Mejoramiento Gentico de la Stevia en Paraguay; Avances y Logros en el pas de origen.

Ing. Agr. M. Sc. Edgar lvarez. Gerente de Investigacin y Desarrollo PureCircle South Amrica S.A.

Stevia rebaudiana (Bert.) Bertoni

Moiss Bertoni, en 1905, resumi su estudio sistemtico sobre la stevia: Pequea hierva de 40 a 80 cm de altura, generalmente 50 cm, con races vivaces, tallo sub leoso, pubescente, dbil y con pocas ramificaciones terminales coronadas por panculas, formadas por pequeos corimbos, teniendo 2 a 6 flores pequeas con corola de lbulos blancos, alargados y abiertos. Familia : Asteraceae ( Compositae) Serie : Multiaristatae Existen en el Paraguay 14 especies, de las que merecen ser destacadas : S. rebaudiana y la S. aristata que tambin presentan principios edulcorantes.

Mato Grosso do Sul

Ocurren espontneamente en la regin de la Sierra del Amambay en el Departamento del Amambay

Paran

LA STEVIA ES UN SUB ARBUSTO CON PROPIEDADES EDULCORANTES EN SUS HOJAS, DEBIDO A LA PRESENCIA DE GLICOSIDOS DITERPENICOS (Estevioles Glicoles)CON PODER ENDULZANTE MUY SUPERIOR A LA SACAROZA.

Estevioles glicoles del kaa he

OR1

COOR

Glicosdeos Steviosideo Steviolbiosideo Rebaudiosideo-A

R -Glc H -Glc

R1 -Glc2 -Glc1 -Glc2 -Glc1 -Glc2 -Glc1 3 -Glc -Glc2 -Glc1 3 -Glc -Glc2-Rha1 3 -Glc -Glc2 -Glc1 3 -Glc -Glc2 -Glc1 -Glc2-Rha1 -Glc2 -Xyl1 3 -Glc Xyl = xilose

Isolado por / ano Briedel e Lavieille / 1931 Kohda et. al. / 1976 Kohda et. al. / 1976

Rebaudiosideo-B

Kohda et. al. / 1976

Rebaudiosideo-C

-Glc

Sakamoto et. al. / 1977

Rebaudiosideo-D

-Glc2 -Glc1

Sakamoto et. al. / 1977

Rebaudiosideo-E Dulcosideo Rebaudiosideo-F

-Glc2 -Glc1 -Glc -Glc

Sakamoto et. al. / 1977 Kobayashi et. al./ 1977 Brandle et. al. / 2002

Glc = glucose

Rha = raminose

UTILIZACION EN LA INDUSTRIA ALIMENTICIA:

Bebidas carbonatadas, jugos concentrados, aguas saborizadas, lcteos, postres, galletitas, etc., etc.

REBAUDIOSIDO A DE PURE CIRCLE EN PRODUCTOS = Agregado

Valor

Pepsi Cola

Merisant

Cargill Coca Cola

DESARROLLO VARIEDADES MEJORADAS DE STEVIA

Que tipo de variedad? : Variedades Clonales

Que mejorar de la stevia?
1.Caractersticas Agronmicas:
1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 Rendimiento Capacidad de adaptacin a diferentes ambientes Diferentes ciclos Longevidad Capacidad de rebrote despus de cada corte Resistencia a enfermedades

2. Caracterstica Industrial
2.1 Alto Rebaudiosido A 2.2 Bajo Steviosido 2.3 Bajo Rebaudiosido C

QUE SE DEBE CONOCER DE LA STEVIA PARA DESARROLLAR NUEVAS VARIEDADES ?

1. BIOLOGIA DE LA REPRODUCCION

2. VARIABILIDAD GENETICA. IDENTIFICACION DE GENOTIPOS DESEABLES

3. HERENCIA DE CARACTERISTICAS QUE SE QUIERE MEJORAR

4. NUMERO DE CROMOSOMAS DE LA ESPECIE: Especie diploide . 2n = 22 cromosomas

1. BIOLOGIA DE LA REPRODUCCION
1.1 Alogama: es un tipo de reproduccin sexual en plantas consistente en la polinizacin
cruzada y fecundacin entre individuos genticamente diferentes.

Implicancia en el Mejoramiento Gentico: Este tipo de reproduccin favorece la produccin de individuos genticamente nuevos y, por ende, la generacin constante de variabilidad gentica en las poblaciones. Las plantas son altamente heterocigticas.

