[ ] 1

Columnas de HPLC XBridge

Versatilidad y rendimiento inigualables
La familia de columnas de HPLC XBridge est diseada para obtener la mxima flexibilidad en
el desarrollo de mtodos de HPLC. Se pueden desarrollar separaciones robustas en menos tiempo
y con mayor confianza, permitiendo que los usuarios de sistemas cromatogrficos aprovechen
plenamente la potencia del pH. Combinando vanguardistas procesos de enlazado, endcapping
y sntesis de partculas con una fabricacin y calidad que lideran el sector, las columnas XBridge
constituyen la solucin de confianza para las separaciones cromatogrficas ms exigentes.

Flexibilidad para funcionar a lo largo de un rango de pH y temperaturas de fase

mvil sin precedentes

Transferencia perfecta de mtodos a la tecnologa UltraPerformance LC

Incomparable vida til de la columna.

Tecnologa BeH
[ ] 4
Introducida por primera vez en 1999 a travs de la familia XTerra

de columnas de HPLC, la tecnologa de partculas hbridas (HPT, siglas inglesas)* orgnicas/inorgnicas, patentada por Waters,
super significativas limitaciones de los materiales de relleno de fase reversa con base de slice: en especial la inestabilidad hidroltica a pH alto. La HPT de segunda generacin, llamada BEH
Technology, incorporada tanto en las columnas ACQUITY UPLC

BEH como en las columnas de HPLC XBridge, marca un nuevo hito en la cromatografa. Finalmente se puede utilizar toda la potencia
del pH en el desarrollo sistemtico de mtodos para LC.
*Patentes de los EE.UU. 6.686.035; 7.223.473; 7.250.214.
En la sntesis de partculas BEH, el monmero bis (trietoxisilil) etano contiene
un puente de etileno en su estructura. Este puente de etileno imparte
a la estructura de la partcula de slice la resistencia a la disolucin
a pH elevado que tienen los polmeros, sin sacrificar en absoluto
la integridad estructural ni la eficacia de la partcula de slice.
S NT ESI S DE PART CULAS PARA LA T ECNOLOG A BEH
DI SOLUCI N DE PART CULAS A PH ELEVADO
3OH
-
Si
Si(OH)4
O
O O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
OH OH
O
Si
O
O O
O O
Si
O
O O O O
O
Si
O
O O O O O O O
OH OH OH
Si
O O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O O
Si
O
Si
Ncleo
Si
O O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
Si
O
OH OH
O
Si
O
CH2 O
O O
Si
O
OH OH O
O
Si
CH2
CH2
O O O O O O O
OH OH CH2 CH2
CH2
CH2
Si
O O
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
Si
O
O
O
Si
Si
O
CH2
OH
Si
O O
O
O
O
O
Si
O
Si
Ncleo
3OH
-
Si
Si(OH)4
O
O O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
OH OH
O
Si
O
O O
O O
Si
O
O O O O
O
Si
O
O O O O O O O
OH OH OH
Si
O O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O O
Si
O
Si
Ncleo
Si
O O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
O
Si
O
Si
O
OH OH
O
Si
O
CH2 O
O O
Si
O
OH OH O
O
Si
CH2
CH2
O O O O O O O
OH OH CH2 CH2
CH2
CH2
Si
O O
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
O
Si
Si
O
O
O
Si
Si
O
CH2
OH
Si
O O
O
O
O
O
Si
O
Si
Ncleo

Slo hay que hidrolizar 4 enlaces.

Hay que hidrolizar hasta 6 enlaces.

Si(OH)4 tiene una elevada solubilidad en el agua.

Hidrfoba, menos reactiva que la slice.

La slice es fcil de disolver a pH > 7.

Prdida de eficacia.

Se forman enlaces Si-O-Si mientras

otros se rompen.
Partcula de slice
Partcula XBridge
Anal. Chem. 2003, 75, 6781-6788
+
4
Si
EtO
EtO
OEt
EtO
Si
EtO
Et O
EtO
Si
OEt
OEt
OEt
Si
Et O
O
CH2 CH2
CH2
CH2
Si
O
Si
EtO
OEt
Si
O
O
OEt
Si
O
Si
O
O
Et
O
O
O
Et
Et
Et
n
Polietoxisilano
(BPEOS)
Tetraetoxisilano
(TEOS)
Bis(trietoxisilil)etano
(BTEE)
Tecnologa BeH
[ ] 5
Atributo de la partcula hbrida
Los grupos hbridos superficiales reducen la concentracin
superficial de silanol.
Los grupos puente internos confieren una elevada interconectividad.
Los grupos hbridos internos y superficiales aaden hidrofobicidad.
BENEFI CI OS DE LA T ECNOLOG A H BRI DA
La tecnologa BEH ofrece a los usuarios de sistemas cromatogrficos la flexibilidad de transferencia entre las plataformas cromatogrficas
UltraPerformance LC, analtica y preparativa. Combinando la tecnologa BEH con el diseo de columna patentado de ptima densidad del lecho
(OBD), las columnas XBridge Prep OBD ofrecen una elevada capacidad de carga, mxima eficacia y larga vida til de la columna. Tanto las
partculas XBridge HPLC como las partculas ACQUITY UPLC BEH de 1,7 m tienen tecnologa BEH, permitiendo as una transferencia directa
de las separaciones por HPLC a la tecnologa UPLC. Tanto si un usuario de sistemas cromatogrficos est interesado en separaciones por UPLC
de menos de 2 m, como en el desarrollo de mtodos de purificacin o en separaciones de escala analtica, la tecnologa BEH ofrece soluciones
precisas y fiables.
Beneficio para la RP-HPLC
Reduccin de los factores de cola USP de los picos para las bases.
Mayor estabilidad qumica y mecnica.
Mayor estabilidad de la columna a pH alto.
Tecnologa de Separacin de Pptidos
Tecnologa de Separacin de Oligonucletidos
Columnas ACQUITY UPLC BEH
Columnas XBridge
Columnas BEH de bioseparacin
Columnas XBridge OBD Prep
PRODUCTOS CON T ECNOLOG A BEH
xBridge c
18
/c
8
[ ] 6
XBRI DGE C
18
/C
8
Las dos fases enlazadas de HPLC ms populares, C18 y C8, son las fases de primera eleccin en el desarrollo de mtodos de LC. tiles para una amplia
variedad de separaciones, estas columnas son conocidas por todos los cientficos dedicados a la separacin. Las columnas XBridge C18 y C8 ofrecen
flexibilidad para el desarrollo de mtodos. Mediante el uso de enlaces trifuncionales y un endcapping avanzado, se observa una excelente reproduc-
ibilidad, rendimiento y vida til de la columna a lo largo de todo el rango de pH (1-12).
* Valores nominales.
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
CH
Polar Group
3
CH
3
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
CH
Polar Group
3
CH
3
Tipo de ligando Trifuncional C
18
Trifuncional C
8
Tamaos de partcula disponibles (m) 2.5, 3.5, 5, 10 2.5, 3.5, 5, 10
Densidad del ligando* 3.1 mol/m
2
3.2 mol/m
2
Carga de carbono* 18% 13%
Tipo de endcapping Patentado Patentado
Intervalo de pH 1-12 1-12
Lmites de temp. a pH bajo 80 C 60 C
Lmites de temp. a pH alto 45 C 45 C
Farmacopea de los Estados Unidos. L1 L7
Dimetro de poro* 135 135
Volumen de poro* 0.7 mL/g 0.7 mL/g
Superficie* 185 m
2
/g 185 m
2
/g
F
a
s
e

e
n
l
a
z
a
d
a
P
a
r
t

c
u
l
a

B
E
H
Caractersticas de las columnas XBridge C
18
y C
8
ESTABI LI DAD A PH BAJO
La inestabilidad a pH bajo se debe a la escisin de los enlaces de
siloxano por hidrlisis cida. Para mejorar la estabilidad a pH bajo de
las fases enlazadas, hay que reducir la tasa de hidrlisis. Los tipos
de qumica XBridge C
18
, C
8
y Fenilo utilizan uniones trifuncionales y
endcapping patentados para conseguirlo. En ensayos acelerados en
condiciones de pH bajo, las columnas XBridge C
18
presentan una mnima
prdida de retencin (mayor estabilidad hidroltica) en comparacin
con las columnas rellenas con fases preparadas empleando silanos
monofuncionales.
ESTABI LI DAD A PH ALTO
La degradacin de las partculas cromatogrficas de base slice a un
pH elevado se debe al ataque nuclefilo de los iones hidrxido sobre
sus enlaces siloxnicos estructurales. Cromatogrficamente, esto
ocasiona vacos en la columna, degradacin de la forma de los picos
o prdida de eficacia. Las partculas XBridge incorporan puentes de
etileno dentro de la matriz de slice, que confieren resistencia a la
disolucin de la partcula. Tendran que romperse hasta seis enlaces
siloxnicos para liberar una sola unidad con puentes de etileno de
una partcula. La estabilidad qumica queda demostrada en el ensayo
acelerado a pH alto que se ilustra ms abajo.
Zorbax

SB C18
XBridge C
18
SunFire C
18
Intersil

ODS-3
Ace

C18
Gemini

C18
Luna

C18 (2)
0 20 40 60 80 100
Horas en TFA al 1% a 80 C hasta una prdida de retencin del 20%
XBridge C
18
XTerra MS C
18
Gemini

C18
Zorbax

Extend C18
Luna

C18 (2)
YMC

Pro C18
0 50 100 150 200
Horas en TEA 50 mM a 50 C hasta una prdida de ecacia del 50%
EL PH COMO HERRAMIENTA PARA UN PTIMO DESARROLLO DE MTODOS
En la cromatografa de fase reversa, el pH de la fase mvil puede producir cambios en la selectividad y capacidad de retencin a los compuestos
ionizables. Los compuestos cidos presentan mayor retencin a valores del pH por debajo de su pKa, y los compuestos bsicos presentan una
retencin ms prolongada a valores del pH por encima de su pK
a
. Muchos compuestos farmacolgicamente activos son ionizables; as, una columna
con un intervalo til de pH ms amplio permite mayor flexibilidad para el desarrollo de mtodos farmacuticos. Las columnas XBridge tienen un
amplio intervalo til de pH (pH 1-12), lo cual ofrece una flexibilidad inigualable para el desarrollo de mtodos.

