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CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO AMBIENTE 1.

INTRODUCCIN El control ambiental es un proceso que permite determinar el grado de asepsia que tiene un recinto, el proceso evaluara la limpieza e indicara si esta deber ser reforzada. En un laboratorio de microbiologa es imprescindible mantener un ambiente asptico por las actividades que all se realizan y para ello es necesario llevar un control de calidad del medio ambiente. En esta prctica se observara los pasos necesarios para mantener un control de calidad del medio ambiente tambin se determina el grado asepsia del mismo. 2. FUNDAMENTO TERICO Medio de cultivo Un medio de cultivo consta de un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, clulas, tejidos vegetales o incluso pequeas plantas. Segn lo que se quiera hacer crecer, el medio requerir unas u otras condiciones. Clasificacin de los medios de cultivo Segn sus cualidades fsicas, se distinguen

lquidos semislidos slidos

Segn su formulacin:

qumicamente definidos: se conoce la cantidad exacta de cada uno de los compuestos que hay en el medio. complejos: se realizan a partir de extractos naturales (extracto de levadura, sangre, etc.); no se conoce exactamente cul es la composicin del medio; sin embargo, presenta la ventaja de que ya estn presentes todos o casi todos los elementos que una clula puede requerir.

Segn su uso:

medio general: medio en donde crecen todo tipo de microorganismos, excepto los que necesitan condiciones especiales (por ejemplo, agar CLED). medio selectivo: permite seleccionar el crecimiento de una especie o grupo determinado (hongos, bacterias entricas, protozoos...). medio diferencial: permite identificar una especie con otra, ambas en el mismo medio. Puede ser por su crecimiento, su metabolismo, su respiracin, etc. (por ejemplo, medio de McConkey). medio de enriquecimiento: contiene los nutrientes necesarios para apoyar el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, se utiliza para la cosecha de diferentes tipos de microorganismos en un mismo medio. medio mnimo: contiene la mnima cantidad de nutrientes posible que permite el crecimiento de una especie; medio de transporte: preparado para servir como almacenamiento temporal a especmenes transportados o en transferencia; mantienen su viabilidad y su concentracin; Simple

Agar Nutriente El agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy til porque permanece slido incluso a relativas altas temperaturas. Adems, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeas. En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el lquido, y aparece como una sustancia espesa, con colonias difcilmente observables. El agar nutritivo contiene normalmente (p/v):1

0,5 % de peptona; 0,3 % de extracto de carne/extracto de levadura; 1,5 % de agar; 0,5 % de cloruro de sodio; agua destilada; pH casi neutro (6,8) a 25 C.

El caldo nutritivo se hace exactamente igual, excepto por la omisin del agar.

3. OBJETIVOS Objetivo general Determinar la presencia o ausencia de microorganismos en un determinado ambiente. Objetivos especficos Preparar el medio de cultivo agar nutriente. Desinfectar el medio de cultivo junto con el material utilizado en una autoclave. Tomar muestras del mesn y del piso y colocarlas en el medio de cultivo, para determinar el grado de asepsia de los mismos. Incubar el medio de cultivo para permitir el crecimiento de las bacterias. Contar el nmero de colonias de bacterias en ambas placas. 4. EQUIPO Y MATERIAL UTILIZADO Balanza electrnica

Baso de precipitado

Caja Petri

Autoclave

Incubadora

5. REACTIVOS Agua destilada y desinfectada

Extracto de carne

Peptona

Agar

6. PROCEDIMIENTO

Calcular las cantidades del medio de cultivo Extracto de carne Peptona Agar Mezclar y disolver los reactivos en el agua con calor en una estufa Introducir en el autoclave las dos cajas Petri junto con el medio de cultivo a una temperatura de 121C por 15 minutos Sacar de la autoclave, verter el medio de cultivo en las cajas Petri y dejar enfriar por un momento Realizar la siembra de la muestra del mesn y del piso en cada caja Petri Etiquetar las placas e incubarlas regulando la incubadora a 22C por una semana de tiempo. Realizar el recuento de colonias en ambas cajas.

7. CONCLUSIONES Tras el realizar la prctica se pudo apreciar la falta de asepsia que tena el laboratorio de microbiologa, aunque si bien los resultados se vieron afectados en gran medida por el excesivo tiempo de incubacin que se tubo (2 semanas), las colonias encontradas en los medios de cultivo sobrepasaban por mucho el valor mximo aceptable tanto as que era imposible realizar el recuento de las mismas. 8. CUESTIONARIO

Qu es un medio de cultivo y que finalidad tiene? Un medio de cultivo consta de un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, clulas, tejidos vegetales o incluso pequeas plantas. Qu consistencia inicial tena el medio de cultivo preparado y que consistencia final se alcanz? Explique la razn del cambio. En principio era lquido y despus se volvi gelatinoso el agar es el causante del cambio Qu tipos de microorganismos pueden crecer en el agar nutriente? Todo tipo de bacterias. En base a los resultados obtenidos podra usted decir que el ambiente estaba asptico. Justifique se respuesta. El crecimiento de bacterias fue tal que resulto imposible el conteo de colonias, adems hubo la posibilidad de encontrar bacterias patgenas por tal razn podamos asegurar a ciencia cierta que el ambiente no estaba asptico Qu tipos de productos, a que concentraciones y por cunto tiempo se recomienda utilizar para la desinfeccin de ambientes. Mencione tres ejemplos. Compuestos inorgnicos como hipoclorito de sodio de calcio y de litio a concentraciones de 0,02% a 1% por ms de 30 min Menopersulfato de potasio al 1% por ms de 50 min Tricloroisocianurato en concentraciones de 1,9% a 6% el tiempo de accin est definido por el fabricante

Qu es un falso positivo obtenido como resultado en un control de calidad microbiolgico? Es un resultado errneo atribuible a la mala realizacin del experimento para evitar un falso positivo se debe realizar otra prueba paralela pero sin someterla a las condiciones propias del experimento (ejemplo: no realizar la siembra), esta nos servir como medida de control Qu tipos de nutrientes aportan el extracto de carne y la peptona? Aportan carbn, nitrgeno, cianocobalamida vitamina B protenas, carbohidratos, hierro, fosforo y

A partir de que materia prima se obtiene el agar y cual la funcin del mismo en los medios de cultivo? Se la obtiene de las algas rojas o rodofceas, agrega sales como sulfato de magnesio de sodio o de amonio y gelifica la mescla. 9. BIBLIOGRAFA Limpieza y desinfeccin de superficies hospitalarias Agencia nacional de vigilancia sanitaria (ANVISA) de Brasil 2010 http://es.wikipedia.org/wiki/Agar_nutritivo http://es.wikipedia.org/wiki/Medio_de_cultivo http://www.ccainternacional.com/areas-asociadas/medio-ambiente-y-control-decalidad/ http://www.bacteriasacuaciencia.blobspot.com/2013/04/falso-positivo-falsonegativo.html?m=1 http://mx.ansewers.yahoo.com/question/index?qid=20120901 html.rincondelvago.com/agar-agar.html