PRACTICA No.

6 AISLAMIENTO DE PURINAS: CAFENA A PARTIR DE T NEGRO, CAF TOSTADO, BEBIDAS DE COLA Y ENERGTICAS

OBJETIVOS Aislar la cafena a partir de bebidas de consumo cotidiano como son el t negro, refresco de cola y caf, usando una disolucin de NaOH y extraccin con diclorometano. Que el alumno revise las propiedades farmacolgicas de la cafena. Comparar el rendimiento y la pureza de la cafena aislada de diferentes productos comerciales. ANTECEDENTES: 1. A qu familia de alcaloides pertenece la cafena y teofilina?

Pertenecen a la familia de las metilxantinas. Las metilxantinos son un grupo de alcaloides estimulantes del Sistema nervioso central (SNC), estas son: la teofilina (t), teobromina (chocolate) y cafena (caf). Alrededor de la mitad de la poblacin de todo el mundo consume estos alcaloides diariamente. Este grupo comparte una estructura especial relacionada con el cido rico. La cafena es 1,3,7- trimeltilxantina, la teofilina es 1,3- dimetilxantina y la teobromina es 3,7dimetilxantina. Las metilxantinas tienen escasa solubilidad, la cual se intensifica por la formacin de complejos (1:1) con diversos compuestos. Las metilxantinas comparten algunas acciones farmacolgicas de inters teraputico, tales como la relajacin del msculo liso (bronquios principalmente), son estimulantes del SNC as como del msculo cardiaco. Sobre los riones tienen un efecto diurtico. Son infrecuentes las intoxicaciones letales por la ingestin de cafena.

2.

Propiedades fsicas y qumicas de la cafena.

La cafena es un alcaloide de la familia metilxantina, cuyos metabolitos incluyen los compuestos teofilina y teobromina, con estructura qumica similar y similares efectos (aunque de menor intensidad a las mismas dosis). En estado puro es un polvo blanco muy amargo. Fue descubierta en 1819 por Runge y descrita en 1821 por Pelletier y Robiquet. Su frmula qumica es C8H10N4O2, su nombre sistemtico es 1,3,7-trimetilxantina o 3,7-dihidro1,3,7-trimetil-1H-purina-2,6-diona y su estructura puede verse en los diagramas incluidos. Una taza de caf contiene de 80 (instantneo) a 125 (filtrado) mg de cafena. El caf descafeinado, en Espaa, debe contener una cantidad de cafena no superior al 0,3%. La cafena se puede conseguir tambin en pldoras estimulantes de hasta 800 mg. Propiedades fsicas Estado de agregacin Slido Apariencia Agujas blancas o polvo. Sin olor. Densidad 1230 kg/m3; 1.230 g/cm3

Masa molar 194,19 g/mol Punto de fusin510 K (237 C) Propiedades qumicas Acidez 0.131.222 pKa Solubilidad en agua 2,17 g/100 ml (25 C) 18,0 g/100 ml (80 C) 67,0 g/100 ml (100 C) Momento dipolar 3,64 (calculado) D

3.

Investigue la frmula qumica de la cafena y explique las semejanzas que encuentra con la teofilina y teobromina.

Estructuralmente, las xantinas son derivados purinrgicos formados por los heterociclos pirimidina e imidazol condensados, dando lugar a las metilxantinas, cafena (1,3,7 trimetilxantina), teofilina (1,3 dimetilxantina) y teobromina (3,7 dimetilxantina) (fig. 1). Las sales que forman estos compuestos son fcilmente solubles

4.

Principales usos de la cafena en las industrias alimenticia y farmacutica.