El clorhidrato de lincomicina es un frmaco antibitico bien establecido, utilizado en medicina humana y veterinaria, efectivo prin-
cipalmente contra patgenos grampositivos. El actual mtodo USP adolece de una forma deficiente de los picos y de poca sensibili-
dad. Para desarrollar un mtodo ptimo, se puede utilizar el pH para obtener mejor forma de los picos y mejor resolucin.
Una vez seleccionado el pH, se optimiz la pendiente del gradiente para mejorar la resolucin.
xBridge c
18
/c
8
[ ] 7
AU
AU
AU
0
0.5
0
0.5
0
0.5
0 5 10 15 min
Columna: XBridge C
18
, 3.0 x 100 mm, 3.5 m
Fase mvil A1: Fosfato potsico 100 mM, pH 2
Fase mvil A2: Fosfato potsico 100 mM, pH 7
Fase mvil A3: Fosfato potsico 100 mM, pH 12
Fase mvil B: ACN
Fase mvil C: H
2
O
Caudal: 0.6 mL/min
Gradiente: Tiempo Perl
(min) %A %B %C
0.0 20 5 75
15.0 20 50 30
Temperatura: 30 C
Volumen de inyeccin: 20 L @ 30 mg/mL en agua
Detection: UV @ 215 nm
Instrumento: Waters Alliance

2695 con PDA 2996

0 5 10 15 min
Columna: XBridge C
18,
3.0 x 100 mm, 3.5 m
Fase mvil A: Fosfato potsico 100 mM, pH 12
Fase mvil B: Acetonitrilo
Fase mvil C: Agua
Gradiente: Tiempo Perl
(min) %A %B %C
0.0 20 15 65
15.0 20 35 45
Caudal: 0.6 mL/min
Volumen de inyeccin: 20 L @ 30 mg/mL en agua
Temperatura: 30 C
Deteccin: UV @ 215 nm
Instrumento: Waters Alliance 2695 with 2996 PDA
pH 2
Forma deficiente de los picos
Sobrecarga de la columna
Baja retencin: ionizado
pH 7
Mejor forma de los picos
Mejor retencin: 50% ionizado
Coelucin
pH 12
La mejor forma de los picos
Buena retencin: 100% no ionizado
La mejor resolucin
Excelente carga
Resolucin optimizada
Excelente forma de picos
0.25%
1.1%
7.3%
xBridge c
18
/c
8
[ ] 8
ELI MI NANDO EL SANGRADO EN MS
0.0E+00
5.0E+06
1.0E+07
1.5E+07
2.0E+07
2.5E+07
3.0E+07
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 min
Sin columna
XBridge C
18
R
e
c
u
e
n
to

d
e

i
o
n
e
s
La espectrometra de masas, en combinacin con la HPLC, ofrece a los qumicos
analticos mayor sensibilidad y selectividad. Para obtener todos los beneficios
de la LC/MS, es esencial la utilizacin de columnas de LC de baja degradacin.
La tecnologa BEH incorporada a las columnas XBridge elimina prcticamente la
degradacin de la LC/MS, al ofrecer mayor sensibilidad hidroltica y resistencia de
las partculas. Como se puede ver ms abajo, en comparacin con una exploracin de
fondo por MS, se observa una degradacin mnima.
SACANDO PARTI DO DE LOS TAMPONES DE FOSFATO
Los tampones de fosfato poseen una singular selectividad, excelente transparencia UV
y buena capacidad de tamponamiento a mltiples valores del pK
a
. No obstante, debido
a la naturaleza agresiva del fosfato, las columnas tradicionales de slice presentan con
frecuencia una vida til muy reducida. Las columnas XBridge demuestran un rendimiento
excelente con tampones de fosfato en todo el intervalo de pH, debido a la resistencia
qumica mejorada de las partculas con tecnologa BEH.
CAMBI O ENT RE PH ALTO Y BAJO
La capacidad de cambiar entre un pH alto y uno
bajo en una sola columna puede permitir una
espectacular reduccin del tiempo de parada del
instrumento, as como significativas reducciones
de coste cuando se trabaja a mltiples niveles
de pH. Tradicionalmente, se asignan columnas
diferentes para cada nivel de pH, para evitar
la degradacin prematura de la columna. Las
partculas de tecnologa BEH, cuando se combinan
con fases enlazadas y endcapping novedosos
e innovadores, permiten el uso de las columnas
de HPLC XBridge a un pH ms elevado que las
columnas convencionales, pero permiten el cambio
de pH sin reduccin en el rendimiento. En otras
palabras, una sola columna XBridge puede utilizarse
para trabajar en condiciones de pH tanto bajo
como alto, eliminando as el tiempo necesario para
cambiar de columna, y la necesidad de disponer de
mltiples columnas para trabajar a pH bajo y alto
por separado.


En esta evaluacin se investig el efecto
de cambiar el pH de la fase mvil de forma
agresiva para cada inyeccin, empleando una
mezcla de compuestos cidos, bsicos y neutros.
Cada columna fue equilibrada primero a pH 3,
seguido de una sola inyeccin de la mezcla de
prueba. La columna fue equilibrada despus
a pH 10, seguido de una sola inyeccin de la
mezcla de prueba. Esta secuencia se repiti para
varios miles de inyecciones sin deterioro de la
columna XBridge C
18
.
V
0
B
A
N
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 min
Iny. n 2
Iny. n 4800
B = base
A = cido
N = neutro
B = base
A = cido
N = neutro
V
0
B
A
N
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 min
Iny. n 2
Iny. n 1724
V
0
B
A
N
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 min
Iny. n 2
Iny. n 4800
B = base
A = cido
N = neutro
B = base
A = cido
N = neutro
V
0
B
A
N
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 min
Iny. n 2
Iny. n 1724
Columna XBridge
Gemini

Column
0 1 2 3 4 5 6 7 8 min
0 1 2 3 4 5 6 7 8 min
0 1 2 3 4 5 6 7 8 min
1
6
6
6
5
5
5
4
4
4
3
3
3
2
2
2
1
1
pH 2
pH 7
pH 12
Instalaciones de fabricacin de Waters
La Corporacin Waters ha recibido los
siguientes registros y certificaciones:
Registrada por la Food y Drug Administration
de los EE.UU.: cGMP y dispositivos mdicos
de Clase 1.
ISO9001:2000
ISO13485:2003
xBridge c
18
/c
8
[ ] 9
ESTABI LI DAD PARA UN RENDI MI ENTO FI ABLE
La tecnologa BEH produce partculas diseadas para mejorar el rendimiento de la
columna y prolongar su vida til en condiciones operativas de LC extremas y exigentes.
Utilizando tcnicas punteras de sntesis, Waters ha diseado y fabricado columnas de
LC capaces de ofrecer una vida til que supera con mucho la de las principales marcas
de columnas convencionales de HPLC, en condiciones de pH tanto bajo como alto.
Las instalaciones de vanguardia de Waters
fabrican columnas de HPLC y de UPLC que
aumentan al mximo el rendimiento del
laboratorio. Somos fabricantes originales de
partculas de slice e hbridas, y podemos vigilar
y controlar continuamente todo el proceso
de fabricacin a lo largo de la vida til del
producto. Esto permite obtener un control y
una repetibilidad sin precedentes entre lotes de
material.
REPRODUCI BI LI DAD PARA EL DESARROLLO DE MTODOS
Waters sigue siendo la referencia del sector para la reproducibilidad lote a lote. Desde
la gama de columnas Symmetry

en 1994 y continuando con las gamas de columnas

de HPLC XTerra, Atlantis

y SunFire, las columnas de Waters ofrecen resultados

constantes. Las columnas XBridge se fabrican en las mismas instalaciones certificadas
cGMP, ISO9001 e ISO13485 que producen estas gamas de columnas de HPLC,
lderes en el sector. Los cientficos dedicados al desarrollo de mtodos pueden tener
la garanta de que las separaciones obtenidas hoy sern reproducibles ao tras ao.
0 10 20 30 min
Los resultados de arriba se obtuvieron como parte de una extensa evaluacin
de columnas de HPLC realizada por una importante empresa farmacutica. Se
evalu un total de 18 columnas en condiciones exigentes para determinar la
estabilidad de la eficacia y de la selectividad durante un uso prolongado, as
como la reproducibilidad entre lotes. Esta evaluacin dio lugar a la seleccin
de las columnas de HPLC XBridge como la principal columna de desarrollo de
mtodos a nivel mundial.
Datos cortesa de Novartis.
0 5 10 15 20 25 30 min
Anlisis del lote 1
Anlisis del lote 13
Anlisis del lote 15
Anlisis del lote 34
Anlisis del lote 36
Anlisis del lote 3
XBridge C18, pH 2
XBridge C18, pH 11.3
1 anlisis de lote = 500 volmenes
de la columna
5 m
5 m
10 m
3.5 m
3.5 m
xBridge Fenilo
[ ] 10
XBRI DGE FENI LO
Las columnas fenilo se utilizan con frecuencia en separaciones donde se necesita una selectividad alternativa, especialmente cuando los analitos
de inters contienen un anillo aromtico. Tradicionalmente, las columnas de fenilo se han utilizado poco, debido a su inadecuada estabilidad en
condiciones de pH bajo. Los cientficos dedicados al desarrollo de mtodos ya no se ven limitados por el pH cuando utilizan una columna de LC de
fenilo. Gracias al novedoso enlazado y endcapping de la tecnologa de partculas BEH, las columnas XBridge Fenilo ofrecen excelente estabilidad a
pH bajo y alto, dando lugar a la columna fenilo ms estable y reproducible del mercado.
EXCELENT E RENDI MI ENTO
Las columnas XBridge Fenilo combinan una unin trifuncional del ligando fenilo-hexilo con tcnicas patentadas de endcapping para obtener una
estabilidad a pH bajo que lidera el sector, sin dejar de ofrecer una excelente forma de picos.
Excelente forma de los picos
10 20 30 40 50 60 70 80 90 min
Zorbax

