosmticos, bem como os mtodos analticos para verificar a qualidade desses produtos, so especificados em Monografias das Farmacopias ou publicaes de outros rgos oficiais como a Organizao Mundial da Sade (OMS). A Farmacopia Brasileira (F. Bras.) conta com quatro edies e desde a sua primeira edio, a F.Bras. vem sendo alterada, com o objetivo de atualiz-la s tcnicas analticas modernas e realidade farmacoteraputica nacional. No caso das drogas vegetais e seus produtos, a F. Bras. foi profundamente modificada ao longo dos anos, sendo que a maior parte das monografias para as drogas vegetais, especialmente de plantas nativas do Brasil, foi excluda das edies subseqentes. A ausncia de dados sobre as plantas medicinais nativas do Brasil na Farmacopia Brasileira dificulta o controle de qualidade de suas drogas vegetais e impede a preparao de medicamentos com as mesmas. O QUADRO 3 descreve o nmero de monografias para drogas vegetais de plantas nativas do Brasil nas 4 Edies da FBras (www.sbfgnosia.org.br/revista).

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QUADRO 3 Nmero de monografias para plantas nativas do Brasil Edio da Nmero (%) de of Monografias Farmacopia Nativas Outras Total 196 517 713 1a edio (27,5) (72,5) (1926) 32(15,6) 173 205 2a edio (84,4) (1959) 4 (17,4) 19 (82,6 ) 23 3a edio (1977) 11 (25) 33 (75) 44 4a edio (1996)
Fonte: BRANDO, 2007.

A existncia de monografias nas Farmacopias com especificaes para cada droga vegetal um fator decisivo para a realizao das anlises de qualidade. O QUADRO 4 descreve algumas das plantas medicinais que contam com monografia na 4 Edio da F.Bras. QUADRO 4 Algumas plantas medicinais que contam com monografia na 4a Ed. da FBras. Alcauz Funcho Alho Genciana Aniz-doce Goiabeira Badiana Guaco Barbatimo Guaran Beladona Hamamelis Boldo Hidraste Camomila Ipecacuanha Canela-do-Ceilo Jaborandi Capim limo Malva Carqueija Pitangueira Cscara Sagrada Poligala Castanha-da-ndia Quebra-pedra Centela Quina-vermelha Coentro Ruibarbo Cravo da ndia Sene Endro Uva-ursi Espinheira-santa Valeriana Estvia
Fonte: BRANDO, 2007.

Os mtodos utilizados para avaliar a qualidade de drogas vegetais so denominados Mtodos em Farmacognosia pela Farmacopia Brasileira 4a Edio. A aplicao desses mtodos permite verificar a presena de adulteraes, fraudes ou mesmo se a amostra se trata de uma falsificao. A adulterao ocorre quando outros tipos de materiais, que no a droga vegetal, integram a amostra. A fraude consiste em se adicionar componentes qumicos (sinttico ou no) ao produto fitoterpico, visando intensificar a atividade farmacolgica. J a falsificao ocorre quando o material botnico substitudo por outras plantas. As anlises devem ser iniciadas a partir da seleo do material a ser analisado por meio de amostragem. Trata-se de um procedimento de extrema relevncia especialmente nos casos em que a quantidade de amostras elevada.

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6.1 Amostragem A amostragem do material a ser analisado deve ser realizada com base no: a) nmero de embalagens contendo o material, b) grau de diviso da droga, c) quantidade de material disponvel a) Nmero de embalagens contendo o material O mtodo aplicado no caso de amostras acondicionadas em embalagens. O nmero de embalagens a serem amostradas vai depender do nmero de embalagens disponveis, conforme QUADRO 5. No caso de se ter de 1 a 10 embalagens da amostra, as anlises de qualidade devem ser realizadas em 1 a 3 amostras. No caso de se ter disponvel mais de 100 amostras, 5% do total devem ser submetidas s anlises.

QUADRO 5 Nmero de embalagens a serem amostradas Nmero de Embalagens 1 a 10 10 a 25 25 a 50 50 a 75 75 a 100 Mais de 100
Fonte: FARMACOPIA, 1988.

