Capitulo 41: Cultivos de muestras orgnicas Humanas

Autores: Francisco Javier Lao Barn o Correo: laobaron@supercable.es o Titulacin acadmica: Diplomado en Enfermera o Centro de Trabajo: Unidad de Cuidados Intensivos !ospital Torrec"rdenas. lmera. Espa#a

dultos.

Cultivos de muestras orgnicas Humanas

INTRODUCCIN Es un medio de estudio del que nos servimos para determinar la causa de una infeccin. El procedimiento que se utiliza suele iniciarse con la toma de muestras de los tejidos, exudados, lquidos corporales, etc. del paciente. A continuacin, estas muestras se envan al la oratorio de micro iologa para su estudio posterior. El microscopio nos permite o servar los microorganismos !los presentes en esas mismas muestras", tales como #ongos o acterias. El cultivo sirve para lograr una proliferacin de esos microorganismos $ de ese modo poder estudiarlos mejor. El diagnstico etiolgico de la enfermedad infecciosa se esta lece desde el momento en que se asla e identifica el agente causante. Entre los microorganismos que podemos encontrar, tenemos% acterias, micoplasmas $ otros organismos de la clase mollicutes, clamidias $ ric&ettsias, parsitos, #ongos, 'irus.

Foto 1: recipientes para recoleccin y transporte de muestras

CU TI!O "#CT$RI#NO En condiciones normales, la piel, las mem ranas $ las mucosas de nuestro organismo estn colonizadas por diferentes especies de microorganismos. Entre ellos, $ de modo destacado, se encuentran distintos tipos de acterias, generalmente inofensivas, incluso algunas eneficiosas. (tras acterias son capaces de causar infecciones slo en determinadas circunstancias% cuando proliferan demasiado, o ien en personas con pro lemas autoinmunes, o que estn tomando determinados frmacos. )inalmente, #a$ acterias que son capaces de causar da*o aun en circunstancias normales. Cuando se sospec#a de una infeccin por una acteria, se tomar una muestra del lugar de la infeccin+ por ejemplo un exudado !secrecin" de la conjuntiva del ojo, en caso de conjuntivitis o ien una muestra de orina si #a$ una infeccin urinaria+ o de lquido cefalorraqudeo si se trata de una meningitis ,as muestras pueden proceder de prcticamente cualquier lugar del organismo. Algunas de las acterias !o servacin directa por tincin de -ram." importantes que causan infeccin son% 1% "acterias &ram% positivas: o Estreptococos% pueden ser responsa les de infeccin en la sangre, faringitis, infeccin de las vlvulas del corazn, fie re reumtica, escarlatina, neumona, etc. o Corine acterias% difteria, infeccin de orina, etc. o Clostridios% t.tanos, otulismo, gangrena gaseosa, infeccin de la

sangre, etc. o /acillus% antrax. o Estafilococos% pueden causar 0eumona, infecciones supuradas !con pus" en la piel $ a scesos en otros lugares, sndrome del s#oc& txico, meningitis, artritis, osteomielitis, enteritis, etc. '% "acterias &ram negativas: o 1almonella, 1#igella $ Camp$lo acter% pueden provocar infeccin en el intestino. o Esc#eric#ia coli $ otras entero acterias% pueden provocar neumona, infeccin de orina, infeccin en la sangre, etc. o ,egionella% puede provocar una neumona grave $ atpica !la enfermedad del legionario" o 2eningococos% puede causar meningitis cere roespinal. o Haemop#$llus% infeccin respiratoria, meningitis, etc. o -onococo% causa la gonorrea o /rucella% rucelosis !fie re de malta". o 3seudomonas% infecciones de odo e infecciones en m4ltiples lugares en personas de ilitadas !neumonas en pacientes de 5'6, infeccin en los pies en dia .ticos, infeccin respiratoria en pacientes con fi rosis qustica, etc.". o /ordetella% tosferina o (tras acterias importantes no se ti*en ien con este m.todo $ para ellas se usan otros+ por ejemplo, para las acterias !mico acterias" que causan la tu erculosis o la sfilis !treponemas". R$# I(#CIN ) TR#N*+ORT$ ,a muestra se enva al la oratorio de micro iologa, para su estudio, $ #asta que sea procesada, se procurar que se altere lo menos posi le. ,os resultados que se o tienen, dependen en gran medida de la calidad de la muestra, de la calidad de la o tencin $ de las condiciones de transporte, por lo que de emos% ( tener las muestras preferentemente antes de comenzar la anti ioterapia o ien antes de introducir cualquier modificacin al tratamiento con antimicro ianos. ,a muestra o tenida no de e presentar contaminacin con flora #a itual, o ser la mnima posi le. ,os sistemas de recoleccin de en ser apropiados al tipo $ volumen de la muestra que se desea o tener. El material usado de e ser est.ril $ li re de material residual, como detergentes o desinfectantes. ,a muestra de e llegar al la oratorio tiempo determinado ,as muestras de en ser identificadas con una etiqueta ad#erida al envase, $ los datos anotados de en coincidir exactamente con los de la solicitud de examen.

7e en incluirse aquellos datos del paciente que permitan al la oratorio elegir el mejor procedimiento para el aislamiento de patgenos, tales como edad, #iptesis diagnstica, tratamientos concomitantes !especialmente anti iticos" enfermedades concomitantes, etc.tera.

Foto 2: Solicitudes para exmenes de muestras.

O"*$R!#CIN ,#CRO*C+IC# 8. ( servacin directa sin tincin o preparacin al fresco % o 3ara la 4squeda de #ongos, acterias $ parsitos. ,a muestra se suspende en suero fisiolgico, permite encontrar 9ricomonas 9reponemas en solucin de :(H, preferentemente en la identificacin de #ongos o ien en tinta c#ina. la visualizacin de Cr$ptococcus neoformans. ;. ( servacin directa con tincin% o Tincin de Gram. ,a diferente coloracin que adquieren las acterias -rampositivas se asa en el menor contenido lpidos de la pared celular $ en la reducida permea ilidad a los solventes de estos microorganismos, en comparacin con los gramnegativos. ,as acterias grampositivas se ti*en violeta por la retencin del complejo cristal violeta genciana<$odo, mientras que las grannegativas no retienen el complejo $ se ti*en rojas al usar la contratincin de safranina. ,a tincin de -ram a$uda a determinar rpidamente las caractersticas morfolgicas , por lo que es 4til en la indicacin de los anti iticos. Esta tincin tam i.n permite esta lecer si el material enviado al la oratorio para su cultivo posee la calidad adecuada. 3or ejemplo, es inadecuada una muestra de expectoracin en que se