SB Fenilo
XBridge Fenilo
Amitriptilina
N
USP
= 9300
T
USP
= 1.20
Amitriptilina
N
USP
= 920
T
USP
= 6.59
Sonda: Etilparabeno
50
60
70
80
90
100
0 20 40 60 80 100
Horas en TFA al 1% en H
2
O pH 1,0 a 80 C
XBridge

Phenyl
Agilent Zorbax

SB-Phenyl
Phenomemex

Luna

Phenyl-Hexyl
Varian Pursuit

Diphenyl
Agilent Zorbax

Eclipse XDB Phenyl

Restek Ultra Phenyl
%

r
e
t
e
n
c
i

n

i
n
i
c
i
a
l
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
CH
Polar Group
3
CH
3
Tipo de ligando Trifuncional C
6
Fenilo
Tamaos de partcula disponibles (m) 2.5, 3.5, 5
Densidad del ligando* 3.0 mol/m
2
Carga de carbono* 15%
Tipo de endcapping Patentado
Intervalo de pH 1-12
Lmites de temp. a pH bajo 80 C
Lmites de temp. a pH alto 45 C
Farmacopea de los Estados Unidos. L11
Dimetro de poro* 135
Volumen de poro* 0.7 mL/g
Superficie* 185 m
2
/g
* Valores nominales.
F
a
s
e

e
n
l
a
z
a
d
a
P
a
r
t

c
u
l
a

B
E
H
Caractersticas de las columnas XBridge Fenilo
Estabilidad a pH bajo que lidera el sector
xBridge Fenilo
[ ] 11
SI NGULAR SELECTI VI DAD
Las columnas XBridge Fenilo ofrecen una selectividad alternativa con
respecto a las columnas alqulicas de cadena recta, as como a las
columnas con grupos polares integrados, en especial para compuestos
que contienen un grupo aromtico. Esto proporciona gran flexibilidad
para desarrollar mtodos ortogonales para separaciones difciles.

USO DEL PH BAJO PARA ENFRENTARSE A DESAF OS DE DESARROLLO DE MTODOS
La separacin de cidos aromticos ha sido histricamente difcil, utilizando columnas C18 tradicionales. Estos compuestos son derivados del fenol
y poseen anillos aromticos; por tanto, construir una columna de fenilo es una solucin lgica. No obstante, se ha demostrado que el pH bajo es
crtico para obtener una separacin efectiva en esta clase de compuestos, lo cual es problemtico para la mayora de las columnas de fenilo que hay
en el mercado, en cuanto a la estabilidad. Las columnas XBridge Fenilo ofrecen la solucin. No solo se consigue la selectividad deseada (mediante
interacciones pi-pi), sino que la estabilidad qumica mejorada favorece la vida til de la columna y un funcionamiento consistente a pH bajo.
4 8 12 16 20 min
cidos
Bases
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 min
En diversos herbicidas comunes, entre ellos Silvex, Picloram y Weed-B-Gone, se utilizan cidos aromticos. Muchos otros cidos
orgnicos son analitos cidos muy polares que pueden ser difciles de retener en las columnas C
18
tradicionales, y sin embargo se
retienen bien utilizando las columnas XBridge Fenilo.s.
Columna: XBridge Phenyl
4.6 100 mm, 3.5 m
Nmero de referencia: 186003334
Fase mvil A: H
2
O
Fase mvil B: ACN
Fase mvil C: NH
4
HCOOH 100 mM, pH 3
Caudal: 1 mL/min
Gradiente: Tiempo Perl
(min) %A %B %C
0.0 85 5 10
8.00 65 25 10
10.00 10 80 10
11.00 10 80 10
12.00 85 5 10
15.00 85 5 10

Volumen de inyeccin: 20 L
Disolvente de la muestra: 10 g/mL of all analytes in H
2
O
Temperatura de la columna: 35 C
Temperatura de la muestra: 20 C
Deteccin: UV @ 280 nm
Velocidad de adquisicin: 5 points/sec
Filtro respuesta: 1.0
Lavado de la aguja: 5/95 MeOH/H
2
O
Instrumento: Alliance 2695 con PDA 2996
Compuestos
1. cido glico
2. cido protocatquico
3. cido 3,4 dihidroxifenilactico
4. cido 4-hidroxibenzoico
5. Picrolam
6. cido vainllico
7. cido sirngico
8. cido saliclico
9. cido 2,4-diclorofenoxiactico
(Weed-B-Gone)
10. cido 2-(2,4,5-triclorofenoxi)
propanoico (Silvex)
Con diferentes ligandos se pueden observar cambios de
selectividad. Como se ilustra aqu, el ligando fenilo ofrece mejor
retencin y una selectividad alternativa para los antidepresivos
tricclicos (picos 6, 7 con respecto al pico 8).
1
1
1
2
2
2
3
3
3
4,5
4
4
5
5
6
6
6
7
7
7
8
8
8
9
9,10
9
11
11
11
10
10
12
12
12
XBridge Fenilo
XBridge C
18
XBridge Shield RP18
1
2
3
4
5
6
7
8
9 10
XBRI DGE SHI ELD RP18
Las columnas que contienen grupos polares embebidos se estn volviendo ms populares entre los cientficos dedicados al desarrollo de mtodos, debido
a su selectividad alternativa en comparacin con los tipos de qumica C
18
tradicionales. El XBridge Shield RP18 ofrece una selectividad complementaria
as como una excelente forma de los picos para las bases. La tecnologa Shield patentada* incorpora un grupo carbamato integrado en la fase unida,
que protege los silanoles superficiales. Adems, esta funcionalidad permite la compatibilidad con fases mviles totalmente acuosas sin riesgo de
deshumectacin de los poros, permitiendo una retencin fiable y consistente.
*Patente de los EE.UU. 5.374.755 [Neue et al.]
xBridge SHield rP18
[ ] 12
* Valores nominales.
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
CH
Polar Group
3
CH
3
Tipo de ligando Monofuncional de grupo polar integrado
Tamaos de partcula disponibles (m) 2.5, 3.5, 5, 10
Densidad del ligando* 3.3 mol/m
2
Carga de carbono* 17%
Tipo de endcapping TMS
Intervalo de pH 2-11
Lmites de temp. a pH bajo 30 C
Lmites de temp. a pH alto 45 C
Farmacopea de los Estados Unidos. L1
Dimetro de poro* 135
Volumen de poro* 0.7 mL/g
Superficie* 185 m
2
/g
F
a
s
e

u
n
i
d
a
P
a
r
t

c
u
l
a

B
E
H
Caractersticas de la columna XBridge Shield RP18
QU ES LA T ECNOLOG A SHI ELD?
A principios de la dcada de 1990 se crearon fases enlazadas
novedosas en las que se integraban grupos funcionales polares en
cadenas alqulicas C18 y C8. Uno de los principales beneficios era
una reduccin de las interacciones silanlicas con los analitos bsicos,
permitiendo una mejora de la forma de los picos. Estos materiales de
primera generacin se preparaban mediante una modificacin superficial
de dos pasos, en una mezcla de grupos amino derivados y no derivados,
que variaban de un lote a otro. As, los analitos eran retenidos mediante
mecanismos de fase reversa y de intercambio aninico.
Los materiales de segunda generacin se preparan utilizando una
modificacin superficial de un paso, en la que el grupo funcional se
integra en un silano. Una sola reaccin superficial con el silano da
lugar a una nica estructura posible del ligando, sin posibilidad alguna
de intercambio aninico. Este enfoque result ofrecer una excelente
reproducibilidad entre lotes. La eliminacin de los mecanismos
de intercambio aninico es tambin importante, ya que previene
la posibilidad de interacciones secundarias con analitos cargados
negativamente.
Beneficios de la tecnologa Shield:

Reduccin de las interacciones silanlicas con los analitos bsicos.

Esta desactivacin o proteccin ocasiona una mejora de la forma de
los picos para los analitos bsicos.

Se observa tambin una singular selectividad para las fases unidas

con grupos polares embebidos, reducindose generalmente los
factores de retencin de los analitos polares y bsicos, y quedando
la retenci de los analitos no polares relativamente inalterada.

Las fases enlazadas Shield ofrecen tiempos de retencin del analito

estables y reproducibles en fases mviles 100% acuosas. Las fases
alqulicas convencionales adolecen de deshumectacin en estas
condiciones, y los tiempos de retencin se reducen significativamente.
A Review of Waters Bonded Phase Shield Technology and Its Use
in High Performance Liquid Chromatography (HPLC) White Paper
Referencia bibliogrfica 720000207EN
Referencia bibliogrfica
OPTI MI ZAR LA SELECTI VI DAD PARA EL DESARROLLO DE MTODOS
Para desarrollar mtodos cromatogrficos, algunas de las herramientas disponibles para el cientfico dedicado a la separacin incluyen el pH, la
qumica de la columna y el modificador orgnico. La columna XBridge Shield RP18 ofrece una selectividad alternativa, junto con la capacidad
de funcionar correctamente en una amplia gama de pH y con diversos eluyentes. Utilizando estas herramientas clave, el usuario de sistemas
cromatogrficos puede optimizar rpidamente las condiciones de prueba necesarias para lograr una separacin efectiva.
Grandes cambios de selectividad cuando se comparan las qumicas de columnas ortogonales en diferentes modificadores orgnicos.
EXCELENT E SEPARACI N DE BASES
Algunas columnas C
18
muestran interacciones secundarias con los compuestos bsicos, debido a un dbil intercambio catinico con los silanoles
superficiales residuales, dando lugar a una asimetra deficiente de los picos. La columna XBridge Shield RP18, con tecnologa Shield patentada,
reduce la interaccin silanlica con los analitos bsicos, produciendo picos simtricos muy eficientes.
xBridge SHield rP18
[ ] 13
0.00
0.02
0.04
0.06
A
U
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 min
Compuestos
1. Nordoxepina
2. Trimetoprim
3. Nortriptilina
4. Doxepina
5. Imipramina
6. Amitriptilina
7. Trimipramina
Columna: XBridge Shield RP18,
4.6 X 50 mm, 3.5 m
Nmero de referencia: 186003042
Fase mvil A: H
2
O
Fase mvil B: MeOH
Fase mvil C: NH
4
HCO
3
100 mM
Caudal: 1.0 mL/min
Gradiente: Tiempo Perl
(min) %A %B %C
0 90 0 10
2 30 60 10
10 16 74 10
11 90 0 10
13 90 0 10