Los usos de la cafena en el mercado. La cafena est siendo utilizada dentro de las tres principales reas de mercado, que son evidentes: los refrescos, bebidas energticas, farmacuticas y en menor medida en los complementos alimenticios. Sin embargo, otras reas se encuentran utilizando la cafena. Solo por mencionar algunas aplicaciones, la cafena se utiliza en los dulces, chocolates, jabones, shampoo, licores, cosmticos, inhaladores, etc. Bebidas Bebidas energticas, Jugos de frutas, Agua cafeinada, Bebidas de cola, Sodas Farmacutica Medicamentos OCT, Analgsicos, Diurtico, Remedios para el resfriado, Medicamentos de prescripcin, Medicamentos de energa,Medicamentos para prdida de peso

5. Mencione los principales efectos que causa la cafena en el organismo e indique cual es la cantidad de cafena que est en el caf, en el t y en un refresco de cola.
Los efectos fisiolgicos de la cafena pueden observarse en los adultos, en dosis de solamente 100 a 200 mg. Esta dosis se alcanza fcilmente con el consumo de 1 a 3 tazas de caf. De acuerdo con el peso corporal, los nios de entre 1 a 5 aos de edad son los mayores consumidores de cafena. Un nio que consume una bebida gaseosa con cafena recibe el equivalente a 4 tazas de caf consumidas por un adulto. El cuerpo absorbe inmediatamente la cafena y su nivel en la sangre asciende aproximadamente 30 minutos despus de su ingestin y el promedio de su eliminacin fuera de la corriente sangunea vara, desde varias horas, en el caso de un adulto, hasta varios das en un recin nacido. Este nivel de evacuacin disminuye en el embarazo y en relacin con el uso de anticonceptivos orales. Por otra parte, pareciera que el fumar incrementa la velocidad en que la cafena es eliminada del cuerpo. Por lo tanto el consumo de cafena debe reducirse significativamente o eliminarse por parte de las personas que tratan de dejar de fumar, para prevenir el incremento de niveles de cafena en la sangre y el posible incremento de la ansiedad por tener nicotina. La cafena produce muchos efectos, incluyendo: + elevado nivel de azcar en la sangre (da la sensacin de un surgimiento de energa) * Elevado nivel de lpidos en la sangre * Incremento de presin arterial * Estimulacin del sistema nervioso central (puede hacer que anule la llamada de atencin del cuerpo que pide descanso) * Irregularidad en latidos del corazn * Aumento de prdida, va urinaria, de calcio y magnesio (puede afectar la salud a largo plazo de los huesos) * Incremento de secrecin cida estomacal (agrava una lcera estomacal) * Temblores, irritabilidad y nerviosismo * Insomnio e interrupcin de los patrones del sueo * Ansiedad y depresin * Intensificacin de los sntomas del sndrome de pre menstruacin (PMS). 1 taza de caf de 180 ml: 100 mg de cafena 1 taza de caf descafeinado de 180 ml: 2 mg de cafena 1 capuccino de 190 ml: 73 mg de cafena 1 Coca- cola de 330 ml: 41 mg de cafena 1 Coca- cola light de 330 ml: 41 mg de cafena 1 Pepsi cola de 360 ml: 35 mg de cafena 1 Pepsi light de 360 ml: 33 mg de cafena 1 taza de t negro de 180 ml: 3.6 mg de tena 1 barrita de chocolate negro de 40 gramos: 194 mg de teobromina

MATERIAL 1 1 1 Bao maria Embudos de separacin con tapn Esptula 1 1 1 Vaso de pp. 50 mL Probeta de 50 mL Tela asbesto

1 1

Agitador aro

1 1

vasos de pp. de 100mL vasos de pp. de 250mL

REACTIVOS 1 Lata de refresco de cola. 5 g Caf tostado en polvo.

5 sobrecitos de t negro. Disolucin de NaOH conc.