o servan a undantes c.lulas epiteliales, lo que indica que est constituida principalmente por saliva $ no secrecin del tracto respiratorio. ,a presencia de polimorfosnuecleares !320" puede indicar infeccin. ,os #ongos levaduriformes se o servan formando pseudomicelios cuando #a$ invasin $ no slo colonizacin. o Tincin de Giemsa y Wright . Es 4til en el diagnstico de algunos parsitos como malaria $ a esiosis . En las lesiones producidas por virus Herpes simplex $ virus varicela=zoster, se o servan c.lulas gigantes multinucleadas, propias de las lesiones virales, lo que permite distinguirlas de las lesiones piod.rmicas acterianas. o Tincin argntica !-omori metenamina de plata, 7ieterle". Es una t.cnica difcil de efectuar, reservada a los la oratorios especializados, 4til en la deteccin de 3neumoc$tis carinii, ,egionella.9reponema, #ongos, ric&ettsias, $ microorganismos asociados a la enfermedad por ara*azo de gato. o Tincin cido peridico de Schi !3A1". 3ermite la deteccin de #ongos en muestras de tejido. o Tincin con anaran!ado de acridina . 5tiliza un fluorocromo que ti*e el cido desoxirri onucleico !A70". Es ms sensi le que la tincin de -ram , $a que a4n las acterias da*adas por los anti iticos pueden ser visualizadas. >equiere de microscopio de fluorescencia. o Tincin con a"ul de metileno . Es usada en la 4squeda de leucocitos fecales, permitiendo una uena tincin de los n4cleos de estas c.lulas. 1e visualizan en las infecciones intestinales invasoras de la pared del tu o digestivo, como las producidas por Esc#eric#ia coli enteroinvasora, 1#igella, colitis ulcerosa, enfermedad de Cro#n $ enterocolitis asociada a anti iticos. # &UNO* CU TI!O* #ulti$o de %yco&acterium spp . 5til en el diagnstico de tu erculosis pulmonar pausi acilar $ especialmente en las formas extrapulmonares. Actualmente est indicado, adems del cultivo en medio slido, el cultivo en medios lquidos, disminu$endo as los tiempos de desarrollo. En nuestro la oratorio utilizamos el sistema 2/</act semiautomizado para todo tipo de muestras, excepto sangre. #ulti$o de hongos. ,a 4squeda puede ser de #ongos levaduriformes o miceliados. Es importante conocer #acia cul de ellos se inclina la sospec#a, dado que los tiempos de incu acin son diferentes. ,os #ongos levaduriformes se incu an por plazos que oscilan entre ? $ @ das, en cam io los filamentos de en ser incu ados por plazos ms largos, de ;A #asta BA das. #ulti$o anaero&io. Algunas acterias de importancia clnica son anaer icas,

difciles de cultivar $ oxgeno l iles, por lo que en su recoleccin $ transporte de en usarse envases especiales que contengan una atmsfera reducida, es decir, con un ajo potencial de oxidoreduccin. Es de extraordinaria importancia que la muestra sea procesada de inmediato. ,a muestra en lo posi le de e ser o tenida por aspiracin. 7e er evitarse la contaminacin con flora residente, $a que en ella estn ampliamente representadas las acterias anaer icas. ,os sitios anatmicos adecuados para la o tencin de muestras para estudio de anaero ios son lquidos orgnicos est.riles !,quido pleural, sangre, ilis, lquido peritoneal, liquido sinovial, !,C>", muestras quir4rgicas o tenidas de sitios est.riles !Contenido de a scesos, aspirado de #eridas profundas" $ muestras de iopsias o tenidas en forma as.ptica !9ranscutnea pulmonar, aspiracin vesical suprap4 ica, lquido de culdocentesis , etc.tera". Es importante tener presente que a toda muestra procesada para la 4squeda de anaero ios, de e efectursele una tincin de -ram. 7ado que los cultivos tardan un tiempo en dar resultados, el -ram puede proporcionar una uena informacin temprana, 4til para iniciar tratamiento $, al mismo tiempo, verifica la concordancia con los resultados de los cultivos. #atteres intra$enosos. ,os cat.teres intravenosos son cultivados cualitativa o semicuantitativamente, dependiendo de las t.cnicas usadas en los la oratorios. ,a t.cnica de cultivo semicuantitativo !2a&i" , consiste en #acer rodar el extremo del cat.ter so re la superficie de una placa de medio cultivo, e informar el n4mero de colonias que se desarrollan en .sta. ,a presencia de 8? o ms colonias se correlaciona con inspeccin. -alta de desarrollo en el cultivo: ,a falta de desarrollo de un cultivo puede de erse a% 'iagnstico incorrecto. ,a inspeccin es de ida a microorganismos no cultiva les en los medios #a ituales, como virus, ric&ettsias, m$coplasmas $ c#lam$dias. 6nterpretacin errada de la tincin de -ram. 1e interpreta como microorganismos la presencia de artefactos en la preparacin. %uestra inadecuada. ,a muestra clnica no es representativa del material propio del sitio de la infeccin. Transporte inadecuado o prolongado. 1i esto sucede, algunos microorganismos pueden no ser via les al momento de llegar al la oratorio. Esto ocurre con anaero ios, estreptococos, 0eisseria. 1i el transporte es prolongado, puede #a er so re crecimiento de flora residente que oculte la presencia de patgenos, lo que pueden #a er estado en menor n4mero. Terapia con anti iticos. Aunque sea una dosis 4nica, .sta muc#as veces es suficiente para in#i ir o retardar el crecimiento acteriano.

%etodolog(a de cultivo inadecuada. 1e requiere de t.cnicas especiales para el cultivo de determinados patgenos, como el caso de anaero ios, mico acterias, #ongos $ ciertas acterias exigentes en cuanto a sus nutrientes $<o condiciones de vida. 3or esto, el la oratorio de e conocer cul es la sospec#a diagnstica, para tener la oportunidad de cultivar al agente etiolgico. T.CNIC#* IN,UNO &IC#* El diagnstico rpido de las enfermedades infecciosas se ve facilitado por el empleo de t.cnicas inmunolgicas a reviadas, aunque ninguna de ellas es tan especfica o sensi le como el cultivo. ,as t.cnicas inmunolgicas pueden estar orientadas a la 4squeda de anticuerpos o de antgenos. ,as destinadas a la 4squeda de anticuerpos necesitan del tiempo necesario para que se produzca un alza significativa del ttulo de anticuerpos. ,os antgenos en cam io, pueden ser detectados desde el comienzo de la enfermedad. Constitu$e una ventaja el que a4n durante el tratamiento con anti iticos, los antgenos sean detecta les. Entre las enfermedades infecciosas diagnosticadas por exmenes serolgicos estn sfilis, ru .ola, leptospirosis toxoplasmosis, mononucleosis infecciosa, etc.tera. Existen diferentes exmenes que permiten su titulacin, entre los que se cuentan aglutinacin, precipitacin, fijacin del complemento, #emaglutinacin, neutralizacin, inmunofluorescencia, ensa$o inmunoenzimtico, radioinmunoensa$o, etc.tera. ,os exmenes serolgicos se usan en la determinacin del grado de inmunidad que posee un sujeto para el diagnstico de infeccin aguda. 7iagnstico del estado inmune. Es de inter.s verificar el estado inmune del sujeto. 5na situacin de este tipo, por ejemplo, es determinar el grado de inmunidad frente a ru .ola en una mujer en edad f.rtil. 7iagnstico de infeccin aguda. El diagnstico de infeccin aguda se esta lece comparando los ttulos de dos sueros pareados, uno o tenido en la fase aguda $ otro en la fase de convalescencia, o 8C das despu.s de la primera muestra. El suero de fase aguda de e o tenerse tan temprano como sea posi le en el transcurso de la enfermedad. El suero de la fase convaleciente de e extraerse no antes de 8A das de comenzada la enfermedad, de preferencia ;=C semanas despu.s. 1ueros pareados. Cuando se usan sueros pareados, la conversin de seronegativo a seropositivo o un aumento de C veces o ms del ttulo de anticuerpos o tenido inicialmente es indicador de infeccin reciente. 1era altamente recomenda le que en todo paciente #ospitalizado con un estado fe ril no diagnosticado, se guarde una muestra de suero congelado, para su uso en eventuales estudios serolgicos. 3ara que las prue as serolgicas pareadas tengan validez am as muestras de suero !fase aguda $ fase de

