CLCULOS Recuento total de unidades formadoras de colonias:

Ecuacin: Recuento total= #UFC * Inverso de la dilucin * Factor de correccin FACTOR DE CORRECCIN: ml o g que se tom para la siembra se multiplica por un factor para que este se convierta en 1, el factor ser el nmero que se tom para convertir el valor en 1. En este caso se tom 0.1 ml para la siembra; para que este se convirtiera en 1 se multiplico por 10, por este motivo el factor de correccin es 10. 1. 10 -7 R= 61 * 107 * 10 = 61 x 108 2. 10-6 R= 62 * 106 * 10 = 62 x 107 3. 10-5 R= 128 * 105 * 10 = 13 x 107 Recuento de microorganismos celulticos

Ecuacin: Recuento total= # De colonias que se encuentra en los halos * Inverso de la dilucin * Factor de correccin 1. 10 -7 R= 14 * 107 * 10 = 14 x 108 2. 10-6 R= 58 * 106 * 10 = 58 x 107 3. 10-5 R= 107 * 105 * 10 = 11 x 107 Porcentaje de recuperacin de microorganismos celulticos

Ecuacin: % Recuperacin=

* 100

1. 10 -7 %R= 2. 10-6 3. 10-5 %R= %R=

* 100 = 22.95 % * 100 = 93.55 % * 100 = 83.59 %

Preparacin de 6 Agares Se realizaron clculos para la preparacin de un medio de cultivo de carboxilmetilcelulosa para 6 cajas de Petri en 15 mL de agua destilada. Componentes del agar celulosa 1. Carboxilmetilcelulosa : 10 g/L composicin * 0.015L de agua destilada= 0.15g * 6 cajas de Petri= 0.9 g 2. Extracto de Levadura: 2.5 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6 = 0.225 g 3. Peptona Universal: 2.5 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6 = 0.225 g 4. Sulfato de Amonio: 0.5 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6= 0.045 g 5. Fosfato Monobsico K: 0.1 g/L * 0.015L = 1.5x10-3g * 6= 9x10-3 g 6. Fosfato Dibsico de Potasio: 0.1 g/L * 0.015L= 1.5x10-3g * 6 =9x10-3g 7. Cloruro de Calcio : 0.5 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6 = 0.045 g 8. Agar Agar: 15 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6 =1.35 g

Componentes del agar sustrato 1. Licuado de Hierbabuena : 10 g/L composicin* 0.015L de agua destilada = 0.15g * 6 cajas de Petri = 0.9 g 2. Extracto de Levadura: 2.5 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6 = 0.225 g 3. Peptona Universal: 2.5 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6 = 0.225 g 4. Sulfato de Amonio: 0.5 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6= 0.045 g 5. Fosfato Monobsico K: 0.1 g/L * 0.015L = 1.5x10-3g * 6= 9x10-3 g 6. Fosfato Dibsico de Potasio: 0.1 g/L * 0.015L= 1.5x10-3g * 6 =9x10-3g 7. Cloruro de Calcio : 0.5 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6 = 0.045 g 8. Agar Agar: 15 g/L * 0.015L = 0.0375g * 6 =1.35 g Preparacin Agua peptonada para diluciones en base 10-1, 10-2, 10-3 Se realiz la preparacin de 110 ml de agua peptonada para realizar las dilucin puesto que en el frasco de jugo hit se incorporan 90 mL de agua y en los dos tubos de ensayo se adicionan 9 mL a cada tubo tapa rosca, esto nos da como resultado 108 mL pero se aproxim a 110mL

