C

Ceruloplasmin
Mtodo inmunoturbidimtrico para la determinacin de ceruloplasmina en suero MUESTRA Suero a) Recoleccin: obtener la muestra de la manera usual. b) Aditivos: no se requieren. c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear muestras hemolizadas, lipmicas o contaminadas. Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifugadas previo a su ensayo. No se observan interferencias por hemoglobina hasta 1000 mg/dl, triglicridos hasta 2500 mg/dl, bilirrubina hasta 20 mg/dl, heparina hasta 50 mg/dl ni citrato de sodio hasta 1000 mg/dl. Referirse a la bibliografa de Young para los efectos de las drogas en el presente mtodo. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no es realizado en el da, la muestra puede ser conservada 48 horas a 2-10oC o por perodos ms prolongados de tiempo a -20oC. MATERIAL REQUERIDO (no provisto) - Espectrofotmetro - Cubetas espectrofotomtricas de caras paralelas - Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados - Tubos de Kahn o hemlisis - Cronmetro CONDICIONES DE REACCION - Longitud de onda: 340 nm - Temperatura de reaccin: temperatura ambiente (25oC). El control de la temperatura no es crtico, pudiendo oscilar entre 22 y 30oC. - Tiempo de reaccin: 15 minutos - Volumen de muestra: 10 ul - Volumen final de reaccin: 1810 ul Los volmenes de muestra y reactivos pueden variarse proporcionalmente, sin que se alteren los factores de clculo. PROCEDIMIENTO CURVA DE CALIBRACION Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en solucin fisiolgica de Ceruloplasmin Calibrator Turbitest AA: 1:1, 1:2, 1:4, 1:8 y 1:16, empleando solucin fisiolgica como punto cero. Calibrador diluido 10 ul

LINEA TURBITEST AA

SIGNIFICACION CLINICA La ceruloplasmina es una 2-glicoprotena sintetizada en el hgado cuya principal funcin es transportar el cobre plasmtico hacia las enzimas que lo requieren. Participa adems, en la regulacin del potencial redox, transporte y utilizacin del hierro. Niveles disminuidos de ceruloplasmina se encuentran en la enfermedad de Wilson y en enfermedades del tejido conectivo. Las causas ms importantes de insuficiencia adquirida de ceruloplasmina son insuficiencia heptica y los sndromes de prdida de protenas tales como enteropatas, sndrome nefrtico y sndrome de malabsorcin. Los niveles sricos aumentan durante procesos inflamatorios crnicos y agudos, colestasis, leucemia, lupus eritematoso sistmico (LES) y artritis reumatoidea. FUNDAMENTOS DEL METODO La ceruloplasmina reacciona con el anticuerpo especfico formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por estos inmunocomplejos es proporcional a la concentracin de ceruloplasmina en la muestra y puede ser medida espectrofotomtricamente. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: buffer fosfato, pH 7,4. B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-ceruloplasmina humana (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. REACTIVOS NO PROVISTOS - Solucin fisiolgica. - Ceruloplasmin Calibrator Turbitest AA de Wiener lab. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: listos para usar. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico in vitro. Todas las muestras de pacientes deben manipularse como si fueran capaces de transmitir infeccin. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.

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Reactivo A

1500 ul

Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilucin a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. Luego agregar: Reactivo B 300 ul

PERFORMANCE a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras con distintos niveles de ceruloplasmina, se calcul la precisin intraensayo: Nivel 11,2 mg/dl 35,6 mg/dl 75,8 mg/dl D.S. 0,4 mg/dl 0,6 mg/dl 2,3 mg/dl C.V. 3,9% 1,6% 3,0%

Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con agua destilada. Calcular la diferencia de absorbancia (A = DO2 - DO1) para cada dilucin de Ceruloplasmin Calibrator Turbitest AA, incluyendo el punto cero. Representar en papel milimetrado las diferencias de absorbancia (A) en funcin de la concentracin en mg/dl de Ceruloplasmin Calibrator Turbitest AA. PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS Muestra Reactivo A 10 ul 1500 ul

b) Lmite de deteccin: 5 mg/dl. c) Rango de medicin: 5 - 110 mg/dl. d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta 150 mg/dl de ceruloplasmina. PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS Referirse a las adaptaciones especficas de cada analizador. PRESENTACION 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A - 1 x 10 ml Reactivo B (Cd. 1009357) BIBLIOGRAFIA - Dati, F et al. - Proteins-Laboratory testing and clinical use, 2005. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", AACC Press, 5th ed., 2000. - Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood, E. (5 Edition) WB Saunders, 2001.

Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilucin a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. Luego agregar: Reactivo B 300 ul

Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con agua destilada. CALCULO DE LOS RESULTADOS Calcular la diferencia de absorbancia (A = DO2 - DO1) correspondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta A en la curva de calibracin para determinar la concentracin en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra estudiada. Las muestras con absorbancias superiores a la de Ceruloplasmin Calibrator Turbitest AA deben ser diluidas con solucin fisiolgica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado obtenido por el factor de dilucin. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Se recomienda el uso del Control Inmunolgico nivel 1 o Control Inmunolgico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. El control deber procesarse de la misma manera que las muestras. VALORES DE REFERENCIA 20 - 60 mg/dl (0,20 - 0,60 g/l) Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA. Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse todo tipo de contaminaciones, empleando para la medicin nicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.

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Smbolos
Los siguientes smbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnstico de Wiener lab.

C
P V X H l

Este producto cumple con los requerimientos previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios para el diagnstico "in vitro" Representante autorizado en la Comunidad Europea Uso diagnstico "in vitro"

M
Xn

Elaborado por:

Nocivo

Corrosivo / Castico

Contenido suficiente para <n> ensayos

Xi

Irritante Fecha de caducidad

Lmite de temperatura (conservar a)

i
Calibr.

Consultar instrucciones de uso

F
Cont.

No congelar

Calibrador

Riesgo biolgico

Volumen despus de la reconstitucin

Contenido

Nmero de lote

b b c h

Control

Control Positivo

Control Negativo

Nmero de catlogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944 2000 - Rosario - Argentina http://www.wiener-lab.com.ar Dir. Tc.: Viviana E. Ctola Bioqumica Producto Autorizado A.N.M.A.T. PM-1102-63

Wiener lab.

2000 Rosario - Argentina

UR120507

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