convalecencia" de en procesarse simultneamente. 2uestra 4nica de suero !fase aguda". 5na muestra 4nica de suero tam i.n puede ser 4til para el diagnstico. ,os anticuerpos tipo 6gm aparecen tempranamente durante la infeccin primaria $ persisten por varias semanas. 3or lo tanto la presencia de anticuerpos 6gm es indicadora de infeccin reciente. D$T$CCIN D$ #NT/&$NO* 1on prue as destinadas a la deteccin de antgenos en las muestras clnicas. Estas reacciones inmunolgicas no dependen de la presencia de microorganismos via les, sino que slo de sus antgenos, por lo que pueden ser usadas aun en sujetos que est.n reci iendo anti iticos. Estos exmenes son de gran apo$o al diagnstico por su rapidez, pero no sustitu$en a los cultivos, a la tincin de -ram ni a otras t.cnicas de diagnstico. Entre las t.cnicas ms usadas est la aglutinacin mediante partculas de ltex recu iertas con anticuerpos especficos, que pueden utilizarse para demostrar en forma rpida la presencia de antgenos acterianos $ f4ngicos. En el diagnstico de cr$ptococosis, por ejemplo, se usan partculas de ltex recu iertas con anticuerpos antipolisacrido de la cpsula del Cr$tococcus neoformas, que provocan una aglutinacin visi le cuando est presente en el ,C> o en el suero del paciente. En casos de meningitis, se puede detectar en el ,C> la presencia de antgenos de Haemop#ilus influenzae !tipo + 1treptococcus pneumoniae !omnitipo"+ 0eisseria meningiditis !tipos A, /, C, D e E" $ de 1treptococcus eta #emoltico grupo /. Ensa$o inmunoenzimtico !E,61A". Esta t.cnica detecta una amplia variedad de agentes infecciosos. 1e deja interactuar el suero del paciente, en el que se encuentra el antgeno, con un anticuerpo especfico, luego se extrae el anticuerpo no ligado so rante $ se agrega una inmunoglo ulina anti=#umana conjugada con una enzima especfica !fosfatasa alcalina, peroxidasa". )inalmente se agrega un sustrato para la enzima. ,a enzima ligada al complejo act4a so re el sustrato, produciendo cam io de color, el que puede leerse a simple vista o mediante un espectrofotmetro, permitiendo su cuantificacin.El color que se produce es proporcional a la cantidad de anticuerpo especfico que se fija al antgeno. El m.todo se utiliza en la deteccin de virus sincial respiratorio. C#lam$dia trac#omatis, 0eisseria gonorr#oeae, rotavirus, adenovirus, virus #epatitis,virus varicela=zster, etc.tera. 6nmunofluorescencia directa !6)7". 5sa un anticuerpo marcado con isotiocianato de fluorescena, que permite la identificacin de antgenos acterianos o virales en las muestras clnicas. 1e usa en la deteccin de virus respiratorios !influenza, parainfluenza, adenovirus, virus sincicial respiratorio", virus #erpes, sarampin $ parotiditis, as como en acterias como /ordetella

pertussis, >ic&ettsia ric&ettsia $ C#lam$dia trac#omatis. Es una t.cnica mu$ sensi le, que requiere de sueros de mu$ uena calidad $ de personal adiestrado. 6nmunofluorescencia indirecta !6)6". 5sa el suero del paciente para investigar anticuerpos. Este suero es incu ado en presencia de un antgeno especfico. 3ara la visualizacin del completo resultante, se utiliza un anticuerpo antiglo ulina #umana, marcado con isotiocianato de fluorescena. $*TUDIO* $*+$C/-ICO* ,#* R$# I(#DO* UROCU TI!O El urocultivo es el estudio micro iolgico de la orina para detectar la presencia de microorganismos $ la posi ilidad o no de infeccin de las vas urinarias. ,o que de e ser confirmado por un cultivo de orina con un recuento de colonias superior a 8AA AAA colonias por ml si la muestra es tomada con olsa recolectora o de la parte media de la miccin !segundo c#orro". ,a 6nfeccin 5rinaria !695" se define como la invasin, multiplicacin $ colonizacin del tracto urinario por g.rmenes que #a itualmente provienen de la regin perineal. ,a incidencia exacta en el ni*o no se conoce, en reci.n nacidos se estima en 8F con una ma$or proporcin de varones afectados !relacin #om re $ mujeres es B%8", en lactantes B a ?F con igual proporcin #om re=mujer, $ en preescolares $ escolares una incidencia del ;F con una clara preponderancia en mujeres !H%2 G 8%?". A los siete a*os de edad, un H,CF de las ni*as $ 8,@F de los ni*os, #a rn sufrido al menos un episodio. O01etivos: ( tencin de una muestra con fines diagnsticos $ < o terap.uticos. 5tilizar m.todos adecuados para la validez de la muestra. 2anejo correcto de la muestra.

Foto ): contenedores para orina

,aterial: -uantes no est.riles. -asas est.riles. )rasco recolector est.ril.

2aterial para la #igiene genital. Cu*a o otella. /olsa colectora en ni*os $ en lactantes. 1i el paciente est sondado necesitar% o 3inza de &oc#er. o 9orunda de gasa. o Ieringa con aguja montada. o Antis.ptico. +rocedimiento: ,a muestra idnea es la primera miccin de la ma*ana, $a que permite la multiplicacin de acterias durante la noc#e. ,a recogida de e realizarse con a soluta asepsia, $a que si no es as podra dar resultados errneos. 1. Tcnicas para mu!eres: o 1e lavar las manos cuidadosamente con agua $ ja n, las enjuagar con agua $ las secar con una toalla limpia. o 1e separarn los la ios ma$ores $ menores, $ los mantendr separados en todo momento #asta que se #a$a recogido la orina. o Con una gasa enja onada se lava ien la vulva pasndola de delante #acia atrs, se repetir el proceso un total de C veces. o Enjuagar cuidadosamente con agua #ervida para eliminar los restos de ja n. o 1e indicar a la paciente que orine desec#ando los ;A=;? primeros mililitros, tras lo cual $ sin interrumpir la miccin, se recoger el resto de la orina en el recipiente. o El frasco de e sujetarse para que no tome contacto con pierna, vulva o ropa del paciente. ,os dedos no de en tocar el orde del frasco o su superficie interior. 2. Tcnica para hom&res: o ,avado de las manos con agua $ ja n. o >etraer completamente el prepucio, que se mantendr as en todo momento, #asta que se #a$a recogido la orina. o ,impiar el glande con ja n neutro. o Eliminar los restos de ja n enjuagndolo con agua #ervida. o 1e pedir al paciente que orine desec#ando los primeros ;A=;? mililitros para, sin interrumpir la miccin, recogerse el resto de la orina en el recipiente est.ril. B. Tcnica para ni*os. o En ni*os $ ni*as ma$ores la orina se recoge de forma similar a los adultos. o En ni*os $ ni*as ms peque*os, la orina se recoger en colectores o

o o

olsas est.riles especialmente dise*adas para ellos de la siguiente forma% ,avado cuidadoso de los genitales $ rea perineal igual que en los adultos. Colocar la olsa de plstico o el colector. 'igilar la olsa cada BA minutos $ tan pronto como el ni*o #a$a orinado, de en retirarse $ enviarse al la oratorio para su procesamiento. 1i la miccin no se #a realizado en una #ora, se repite la operacin colocando una nueva olsa. 5na vez recogida la muestra, lave de nuevo la zona genital, para evitar irritaciones. Enve la muestra al la oratorio junto con la peticin escrita. >egistro en su #oja de evolucin de enfermera% t.cnica, fec#a, #ora, caractersticas de la orina, incidencias presentadas.