Volumen de inyeccin: 20 L
Concentracin y diluyente
de la muestra: 10 g/mL in H
2
O
Temperatura: 35 C
Deteccin: UV @ 254
Velocidad de adquisicin: 5 points/second
Constante de tiempo: 1.0
Lavado de la aguja: 5/95 MeOH/H
2
O
Instrumento: Alliance 2695 con PDA 2996
cidos
Bases
2 0 4 6 8 10 12 14 16 18 min
2 0 4 6 8 10 12 14 16 18 min
2 0 4 6 8 10 12 14 16 18 min
1
2
2
2
1
1
3
3
3
4
4
4
5
5
5
6
6
6
7,12
7
7
8
8,9
8
9
9
10
10
10
11
11
11
12
12
1
2
3
4 5
6
7
pH 10
XBridge

C
18
Metanol
XBridge

Shield RP18
Metanol
XBridge

Shield RP18
Acetonitrilo
* Valores nominales.
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
O
O
O Si
CH
Polar Group
3
CH
3
Tipo de ligando BEH no enlazado
Tamaos de partcula disponibles (m) 2.5, 3.5, 5
Intervalo de pH 1 - 8
Lmites de temp. a pH bajo 45 C
Lmites de temp. a pH alto 45 C
Farmacopea de los Estados Unidos. L3
Dimetro de poro* 130
Volumen de poro* 0.7 mL/g
Superficie* 185 m
2
/g P
a
r
t

c
u
l
a

B
E
H
Caractersticas de la columna XBridge Shield RP18
xBridge Hilic
[ ] 14
XBRI DGE HI LI C
La cromatografa de interaccin hidrfila (HILIC, siglas inglesas) es una tcnica cromatogrfica que puede emplearse para mejorar la retencin
de especies muy polares, que se retienen muy poco por cromatografa de fase reversa. Las columnas XBridge HILIC ofrecen una selectividad
alternativa a las columnas de fase reversa, al tiempo que mejoran la forma de los picos, la retencin y la vida til de la columna, en comparacin
con las columnas HILIC con base de slice. Gracias a la fuerte y consistente tecnologa BEH, las columnas XBridge HILIC establecen un nuevo
estndar de rendimiento para las separaciones HILIC.
RET ENCI N MEJORADA
Los mecanismos de retencin de HILIC son una compleja combinacin
de particin, intercambio inico y enlaces de hidrgeno, dando lugar a
una retencin mejorada para analitos polares. La retencin tiene lugar
con una fase estacionaria polar en combinacin con fases mviles
compuestas de acetonitrilo a concentraciones superiores al 80%, que
ofrecen una retencin notablemente mayor que la fase reversa.
V
0
= 0.35 min
V
0
= 0.33 min
Colina
0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 min
HO
N
+
XBridge C
18
de fase reversa
Factor de retencin = 0
XBridge HILIC
Factor de retencin = 1,8 1 2 3 4 5 6 min 0
El XBridge HILIC ofrece retencin donde la fase reversa no
consigue retencin alguna.
Compuestos
1. 6-acetilmorna
2. Morna
3. Morna-3--glucurnido
XBridge C
18
de fase reversa
XBridge HILIC
3
2
1
1
2
3
XBridge HILIC ofrece una selectividad alternativa a la fase
reversa. Los metabolitos polares de morfina se retienen ms en
condiciones HILIC.
SELECTI VI DAD COMPLEMENTARI A
Las columnas XBridge HILIC ofrecen una selectividad complementaria
a las columnas de fase reversa. En algunos casos, se observa una
inversin del orden de elucin, adems de una mejor retencin, lo cual
puede ser ventajoso cuando se desarrollan separaciones ortogonales
para analitos polares.
F
a
s
e

u
n
i
d
a
ESTABI LI DAD QU MI CA
Con frecuencia se necesita un pH intermedio en la fase mvil para alterar el estado de carga del analito o del sustrato, a fin de promover la
retencin. Para los materiales con base de slice, esto provoca frecuentemente una disolucin de las partculas, ocasionando una reduccin de la
vida til de la columna. Las columnas XBridge HILIC estn fabricadas con tecnologa BEH, que permite una excepcional longevidad de la columna,
permitiendo varios miles de inyecciones sin reduccin del rendimiento debida a la degradacin qumica.
xBridge Hilic
[ ] 15
2 min 1 0
1. Acetilcolina (Ach) 2. Colina (Ch)
3.0 x 10
7
2.0 x 10
7
1.0 x 10
7
Intensidad
3.0 x 10
7
2.0 x 10
7
1.0 x 10
7
Intensidad
0.2 1.0 2.0 min
O
N
+
O
HO
N
+
Condicionar/equilibrar:
200 L CH
3
OH/ 200 L de H
2
O
Cargar:
300 L de plasma humano
enriquecido con un 2% H
3
PO
4
Lavado 1:200 L de HCOOH
al 2% en H
2
O
Lavado 2:
200 L CH
3
OH
Lavado 3:
200 L CH
3
CN
Eluir: 50 L de NH
4
OH
al 5% en CH
3
CN
Inyeccin directa del eluato:
elimina los largos pasos de
evaporacin y reconstitucin.
6-acetilmorna
10 ng/mL aadidos a plasma humano
Morna
10 ng/mL aadidos a plasma humano
0 2 4 6 min
HO
O
O
NCH3
H
O
HO
O
HO
NCH3
H
XBridge C
18
de fase reversa
Inyeccin 10
Inyeccin1000
Inyeccin 2000
XBridge HILIC
1
2
3
Columna: XBridge HILIC, 2.1 x 50 mm, 3.5 m
Fase mvil A: Acetonitrilo:agua 95:5 con NH
4
+ CH
3
COO- 10 mM pH 5,5
Fase mvil B: Acetonitrilo:agua 50:50 con NH
4
+ CH
3
COO- 10 mM pH 5,5
Caudal: 0.5 mL/min
Gradiente: 1 99% B a lo largo de 2 minutos, 1% B a 2,1 min, parar 0,4 min
Volumen de inyeccin: 2.0 L
Temperatura: 30 C
Deteccin: UV @ 254 nm
La XBridge HILIC muestra una excepcional resistencia
qumica, que permite una prolongada vida til de la
columna.
2 1
1
2
Respuesta 10,5 x
Respuesta 8,6 x
La XBridge HILIC ofrece una respuesta mejorada de la espec-
trometra de masas, permitiendo lmites de deteccin ms bajos.
SENSIBILIDAD MEJORADA PARA ESPECTROMETRA DE MASAS
La utilizacin de HILIC ha adquirido popularidad, principalmente debido a
la amplia adopcin de la espectrometra de masas como detector, y a la
necesidad de mejorar la sensibilidad para la cuantificacin de analitos po-
lares. A diferencia de la fase reversa, que utiliza fases mviles altamente
acuosas para inducir la retencin de los compuestos polares, con HILIC
se emplea una fase mvil rica en acetonitrilo. Esta fase mvil altamente
orgnica se desolvata con facilidad, permitiendo una mejora en la eficacia
de ionizacin y en la respuesta de la espectrometra de masas.
PASOS REDUCIDOS DE MANIPULACIN DE LAS MUESTRAS
Cuando se utilizan mtodos de extraccin en fase slida (SPE, siglas
inglesas) para la limpieza de las muestras, con frecuencia se utiliza
una fraccin altamente orgnica, para eluir selectivamente los
analitos de inters del dispositivo. Antes de inyectar esta fraccin en
una columna de fase reversa, hay que evaporar primero la fraccin
orgnica y despus reconstituirla con una porcin de disolvente
acuoso. Estos dos pasos son frecuentemente los pasos ms largos de
un procedimiento de SPE. Con las columnas XBridge HILIC, la fraccin
altamente orgnica se puede inyectar directamente, con lo que se
elimina la necesidad de evaporacin y se aumenta el rendimiento de
las muestras.
La XBridge HILIC ofrece una inyeccin directa de los eluyentes
de SPE, aumentando as el rendimiento de las muestras.
Opiceos en plasma humano
Placa Elution Oasis