Nmero de Embalagens a serem amostradas 1a3 3a5 4a6 6a8 8 a 10 5% do total de embalagens (mnimo 10)

b) Grau de diviso e c) quantidade de material Esse tipo de amostragem efetuado no caso da amostra se encontrar rasurada, fragmentada ou pulverizada. Se os fragmentos so inferiores a 1cm, o procedimento o seguinte: (a) As amostras devem ser colhidas de cima para baixo, de baixo para cima e lateralmente; (b) at 100Kg: colher 250g de amostra para anlise (c) acima de 100kg: fazer o quarteamento at a obteno de 250 g de amostra para anlise. Se o material tem dimenses superiores a 1 cm, o procedimento : (a) at 100 kg: colher amostra de 500 g (b) acima de 100 kg: fazer o quarteamento at a obteno de 500g Em ambos os casos, para quantidades inferiores a 10 kg, a amostra para anlise poder ser menor, porm, no inferior a 125g. O quarteamento um procedimento utilizado para a seleo de material para anlise, por amostragem. utilizado no caso de grande quantidade de material para a anlise. O mtodo consiste em: a) espalhar quantidade determinada de amostra sobre uma superfcie plana, sendo a mesma dividida em quatro partes iguais, conforme demonstrado abaixo:

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b) aps a diviso, selecionam-se duas partes perpendiculares, enquanto as outras duas partes so descartadas da anlise. A FIGURA abaixo ilustra a seleo de duas partes perpendiculares.

c) as partes selecionadas so novamente distribudas sobre a superfcie plana e dividida novamente em quatro partes, conforme abaixo:

d) seleciona-se novamente duas partes perpendiculares, dessa vez em outra direo:

Esse procedimento repetido at que se obtenha quantidade necessria para efetuar as anlises de qualidade. Em linhas gerais, os trabalhos de anlises de qualidade das drogas vegetais podem ser divididos em trs etapas: Estudo da autenticidade ou identidade do material: feito pela observao se a droga em anlise trata-se realmente da espcie descrita ou se trata de alguma falsificao; Avaliao dos caracteres de pureza: procura-se verificar a presena de elementos no prprios da amostra e se existem adulteraes; e Verificao da presena e teor dos princpios ativos, necessrios para as atividades farmacolgicas.