Transporte. ,a orina de e llegar al la oratorio en el plazo de una #ora. Cuando esto no sea posi le de e refrigerarse a CJC durante un tiempo mximo de ;C #oras. El la oratorio de e controlar el transporte, garantizndose el que las muestras #an sido refrigeradas desde el momento de su toma, siendo admisi le, si no puede garantizarse el transporte correcto, la utilizacin de alg4n conservante !cido rico al ;F o el sistema comercial con rico=formiato". !olumen de la muestra /51K5E7A '(,52E0 7E (>60A !ml" C(0167E>AC6(0E1 /acterias A,? L 8 3rimera orina de la ma*ana Hongos M;A 3rimera orina de la ma*ana 2$co acterias M;A 3rimera orina de la ma*ana, B das consecutivos Anaero ios 8 Aspirado suprap4 ico 'irus 8A = 8? 3rimera orina de la ma*ana, enviar con #ielo al la oratorio En pacientes ingresados con imposi ilidad de recoger la muestra por s mismos, se realizar sondaje vesical por personal sanitario experto con las medidas as.pticas oportunas. 3ara la investigacin de anaero ios es necesario que la orina se o tenga por puncin suprap4 ica. 3ara la 4squeda de mico acterias, la orina se recoge de la forma descrita anteriormente durante tres das consecutivos. En este caso el volumen de orina de e ser 8AA=8?A ml. $ se elegir preferentemente la primera miccin de la ma*ana. Cuando se sospec#a la presencia de #ongos $ virus, el volumen de orina ser superior a ;A ml. $ en el caso de parsitos se recoger la orina de ;C #oras.

O0servaciones: Evitar fugas de orina al poner la parte ad#esiva de la olsa. 7espegar la olsa con cuidado para no lesionar la piel. El sondaje vesical en ni*os $ lactantes es una t.cnica que se reduce a lo imprescindi le por el gran riesgo de infeccin que entra*a. R$CO&ID# D$ ,U$*TR#* -$C# $* Consiste en la recogida de #eces para su estudio en el la oratorio. O01etivos: ( tener una muestra de #eces con fines diagnsticos $<o terap.uticos. 5tilizar m.todos adecuados para la validez de la muestra. 2anejo correcto de las muestras. 5tilidad% o #oproculti$o. 1e usa de preferencia en la 4squeda de patgenos intestinales productores de enterocolitis aguda. ,a muestra se o tiene directamente de la deposicin recientemente emitida o ien de un #isopado rectal. 7e e usarse un medio de transporte adecuado !Car$= /lair" si .sta no va a ser procesada de inmediato. ,a seleccin de los medios de cultivo, as como el procedimiento de aislamiento a seguir, dependen del agente etiolgico que se est. investigando. 1i no se explicita otra situacin, rutinariamente, la 4squeda se concentra en los patgenos #a ituales como 1almonella $ 1c#igella. En los casos especiales, de e indicarse si se sospec#a de Esc#eric#ia Coli enteropatgena, enteroinvasora, enterotoxig.nica, entero#emorrgica , o entero agregante+ Camp$lo acter, 133.,'i rioc#olera, Eersinia enteroclitica, etc. o Estudios parasicolgicos. o Estudio oxiuros. ,aterial -uantes no est.riles. >ecipientes est.riles con cierres de rosca. Cu*a. Cuc#arilla est.ril. 7epresores est.riles. Hisopo. 3apel ad#esivo transparente. +rocedimiento: 6nformar al paciente de la t.cnica. 1i el ni*o puede cola orar indquele que realice la #igiene genital $ la recogida de la muestra en el cuarto de a*o. En los pacientes que no cola oran%

1e les coloca en la posicin adecuada sedestacin o dec4 ito supino, so re la cu*a si se mantienen en ella. o 1e les pondr un pa*al limpio !lactantes", que se ira cam iando cada #ora para evitar la contaminacin de la muestra por orina. o 5na vez realizada la deposicin, pngase los guantes, cu ra la cu*a $ retrela, evitando la contaminacin $ los malos olores. o 1i las deposiciones son lquidas o irritantes, inspeccionar la zona anal en usca de microlesiones o irritaciones. o 5tilice dos depresores linguales para recoger la deposicin $ transferirla al recipiente. !una muestra como una casta*a". o 9ape el frasco. o 6dentificar el recipiente con la etiqueta del paciente $ el tipo de muestra. o >emita la muestra al la oratorio de inmediato, o mant.ngala a temperatura am iente #asta su envo, si este se demora ms de BA minutos, se recurre a utilizar conservantes !8Aml de alco#ol polivinlico 3'A" $ se mantiene en el frigorfico #asta su envo. o 3ara detectar oxiuros en los ni*os% o Colocacin de guantes est.riles, $ secado de la zona anal al ni*o. o ,a toma se realiza por al ma*ana, para ello se separan los gl4teos del ni*o $ se le aplica un trozo de cinta ad#esiva en el ano #asta conseguir la muestra. o ,a muestra se deposita so re un portao jeto para ser enviada al la oratorio. CO+ROCU TI!O O0tenci2n de la muestra 1i son formadas o pastosas se toma una porcin del recipiente donde #a$an sido emitidas $ se transfieren al sistema elegido para el envo al la oratorio. 1e seleccionan zonas donde #a$a sangre, moco o pus. 0o son vlidas las muestras contaminadas con orina. 0o de e utilizarse para la recogida papel #igi.nico, porque suelen tener sales de ario que in#i en algunas acterias enteropatgenas. !olumen m3nimo de muestra Heces formadas o pastosas% al menos 8 ; gr. para virologa, a*adir de ; a C gr. ms. 2uestras del tama*o de una nuez son mu$ adecuadas pues permiten realizar la ma$ora de las investigaciones posi les. Heces lquidas% entre ? $ 8A ml. Transporte% 3ara el estudio acteriolgico es suficiente enviar la muestra en un recipiente est.ril si se va a procesar en el plazo de 8 ; #oras despu.s de su emisin. En caso contrario se remite en un sistema de transporte para acterias. En am os casos se mantiene en refrigeracin #asta el procesamiento, para evitar el so recrecimiento de la flora normal que puede enmascarar o destruir a los enteropatgenos. El fro puede
o