1.2 Auto incompatible: Imposibilidad fisiolgica controlada genticamente de producir frutos

por autofecundacin. Incompatibilidad es del tipo esporofitico, adems de exhibir protandria Implicancia en el Mejoramiento Gentico: la imposibilidad de generar lneas puras por autofecundacin. Para la produccin de hbridos es necesarios explorar otros caminos.

1.3 Apomiticas obligatorias: formacin de embriones pseudoagamicos por efecto de la

polinizacin cruzada, sin fertilizacin y sin meiosis. Una planta apomctica produce semillas que son genticamente idnticas a la planta madre.

Implicancia en el Mejoramiento Gentico: la apomixis es un modo de reproduccin

asexual, esta ventaja es -desde el punto de vista gentico- la misma que presenta la multiplicacin vegetativa.

2. VARIABILIDAD GENETICA. IDENTIFICACION DE GENOTIPOS DESEABLES

CARACTERISTICAS AMPLITUD PROMEDIO DESVIACION TIPICA

1. Altura de la planta(cm) 2. Copa/Cannopy) (cm) 3. Numero de tallos verticales 4. Dimetro del tallo en la base(cm) 5. Numero de nudos en el tallo 6- Longitud de entrenudos 7. Numero de brotes laterales primarios 8. Numero de brotes laterales secundarios 9. Razn Hojas: Nudo 10. Longitud de hojas(cm) 11. Dimetro de hojas(cm) 12. Espesor de la hoja( en micrones) 13. % de rendimiento de hojas en peso seco(al aire)

31 - 80 18 -64 1 - 25 3.2 - 10.1 6 - 32 1.1 - 6.7 0 - 40 0 - 18 2 20.4 3.7 7.4 1.0 2.9 210 - 460 18.1 36.3

53.7 38.8 10.3 5.2 18.9 3.0 10.6 2.1 9.1 5.6 1.8 292 25.9

11.36 11.20 6.58 1.48 5.57 0.89 8.22 4.17 3.50 0.93 0.54 39.14 3.93

BANCO DE GERMOPLASMA

14. Sensibilidad al fotoperiodo para induccin de floracin(hs)

15. Resistencia a enfermedades foliares( Septoria)

11 - 14
S-R

13
MR

1.5
-

Molero, J. 1984

Lneas clonales resistente(der.) y susceptible (izq.) a septoriosis

3. HERENCIA DE CARACTERISTICAS QUE SE QUIERE MEJORAR

Heredabilidad : es la proporcin de la variacin fenotpica en una poblacin, atribuible a la
variacin genotpica entre individuos. H2 = G = F 0 - 1

Caracterstica

Heredabilidad

poca de floracin Altura de la planta

0.998 0.886

Numero de nudos en el tallo principal Numero de ramas primarias Peso seco de hojas % de Esteviosido

0.958 0.881 0.62 0.94

La proporcin Reb A comparado con el total de otros estevioles glicoles tienen herencia cuantitativa y controlada por genes mltiples.

La Planta ideal de Stevia . Parmetros de Seleccin

CARACTERISTICAS
1. Planta de alta longevidad
2. Altura de la planta - media a mayor 3. Crecimiento multicaule y ramificado desde la base 4. Habito de crecimiento erecto 5. Entrenudos cortos y numerosos 6. Hojas grandes , gruesas y numerosas 7. Relacin alta de HOJA / TALLO 8. Sistema radicular profundo 9. Respuesta rpida y profusa produccin de brotes al podarse o cosecharse 10. Resistencia a enfermedades 11. Florecida tarda Resistente a Septoria y Alternaria. Igual o Mayor a 0.85 Igual o mayor a 30 nudos en el tallo principal

PARAMETROS
Capacidad de producir en alta por mas de 5 aos
Igual a Mayor a 60 cm de altura (evaluado en cosecha de verano) Igual o mayor a 4 brotes basales evaluado despus del corte de uniformizacin

12. Requisito de fotoperiodo largo

13. Desprendimiento fcil de las hojas despus del corte 14. Alto porcentaje de materia seca en hojas 15. Alto contenido de Rebaudisido A 16. Ausencia de sustancia que dan sabor amargo

Igual o mayor a 13 horas luz

Igual o mayor a 70% sobre el total de Stevioles Glicoles evaluado en cosecha de verano Bajo en Reb . C (Igual o menor 0.95 %) y Steviosido (Igual o menor a 5%)