As execues dessas anlises uma exigncia da ANVISA para a obteno do registro dos fitoterpicos por aquele rgo. As tcnicas a serem empregadas em cada anlise e as faixas aceitveis para os resultados encontram-se descritas nas respectivas monografias para as drogas nas Farmacopias e bibliografia especializada. Os resultados das anlises podem ser tambm comparados com outros obtidos com amostras referncias. 6.2 Estudo da autenticidade ou identidade do material A identidade de uma droga vegetal pode ser verificada a partir da anlise de suas caractersticas organolpticas, macroscpicas e microscpicas. No estudo da identidade possvel verificar, portanto, se a amostra se trata de uma falsificao. 6.2.1 Caracterizao organolptica Consiste na observao dos caracteres perceptveis pelos rgos do sentido. A alterao das caractersticas organolpticas pode indicar a ocorrncia de degradao enzimtica ou oxidao do material, entre outros processos. As caractersticas organolpticas a serem observadas podem ser divididas em: a) Cor: a anlise de cor importante para verificar se a amostra constitui-se do farmacgeno (= parte da planta que contm o princpio ativo) descrito. necessrio observar, por exemplo, que ps brancos correspondem amido; ps verdes correspondem a folhas; ps coloridos so, provavelmente, provenientes de flores e ps marrons, de cascas e razes.
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b) Odor: muitas plantas, especialmente as produtoras de leos volteis, apresentam odores caractersticos que podem servir como indicativos de sua identidade. Em algumas drogas os odores podem ser difceis de descrever e as anlises devem ser realizadas em paralelo a uma amostra autntica. A fraca intensidade de um aroma em comparao com o da amostra padro indicativo da qualidade inferior do material analisado. c) Sabor: A identidade de um material vegetal pode ser verificada tambm a partir do seu sabor, muitas vezes caracterstico de uma espcie. As anlises devem ser realizadas preferencialmente em amostras fragmentadas ou pulverizadas e os resultados comparados com uma amostra autntica. Os sabores podem ser classificados em amargo, doce, cido, salgado, apimentado, adstringente, irritante, oleoso, refrescante e condimentado. d) Textura: a textura do material vegetal pode ser observada a partir da percepo ao tato. Essa anlise deve ser efetuada em comparao com uma amostra autntica. Alm de permitir a identificao do material, a partir dessa anlise possvel verificar possvel deteriorao devido ao ataque de microorganismos, roedores e insetos. 6.2.2 Caracterizao macroscpica e microscpica So realizadas anlises das caractersticas morfolgicas do material vegetal, sendo essas comparadas com aquelas apresentadas por amostras referncias ou descries das monografias Farmacopicas e bibliografia especializada. a) Macroscopia: A anlise macroscpica consiste num estudo visual do material, com ou sem o auxlio de lupa. Na anlise busca-se a identificao de formas e elementos caractersticos da droga vegetal, como tamanho, tipo de nervura das folhas, caractersticas das flores, entre outros aspectos. A anlise macroscpica somente possvel de ser efetuada em material ntegro ou fragmentado. b) Microscopia: visa a identificao de elementos microscpicos caractersticos das drogas vegetais. A anlise pode ser efetuada a partir do estudo da anatomia vegetal, por meio de cortes histolgicos, ou da anlise de drogas pulverizadas. No estudo microscpico, a partir de cortes histolgicos, possvel observar a organizao dos tecidos. Este estudo pode ser efetuado sobre amostras ntegras e fragmentadas. As drogas vegetais secas so reidratadas com gua em ebulio, efetua-se os cortes e as preparaes so fixadas em etanol ou com mistura de etanol- glicerina. As lminas so ento montadas e coradas com reagentes especficos. A anlise efetuada a partir da observao da organizao dos tecidos e da pesquisa de elementos caractersticos da droga vegetal. No estudo dos ps, as amostras so levadas at p fino e ento tamizados para a obteno de p homogneo. O p ento transferido para lmina de microscopia com o auxlio de gua destilada ou outro solvente. Essa anlise no permite o estudo da organizao dos tecidos vegetais da amostra, mas por meio dela possvel identificar elementos caractersticos das mesmas. No QUADRO 6 so descritos os elementos vegetais caractersticos de cada parte da planta e que podem ser identificados no exame microscpico dos ps. QUADRO 6 Exemplos de elementos morfolgicos caractersticos de cada farmacgeno Farmacgeno Elementos a serem pesquisados Folhas estmatos, cristais, traquedeos, tricomas tectores ou glandulares Cascas clulas ptreas, fibras, cristais, drusas Razes amido, clulas ptreas, Flores gros de plen, clulas secretoras Frutos Clulas caractersticas, amido, glndulas
Fonte: BRANDO, 2007.
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6.3 Avaliao dos caracteres de pureza Uma vez confirmada a identidade do material vegetal analisado, deve-se partir para a verificao do seu estado de pureza. As caractersticas de pureza podem ser avaliadas por meio da pesquisa de elementos estranhos, verificao do teor de umidade, cinzas (totais e insolveis em cido), pesquisa de contaminantes microbiolgicos, agrotxicos e pesticidas. 6.3.1 Pesquisa de elementos estranhos Segundo a Farmacopia Brasileira 4a Edio, as drogas devem estar, o quanto possvel, isentas de fungos, insetos e outros materiais contaminantes. A OMS recomenda que as amostras devem estar livres tambm de organismos patognicos, pesticidas e metais pesados. A Classificao de elementos estranhos, segundo a F.Bras. 4a Edio e a OMS a seguinte: partes da planta, mas que no constituem a droga vegetal, partes de outras plantas, impurezas de natureza mineral ou orgnica, no inerentes droga.