afectar la via ilidad de 1#igella spp. 3ara el estudio de toxinas de C. difficile, la muestra se puede mantener #asta CH #oras en refrigeracin, congelada a =;AJC se puede mantener indefinidamente. Este tipo de muestra, preferi lemente sin medio de transporte, es indispensa le para el examen en fresco, el ensa$o de las toxinas de C. difficile, deteccin por concentracin de #uevos o parsitos $ estudios virolgicos !cultivos, inmunoelectromicroscopa, E,61A, o ltex para rotavirus". Es preferi le enviar las muestras para estudio virolgico sin medio de cultivo, pues este dilu$e las partculas virales disminu$endo la sensi ilidad. 1i su envo se retrasa muc#o es necesario utilizar un medio de transporte. 1e enviarn en recipientes colocados en #ielo. 3ara el estudio de parsitos es 4til adems, enviar una muestra peque*a en un medio fijador. 5na parte en dos de fijador de alco#ol polivinlico. ,as muestras para coprocultivo, de ern tomarse antes de la administracin de antimicro ianos o agentes antidiarr.icos. Es conveniente tam i.n evitar, so re todo para estudios parasitolgicos la utilizacin previa de anticidos $ laxantes oleoso, as como de los compuestos #a itualmente utilizados para estudios radiolgicos digestivos ! ario, ismuto". 6ndicar siempre el juicio diagnstico de presuncin $ si el paciente es menor de un a*o. 1olicitar las investigaciones especiales explcitamente !C. difficile, C. perfringens, 1. aureus, etc.". 1i con la primera muestra no se detecta la presencia de enteropatgenos, es necesario enviar en los das siguientes, dos tomas adicionales. En general, para los estudios parasitolgicos, se de en enviar tres muestras tomadas en diferentes das. ,uestras inadecuadas% 2uestras de restos fecales. Heces emitidas anteriores a dos #oras $ que no #a$an sido refrigeradas. ,as tres tomas realizadas el mismo da. Interpretaci2n de los coprocultivos: El coprocultivo cumple con la metodologa adecuada para identificar las nuevas acterias enteropatgenas, adems contri u$e al conocimiento de la etiologa de la E7A infantil $ al uen tratamiento. ,a coleccin $ preservacin adecuada de muestras de #eces para coprocultivo es a menudo dispendiosa pero necesaria para el aislamiento de microorganismos causantes de procesos infecciosos gastrointestinales. >ecomendaciones para la recoleccin de las muestras% >ecoleccin en el estadio primario de la enfermedad !salmonella $ s#igella se encuentran en n4mero aprecia le en las #eces en el perodo agudo, por lo que la muestra de e o tenerse en los tres primeros das", lo mismo que para tratar de aislar E. Coli enteroinvasiva $<o E. Coli toxig.nica. 1i es posi le, examinar varias muestras sucesivas de materia fecal para ma$ores posi ilidades de aislamiento.

0o de e iniciarse tratamiento anti itico antes de tomar las muestras para coprocultivo. 2uestras de #eces reci.n emitidas, en recipientes est.riles de tama*o adecuado. 1i #a$ sospec#a de s#iquellosis, un esco illeo rectal puede servir, $a que este microorganismo se encuentra en la parte final del intestino. ,os coprocultivos se piden en toda diarrea desinteriforme, mxime si cursa con respuesta inflamatoria sist.mica, o si #a$ pus o sangre en las #eces. Estadsticamente los ndices de positividad de estos coprocultivos puede llegar #asta el @?F. Ha$ disponi les en algunos la oratorios prue as que intentan, por m.todos directos o indirectos $ de resultado rpido, la deteccin de antgenos de diversos g.rmenes% E,61A para rotavirus, adenovirus $ gardia lam ia,3C> para casi todas las acterias, #ongos $ parsitos. O0servaciones: >ecogida de la muestra sin contaminar $a que puede alterar el resultado. 6nformar a la familia si requiere preparacin previa !dieta, etc". $ H$,OCU TI!O Consiste en la extraccin de muestras sanguneas seriadas para su estudio $<o cultivo en el la oratorio $ as determinar los agentes patgenos causantes de algunas infecciones.

Foto +: rascos de hemoculti$os ,aero&ios y anaero&ios-

+rocedimiento: >etirar los tapones externos de los frascos. 7esinfectar los tapones de goma con alco#ol iodado o con iodforo,

dejndolo secar al menos un minuto. ,ocalizar por palpacin la vena que se va a puncionar. 7e e utilizarse una vena distinta para cada extraccin. o Cuando no #a$a venas accesi les puede realizarse la extraccin de sangre arterial. o 0o son adecuadas las muestras procedentes de cat.ter, solamente en caso de que se sospec#e infeccin del propio cat.ter $ se complica su retirada+ se recomienda tomas del razo opuesto $ otras del razo del cat.ter, para sa er si es intra o extraluminal 7esinfectar con alco#ol una zona de piel de unos 8A cm de dimetro. 1e comenzar por el centro $ se irn #aciendo crculos conc.ntricos #acia el exterior. >epetir el paso anterior pero con el alco#ol iodado, dejndolo secar durante un minuto. Extraer la sangre sin tocar en ning4n momento el campo desinfectado. 1i fuera necesario palpar nuevamente la vena se utilizarn guantes de goma est.riles o se desinfectarn los dedos de la misma manera que la piel del paciente. ,a cantidad de sangre a introducir en cada frasco viene determinada por el modelo utilizado en cada #ospital, entre 8?=;A ml por toma en adultos $ 8=B ml en ni*os. o Como norma general es adecuado que la sangre mantenga una proporcin 8%8A con el medio de cultivo. Es decir, para un frasco de 8AA ml, introducir 8A ml. de sangre. o En caso de neonatos $ ni*os peque*os en que no se pueden o tener vol4menes grandes de sangre es suficiente una cantidad de 8=? ml, que se introduce en un solo frasco. 6ntroducir la sangre en los frascos evitando que entre aire en el frasco para cultivo en anaero iosis. ,a ventilacin se realizar en el la oratorio de 2icro iologa. 2over los frascos para que la sangre $ el medio de cultivo se mezclen. 6ntroducir los frascos a B@JC. 04mero de muestras% tres #emocultivos por paciente, previos al tratamiento antimicro iano. El intervalo entre las extracciones de e ser superior a una #ora cuando sea posi le, pero cuando exista una gran urgencia en iniciar el tratamiento, este intervalo puede acortarse #asta 8? minutos. En caso de sepsis $ endocarditis su aguda las extracciones se reparten en ;C #oras $ en caso de que sean los #emocultivos negativos, o tener tres muestras ms al da siguiente. Transporte% 7e en enviarse al la oratorio. Hasta su envo mantener a B?=B@JC+ cuando esto