MCS
Compuestos
1. Uracilo
2. 5-uorocitosina
3. Citosina
Tecnologa UPlc
[ ] 16
En 2004, Waters revolucion la ciencia de la separacin por LC con la creacin del sistema ACQUITY UltraPerformance LC (UPLC). Las
separaciones de alta resolucin por UPLC se realizan en un sistema capaz de utilizar plenamente unas columnas de LC que estn eficazmente
rellenas de partculas de menos de 2 m, con tolerancia a la presin. La tecnologa BEH es uno de los principales elementos habilitadores que hay
tras esta nueva plataforma de separacin, y ofrece la eficacia, resistencia e intervalo de pH necesarios para las separaciones por UPLC.
Como las columnas ACQUITY UPLC BEH y las XBridge HPLC incorporan la misma tecnologa BEH, los mtodos se pueden transferir sin problemas
entre estas plataformas de partculas. Las separaciones cromatogrficas se pueden transferir sin esfuerzo entre la tecnologa de UPLC, la escala
analtica y la preparativa. Los usuarios de sistemas cromatogrficos pueden aprovechar una amplia variedad de tamaos de partculas (esto es, 1,7,
2,5, 3,5, 5 y 10 m) conservando la eficacia del mtodo.
T ECNOLOG A UPLC: VELOCI DAD Y RESOLUCI N
Para separaciones isocrticas, la resolucin (Rs) es proporcional
al tamao de la partcula. Por tanto, las partculas ms
pequeas ofrecen mayor resolucin.
A
b
s
o
r
b
a
n
c
ia

a

2
7
0

n
m
0.04
0.08
A
b
s
o
r
b
a
n
c
ia

a

2
7
0

n
m
0.08
A
b
s
o
r
b
a
n
c
ia

a

2
7
0

n
m
0.04
A
b
s
o
r
b
a
n
c
ia

a

2
7
0

n
m
0.04
A
b
s
o
r
b
a
n
c
ia

a

2
7
0

n
m
Rs
(2,3)
= 2.90
Rs
(2,3)
= 7.42
Rs
(2,3)
= 4.58
Rs
(2,3)
= 4.57
Rs
(2,3)
= 6.18
2.1 x 30 mm, 1.7 m
2.1 x 50 mm, 1.7 m
2.1 x 100 mm, 1.7 m
2.1 x 150 mm, 5.0 m
UPLC
HPLC
2.1 x 150 mm, 1.7 m
0.00 0.50 1.00 1.50
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00
0.00 2.00 4.00 6.00 7.00
0.00 0.50 1.50 2.00 1.00 2.50
0.00 5.00 15.00 10.00 20.00
VELOCIDAD
EXTREMA
RESOLUCIN
EXTREMA
VELOCIDAD CON
RESOLUCIN
RESOLUCIN
CON VELOCIDAD
UPLC
Protocolo de desarrollo de mtodos
HPLC
Protocolo de desarrollo de mtodos
deSarrollo de mTodoS mS rPido con la Tecnologa UPlc
26.8 Horas
TiemPo ToTal de Screening
pH 3 / Acetonitrilo pH 3 / Acetonitrilo
pH 3 / Metanol
pH 3 / Metanol
pH 10 / Acetonitrilo
pH 10 / Acetonitrilo
pH 10 / Metanol
pH 10 / Metanol
Tiempo de anlisis: 6,7 horas/columna x 4 columnas
8 Horas
TiemPo ToTal de Screening
Tiempo de screening: 2 horas/columna x 4 columnas
El desarrollo de mtodos utilizando un enfoque de screening
sistemtico es uno de los modos ms rpidos y efectivos para
crear nuevas separaciones de HPLC. Evaluando combinaciones de
pH, qumica de la columna y modificador orgnico, se racionaliza
la informacin necesaria para permitir una decisin segura
acerca del modo de continuar con un mtodo. Pero y si los datos
pudieran obtenerse an ms deprisa? La respuesta est en la
tecnologa de UPLC.
Se ilustra aqu un protocolo convencional de desarrollo de mtodos
utilizando tecnologa HPLC y UPLC. Ambas tcnicas proporcionan
la misma cantidad de informacin. La diferencia es la cantidad de
tiempo de laboratorio necesaria para obtener esta informacin. En
este ejemplo, la tecnologa UPLC dio la respuesta en 1/3 del tiempo!
Este protocolo completo se puede terminar en un solo da laborable,
manteniendo la misma calidad de la informacin. La tecnologa
UPLC aumenta considerablemente la velocidad de desarrollo de
mtodos y la eficacia del funcionamiento de un laboratorio.
ALCANZAR UN NUEVO NI VEL DE DURACI N DE LAS COLUMNAS PREPARATI VAS
La escasa vida til y el rendimiento irregular de las columnas preparativas han sido fuente
de inquietud significativa para el qumico dedicado a la purificacin. Hay que reducir el
coste por purificacin, y la prdida de muestras por fallo prematuro de la columna debe ser
reducida al mnimo. Tras muchos aos de investigacin acerca del relleno y del diseo de
las columnas, Waters cre el diseo de columna preparativa con ptima densidad del lecho
(OBD)*, resolviendo eficazmente estos problemas. Este formato es reconocido en el sector como el que ofrece las columnas
preparativas ms estables, eficaces y reproducibles.
La combinacin de los robustos rellenos XBridge y el diseo OBD eleva el rendimiento de las columnas preparativas a un
nuevo nivel y garantiza una escalabilidad directa, una eficacia mxima y una larga vida til de las columnas.
Las columnas XBridge Prep ofrecen la misma elevada capacidad de carga y fiabilidad que se espera de nuestros
productos XTerra Prep, generando al tiempo menor contrapresin en la columna y mayor eficacia.
Eficacia mxima/un 30% menos de contrapresin
0 2 4 6 8 10 min
0 2 4 6 8 10 min 0 2 4 6 8 10 min
0 2 4 6 8 10 min
XTerra Prep MS C
18
, 19 x 50 mm, 5 m
Volumen de inyeccin: 660 L
Carga total: 198 mg
Presin mxima: 1000 psi
XBridge Prep C
18
, 19 x 50 mm, 5 m
Volumen de inyeccin: 660 L
Carga total: 198 mg
Maximum
Contrapresin mxima: 700 psi
Fase mvil A: 0,1% de DEA en agua
Fase mvil B: 0,1% de DEA en acetonitrilo
Concentracin de la muestra: 300 mg/mL en DMSO
Instrumento: Sistema AutoPurication

Deteccin: UV @ 260 nm
Compuestos
1. Labetolol (50 mg/mL)
2. Quinina (50 mg/mL)
3. Diltiacem (50 mg/mL)
4. Verapamilo (100 mg/mL)
5. Amitriptilina (50 mg/mL)
Caudal: 23.8 mL/min
Gradiente: Tiempo Perl
(min) %A %B
0.0 95 5
1.79 95 5
6.79 5 95
7.79 5 95
Caudal: 23.8 mL/min
Gradiente: Tiempo Perl
(min) %A %B
0.0 95 5
1.79 95 5
6.79 5 95
7.79 5 95
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 min
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 min 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 min
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 min
El diseo de la columna preparativa OBD ofrece una densidad del lecho relleno equivalente a la de la columna
analtica, garantizando por tanto una transferencia directa.
XBridge C
18
, 4.6 x 100 mm, 5 m
Volumen de inyeccin: 30 L
Carga total: 6 mg
Fase mvil A: Acetato amnico 10 mM, pH 10
Fase mvil B: Acetonitrilo/bicarbonato amnico 100 mM (90/10)
Caudal: 1,06 min/mL (ana); 18 min/mL (prep)
Gradiente: Gradiente de 10 min, desde el 5% de A al 95% de B
Deteccin: UV @ 270 nm
Compuestos
1. Econazol (100 mg/mL)
2. Miconazol (100 mg/mL)
XBridge Prep C
18
, 19 x 100 mm, 5 m
Volumen de inyeccin: 510 L
Carga total: 102 mg
Transferencia directa
Tecnologa PreParaTiVa oBd
[ ] 18
*Patente del Reino Unido n GB2408469.
1 2
3
4
5
1
2
3
4
5
1
2
1
2
0
100
100
100
0
0
0 1 2 3 4 5 6 7 min
%
%
%
BENEFI CI OS DEL pH EN EL AI SLAMI ENTO Y EN LA PURI FI CACI N
-1
100
100
100
-8
0
0 2 4 6 8 10 min
%
%
%
El pH bajo para analitos cidos ofrece la ms alta capacidad de carga,
as como la mejor retencin y separacin.
El pH elevado para analitos bsicos ofrece la mejor capacidad de carga,
as como la mejor retencin y separacin.
XBridge C
18
XBridge C
18
Carga de bases
Carga de cidos
REDUCI R EL COST E AMPLI ANDO
LA VI DA TI L DE LA COLUMNA
Inyeccin 1
Inyeccin 7.000
Folleto de las columnas preparativas de ptima
densidad del lecho (OBD).
Referencia bibliogrfica 720002336EN
Referencia bibliogrfica
Tecnologa PreParaTiVa oBd
[ ] 19
La demanda de aislamiento rpido de compuestos con
elevada pureza exige integridad y estabilidad de la
columna preparativa. Las materias primas complejas,
de escasa solubilidad, se disuelven con frecuencia en
disolventes fuertes, como el DMSO. Esta combinacin
de escasa solubilidad y los choques de presin
asociados a los grandes volmenes de inyeccin de
eluyente orgnico puro es la principal responsable del
fallo precoz de la columna, y del colapso del lecho
cromatogrfico.
El diseo OBD muestra una resistencia excepcional
al fallo mecnico del lecho cromatogrfico y ofrece
un rendimiento constante de una columna a otra,
reduciendo el coste mediante una vida til prolongada
1,2
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2
3
3
3
3
3
3
Bases
1. Nordoxepina
2. Doxepina
3. Amitriptilina
cidos
1. Oxacilina
2. Cloxacilina
3. Dicloxacilina
x 5 en las ordenadas
x 20 en las ordenadas
0.1 mg
0.8 mg
0.1 mg
0.3 mg
0.5 mg
0.2 mg
pH 2.3
pH 2.3
pH 7
pH 7
pH 10
pH 10
Tecnologa de SeParacin de PPTidoS
[ ] 20
Las columnas con tecnologa de separacin de pptidos de Waters incorporan partculas con tecnologa BEH. Estn
especialmente testadas con un mapa de pptidos para garantizar la estabilidad de los mtodos de separacin de pptidos,
as como un comportamiento predecible, con la diversidad de muestras que se encuentran en protemica, caracterizacin de
protenas y sntesis peptdica. Disponibles en tamaos de poro de 130 o de 300 y en tamaos de partcula desde 1,7
m hasta 10 m, ofrecen:

Picos estrechos y simtricos para obtener la mxima resolucin.

Excelente separacin de una amplia diversidad de pptidos.

Excelente forma y retencin de los picos en cido frmico y en cido trifluoroactico, para obtener una
ptima cromatografa.