A amostra da droga vegetal deve ser espalhada em camada fina sobre uma superfcie plana. Com o auxlio de uma pina, o material estranho droga separado inicialmente a olho nu e, em seguida, com o auxlio de lente de aumento (5 a 10 vezes). O material separado ento pesado e determina-se sua porcentagem com base no peso de tomada de ensaio. A Farmacopia traz o limite mximo de elementos estranhos permitidos para cada droga vegetal. Na ausncia desta informao, considera-se que os mesmos devem estar ausentes. 6.3.2 Teor de umidade (determinao de gua) O excesso de umidade leva ao crescimento de microorganismos e deteriorao dos materiais botnicos. Por isto, o teor de gua nas drogas vegetais no deve ultrapassar os limites determinados e que induzem a algum tipo de deteriorao. O QUADRO 7 exemplifica as faixas de teores de umidade permitidos para cada farmacgeno. QUADRO 7 Teor de umidade permitidos para cada farmacgeno rgo vegetal Planta fresca (in natura) (%) Teor permitido (%) Casca 50-55 8-14 Erva 50-90 12-15 Folha 60-98 8-14 Flor 60-95 8-15 Fruto 15-95 8-15 Raiz 50-85 8-14 Rizoma 50-85 12-16 Semente 10-15 12-13
Fonte: BRANDO, 2007.

A Farmacopia Brasileira 4a Edio preconiza a determinao do teor de umidade por meio de trs mtodos: a) mtodo gravimtrico: consiste em deixar a amostra em cpsula tarada, no interior de estufa, por tempo determinado e depois at peso constante. O mtodo no adequado
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para a anlise de umidade de drogas vegetais que contenham leos volteis, uma vez que esses podem ser perdidos no processo; b) mtodo azeotrpico (destilao com tolueno): utiliza-se equipamento prprio. A amostra aquecida e a gua eliminada por evaporao forma uma azeotropo com o tolueno. O acrscimo do volume final desse solvente corresponde ao volume de gua liberada pelo material; c) o mtodo de Karl Fischer um mtodo volumtrico determinao de gua na amostra. Uma soluo de dixido de enxofre e de iodo em piridina e metanol (reagente de Karl Fischer) reage com o mesmo peso que a gua. 6.3.3 Teor de cinzas Visa determinar a porcentagem de materiais inorgnicos adulterantes presentes na amostra, como areia, terra ou pedras. A amostra pulverizada pesada diretamente em cadinhos previamente calcinados, resfriados e pesados. As amostras so distribudas uniformemente nos cadinhos e incineradas at eliminao total do carvo, inicialmente na chama e depois em mufla a 450C. Resfria-se em dessecador e pesa-se o resduo inorgnico. Esta anlise deve ser realizada em triplicata. A porcentagem de cinzas totais calculada em relao droga seca ao ar e o mximo permitido para cada droga vegetal [e descrito em suas respectivas monografias.