no sea posi le, mantener a temperatura am iente. 0unca de e refrigerarse ni congelarse. .,4todos de estudio% ,os m.todos para el estudio micro iolgico de los #emocultivos pueden ser cuantitativos, semicuantitativos $ cualitativos. ,os m.todos cuantitati$os permiten esta lecer el n4mero de acterias por ml. de sangre cultivada En los m.todos semicuantitati$os se sigue un procedimiento de lisis centrifugacin. ,a sangre se centrifuga $ el sedimento se siem ra directamente en las placas de cultivo. Este m.todo permite una valoracin semicuantitativa por recuento de las colonias aisladas. ,os m.todos cualitati$os se realizan cultivando la sangre en frascos con medio lquido o ifsico $ son los utilizados de forma rutinaria en la ma$oria de los ,a oratorios de 2icro iologa. O0servaciones En primer lugar, es necesario recordar que la sangre inoculada en los frascos puede contener microorganismos, incluidos el virus de la #epatitis o el '6H, lo que implica un riesgo de infeccin para las personas que los manipulan. En este sentido, existen en todos los #ospitales normas de prevencin en el manejo de sangre que de en ser seguidas de forma estricta $ que mu$ someramente se podran resumir en la utilizacin de guantes, atas, mascarillas desec#a les, campanas protectoras $ en la no reinsercin de las agujas en su capuc#n original, arrojndolas a los envases preparados a tal efecto. O"T$NCIN D$ $*+UTO +#R# $5#,$N ,ICRO"IO &ICO ) CITO &ICO El estudio de esputo en el la oratorio, nos facilita una informacin esencial $ rpida de la evaluacin, evolucin $ so re el diagnstico en los pacientes con patologa respiratoria. O01etivos: 7eterminar si el microorganismo es -ram N o -ram =% mediante tincin de -ram, cu$os resultados estn disponi les en pocas #oras, siendo 4til para seleccionar la anti ioterapia #asta que est.n otros resultados. 7eterminar presencia de acilos de tu erculosis% mediante tincin acidoalco#olresistente !/AA>". >esultado en pocas #oras. 7eterminar mediante cultivo especfico la evidencia o no de m$co acterium tu erculoso% mediante cultivo de ,oOestein. >esultado en B=P semanas+ se requieren muestras de B das consecutivos. 7eterminar la presencia de c.lulas malignas% muestra de esputo aislada con solucin fijadora.

Foto .: dispositi$o de extraccin por aspiracin de esputo y/o secreciones &ron0uiales ,mucoextractor-

+rocedimiento: El esputo se recoge a primera #ora de la ma*ana !ms concentrado $ ms a undante por el acumulo que se produce con el sue*o" ,a muestra se recoge en un contenedor est.ril $ se transporta de forma rpida al la oratorio. ,a recoleccin del esputo se puede realizar por% 8. ( tencin directa% o El paciente tose de forma voluntaria, o 1i no se consigue producir una muestra !esputo inducido"% Enjuagar la oca con agua destilada est.ril o solucin salina. ( tener el esputo tras una expectoracin profunda, preferentemente matinal. 7e no producirse expectoracin espontnea, puede inducirse el esputo con ne ulizaciones de suero fisiolgico est.ril !8? ml durante 8A minutos", siendo 4til adems realizar un drenaje postural o fisioterapia respiratoria. !olumen m3nimo% 7e ; a 8A ml, si es posi le. Transporte 6 conservacion% Envo inmediato al la oratorio !no superior a ; #oras". 1i no es posi le, conservar en frigorfico CJC. Es preferi le realizar la toma antes de instaurar el tratamiento anti itico.

0o es 4til para anaero ios. 0o son inocula les las secreciones de sospec#osa procedencia. ,a expectoracin de e rec#azarse #asta o tener un esputo de calidad suficiente !mas de ;? leucocitos polimorfonucleares por campo 8AAx, $ de 8A c.lulas epiteliales por campo 8AAx". 6nstruir al paciente para que expectore cualquier secrecin postnasal. Explicar la mejor forma de o tener un esputo% realizar una inspiracin profunda #asta su mxima capacidad $ exa#alar el aire con una profunda tos expulsiva directamente en el contenedor est.ril $ de oca anc#a. Anotar el color, consistencia, olor $ cantidad del esputo.

;. ( tencin indirecta% o El esputo tam i.n se puede recoger en pacientes que son incapaces de toser $ expectorar, mediante aspiracin nasotraqueal o traqueal. o El recipiente es est.ril $ especial para adaptar una sonda de aspiracin al mismo. o ,a t.cnica de aspiracin, es est.ril. o ( tencin mediante lavado gstrico% Especialmente indicada en pacientes que no cooperan, en pacientes en fases agudas !proceso maligno o tu erculoso", o en ni*os mu$ peque*os. Este m.todo est asado en el #ec#o el paciente deglute esputos mientras duerme $ durante la expectoracin de las primeras #oras de la ma*ana. 3ara su o tencin se inserta una sonda nasogstica, que retiraremos, una vez o tenida la muestra. Es importante un mnimo de H #oras de a$unas antes de la extraccin. 1e aspira el contenido gstrico con una jeringa, se coloca en un contenedor est.ril $ se enva al la oratorio. /7UIDO C$-# ORR#7U/D$O ( tencin de lquido cefalorraqudeo por puncin lum ar con fines diagnsticos. 1e o tendr antes de instaurar cualquier terap.utica anti itica +rocedimiento 1e localiza la zona elegida para la puncin lum ar mediante palpacin de los espacios interverte rales una vez colocado el paciente en la posicin adecuada. 1e desinfecta con alco#ol al @AF una zona de uso 8A cm. de dimetro en el rea elegida, la aplicacin del desinfectante se #ace de forma conc.ntrica del centro a la periferia. 1e repite la operacin con povidona $odada que se deja secar durante un minuto.

>ealizar la puncin entre los espacios inter=verte rales ,B=,C, ,A=,? o ,?=18, siguiendo las normas de la ms estricta asepsia. Al llegar al espacio su aracnoideo retirar el estilete $ dejar salir li remente el lquido cefalorraqudeo que se recoger en tres tu os sin conservantes con tapn de rosca. -eneralmente el primero para el estudio ioqumico, el segundo para el estudio micro iolgico $ el tercero para investigacin de c.lulas !este suele ser el ms transparente aunque la puncin #a$a sido traumtica". 0o o stante, el tu o ms tur io se enviar a 2icro iologa.

Foto 1: recipientes estriles para 2#3 4 agu!as para puncin lum&ar

O0servaciones% 3ara el estudio acteriolgico rutinario es suficiente 8 ml, aunque es preferi le disponer de vol4menes superiores. 3ara #ongos o mico acterias se necesitan al menos ; ml adicionales ms por cada uno de los estudios, siendo desea le llegar a los 8A ml 3ara estudio de virus se necesita al menos 8 ; ml ms. El producto de e enviarse inmediatamente al la oratorio, pues alguno de los agentes de #emocultivo que se mantendr en id.nticas condiciones #asta su procesamiento en el la oratorio. 1i no se dispone de estufas se mantendr a temperatura am iente. 0unca de er refrigerarse pues se puede afectar la via ilidad de 0. meningitidis $ H. influenzae. En el ,C> no se estudian rutinariamente anaero ios. En caso de solicitar una investigacin se enviar en un medio de transporte de lquidos para estudio de anaero ios o en #emocultivo de anaero ios. ,as muestras para el estudio de virus se enviarn en #ielo, si el envo se

