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MICROBIOLOGA Morfologa Bacteriana

ESTRUCTURA BACTERIANA Son procariotas. No tienen el material gentico ligado a protenas del tipo histonas. Son haploides. Poseen una pared celular (excepto el orden de los Mollicutes) Carecen de: membrana nuclear y orgnulos rodeados de membrana (ap. de Golgi RE). Se dividen por FISIN BINARIA.

I.

Elementos Bacterianos Obligados

Pared Bacteriana: Externa a la membrana celular. Semirrgida. Responsable de la forma bacteriana. Protege a los elementos internos frente a diferencias de presin, ya que la presin osmtica bacteriana es mayor que la del medio interno (evita la lisis osmtica). Participa en la divisin bacteriana (fisin binaria) formando un tabique (junto con la membrana citoplasmtica) intercelular que separa la clula inicial en 2 clulas hijas. Posee poros selectivos, que permiten el paso de agua y metabolitos esenciales, pero que impiden el paso de macromolculas, como por ejemplo determinados ATB (acta como filtro) Se caracteriza por la presencia de murena o peptidoglicano o mucopptido lo que la diferencia de las clulas eucariotas. Es el punto de accin de diversos ATB. Punto de anclaje de bacterifagos. Posee Ag muy potentes, los cuales originan la produccin de Ac. GRAM +: los componentes de la pared tienen importancia en la adherencia a superficies epiteliales. GRAM -: LPIDO A (shock sptico)

MICROBIOLOGA Morfologa Bacteriana Constitucin de la pared bacteriana:

1. Murena, mucopptido o pptidoglicano: es el esqueleto de la pared y est constituido por 2 aminoazcares: N-Acetil Glucosamina (NAG) y N-Acetil Muramnico (NAM). 2. Lipopolisacrido (slo en GRAM -): acta como barrera para algunos ATB, ej: Penicilina. La parte lipdica es tambin llamada Lpido A o Endotoxina con poder patgeno, ya que lesiona capilares sanguneos pudiendo producir: vasculitis, petequias, prpuras, CID y Sme. De Waterhouse Friedericksen. Es tambin responsable de la fiebre en las infecciones Gram (). Es causante del inicio del cuadro del SHOCK SPTICO. 3. cido Teicoico (slo en GRAM +): es el principal Ag de las bacterias GRAM (+). Espacio Periplsmico: Es virtual, est situado entre la membrana y la pared, en su interior hay protenas, fosfatasa alcalina y cidos. Contiene tambin enzimas (desoxirribonucleasa, ribonucleasa) y exotoxinas (gram -). Membrana Citoplasmtica: se sita por dentro de la pared celular de la que est separada por el espacio Periplsmico (gram -). Est constituida principalmente por protenas (40%) y fosfolpidos (60%) y, a diferencia de las clulas eucariotas no contiene esteroles (excepto los Mycoplasmas). Los fosfolpidos forman una doble capa que engloba a las protenas. Tambin tiene glicolpidos que forman poros en el interior de la membrana. Funciones de la membrana: barrera osmtica, tiene funcin similar a las mitocondrias (citocromos), sintetiza las sustancias que forman parte de la pared celular, es el lugar donde se ubican las protenas destinadas a la excrecin (toxinas, etc), sobre la membrana plasmtica actan diversos ATB Ej: polimixinas. Citoplasma Bacteriano: es un sistema coloidal formado por agua (85%), minerales y fermentos. No tiene sistemas membranosos ni estructuras especializadas (no tiene REL, RER, Golgi, lisosomas, mitocondrias, microtbulos ni cloroplastos), si tiene mesosomas (estructuras membranosas invaginadas a partir de la membrana plasmtica), ribosomas, inclusiones y el cromosoma bacteriano. Ncleo: no presenta membrana nuclear, est constituido por ADN de doble cadena, llamado ADN cromosmico o cromosoma. Este ADN no est asociado a protenas histonas. Las bacterias son haploides y la transmisin gentica es lineal. ADN extracromosmico: es 100 a 1000 veces ms pequeo que el cromosmico y recibe el nombre de plsmido. Tiene capacidad de autorreplicarse y de integrarse al cromosoma. Son molculas circulares de ADN bicatenario. Su estructura es helicoidal y superenrollada. Al ser muy pequeo una bacteria puede tener varios plsmidos independientes o conectados. Las funciones codificadas por plsmidos son adicionales y dan a la bacteria una ventaja para la supervivencia en condiciones ambientales particulares (ej: capacidad para sobrevivir en concentraciones letales de ATB). Algunos plsmidos transportan genes de una bacteria a otra (conjugacin). Los plsmidos pueden recombinarse con el ADN cromosmico o bien con otros plsmidos. Tipos de plsmidos y sus funciones: Plsmidos sexuales: son plsmidos autotrasnferibles responsables de la transferencia de genes cromosmicos por conjugacin y que codifican la produccin de PILI o fimbrias sexuales. El plsmido (o factor) ms importante es el F (fertilidad). Las bacterias portadoras de este plsmido se llaman bacterias F (+) y las no portadoras