PROGRAMA DE MEJORAMIENTO GENETICO

SELECCIN INDIVIDUAL . Flujograma
Seleccin Individual. Lote de Plantas Var. Criolla

x x x

x x x

x x x

x x x

x x x

x x x

x x x

x x x

Seleccin Individual. Lote de Progenies de Lneas Clonales

x x x x x x x x

Lote de Plantas Seleccionadas . (Platas Distribuidas en Diseo Experimental en Panal de Abejas)

Prueba de Resistencia Septoria

Lab. Anlisis Reb. A

Constitucin de Lneas Clonales (LC). Ensayo preliminar de Rendimiento de LC. (Distribucin Sistemtica de los Tratamientos)

Ensayo Final de Rendimiento (VCU) (Distribucin de los Tratamientos en Diseos Experimentales en 5 localidades por 2 aos )

PROGRAMA DE MEJORAMIENTO GENETICO

SELECCION DENTRO DE PROGENIES DE CRUZAS . Flujograma
Materiales Elite : Lneas Clonales /Variedades

B
Lote/Almacigo de Progenies de Cruzas

x x x

x x x

x x x

x x x

Lote /Plantas Individuales de Progenies de Cruzas Lote de Plantas Seleccionadas . (Platas Distribuidas en Diseo Experimental en Panal de Abejas) Constitucin de Lneas Clonales (LC). Ensayo preliminar de Rendimiento de LC. (Distribucin Sistemtica de los Tratamientos)

x x

x x

x x x x

Prueba de Resistencia Septoria

Lab. Anlisis Reb. A

Ensayo Final de Rendimiento (VCU) (Distribucin de los Tratamientos en Diseos Experimentales en 5 localidades por 2 aos )

CULTIVO DE ANTERAS COMO HERRAMIENTA PARA LA PRODUCCION DE HIBRIDOS

Plantas diploides. 2 n = 22 Heterocigota

EMBRIOGENESIS SOMATICA

Gracia, V. 2008 ( Tesis - IAN)

Plantas haploides. n = 11

VARIEDADES HIBRIDAS Diploides 2 n = 22 VARIEDADES HIBRIDAS Tetraploides 4 n = 44

A x B
Cruzas dirigidas

LINEAS PURAS
Plantas diploides 2 n = 22 Homocigotas Tratamiento con COLCHICINA

VARIEDADES CLONALES. (Registradas)

OBTENTORES DE VARIEDADES
1) INSTITUTO AGRONOMICO NACIONAL 2) PURE CIRCLE SOUTH AMERICA S.A Variedades Obtentor Ao de Registro Ciclo / N0 cortes por ao

EIRETE

IAN - IPTA Pure Circle South America S.A Pure Circle South America S.A Pure Circle South America S.A Pure Circle South America S.A Pure Circle South America S.A

2004 2008 2008 2008 2008 2008

Precoz 4 cortes por ao Tardo .- 2 Cortes por ao Precoz 4 cortes por ao Precoz 4 cortes por ao Precoz 4 cortes por ao Precoz 4 cortes por ao

PC 1 PC 2 PC 4 PC 6 PC 7

Variedades de Pure Circle registrado en la Direccin de Semillas (DISE), del Servicio de Sanidad Vegetal y Calidad de Semillas(SENAVE), sobre la base de descriptores morfolgicos especficos para la especie y complementado por FINGER PRINTING Gentico desarrollado para cada variedad que permite distinguir una variedad de otra, a travs de marcadores moleculares del tipo AFLPS (MSU).

EIRETE
Genealoga : Seleccin en la Variedad Criolla Ciclo : Precoz 4 cortes por ao

Resistencia a Septoria : Moderadamente Resistente Contenido de Reb. A : 45 a 47 % sobre el total de Stevioles Glicoles Brotacin Basal : Buena Potencial de Rendimiento : Alto ( 5.000 kg/ha/ ao) Sistema Radicular : Profundo y abundante Porte de la planta : Planta muy alta

VARIEDAD PC 1

Genealoga : AKH / EM 1 x Eirete Ciclo : Tardo 2 cortes por ao

Resistencia a Septoria : Moderadamente Susceptible

Contenido de Reb. A : 80 a 85 % sobre el total de Stevioles Glicoles ( Extremadamente dulce). Cosecha de Verano Brotacin Basal : Profusa , muy buena Potencial de Rendimiento : Alto ( 5.000 kg/ha/ao) Sistema Radicular : Profunda, abundante