retrasa ms de ;C #oras, se de er de conservar a =@AJC. Como la meningitis suele surgir por un proceso acteri.mico se solicitarn simultneamente #emocultivos, pudiendo ser as mismo estudiadas las posi les lesiones metastsicas cutneas. Es necesario que el m.dico se*ale claramente las investigaciones solicitadas ! acterias #a ituales, mico acterias, anaero ios, #ongos o virus". CU TI!O D$ &#R&#NT# Es una prue a de la oratorio que se #ace para aislar e identificar organismos que puedan causar una infeccin en la garganta. O01etivos El examen se realiza cuando se sospec#a de una infeccin en la garganta, en particular, una infeccin de garganta por estreptococos. Este examen se usa principalmente para identificar estreptococos en la garganta, sin em argo, se pueden detectar otros organismos, dependiendo del tipo de medio de cultivo utilizado. +rocedimiento ,actantes $<o ni*os% la preparacin fsica $ psicolgica que se puede rindar para este o cualquier examen o procedimiento depende de la edad, intereses, experiencias previas $ grado de confianza del ni*o. ,a persona de e inclinar la ca eza #acia atrs con la oca ien a ierta. 1e de en resistir las nuseas $ cerrar la oca mientras el cepillo toca la parte posterior de la garganta cerca de las amgdalas. 0o se de en usar enjuagues ucales antis.pticos antes del examen. 1e cepilla la parte posterior de la garganta con un aplicador de algodn est.ril !#isopo", cerca del rea de las amgdalas $ se coloca en un tu o con un medio de cultivo. O0servaciones 1e pueden indicar anti iticos antes de conocer los resultados. ,os anti iticos de en tomarse seg4n las instrucciones m.dicas, aunque los sntomas #a$an desaparecido. Con el fin de mejorar las posi ilidades de detectar acterias, el aplicador se puede utilizar para raspar la parte posterior de la garganta varias veces. ,a presencia de acterias normales de la oca de la garganta es un #allazgo normal. ,a presencia de ciertos organismos, como los estreptococos eta=#emolticos del grupo A, que ocasionan infeccin de garganta por estreptococos, al igual que otros organismos que causan difteria $ gonorrea, es anormal $ puede ser indicio de la presencia de una infeccin. Complicaciones Esta prue a es segura $ se tolera ien. En mu$ pocos pacientes, la sensacin de nusea puede llevar a una urgencia de vomitar o toser.

CU TI!O D$ # N#*O-#RIN&$8 C$+I #DO +#R# !IRU* R$*+IR#TORIO*8 C$+I #DO +#R# $*T#-I OCOCO* Consiste en la extraccin de una muestra de secreciones nasofarngeas es una muestra de las secreciones nasofarngeas para o servar $ estudiar en el la oratorio $ as para detectar la presencia de posi les organismos patgenos.

Foto 5: hisopos o esco&illones.

O01etivos Con este examen se identifican los microorganismos que causan los sntomas del tracto respiratorio superior. ,os cultivos nasofarngeos sirven para identificar virus respiratorios como Staphyloccus aureus6 7ordetella pertussis y 8eisseria meningitidis !tipos de acterias". El cultivo puede usarse para verificar la terapia con anti iticos apropiada. +rocedimiento 1e le pide al paciente que tosa antes de comenzar el examen $ que incline su ca eza #acia atrs. 1e pasa un aplicador !#isopo" de algodn con suavidad a trav.s de la fosa nasal #asta la nasofaringe, la porcin de la faringe que se encuentra so re el tec#o de la oca. 1e #ace rotar el aplicador !#isopo" rpidamente $ luego se retira. o 9dultos: no #a$ preparacin especial. o 7e&s y ni*os:,a preparacin fsica $ sicolgica que se puede rindar para este o cualquier examen o procedimiento depende de la edad, intereses, experiencias previas $ grado de confianza del ni*o. O0servaciones Es normal la presencia de los microorganismos que suelen encontrarse en la nasofaringe. 1e encuentran patgenos !cualquier virus, acteria u #ongo que pueda

causar una enfermedad". Complicaciones El paciente puede experimentar una leve molestia $ puede sentir nuseas. 0o #a$ riesgos graves. CU TI!O D$ /7UIDO D$ $*+#CIO + $UR# Es una prue a de la oratorio que se realiza en el lquido pleural !el lquido que se encuentra en el espacio alrededor de los pulmones" $ que se utiliza para aislar e identificar los organismos que causan una infeccin.

Foto :: material para ;9F

O01etivos Este examen se practica cuando se sospec#a la presencia de una infeccin en el espacio pleural o cuando en una radiografa de trax se o serva una acumulacin anormal de lquido pleural, pudiendo indicar la presencia de neumona, tu erculosis u otro a sceso pulmonar. +rocedimiento ,a muestra se o tiene por medio de una toracentesis% 7esinfeccin de la zona del trax a puncionar. 6nfiltracin de anest.sico local. 6ntroduccin de aguja entre las costillas. Aspiracin de una muestra de lquido en el espacio pleural. O0servaciones Es importante evitar toser, respirar profundamente o moverse cuando se est tomando la muestra. 0o se requiere ninguna otra preparacin especial para el examen. 1e presenta una sensacin de puncin cuando se in$ecta la anestesia e

igualmente se puede sentir algo de presin $ dolor localizado leve cuando la aguja de toracentesis entra en el espacio pleural. -eneralmente, despu.s del examen se toma una radiografa de trax para asegurarse de que el tejido pulmonar no #a$a sido afectado. El resultado normal de este examen es la ausencia de organismos. Complicaciones Existe el riesgo de sangrado pulmonar interno $ de neumotrax !pulmn colapsado". ,as complicaciones serias son mu$ poco frecuentes. C#*O* $*+$CI# $* %todos cuantitati$os En los pacientes policateterizados o portadores de cat.ter central para tratamientos prolongados o #emodilisis en los que se sospec#e que son foco de infeccin es posi le #acer #emocultivos cuantitativos. Estos se realizarn a partir del cat.ter $ al mismo tiempo por venopuncin. 1e estima que la acteriemia asociada a un cat.ter se produce entre el 8 $ el HF de las cnulas utilizadas. 3or otra parte, el BBF de las acteriemias nosocomiales tienen este origen. +rocedimiento 1e extraen de C a @ ml. de sangre a trav.s de cada cat.ter que se quiera estudiar $ se introducen en un tu o que contenga anticoagulante, el ptimo es el 131. 1e transportar al la oratorio rpidamente $ se realizarn placas por el m.todo de 1c#otmQeller. En cada uno de los tu os se especificar de forma mu$ clara la procedencia de la extraccin. 1e procede de la misma manera con la extraccin por venopuncin $ a la vez se realiza un #emocultivo convencional $a que la acteriemia puede ser de mu$ ajo grado $ no detectarse con el m.todo cuantitativo, o no ser el cat.ter el foco de la acteriemia. ,as placas se incu an a B?=B@JC durante ? das con lectura diaria. El procesamiento de los positivos es igual al de la t.cnica convencional descrita. 1e considera que un cat.ter es foco de acteriemia cuando se asla la misma acteria en los dos #emocultivos cuantitativos $ el n4mero de 5)C<ml. aisladas en el del cat.ter es C veces superior al o tenido por venopuncin. %icroorganismos especiales ,ico0acterias ,a sangre no es la muestra ms adecuada para diagnosticar una mico acteriosis. 0o o stante, actualmente en pacientes portadores del '6H se #a o servado que presentan mico acteriemia con relativa frecuencia, generalmente con mu$ poca sintomatologa o mu$ inespecfica. En estos casos puede estar indicado investigar la presencia de mico acterias en sangre. eptospiras ,a leptospirosis es una infeccin aguda producida por espiroquetas del g.nero ,eptospira que se muestra a menudo con un amplio espectro de manifestaciones