Os teores de cinzas podem ser expressos como: a) Cinzas totais: resduo no voltil, obtido aps incinerao completa de uma amostra. Indica a presena de carbonatos, fosfatos, sulfatos e cloretos. b) Cinzas sulfatadas: resduo no voltil, obtido aps incinerao completa de uma amostra tratada com cido sulfrico. c) Cinzas insolveis em HCl: resduo no voltil, obtido da solubilizao das cinzas ou cinzas sulfatadas com cido clordrico. As cinzas insolveis em cido clordrico indicativo da presena de terra, pois representa a porcentagem de silicatos. 6.3.4 Pesquisa de contaminantes microbiolgicos A Farmacopia Brasileira 4a Edio estabelece limites especficos para contaminantes microbiolgicos em drogas vegetais, sendo detalhadamente descritos os mtodos de filtrao por membrana, contagem em placa ou em tubos mltiplos. Esses mtodos so aplicveis contagem de microorganismos viveis, especialmente em produtos que no necessitam cumprir com o teste de esterilidade. Na pesquisa de contaminantes microbiolgicos em drogas vegetais importante conhecer a sua microflora caracterstica. As amostras no devem conter fungos (aflatoxinas), Salmonella, Escherichia coli, Staphylococcus aureus ou quaisquer outros microorganismos patognicos. A contagem de bactrias no patognicas realizada por meio da contagem de organismos viveis, por exemplo em: 4 dias em agar casena de soja a 30-35C 7 dias em agar Sabouraud-dextrose a 20-25C Os limites estabelecidos atualmente para a contagem de microorganismos so: drogas para chs ou para uso externo bactrias aerbicas ...............107 ufc/g fungos e leveduras ............... 104 ufc/g
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outros produtos bactrias aerbicas ...............105 ufc/g fungos e leveduras ............... 103 ufc/g Os limites de tolerabilidade de contaminao microbiana para drogas vegetais so freqentemente os aceitos para os alimentos. A Farmacopia Europia estabelece para as drogas vegetais os seguintes critrios: a) Drogas que sero adicionadas de gua fervente antes do uso: microorganismos aerbicos viveis (totais): < ou igual a 107 bactrias aerbicas e 105 fungos/g ou ml. Escherichia coli: < ou igual 102/g ou ml b) Outras preparaes vegetais microorganismos aerbicos viveis (totais): < ou igual a 105 bactrias aerbicas e 104 fungos/g ou ml. enterobactrias e outras bactrias gram-negativas: 103 /g ou ml ausncia de E. coli (1,0g ou 1,0ml) ausncia de Salmonella (10,0g ou 10,0ml). 6.3.5 Pesquisa de agrotxicos ou pesticidas Os agrotxicos ou pesticidas so produtos empregados no combate a organismos danosos s plantas. Eles podem ser classificados em: a) raticidas, utilizados contra ratos, camundongos e outros roedores, b) inseticidas, utilizados contra vrios insetos e alguns artrpodes, c) herbicidas, utilizados para impedir o crescimento de ervas indesejveis nos cultivos, d) fungicidas, utilizados para impedir o crescimento de diferentes tipos de fungos. Existem limites mximos aceitveis para essas substncias no material vegetal. As tcnicas de anlise para verificar os teores dos mesmos dependem do tipo de substncia qumica a ser detectada, que pode ser: a) Hidrocarbonetos clorados e agrotxicos correlatos; b) Derivados clorados do cido fenolactico; c) Organofosforados; d) Carbamatos; e) Ditiocarbamatos; f) Outros materiais inorgnicos; g) Materiais de origem vegetal como folhas de tabaco e nicotina, flores e extratos de crisntemo e piretrides. 6.4 Determinao qualitativa e quantitativa dos constituintes qumicos caractersticos das espcies vegetais Aps a verificao da autenticidade do material e as suas condies de pureza, deve-se ento verificar a presena e o teor dos princpios ativos, uma vez que deles dependem a atividade farmacolgica. No caso dos princpios ativos serem desconhecidos, as anlises devem procurar detectar outros marcadores qumicos caractersticos das espcies. A deteco da presena das substncias qumicas no material vegetal pode ser efetuada por meio de testes qumicos qualitativos e da anlise do perfil cromatogrfico.

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6.4.1 Testes qumicos qualitativos (anlise fitoqumica) So realizados por meio de reaes de precipitao ou colorao. As drogas vegetais so extradas com solventes especficos, os extratos so purificados e submetidos reaes qumicas para verificar a presena das substncias caractersticas de cada planta. O QUADRO 8 traz a relao de algumas reaes qumicas utilizadas para a deteco das diferentes substncias das plantas: QUADRO 8 Exemplos de reaes qumicas para caracterizao dos constituintes qumicos ativos Classe de produto natural Reaes especficas Alcalides Extrao em meio cido e deteco por reagentes de precipitao Flavonides Extrao em soluo alcolica e complexao com agentes que induzem fluorescncia (sob luz UV) Taninos Extrao aquosa e precipitao com soluo de gelatina Fenlicos Extrao alcolica e reao com cloreto frrico Saponinas Extrao aquosa e agitao para a formao de espuma
Fonte: BRANDO, 2007.