Transferencia directa de los mtodos desde la tecnologa UPLC de menos de 2 m hasta las separaciones preparatorias por HPLC
Las columnas con tecnologa BEH pueden emplearse para aumentar la resolucin de digestiones peptdicas complejas.
Utilizando las partculas de UPLC BEH de 1,7 m en dimensiones de columna ms largas, el usuario de sistemas
cromatogrficos puede conseguir una resolucin extrema. El poder de resolucin de una columna de LC se puede expresar
por su cociente de longitud a tamao de partcula (l/dp). Las columnas con cocientes l/dp ms elevados ofrecen mayor
eficacia y se utilizan para las separaciones ms difciles. Un ejemplo seran las columnas ACQUITY UPLC BEH con
tecnologa de separacin de pptidos, que estn disponibles con una longitud de 150 mm. Su cociente l/dp es superior a
88.000 y ofrecen eficacias de > 35.000 placas por separacin.

MAPA PEPT DI CO DE MAYOR RESOLUCI N CON UPLC

Se muestra arriba la resolucin de una mezcla peptdica compleja de una digestin proteica con fosforilasa b. En
comparacin con el uso de tecnologa tradicional de HPLC, se obtiene mejor resolucin de los componentes en un
sistema ACQUITY UPLC de Waters, utilizando columnas con tecnologa de separacin de pptidos de Waters, que
contienen partculas BEH de 1,7 m.
30 40 50 60 70 80 90 min
30 40 50 60 70 80 90 min
HPLC
Capacidad de picos = 372
UPLC
Capacidad de picos = 723
Tecnologa de SeParacin de oligonUcleTidoS
[ ] 21
Las columnas con tecnologa de separacin de oligonucletidos (OST, siglas inglesas) de Waters utilizan la tecnologa BEH
de partculas hbridas, y estn disponibles en formatos de partculas de 1,7 m para UPLC y de 2,5 m para HPLC. Esto
proporciona la flexibilidad necesaria para cubrir una amplia diversidad de necesidades analticas y de purificacin, sin dejar
de ofrecer una excepcional resolucin y vida til de la columna.
La separacin de muestras de oligonucletidos sintticos destritilados se basa en el mtodo convencional de cromatografa de
fase reversa con par inico. Las columnas ACQUITY UPLC OST C18 y XBridge OST C18 son las adecuadas para este tipo de
anlisis y ofrecen:

Una eficacia de separacin equivalente o mejor que la de los mtodos PAGE-CGE o HPLC de intercambio inico.

La capacidad de resolver largas secuencias de oligonucletidos gracias a la mayor potencia de resolucin obtenida empleando
partculas de menos de 3 m.

Una amplia oferta de columnas escalables para cubrir las necesidades de aislamiento de escala en el laboratorio.

Excepcional vida til de la columna para reducir el coste por anlisis.

EXCEPCI ONAL DURACI N DE LAS COLUMNAS
Separacin de una cadena de un 5525mero de oligodesoxitimidina destritilada


Las columnas XBridge OST C
18
son adecuadas para la purificacin de oligonucletidos destritilados, debido a su disponibilidad
en diversos tamaos de columna. El cientfico dedicado a la separacin tiene la posibilidad de seleccionar el tamao de
columna ms adecuado, basndose en la cantidad de muestra de oligonucletido disponible. Esto permite la mxima
resolucin de los componentes y la mxima recuperacin del producto de inters en secuencias fallidas no deseadas.
Gua de seleccin de columnas XBridge OST C
18
para la purificacin de oligonucletidos destritilados.
Columna: XBridge OST C
18
, 2.5 m (2.1 x 50 mm)
Fase mvil: A: 10% de MeOH / 90% de (HFIP 385 mM + TEA 14,3 mM)
B: 25% de MeOH / 75% de (HFIP 385 mM + TEA 14,3 mM)
Temperatura de
la columna TEA: 60 C
Gradiente: 0 100% de B en 30 min (10-25% MeOH).
Caudal: 1.0 mL/min
Deteccin: 260 nm, 5 barridos por segundo
Sistema HPLC: Alliance Bio 2796 de Waters con PDA
Columna (mm) Carga de masas aprox. (moles)** Caudal (mL/min)
2.1 x 50 0.04 0.2
4.6 x 50 0.20 1.0
10.0 x 50 1.00 4.5
19.0 x 50* 4.00 16.0
30.0 x 50* 9.00 40.0
50.0 x 50* 25.00 110.0
* Columna OST especial
** Los valores son solo aproximados y varan en funcin de la longitud del oligonucletido, su composicin de bases
y el mtodo de recogida de fracciones utilizado.
Inyeccin n 4 Inyeccin n 1001
[ ] 22

Anlisis de estatinas
Las estatinas (o inhibidores de la HMG-CoA reductasa) forman una clase de agentes hipolipidemiantes, empleados como
frmacos para reducir los niveles de colesterol en personas que padecen enfermedad cardiovascular o corren riesgo de
padecerla. Reducen el colesterol inhibiendo la enzima HMG-CoA reductasa, que es una enzima limitadora de la velocidad
de la va del mevalonato, implicada en la sntesis del colesterol. La inhibicin de esta enzima en el hgado estimula los
receptores de LDL, ocasionando un aumento del aclaramiento de lipoprotenas de baja densidad (LDL, siglas inglesas) del
torrente circulatorio, y una reduccin de los niveles de colesterol en sangre.
Adems de la actividad liporreductora, las estatinas presentan propiedades ligadas a la prevencin de la ateroesclerosis. Los
investigadores especulan tambin que las estatinas ayudan a prevenir la enfermedad cardiovascular, inhibiendo la formacin
de trombos, estabilizando los niveles de placa, mejorando la funcin endotelial y moderando las respuestas inflamatorias.
Compuestos
1. Pravastatina
2. Atorvastatina
3. Lovastatina
4. Simvastatina
0 1 3 5 7 min
Las columnas XBridge Shield RP18 separan
eficazmente compuestos estrechamente
relacionados, permitiendo su rpida identificacin.
SolUcioneS xBridge: ProdUcToS FarmacUTicoS

Anlisis de cafena y sus metabolitos

La cafena es un estimulante del sistema nervioso central y del metabolismo, y se utiliza tanto en situaciones sociales
como en medicina, para reducir la fatiga fsica y restaurar la alerta mental cuando se produce una debilidad o somnolencia
inusuales. La cafena estimula el sistema nervioso central primero a los niveles superiores, ocasionando un aumento de la
alerta y de la vigilia, un raciocino ms rpido y claro, mayor concentracin y mejor coordinacin corporal general.
Columna: XBridge Phenyl, 4.6 100 mm, 3.5 m
Nmero de referencia: 186003334
Fase mvil A: H
2
O
Fase mvil B: ACN
Fase mvil C: 100 mM NH
4
HCO
3

Caudal: 1.0 mL/min
Gradiente: Tiempo Perl
(min) %A %B %C
0.0 89 1 10
9.00 66 24 10
10.00 89 1 10
20.00 89 1 10
Volumen de inyeccin: 10 L
Muestra: Cafena (10 g/mL), teobromina (10 g/mL),
1-metilxantina (10 g/mL), cido 1,3-dimetilrico
(10 g/mL), 1,7-dimetilxantina
(10 g/mL), cido 1,7-dimetilrico (10 g/mL)
en H
2
O/NH
4
HCO
3
(90/10)
Temp. de la columna: 30 C
Temp. de la muestra: 15 C
Deteccin: UV @ 280 nm
Velocidad de adquisicin: 5 puntos/s
Respuesta del ltro: 0.2
Instrumento: Waters Alliance 2695 con PDA 2998
Las columnas XBridge Fenilo ofrecen una
separacin rpida y consistente para el anlisis
de la cafena y sus metabolitos.
Compuestos
1. cido 1,7-dimetilrico
2. 1-metilxantina
3. cido 1,3-dimetilrico
4. 1,7-dimetilxantina
5. Teobromina
6. Cafena
0 2 4 6 8 min
Columna: XBridge Shield RP18, 4.6 x 50 mm, 3.5 m
Nmero de referencia: 186003042
Fase mvil A: H2O
Fase mvil B: ACN
Fase mvil C: NH
4
HCO
3
100 mM, pH 10
Caudal: 1.2 mL/min
Volumen de inyeccin: 20 L
Concentracin y diluyente
de la muestra: 10 g/mL en H
2
O
Temperatura: 30 C
Deteccin: UV @ 248
Velocidad de adquisicin: 5 puntos/segundo
Filtro respuesta: 1.0
Lavado de la aguja: 5/95 MeOH/H
2
O
Instrumento: Waters Alliance 2695 con PDA 2996
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
SolUcioneS xBridge: SegUridad alimenTaria
[ ] 23
Para obtener notas de aplicacin adicionales del XBridge, visitar www.waters.com/xbridge
Literature Reference

Anlisis de aditivos y conservantes alimentarios

La sacarina es un edulcorante artificial. El cido 4-hidroxibenzoico es conocido principalmente como la base para la
preparacin de sus steres, llamados parabenos, que se utilizan como conservantes. El cido deshidroactico, el metil
parabeno y el cido srbico son conservantes empleados en cosmticos y alimentos.

La columna XBridge Fenilo permiti una rpida
cuantificacin de los compuestos de inters.

Anlisis de patulina en zumo de manzana

La patulina es una micotoxina producida por varias especies de mohos, que puede aparecer en diversos alimentos,
incluyendo cereales, frutas y quesos. De los hongos capaces de producir patulina, Penicillum expansum es el ms comn y
se asla con frecuencia en manzanas podridas. Debido a su toxicidad, diversos organismos reguladores han establecido una
ingesta mxima diaria de patulina, siendo la inquietud principal el consumo de zumo de manzana por los nios.

En este mtodo, la patulina se puede resolver
completamente del hidroximetilfurfural, un
compuesto interferente comn.