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F (-). Puede estar libre o integrado al cromosoma bacteriano. Las bacterias que portan un plsmido integrado se llaman de alta frecuencia de recombinacin (Hfr). Plsmidos de Resistencias ( R ): son responsables de la resistencia de ciertas bacterias Gram (-) , a uno o ms ATB ya que promueven la elaboracin de una enzima que degrada o modifica ATB como por ej: -lactmicos (penicilinas, cefalosporinas) y aminoglucsidos. Plsmidos determinantes de patogenicidad: Plsmidos ENT: codifican la sntesis de enterotoxinas. Plsmidos INV: dan capacidad a las bacterias enteroinvasivas de penetrar en las clulas. Plsmidos HLy: codifican hemolisinas. Plsmidos K: codifican antgenos en la superficie de algunas bacterias (E. Coli) Plsmidos o factores col: codifican la produccin de compuestos similares a los ATB llamados bacteriocinas. Ej: colicinas (producidas por E. Coli) marcescinas (Serratia Marcescens) Piocinas (Pseudomona Aeruginosa). Plsmidos degradantes: son genes que determinan las enzimas con capacidad metablica pada degradar y utilizar materia orgnica para la biosntesis y produccin de energa. Plsmidos de estafilococos: son anlogos a los de las bacterias gram (-): dan resistencia a los ATB, produccin de enterotoxinas, produccin de hemolisinas. Se diferencian de los factores R en que no se transmiten por conjugacin.

II.

Elementos no constantes o facultativos

Capa mucosa: est constituida por polisacridos sintetizados por la propia bacteria que agregan y depositan por fuera de la pared bacteriana. Ej: cpsulas de Neumococo, Klebsiella Pneumoniae, Haemophillus Influenzae. O bien est formada por polipptidos. Ej: cpsula de Bacillus. La informacin gentica est codificada en el ADN cromosmico. Funcin de la capa mucosa: a. Es antifagoctica: favorece la multiplicacin bacteriana y la invasin del organismo infectado. b. Es antignica: esto permite la identificacin de especies mediante la aglutinacin con sueros especficos. c. Protege a la bacteria de la fagocitosis y de la accin de ciertos ATB que no pueden ejercer su accin. Glicocalix: algunas bacterias son capaces de segregar dextrano, ste forma una trama de fibrillas por fuera de la bacteria que facilitan la adherencia de sta (ej: Streptococcus mutans al esmalte dental). Flagelos: son rganos de estructura helicoidal responsables de la movilidad bacteriana. Su posicin sobre la superficie de la bacteria difiere en las distintas especies, y esto permite clasificar a las bacterias en diferentes tipos:

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MONTRICAS (1 flagelo polar) LOFTRICAS ANFTRICAS PERTRICAS

(1 penacho polar) (En ambos polos) (Sobre toda la sup.)

Fimbrias o Pili: son filamentos rgidos, cortos y muy numerosos, implantados en la superficie bacteriana. Carecen de movilidad, estn constituidos por unas protena (pilina) antignica. Permiten la adherencia de la bacteria a: ltex, hemates u Glicocalix, por lo tanto es un factor iniciador de la infeccin. Existe una subclase de fimbrias que reciben el nombre de pili y que intervienen en la conjugacin bacteriana, stas son ms largas y menos numerosas que las fimbrias comunes (de 1 a 4 solamente). Estos pili son necesarios para transferir el material gentico desde las bacterias (F+) a las receptoras (F-). Esporos: son estructuras presentes en algunas bacterias (exclusivamente bacilos) de forma esfrica u oval, termo resistentes y constituyen una forma de resistencia bacteriana ante situaciones de deficiencia nutricional, desecacin, fro, temperaturas elevadas y determinados agentes qumicos. Los esporos pueden estar en el interior de la bacteria, llamndose endosporos o permanecer libres. No se tien con colorantes habituales y se ven como una zona clara que contrasta con el resto de la bacteria coloreada. Pueden o no deformar el cuerpo de la bacteria.