6.4.2 Cromatografia em Camada Delgada (CCD) Trata-se de um mtodo no qual possvel detectar a presena de vrias substncias qumicas que estejam em mistura na droga vegetal (no extrato bruto, por exemplo). Extratos obtidos das amostras de droga vegetal so aplicados em placas de vidro recobertas de material inerte, por exemplo, a slica gel, e eludos com sistemas de solventes definidos para cada tipo de substncia. Durante o processo de eluio, os constituintes qumicos do extrato so separados por diferena de polaridade (cromatografia de adsoro). Aps a eluio, as placas so reveladas com agentes qumicos que produzem reaes qumicas especficas. Os resultados obtidos nas placas devem ser ento comparados com: a) Padres de referncia qumicos isolados de outras fontes ou adquiridos no comrcio. O custo para obteno desses padres elevado e torna-se um fator limitante para as anlises; b) Comparao com os perfis cromatogrficos apresentados por extratos preparados com amostras referncias das plantas coletadas e devidamente identificadas; c) Comparao com os perfis cromatogrficos descritos na bibliografia, como monografias das Farmacopias e outras referncias. Na FIG. 7 encontra-se o resultado de uma anlise em cromatografia em camada delgada para extratos de nim (Azadirachta indica), uma planta amplamente utilizada na preparao de produtos para uso veterinrio. No foi detectada a presena de azadiractina (mancha esverdeada na coluna do meio), princpio ativo responsvel pela atividade, nos extratos analisados.

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FIGURA 7 - CCD para o nim Fonte: BRANDO, 2007.

6.4.3 Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (CLAE) A cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE) o mais novo e mais importante mtodo de separao. A CLAE utiliza instrumentos que podem ser totalmente automatizados. um tipo de cromatografia lquida que emprega pequenas colunas, recheadas de materiais especialmente preparados e uma fase mvel que eluda a altas presses. Ela tem a capacidade de realizar separaes e purificaes (CLAE preparativa) e anlises quantitativas ou qualitativas (CLAE analtica) de uma grande quantidade de compostos presentes em vrios tipos de amostras, em escala de tempo de poucos minutos, com alta resoluo, eficincia e sensibilidade. Na FIG. 8 demonstrado o cromatograma obtido para a anlise de extrato hidroalcolico das razes de Bidens pilosa (pico preto), planta utilizada no tratamento de vrios problemas hepticos. Dois picos principais indicam a presena de elevada concentrao de acetilenos e flavonides, caractersticos da planta.

FIGURA 8 - CLAE para extrato das razes de Bidens pilosa (pico preto) Fonte: BRANDO, 2007.

6.4.4 Cromatografia Gasosa (CG) A CG uma tcnica amplamente difundida e mais utilizada que a CLAE. Na CG necessrio que a amostra seja suficientemente voltil, a fim de que possa passar atravs da coluna na forma de vapor e seja estvel termicamente para no se decompor nas condies de separao. o mtodo ideal para a anlise de drogas que contm leos volteis.
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Tanto na CG como na CLAE, as anlises quantitativas se baseiam na comparao entre a rea sob o pico registrado para um composto de referncia com concentrao conhecida (padro interno) e a rea sob o pico registrado de cada um dos componentes da amostra (extrato, por exemplo). O cromatgrafo gasoso tambm pode estar conectado com um espectrmetro de massas, sendo assim, pode-se realizar uma anlise qualitativa do material de origem vegetal mais sofisticada, resultando na identificao da estrutura qumica dos seus componentes. 6.4.5 Determinao quantitativa dos constituintes ativos ou de marcadores qumicos As anlises so realizadas segundo mtodos gravimtricos, volumtricos, espectromtricos e cromatogrficos. As tcnicas especficas para cada droga vegetal encontram-se descritas nas respectivas monografias das Farmacopias e bibliografia especializada. Todos os mtodos de determinao quantitativa iniciam-se com a extrao cuidadosa do material vegetal, seguida da purificao dos extratos e da aplicao dos processos especficos para cada droga. No caso de quantificar os leos essncias de uma droga vegetal aromtica, utiliza-se, por exemplo, a hidrodestilao por meio de aparelho ilustrados na FIG. 9. A determinao quantitativa tambm pode ser efetivada por meio de CLAE ou CG.

FIGURA 9 Destilao de leos essenciais para determinao quantitativa Fonte: BRANDO, 2007.