Diclorometano Agua destilada

PROCEDIMIENTO PARA EXTRACCIN DE CAFENA DE T NEGRO Pese las 5 bolsitas del t negro, y anote el peso de stas en su bitcora, posteriormente, coloque las bolsitas en un vaso de precipitados de 250 mL (no rompa los sobres), y vierta aproximadamente 30 mL de agua hirviendo. Coloque el vaso de precipitados en una parrilla y continu calentando por unos 20 minutos ms con agitacin. Verifique el pH de la disolucin, si ste es alcalino no agregue nada, pero si el pH es ligeramente cido agregue unas gotas de sosa para que el pH sea de 8, ya que a pH alcalinos se encuentra libre al alcaloide. Separe la solucin y repita el mismo procedimiento dos veces ms para recuperar la mayor cantidad de cafena para obtener un volumen aproximado de 100 mL. En la disolucin alcalina se encuentra la cafena libre, dejar que se enfre para luego realizar la extraccin con unos 10 mL de cloruro de metileno, repita la extraccin dos veces ms; se puede formar una emulsin si la agitacin es muy violenta, en cuyo caso deber esperar ms tiempo para la separacin de las fases acuosa y orgnica. Se recolectan las fases orgnicas en un vaso de precipitados de 100 mL y posteriormente se secan con Na2SO4 anhidro. La fase orgnica se transfiere a un caso de precipitados de 50 mL previamente pesado. Deje evaporar el disolvente en la campana, se obtendrn agujas blancas de la cafena. Se pesa el vaso de precipitados con el producto obtenido y con la diferencia de pesos se calcula el rendimiento de cafena. Determine el punto de fusin. PARA EXTRACCIN DE REFRESCO DE COLA Medir con la ayuda de una probeta 50 mL de refresco de cola y trasvasarlo a un matraz Erlenmeyer, agitar el lquido hasta que se hayan eliminado las burbujas de CO2. Determine el pH del lquido. Posteriormente trasvasar el lquido en un embudo de separacin y extraer la mezcla don 10 mL de CH2Cl2; repita la extraccin dos veces ms. Colocar los 30 mL, aproximadamente de fase orgnica en un vaso de pp. de 100 mL, seque con Na2SO4 anhidro y vace la fase orgnica en otro vaso de pp. de 50 mL previamente pesado para poder calcular el rendimiento de cafena. Deje evaporar el disolvente en la campana, determine rendimiento y punto de fusin del slido obtenido. Compare las caractersticas de este slido con las descritas para la cafena.

PARA EXTRACCIN DE CAFENA DE CAF TOSTADO Se pesan 5 g de caf tostado el cual debe estar molido y se colocan en un vaso de precipitados de 250 mL, se colocan aproximadamente 30 mL de agua hirviendo y se calienta por unos 20 minutos ms con agitacin constante, pasado este tiempo verifique el pH y coloque unas gotas de hidrxido de sodio para que el pH sea de 8 (ligeramente alcalino), esto ayuda a liberar el alcaloide. Realice otras 2 infusiones con otros 30 mL de agua y verifique que el pH sea alcalino, junte todo el lquido obtenido y como hay residuos de caf se tiene que filtrar con un embudo de vidrio. Al lquido obtenido se extrae con 10 mL de diclorometano por triplicado y la fase orgnica es la que contiene mi producto, el vaso de precipitados en el cual se va a colocar la fase orgnica debe estar previamente pesado para poder calcular el rendimiento. Luego se deja evaporar el disolvente en la campana, para posteriormente tomar el punto de fusin y se pesa el vaso con el producto obtenido.

Diagrama de flujo para extraccin de cafena en caf tostado.

Se pesan 5 g de caf tostado el cual debe estar molido y se colocan en un vaso de precipitados de 250mL, se colocan aproximadamente 30mL de agua hirviendo y se calienta por unos 20 minutos ms con agitacin constante

Pasado este tiempo verifique el pH y coloque unas gotas de hidrxido de sodio para que el pH sea de 8 (ligeramente alcalino), esto ayuda a liberar el alcaloide.

Realice otras 2 infusiones con otros 30mL de agua y verifique que el pH sea alcalino, junte todo el lquido obtenido y como hay residuos de caf se tiene que filtrar con un embudo de vidrio

Al lquido obtenido se extrae con 10mL de diclorometano por triplicado y la fase orgnica es la que contiene mi producto, el vaso de precipitados en el cual se va a colocar la fase orgnica debe estar previamente pesado para poder calcular el rendimiento.

Luego se deja evaporar el disolvente en la campana, para posteriormente tomar el punto de fusin y se pesa el vaso con el producto obtenido.