VARIEDAD PC 2

Genealoga : AKH / G.8.D. x Eirete Ciclo : Precoz 4 cortes por ao

Resistencia a Septoria : Moderadamente Resistente

Contenido de Reb. A : 70 a 75% sobre el total de Stevioles Glicoles ( Muy dulce). Cosecha de Verano Brotacin Basal : Buena Potencial de Rendimiento : Alto ( 4.500 kg/ha/ ao) Sistema Radicular : Superficial, abundante

VARIEDAD PC 4

Genealoga : AKH / G.8.D. x Eirete Ciclo : Precoz 4 cortes por ao

Resistencia a Septoria : Moderadamente Susceptible

Contenido de Reb. A : 65 a 70% sobre el total de Stevioles Glicoles ( Muy dulce). Cosecha de Verano Brotacin Basal : Profusa , muy buena Potencial de Rendimiento : Muy Alto ( 7.000 kg/ha/ ao) Sistema Radicular : Superficial, abundante

Rendimiento Potencial de la Var. L 4

7.284 Kg/ha/ao

4500

4002

4000

3500

3000 Kg/ha de Hoja seca

2500

2082

2000

1500

1000

500

700

500

1er corte 22/08/08

2do corte

3er corte
Epocas de Cosecha

4to corte 7/04/09

3/11/08

17/02/09

Contenido de Stevioles Glicoles en la Var. L 4

80

73.3

70

60

50

46.2

49.6

52.3
% Stev % Reb. A

40

% Reb A + Stev
30

% Reb A s/ Total
20

13.7
10

13.5 9.9 10.5 5.0 5.5

8.2 4.4 3.8

6.9

6.8 3.6

1 er Corte
22/08/08

2 er Corte
3/11/09

3 er Corte
12/02/09

4 er Corte
7/04/09

VARIEDAD PC 7

Genealoga : AKH / G.8.D. x Eirete Ciclo : Precoz 4 cortes por ao Resistencia a Septoria : Muy Resistente Contenido de Reb. A : 65 a 70% sobre el total de Stevioles Glicoles ( Muy dulce) Brotacin Basal : Muy Buena Potencial de Rendimiento : Muy Alto ( 6.500 kg/ha/ ao) Sistema Radicular : Muy Profunda y abundante

Observacin: muy adaptado a la produccin orgnica por su alta resistencia a enfermedades foliares

! VARIEDADES PARAGUAYAS EN EL MUNDO !! . Registros en otros pases

USA TAILANDIA COLOMBIA ECUADOR PERU BRASIL KENIA VIETNAM MALASIA

INDONESIA

CHILE ARGENTINA

CALIDAD INDUSTRIAL DE ALGUNAS VARIEDADES (Cosecha de Febrero, 2010)

90

81

Variedades

Stev. (%)

RC (%)

Reb. A (%)

RD (%)

Total SG (%)

% Reb A s/ Total

80

70

60

PC 1 1.84 0.9 13.06 0.40 16.2

PC 4 3.50 0.85 9.95 0.35 14.65 Eirete 7.26 0.89 6.78 0.09 15.02 Criolla 5.87 0.49 2.29 0.25 8.90

81
50 L1 L4 40

68
30

Eirete Criolla

45 26

20

16.2 13.06

10

1.84
0

0.9

0.40

Stev.(%)

RC(%)

Reb. A (%)

RD(%)

Total SG(%)

% Reb A s/ Total

 DONDE APUNTAR EN EL TEMA DE LAS VARIEDADES ?

Variedades clonales mas productivas y alto Reb A ( >85% ) tanto en variedades precoces y tardos. Lnea

Clonal : PCSA /SI EM-1/08/LC 1 = 85% de Reb. A sobre el total de SG, precoz( 4 cortes ao).

* Variedades con mejor performance para la mecanizacin del cultivo * Variedades hbridas (diploides o tetraploides) de alto rinde y alto Reb A.

!!! TENEMOS

LA

VARIEDAD .

Aleluya Aleluya. Aleluya..

ESTO TERMINA AQU ?

SI . PERO NOOO

! ESTO

NO TERMINA AQU

PROPAGACION DE VARIEDADES CLONALES PROPAGACION CLONAL O VEGETATIVA POR ESQUEJES. VIVERO DE PRODUCCION DE PLANTINES EN BANDEJAS BAJO NORMAS DE CALIDAD

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Elevar el nivel de vida de nuestros productores

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