6.5 Laudos tcnicos de qualidade Todo o processo de produo do fitoterpico (processo de transformao da matria-prima vegetal) deve ser acompanhado de laudos tcnicos de controle de qualidade que contenham informaes, por exemplo, sobre a concentrao do princpio ativo (houve ou no perda do princpio ativo), sobre a formao de artefatos qumicos durante o processo de produo, sobre a contaminao microbiolgica devido manipulao do material, sobre a temperatura utilizada num determinado procedimento. No laudo sobre a produo (cultivo) ou obteno (coleta de material silvestre) do vegetal devem conter os seguintes dados ou informaes agronmicas (Farias, 2001): Nome da empresa produtora e fornecedora, endereo completo, telefone, fax, CGC, CNPJ, inscrio no IBAMA;
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Nome cientfico da planta, nome popular, nome do botnico que identificou o material, origem do material (silvestre ou cultivado), no da exsicata, local de depsito da exsicata; Nome do coletor, data e local da coleta; Parte da planta colhida, fase de desenvolvimento da planta, tipo de solo, tratamento especial, condies do tempo durante a coleta, horrio da coleta, mtodo de secagem, temperatura de secagem e tempo de secagem; Observaes e informaes complementares; Data do laudo, nome e assinatura do responsvel tcnico pelas informaes.

No laudo tcnico sobre o controle de qualidade da matria-prima vegetal deve constar (Farias, 2001): Nome da empresa produtora e da empresa responsvel pelo controle de qualidade (quando terceirizado), bem como seus respectivos endereos completo, telefone, fax, CGC, CNPJ; Especificao do material a ser analisado (p, extrato, etc.); Identificao botnica do vegetal que constitui a matria-prima (nome cientfico, identificador, nome popular, no da exsicata e local de seu depsito, especificaes sobre o fornecedor da matria-prima, no do lote da matria-prima, data de validade da matriaprima); Anlises organolpticas (odor, sabor, cor, observaes e informaes complementares); Autenticidade da amostra (caracteres botnicos macro e microscpicos, reaes qumicas de caracterizao, cromatogramas); Verificao da pureza (pesquisa de elementos estranhos e de constituintes indesejveis, teor de cinzas, perda por dessecao, pesquisa de contaminantes microbiolgicos, pesquisa de agrotxicos ou pesticida, pesquisa de metais pesados); Ensaio quantitativo (teor mnimo do princpio ativo ou do marcador qumico encontrado); Nome e assinatura do responsvel tcnico pelo laudo e data. Concluses e recomendaes

CONCLUSES E RECOMENDAES
Recomenda-se que os interessados em produzir chs e extratos de plantas medicinais busquem trabalhar com poucas espcies vegetais e somente com aquelas plantas que contam com aprovao da ANVISA. importante que o cultivo dessas espcies se inicie com mudas certificadas e todo o processo tenha acompanhamento de tcnicos da rea agronmica www.esalq.usp.br; www.fca.unesp.br; www.ufv.br; www.ufla.br; www.ufmg.br/nca. A preparao dos chs e extratos deve ter o acompanhamento de uma profissional da rea de farmcia. As anlises de qualidade, tanto da matria-prima vegetal quanto dos produtos podem ser terceirizadas (www.puc-campinas.edu.br; www.tecpar.br; www.ufmg.br/farmacia). Referncias

REFERNCIAS
BRASIL. AGNCIA NACIONAL DE VIGILNCIA SANITRIA. Resoluo-RDC n. 48 de 16 de maro de 2004. Dispe sobre o registro de medicamentos fitoterpicos. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, seo , 25. 2004. FARMACOPIA brasileira. 4.ed. So Paulo: Atheneu, 1988.1213p. FARIAS, M. R. Avaliao da qualidade de matrias-primas vegetais. In: SIMES, C.M.O.; et al. Farmacognosia: da planta ao medicamento. Ed. da UFSC, 3. ed. 2001. OLIVEIRA, F.; AKISUE, G. & AKISUE, M.K. Farmacognosia. So Paulo: Atheneu, Rio de Janeiro, 1991.
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ORGANIZAO MUNDIAL DA SADE-OMS. Quality control methods for medicinal plant materials. 1992. 125pp. Nome do tcnico responsvel Maria das Graas Lins Brando Doutora em Qumica de Produtos Naturais Nome da Instituio do SBRT responsvel Fundao Centro Tecnolgico de Minas Gerais - CETEC Data de finalizao 27 ago. 2007

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