No son destruidos por ebullicin, se precisan temperaturas de 120c durante 30 o varias horas para destruirlos, esto se debe a su escaso contenido de agua por lo que las protenas y cidos nucleicos que contienen son ms resistentes a la termorregulacin. Esporulacin: es el paso de una bacteria en su forma vegetativa a su forma esporulada (cuando el medio ambiente es adverso) Germinacin: es el proceso inverso al anterior (cuando las condiciones del medio son favorables). FORMAS BACTERIANAS 1. ESFRICA: alrededor de un m de dimetro. Se conocen con el nombre de COCOS. Pueden presentarse:

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Segn la orientacin de los planos de divisin de la bacteria y de la rapidez en separarse las clulas hijas pueden agruparse en: diplococos (de a 2) Ej: neumococos, gonococos, meningococos Cadenas Ej: estreptococos. Racimos, Ej: estafilococos. Ttradas (de a 4). Sarcinas (de a 8). .

2. CILNDRICA: Entre 1,5 y 6,8 m de longitud. Se conocen con el nombre de BACILOS. Pueden presentarse: rectos: ej: enterobacterias curvos: ej: Vibrios Ramificados: Ej: Actinomyces

3. HELICOIDAL: de 10 a 15 m de dimetro. Son bacterias que presentan varias incurvaciones (espiral), se separan en: a. Gnero Spirillum: 1 espiral rgido. b. Orden espiroquetas: espirales flexibles enrollados (sacacorchos) se dividen en: Treponemas: espiras regulares en n mayor a 12. Borrelias: espiras irregulares. Leptospiras: espiras en n menor de 12 y con extremos curvos. TINCIONES BACTERIANAS Tincin de Gram Nicolle: 1. La extensin previamente fijada, se tie con un colorante bsico (violeta de genciana o cristal violeta), se deja actuar un minuto y luego se enjuaga. 2. Luego se sumerge en Lugol (Iodo + Ioduro de Potasio -IK-) u otro mordiente, durante un minuto, el IK forma una malla junto con el violeta de genciana y el cido teicoico, fijando el 1 colorante (aumenta la afinidad de la clula por el colorante). 3. Decoloracin con alcohol-acetona (70-30): minuto, luego se enjuaga. Por tener acetona difunde muy bien en presencia de lpidos. 4. Se tie con un colorante de contraste (safranina o fucsina): se sumerge durante un minuto y luego se enjuaga. Este colorante tie a las bacterias cuya pared fue decolorada por el alcohol acetona (GRAM -).

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GRAM +: retienen el colorante inicial, por eso se las ve color VIOLETA GRAM -: se decoloran y retienen el colorante de contraste, por eso se las ve color ROSA O ROJO

Tincin Negativa o Tincin de Burri: Se utiliza TINTA CHINA (es cida y opaca), sta se deposita alrededor de la bacteria sin teirla, destacando su contorno. Se utiliza para ver tanto la cpsula de bacterias como de algunos hongos (Cryptococcus Neoformans). Reaccin de Quellung: es una reaccin de precipitacin in situ, entre la cpsula y sus correspondientes Ac. Sirve para ver S. neumoniae, H. influenzae, etc. (capsulados). Tincin Ziehl Neelsen: es una tincin que pone de manifiesto la cido-alcohol resistencia. Detecta bacterias con un alto contenido lipdico en la pared celular, como micobacterias y nocardias. El alto contenido lipdico de la pared celular dificulta la tincin, pero una vez efectuada, resisten a la decoloracin con una mezcla de cido fuerte y alcohol. Nocardia, Rhodococcus, Corynebacterium, Legionella Micdadei, etc se comportan como cido-alcohol resistentes dbiles, ya que se decoloran parcialmente. 1. Colorante bsico: FUCSINA FNICA 2. Mordiente: CALOR 3. Decoloracin: ALCOHOL-CIDO CLORHDRICO 4. Colorante de contraste: AZUL DE METILENO
Las bacterias cido-alcohol resistentes se observan de color rojo sobre fondo azul oscuro. Las bacterias que no son cido-alcohol resistentes se observan color azul.

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ANEXO

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