1. Peptona: 0.1% P/V 0.1g de peptona/ 100mL de agua * 110mL de agua destilada = 0.11 g 2. Cloruro de sodio (NaCl): 0.05% P/V 0.05g de NaCl / 100mL de agua * 110mL de agua destilada = 0.055g Preparacin de 4 agares Se realizaron clculos para la preparacin de un medio de cultivo de carboxilmetilcelulosa para 4 cajas de Petri en 20 mL de agua destilada, para realizar siembra de diluciones menos concentradas. Componentes del agar celulosa 1. Carboxilmetilcelulosa : 10 g/L composicin * 0.020L de agua destilada= 0.20g * 4 cajas de Petri= 0.8 g 2. Extracto de Levadura: 2.5 g/L * 0.020L = 0.05g * 4 = 0.2 g 3. Peptona Universal: 2.5 g/L * 0.020L = 0.05g * 4 = 0.2 g 4. Sulfato de Amonio: 0.5 g/L * 0.020L = 0.01g * 4= 0.04 g 5. Fosfato Monobsico K: 0.1 g/L * 0.020L = 2x10-3g * 4= 8x10-3 g 6. Fosfato Dibsico de Potasio: : 0.1 g/L * 0.020L = 2x10-3g * 4= 8x10-3g 7. Cloruro de Calcio : 0.5 g/L * 0.020L = 0.0375g * 4 = 0.045 g 8. Agar Agar: 15 g/L * 0.020L = 0.0375g * 4 =1.35 g Preparacin Agua peptonada para diluciones en base 10-1, 10-2, 10-3,104 , 10-5, 10-6,10-7 Se realiz la preparacin de 144 mL de agua peptonada para realizar las dilucin puesto que en el frasco de jugo hit se incorporan 90 mL de agua y en los 6 tubos de ensayo se adicionan 9 mL a cada tubo tapa rosca. 3. Peptona: 0.1% P/V 0.1g de peptona/ 100mL de agua * 144mL de agua destilada = 0.144 g 4. Cloruro de sodio (NaCl): 0.85% P/V 0.85g de NaCl / 100mL de agua * 144mL de agua destilada =1.224g

Preparacin de rojo congo Se prepararon 100 ml de solucin de rojo congo para todo el grupo, el rojo congo se encontraba al 1% Rojo Congo al 1%

Preparacin de Solucin de NaCl Se preparacin 200 ml de solucin de NaCl para todo el grupo al 2M.

2n/L * 0.2L= 0.4n NaCl

4. Resultados

5.1 Alistamiento de material y medios de cultivo (agar celulosa con 15 ml)

REACTIVO O MEDIO DE CULTIVO Carboxilmetilcelulosa Extracto de levadura Peptona Universal Sulfato de Amonio Fosfato Monobsico Fosfato Dibsico de Potasio Cloruro de Calcio Agar Agar

GRAMOS 0.9 g 0.225 g 0.225 g 0.045 g 9 x 10-3 g 9 x 10-3 g 0.045 g 1.35 g

VOLUMEN A PREPARAR 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL

5.2 Alistamiento de material y medios de cultivo (agar sustrato con 15 ml) REACTIVO O MEDIO DE CULTIVO Hierbabuena licuada Extracto de levadura Peptona Universal Sulfato de Amonio Fosfato Monobsico Fosfato Dibsico de Potasio Cloruro de Calcio Agar Agar GRAMOS 0.9 g 0.225 g 0.225 g 0.045 g 9 x 10-3 g 9 x 10-3 g 0.045 g 1.35 g VOLUMEN A PREPARAR 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL 15 mL

5.3 Alistamiento de material y medios de cultivo (agar celulosa 20 ml) REACTIVO O MEDIO DE CULTIVO Carboxilmetilcelulosa Extracto de levadura Peptona Universal Sulfato de Amonio Fosfato Monobsico Fosfato Dibsico de Potasio Cloruro de Calcio Agar Agar GRAMOS 0.9 g 0.225 g 0.225 g 0.045 g 9 x 10-3 g 9 x 10-3 g 0.045 g 1.35 g VOLUMEN A PREPARAR 20 mL 20 mL 20 mL 20 mL 20 mL 20 mL 20 mL 20 mL

5.4 Recuento y porcentaje de recuperacin COLUMNA DE DILUCIN 10-7 10-6 10-5 RECUENTO TOTAL UFC/G 61 62 128 RECUENTO DE % MICROORGANISMOS RECUPERACIN CELULTICOS 14 % 22.95 58 % 93.55 107 % 83.59

MATERIALES Frasco Shot 250 mL Pipeta graduada 1 mL Pipeta graduada 10 mL Cajas de Petri Frasco de jugo hit Tubos tapa rosca Erlenmeyer 250 Agitador de vidrio Esptula Vidrio de reloj Asa redonda Esptula de vidrio pipeteador Papel craf Papel aluminio Vinilpel

CANTIDAD UTILIZADA 1 1 1 10 1 8 2 1 1 1 1 1 1

REACTIVO Peptona Cloruro de Sodio

GRAMOS 0.11 g 0.055 g

VOLUMEN A PREPARAR 110 mL 110 mL

REACTIVO Peptona Cloruro de Sodio

GRAMOS 0.144 g 1.224 g

VOLUMEN A PREPARAR 144 mL 144 mL