Los datos han sido ofrecidos por cortesa del Dr. Vural Gkmen, Departamento de Ingeniera Alimentaria, Universidad Hacettepe, Ankara, Turqua.
3 4 5 6 min
Columna: XBridge C
18
, 4.6 x 100 mm, 3.5 m
Nmero de referencia: 186003033
Fase mvil: HCOOH:ACN (95:5, v/v) al 0,1%
Caudal: 0,75 mL/min
Temperatura: 25 C
Deteccin: 276 nm
1 2 3 4 5 6 min
Compuestos
1. Sacarina
2. cido 4-hidroxibenzoico
3. cido srbico
4. Metilparabeno
5. cido deshidroactico
Columna: XBridge Phenyl, 4.6 100 mm, 3.5 m
Nmero de referencia: 186003334
Fase mvil A: KH
2
PO
4
20 mM, pH 2,5
Fase mvil B: ACN
Caudal: 1.0 mL/min
Isocratic Mobile
Composicin de la fase
mvil isocrtica: 75%A; 25%B
Volumen de inyeccin: 10 L
Muestra: Sacarina (100 g/mL), cido 4-hidroxibenzoico
(10 g/mL), cido deshidroactico
(100 g/mL), metilparabeno (25 g/mL),
cido srbico (10 g/mL)
en KH
2
PO
4
/ACN (75/25)
Temperatura de la columna: 30 C
Temperatura de la muestra: 15 C
Deteccin: UV @ 240 nm
Velocidad de adquisicin: 5 puntos/s
Filtro respuesta: 0.2
IInstrumento: Waters Alliance 2695 con PDA 2996
1
2
1
2
3
4
5
Compuestos
1. Hidroximetilfurfural
2. Patulina
SolUcioneS xBridge: medioamBienTaleS
[ ] 24

Anlisis de derivatizados con DNPH

Los organismos reguladores de todo el mundo estn interesados en medir el formaldehdo y otros aldehdos en el aire.
Muchos grupos dedicados a la salud pblica estn interesados en la implicacin de estos aldehdos en la irritacin
respiratoria y sus posibles efectos cancergenos con una exposicin prolongada. Los fabricantes de productos que pueden
contribuir a las emisiones de aldehdos al aire, as como contaminantes en interiores, son los fabricantes de materiales de
construccin y productos de madera, tejidos y textiles, y empresas de automocin.
1 3 5 7 min
Las columnas XBridge C
18
separan rpidamente
los compuestos de inters para su cuantificacin.
Columna: XBridge Phenyl, 3.5 m, 4.6 100 mm
Nmero de referencia: 186003334
Fase mvil A: H
2
O
Fase mvil B: ACN
Fase mvil C: HCOOH al 0,2% en H
2
O
Caudal: 1.2 mL/min
Gradiente: Tiempo Perl (min)
(min) %A %B %C
0.0 40 50 10
2.67 40 50 10
6.67 0 90 10
7.33 40 50 10
11.00 40 50 10
Volumen de inyeccin: 10 L
Muestra: Acetaldehdo-DNPH (10 g/mL),
acetona-DNPH (10 g/mL), ciclohexanona-DNPH
(10 g/mL), formaldehdo-DNPH (10 g/mL),
crotonaldehdo-DNPH (10 g/mL) en
H
2
O/ACN (60/40)
Temperatura de la columna: 30 C
Temperatura de la muestra: 15 C
Deteccin: UV @ 254 nm
Velocidad de adquisicin: 5 puntos/s
Filtro respuesta: 0.2
Instrumento: Waters Alliance 2695 con PDA 2996
Compuestos
1. Formaldehdo-DNPH
2. Acetaldehdo-DNPH
3. Acetona-DNPH
4. Crotonaldehdo-DNPH
5. Ciclohexanona-DNPH
1 2
3
4
5

Anlisis de explosivos
El mtodo EPA 8330 describe el uso de la cromatografa lquida de alto rendimiento (HPLC) con deteccin ultravioleta (UV)
para el anlisis de muestras que contienen, o se sospecha que contienen, compuestos explosivos. El mtodo 8330 permite la
deteccin de explosivos en partes por mil millones (ppb, siglas inglesas) en tierra, agua y sedimentos.

2 6 10 14 18 22 min
Columna: XBridge Phenyl, 2.1 x 150 mm, 3.5 m
Nmero de referencia: 186003324
Fase mvil: Formiato amnico 10 mM/isopropanol
Caudal: 0.25 mL/min
Inyeccin: 10 L
Temperatura: 40 C
Deteccin UV @ 254 nm
Sistema: Sistema Alliance HPLC de Waters con detector de
absorbancia 2487 doble .
Compuestos
1. HMX
2. RDX
3. 1,3,5-trinitrobenceno
4. 1,3 dinitrobenceno
5. Nitrobenceno
6. TNT
7. Tetrilo
8. 2 amino-4,6 dinitrotolueno
9. 2,4 dinitrotolueno
10. 4 amino-2,6 dinitrotolueno
11. 2,6 dinitrotolueno
12. 4-nitrotolueno
13. 2-nitrotolueno
14. 3-nitrotolueno


Las columnas XBridge Fenilo separaron con
precisin 14 compuestos explosivos en muestras
de inters.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13 14
SolUcioneS xBridge: medioamBienTaleS
[ ] 25
Para obtener notas de aplicacin adicionales del XBridge, visitar www.waters.com/xbridge
Referencia bibliogrfica

Anlisis de aldehdos y cetonas como derivados de la DNPH

Los mtodos EPA T011, 554 y 8315 describen el uso de la cromatografa lquida de alto rendimiento (HPLC) con deteccin ultravioleta (UV) para
la identificacin de aldehdos y cetonas, como derivados de la dinitrofenil hidracina (DNPH) en el agua potable (554); tierra, aire, agua, desechos
o chimeneas obtenidos por el mtodo 0011 (8315 opcin 1) al aire libre (T011), y muestras obtenidas en aire de interiores por el mtodo 0100
(8315 opcin 2). Los mtodos EPA 554 y 8315 opcin 1 estn dirigidos a los mismos 12 compuestos. Igualmente, los mtodos EPA T011 y
8315 opcin 2 estn dirigidos a los mismos 15 compuestos. Varios analitos son comunes a los cuatro mtodos.

En combinacin con estos mtodos EPA, las columnas XBridge Fenilo
facilitaron la identificacin efectiva de derivados de la DNPH en muestras
medioambientales.
Columna: XBridge Phenyl, 4.6 x 150 mm, 3.5 m
Nmero de referencia: 186003335
Fase mvil: Agua/tetrahidrofurano/acetonitrilo
Caudal: 1.5 mL/min
Inyeccin: 20 L cada uno de mezcla AccuStandard
(M-8315-R1-DNPH y M-8315-R2-DNPH)
diluida 1:5 en agua/acetonitrilo 40:60.
Temperatura: 35 C
Deteccin: UV @ 360 nm
Sistema: Sistema Alliance HPLC de Waters con deteccin UV.
Derivados DNPH de
1. Formaldehdo
2. Acetaldehdo
3. Propanal
4. Crotonaldehdo
5. Butanal
6. Ciclohexanona
7. Pentanal
8. Hexanal
9. Heptanal
10. Octanal
11. Nonanal
12. Decanal
Derivados DNPH de
1. Formaldehdo
2. Acetaldehdo
3. Acetona
4. Acrolena
5. Propanal
6. Crotonaldehdo
7. Butanal
8. Benzaldehdo
9. Isovaleraldehdo
10. Pentanal
11. o-tolualdehdo
12. p-tolualdehdo
13. m-tolualdehdo
14. Hexanal
15. 2-5 dimetilbenzaldehdo
4 8 6 12 10 16 14 18 20 22 min
4 8 6 12 10 16 14 18 20 min
1
1 2
3
4
5
6
7
8 9
10
11
12
13
14
15
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
inFormacin Para PedidoS
[ ] 26
Columnas analticas XBridge
Dimensiones Tipo Tamao de las
partculas
C
18
C
8
Shield RP18 Fenilo HILIC
1.0 x 50 mm Columna 2.5 m 186003118 186003164 186003136 186003306

2.1 x 10 mm Precolumna 2.5 m 186003056

1
186003074
1
186003065
1
186003359
1
186004455
2.1 x 20 mm IS

Columna 2.5 m 186003201 186003167 186003139 186003307

2.1 x 30 mm Columna 2.5 m 186003084 186003099 186003091 186003308 186004456

2.1 x 50 mm Columna 2.5 m 186003085 186003101 186003092 186003309 186004457
3.0 x 20 mm IS Columna 2.5 m 186003087 186003168 186003140 186003310
3.0 x 20 mm Precolumna 2.5 m 186003057
2
186003075
2
186003066
2
186003360
2

3.0 x 30 mm Columna 2.5 m 186003121 186003169 186003141 186003311

3.0 x 50 mm Columna 2.5 m 186003122 186003170 186003142 186003312 186004458
4.6 x 20 mm IS Columna 2.5 m 186003088 186003172 186003144 186003313
4.6 x 20 mm Precolumna 2.5 m 186003058
2
186003076
2
186003067
2
186003361
2
186004459
4.6 x 30 mm Columna 2.5 m 186003089 186003173 186003145 186003314
4.6 x 50 mm Columna 2.5 m 186003090 186003174 186003096 186003315 186004460
4.6 x 75 mm Columna 2.5 m 186003124 186003175 186003146 186003316 186004461
1.0 x 50 mm Columna 3.5 m 186003126 186003177 186003148 186003317 186004429
1.0 x 100 mm Columna 3.5 m 186003127 186003178 186003149 186003318
1.0 x 150 mm Columna 3.5 m 186003128 186003179 186003150 186003319
2.1 x 10 mm Precolumna 3.5 m 186003059
1
186003077
1
186003068
1
186003362
1
186004430
2.1 x 20 mm IS Columna 3.5 m 186003019 186003180 186003151 186003320
2.1 x 30 mm Columna 3.5 m 186003020 186003046 186003035 186003321 186004431
2.1 x 50 mm Columna 3.5 m 186003021 186003047 186003036 186003322 186004432
2.1 x 100 mm Columna 3.5 m 186003022 186003048 186003037 186003323 186004433
2.1 x 150 mm Columna 3.5 m 186003023 186003049 186003038 186003324 186004434
3.0 x 20 mm IS Columna 3.5 m 186003024 186003181 186003152 186003325
3.0 x 20 mm Precolumna 3.5 m 186003060
2
186003078
2
186003069
2
186003363
2

