METODOLOGA: El Dinitrofluorobenceno es un compuesto que reacciona fcilmente con los aminocidos terminales sin romper enlaces peptdicos, en este

caso se har la identificacin del grupo amino terminal de la hemoglobina. Para que la reaccin se lleve a cabo con rapidez, es necesario desprotonar los grupos amino de la hemoglobina, para esto utilizamos una base dbil como el bicarbonato de sodio (NaCO3), la razn es que una base fuerte podran hidrolizar los enlaces dando resultados equvocos. Despus de ser desprotonada el flor se une a un hidrgeno de la amina, dejando cargas contrarias el ahora Dinitrofenilo y la el amino terminal de la hemoglobina hacen un enlace. El dinitrofenilo (DNP) es un compuesto fcil de identificar debido a su color amarillo, caracterstico de los grupos Nitro (NO2 Aadimos HCl 3N, para regular el pH y evitar la hidrlisis temprana, despus extraemos 4 veces con un compuesto que no altere la estructura, como el ter y que tambin evite la formacin de cargas y elimine junto con la fase etrea el DNFB que no haya reaccionado. El FeSO4 nos guiar mediante la coloracin de la muestra. Evaporamos los residuos de ter y centrifugamos. Procedemos a agregar HCl 6N para hidrolizar los enlaces peptdicos, pero no el enlace dinitrofenilo-amina. Volvemos a extraer con ter, solo que esta vez desechamos la fase acuosa, separamos la fase etrea donde se encuentra el DNP unido al aminocido. Evaporamos residuos de ter, disolvemos los residuos en etanol y procedemos hacer una cromatografa en papel.

Discusin: Para la identificacin del aminocido terminal de la hemoglobina utilizamos 5 sustancias, DNP-Ala, DNP-Glu, DNP-Val, DNFB y solucin problema, al medir los Rfs notamos que el ms cercano a la solucin problema fue el cido glutmico, lo cual no va de acorde a la bibliografa consultada que indica que se trata de la valina. Esto puede deberse a que el mtodo de cromatografa en papel tiene ciertas desventajas que nos pueden llevar a un resultado diferente del esperado, estos pueden ser el no dejar que el eluyente llegue al extremo del papel. Tambin aunque menos probable es que la sustancia se haya adherido a la celulosa del papel. La contaminacin por parte sustancias como grasas tambin pudo afectar el recorrido de la fase mvil. Por ltimo puede que la temperatura a la que fue realizada la cromatografa, haya afectado haciendo que la sustancia se adsorbiera en la fase estacionaria.

Bibliografa Solari Alberto Juan. Gentica Humana (2007). Buenos Aires: Mdica Panamericana. pp 99.

Objetivo: Se determinarn los aminocidos que contiene terminal de la molcula de hemoglobina utilizando el mtodo de Sanger