3.0 x 30 mm Columna 3.5 m 186003025 186003182 186003153 186003326

3.0 x 50 mm Columna 3.5 m 186003026 186003050 186003039 186003327 186004435
3.0 x 100 mm Columna 3.5 m 186003027 186003051 186003040 186003328 186004436
3.0 x 150 mm Columna 3.5 m 186003028 186003052 186003041 186003329
4.6 x 20 mm IS Columna 3.5 m 186003029 186003183 186003154 186003330
4.6 x 20 mm Precolumna 3.5 m 186003061
2
186003079
2
186003070
2
186003364
2
186004437
4.6 x 30 mm Columna 3.5 m 186003030 186003184 186003155 186003331 186004438
4.6 x 50 mm Columna 3.5 m 186003031 186003053 186003042 186003332 186004439
4.6 x 75 mm Columna 3.5 m 186003032 186003185 186003043 186003333
4.6 x 100 mm Columna 3.5 m 186003033 186003054 186003044 186003334 186004440
4.6 x 150 mm Columna 3.5 m 186003034 186003055 186003045 186003335 186004441
4.6 x 250 mm Columna 3.5 m 186003943 186003963 186003964 186003965
2.1 x 10 mm Precolumna 5 m 186003062
1
186003080
1
186003071
1
186003366
1
186004442
2.1 x 20 mm IS Columna 5 m 186003107 186003186 186003156 186003336
2.1 x 30 mm Columna 5 m 186003129 186003187 186003157 186003337 186004443
2.1 x 50 mm Columna 5 m 186003108 186003011 186002999 186003338 186004444
2.1 x 100 mm Columna 5 m 186003109 186003012 186003002 186003339 186004445
2.1 x 150 mm Columna 5 m 186003110 186003013 186003003 186003340 186004446
3.0 x 20 mm IS Columna 5 m 186003130 186003188 186003158 186003341
3.0 x 20 mm Precolumna 5 m 186003063
2
186003081
2
186003072
2
186003367
2

3.0 x 30 mm Columna 5 m 186003111 186003189 186003159 186003342

3.0 x 50 mm Columna 5 m 186003131 186003190 186003160 186003343 186004447
3.0 x 100 mm Columna 5 m 186003132 186003191 186003004 186003344 186004448
3.0 x 150 mm Columna 5 m 186003112 186003014 186003005 186003345
3.0 x 250 mm Columna 5 m 186003133 186003192 186003161 186003346
4.6 x 20 mm IS Columna 5 m 186003134 186003193 186003162 186003347
4.6 x 20 mm Precolumna 5 m 186003064
2
186003082
2
186003073
2
186003368
2
186004449
4.6 x 30 mm Columna 5 m 186003135 186003194 186003163 186003348 186004450
4.6 x 50 mm Columna 5 m 186003113 186003015 186003006 186003349 186004451
4.6 x 75 mm Columna 5 m 186003114 186003195 186003007 186003350
4.6 x 100 mm Columna 5 m 186003115 186003016 186003008 186003351 186004452
4.6 x 150 mm Columna 5 m 186003116 186003017 186003009 186003352 186004453
4.6 x 250 mm Columna 5 m 186003117 186003018 186003010 186003353 186004454
Pedidos en lnea en www.waters.com
ordering inFormaTon
[ ] 27
XBridge Preparative Columns
Dimensiones Tipo Tamao de las
partculas
C
18
C
8
Shield RP18 Fenilo
2.1 x 100 mm MVKit 3.5 m 186003766 186003777 186003788 186003799
3.0 x 100 mm MVKit 3.5 m 186003767 186003778 186003789 186003800
3.0 x 150 mm MVKit 3.5 m 186003768 186003779 186003790 186003801
4.6 x 100 mm MVKit 3.5 m 186003769 186003780 186003791 186003802
4.6 x 150 mm MVKit 3.5 m 186003770 186003781 186003792 186003803
2.1 x 150 mm MVKit 5 m 186003771 186003782 186003793 186003804
3.0 x 100 mm MVKit 5 m 186003772 186003783 186003794 186003805
3.0 x 150 mm MVKit 5 m 186003773 186003784 186003795 186003806
4.6 x 100 mm MVKit 5 m 186003774 186003785 186003796 186003807
4.6 x 150 mm MVKit 5 m 186003775 186003786 186003797 186003808
4.6 x 250 mm MVKit 5 m 186003776 186003787 186003798 186003809
XBridge Column Method Validation Kits
1
Requiere soporte universal para precolumnas Sentry: 2,1 x 10 mm WAT097958
2
Requiere soporte universal para precolumnas Sentry: 3,0 x 20 mm/4,6 x 20 mm WAT046910
3
Requiere soporte para precolumnas preparativas de 10 x 10 mm 289000779
4
Requiere soporte para precolumnas preparativas de 19 x 10 mm 186000709
Para obtener informacin acerca
de pedidos de columnas ACQUITY
UPLC, visite:
www.waters.com/acquitycolumns
Para obtener informacin acerca
de pedidos para bioseparacin y
anlisis, visite:
www.waters.com/biosep
Dimensiones Tipo Tamao de las partculas C
18
C
8
Shield RP18 Fenilo
10 x 10 mm PreColumnaa 5 m 186002972
1
186002991
1
186002983
1
186003354
1
10 x 50 mm Columna 5 m 186002973 186003264 186003257 186003271
10 x 100 mm Columna 5 m 186003255 186003265 186003258 186003272
10 x 150 mm Columna 5 m 186002974 186003266 186003259 186003273
10 x 250 mm Columna 5 m 186003256 186003267 186003260 186003274
19 x 10 mm PreColumnaa 5 m 186002975
2
186002992
2
186002984
2
186003355
2
OBD 19 x 30 mm Columna 5 m 186002976 186003268 186003261 186003275
OBD 19 x 50 mm Columna 5 m 186002977 186002993 186002985 186003356
OBD 19 x 100 mm Columna 5 m 186002978 186002994 186002986 186003357
OBD 19 x 150 mm Columna 5 m 186002979 186002995 186002987 186003358
OBD 19 x 250 mm Columna 5 m 186004021 186004023 186004022 186004024
OBD 30 x 50 mm Columna 5 m 186002980 186002996 186002988 186003277
OBD 30 x 75 mm Columna 5 m 186002981 186003269 186003262 186003278
OBD 30 x 100 mm Columna 5 m 186002982 186002997 186002989 186003279
OBD 30 x 150 mm Columna 5 m 186003284 186003083 186002990 186003276
OBD 30 x 150 mm Columna 5 m 186004025
OBD 50 x 50 mm Columna 5 m 186003933 186003934 186003935 186003936
OBD 50 x 100 mm Columna 5 m 186003937 186003938 186003939 186003940
OBD 50 x 150 mm Columna 5 m 186003929
OBD 50 x 250 mm Columna 5 m 186004107
10 x 10 mm PreColumnaa 10 m 186003889
3
186004003
3
186003988
3

10 x 150 mm Columna 10 m 186003890 186004004 186003989

10 x 250 mm Columna 10 m 186003891 186004005 186003990
OBD 19 x 10 mm PreColumnaa 10 m 186003892
4
186004006
4
186003991
4

OBD 19 x 50 mm Columna 10 m 186003893 186004007 186003992

OBD 19 x 100 mm Columna 10 m 186003901 186004008 186003993
OBD 19 x 150 mm Columna 10 m 186003894 186004009 186003994
OBD 19 x 250 mm Columna 10 m 186003895 186004010 186003995
OBD 30 x 100 mm Columna 10 m 186003930
OBD 30 x 150 mm Columna 10 m 186003896 186004011 186003996
OBD 30 x 250 mm Columna 10 m 186003897 186004012 186003997
OBD 50 x 50 mm Columna 10 m 186003898 186004013 186003998
OBD 50 x 100 mm Columna 10 m 186003902 186004014 186003999
OBD 50 x 150 mm Columna 10 m 186003899 186004015 186004001
OBD 50 x 250 mm Columna 10 m 186003900 186004016 186004002
Austria y exportacin europea (Europa cen-
tral sudoriental, CEI y Oriente Medio)
43 1 877 18 07
Australia 61 2 9933 1777
Blgica 32 2 726 1000
Brasil 55 11 5094-3788
Canad 1 800 252 4752 x2205
China 86 10 8586 8899
CEI/Rusia +7 495 3367000
Repblica Checa 420 2 617 1 1384
Dinamarca 45 46 59 8080
Finlandia 09 5659 6288
Francia 33 1 30 48 72 00
Alemania 49 6196 400600
Hong Kong 852 29 64 1800
Hungra 36 1 350 5086
India y subcontinente indio
91 80 2837 1900
Irlanda 353 1 448 1500
Italia 39 02 27 421 1
Japn 81 3 3471 7191
Corea 82 2 820 2700
Mxico 52 55 5200 1860
Pases Bajos 31 76 508 7200
Noruega 47 6 384 60 50
Polonia 48 22 833 4400
Puerto Rico 1 787 747 8445
Singapur 65 6273 1221
Espaa 34 93 600 9300
Suecia 46 8 555 11 500
Suiza 41 56 676 70 00
Taiwn 886 2 2543 1898
Reino Unido 44 208 238 6100
Todos los dems pases: Waters
Corporation EE.UU.
1 508 478 2000 1 800 252 4752
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720001255ES abril de 2008 SC-WP
El sistema de gestin de calidad de las instalaciones de fabricacin de Waters
en Taunton, Massachusetts y en Wexford, Irlanda, cumple los estndares
de gestin de calidad y garanta de calidad de la norma internacional ISO
9001:2000. El sistema de gestin de calidad de Waters es auditado peridi-
camente por el organismo de registro para garantizar su cumplimiento.