clnicas. -eneralmente, el microorganismo est presente en la sangre en la fase aguda, durante la primera semana de la enfermedad. eis9manias ;acientes con in eccin por <=> Cada vez es ma$or el n4mero de pacientes atendidos en los centros #ospitalarios portadores del '6H, un alto porcentaje de los cuales son adictos a drogas por va parenteral !A73'" $, al mismo tiempo #an aumentado considera lemente los enfermos con sida. Es ien conocido que el estado inmunitario de estos pacientes condiciona una elevada incidencia de infecciones oportunistas, estimndose en este grupo de po lacin un ndice de acteriemia entre el @,; $ el BAF, cu$a etiologa ms frecuente es 1treptococcus pneumoniae, 1tap#$lococcus auerus $ 1almonella spp. Adems, este tipo de enfermos presentan infecciones oportunistas diseminadas causadas por mico acteria, #ongos o parsitos que pueden detectarse mediante #emocultivo. As, son frecuentes las infecciones diseminadas por 2$co acterium avium, Criptococcus neoformans $ ,eis#mania donovani $ en nuestro pas, donde la prevalencia de la tu erculosis es elevada, es #a itual aislar 2$co acterium tu erculosis. 3or lo tanto, es aconseja le notificar siempre al ,a oratorio de 2icro iologa si un paciente es portador de '6H porque puede ser conveniente prolongar el perodo de incu acin de los frascos aero ios o #acer cultivos especiales seg4n la orientacin diagnstica del proceso infeccioso actual. >ecomendaciones 8. ,a extraccin de los #emocultivos seguir unas medidas de asepsia mu$ rigurosas. 1e informar peridicamente al personal encargado de la extraccin de la importancia de los #emocultivos, de los pro lemas que conlleva la contaminacin de esta muestra $ de las normas a seguir para una adecuada recogida. 7urante la extraccin $ el procesamiento de los #emocultivos se tomarn las medidas de proteccin adecuadas para evitar la adquisicin de infecciones como #epatitis e infeccin por '6H. ;. 1e extraern dos o tres #emocultivos por venopunciones diferentes, cada una con un volumen de sangre de 8A ml. que se repartir a partes iguales en un medio aero io $ en un medio anaero io. B. El frasco aero io se ventilar $ en el anaero io se evitar la entrada de aire. C. ,os frascos se incu arn lo antes posi le en estufa de B?=B@JC. 0unca se mantendrn en nevera. ?. Entre las 8H $ las ;C primeras #oras de incu acin se realizar una lectura macroscpica de los frascos. A los que no tengan signos de crecimiento se les efectuar una tincin con naranja de acridina o un su cultivo ciego. #N$5O +R$+#R#CIN &$N$R# +#R# UN $5#,$N O +ROC$DI,I$NTO D$ NI:O* +R$$*CO #R ,a preparacin puede ser efectiva para reducir la angustia en los pacientes peditricos que se someten a exmenes $<o prue as por parte del personal

sanitario pudiendo minimizar la sensacin de dolor, el llanto $ la resistencia al procedimiento. Antes del examen, es preciso entender que el ni*o pro a lemente llorar $ que la preparacin no cam ia el #ec#o de que el ni*o sienta alg4n malestar o dolor. 1e puede tratar de demostrar lo que ocurrir durante el examen con anticipacin para conocer los miedos $ preocupaciones particulares del ni*o. El uso de alg4n juguete u otro o jeto para representar el procedimiento puede a$udar a revelar las preocupaciones que el ni*o tal vez no quiera admitir directamente. ,o anterior puede a$udar a disminuir la ansiedad del ni*o de ido a que la ma$ora de las personas presenta ms temor ante lo desconocido que el que se manifiesta cuando se sa e exactamente qu. esperar. 1i los temores del ni*o son irreales, se le puede explicar lo que realmente suceder+ si est preocupado acerca de una parte inevita le del examen, no se de en minimizar sus preocupaciones sino confirmarle que la persona estar con .l tanto como sea posi le. Es recomenda le asegurarse de que el ni*o entienda que el procedimiento no es un castigo. 3>E3A>AC6R0 A09E1 7E, 3>(CE7626E09(% ,as explicaciones so re el procedimiento de en limitarse a ? 8A minutos, pues los ni*os peque*os tienen un perodo de atencin limitado. ,a preparacin de e realizarse justo antes del examen o procedimiento para que el ni*o no se preocupe con das o semanas de anticipacin. A continuacin se encuentran algunas pautas generales para preparar a un ni*o para un examen o procedimiento% o 5tilizar un lenguaje que el ni*o entienda, usando t.rminos concretos $ evitando cualquier terminologa a stracta. o Asegurarse de que el ni*o entienda cul es la parte exacta de su cuerpo que est involucrada $ que el procedimiento se va a limitar a esa rea. o 1i el procedimiento afecta una parte del cuerpo que cumple una funcin notoria !como el #a la, la audicin o la miccin", se de en explicar los cam ios que se van a presentar despu.s. o 1e le de e permitir al ni*o gritar, llorar o expresar su dolor de cualquier otra forma ver al. o 1er #onesto con el ni*o acerca de la molestia que se puede sentir. o 3reguntarle al ni*o si no #a entendido algo que el adulto #a explicado. o 7escri ir lo que se siente durante el examen lo mejor posi le. o 3ermitir al ni*o practicar diferentes posiciones o movimientos que son necesarios para ese examen o procedimiento en particular, como la posicin fetal para una puncin lum ar.

Enfatizar los eneficios del procedimiento $ todo lo que puede darle placer al ni*o, una vez terminado el procedimiento, como sentirse mejor o ir a casa. 1e puede ofrecer al ni*o un #elado u otra invitacin despu.s, pero no condicionar esto a Ssentirse ienS durante el examen. o 3racticar la respiracin profunda $ otras actividades confortantes. 1i es posi le, se de e permitir que el ni*o tome de la mano al acompa*ante $ pedirle que la apriete cuando sienta dolor. 75>A09E E, 3>(CE7626E09(% ,a presencia del adulto, si es posi le, a$uda al ni*o durante el procedimiento, so re todo si el examen permite que el ni*o mantenga un contacto fsico. 1i el procedimiento se realiza en el #ospital o en el consultorio del m.dico, lo ms pro a le es que el adulto tenga la oportunidad de estar presente. 1i al adulto no se le #a preguntado si desea acompa*ar al ni*o $ quisiera #acerlo, le de e preguntar al m.dico si esto es posi le. 1i el adulto cree que puede descomponerse o ponerse ansioso, de e optar por quedarse a cierta distancia, pero siempre dentro del campo visual del ni*o. 1i no es posi le que el adulto est. presente, dejar un o jeto familiar acompa*ando al ni*o puede a$udarlo a sentirse mejor. (tras consideraciones% ,imitar el n4mero de personas extra*as que entren $ salgan de la #a itacin durante el procedimiento, pues su presencia puede aumentar la ansiedad. 3edir que el personal sanitario que #a compartido ms tiempo con el ni*o que est. presente durante el procedimiento. 1olicitar el uso de anestesia, cuando sea adecuado, para reducir el nivel de molestia que el ni*o pueda sentir. 3edir que los procedimientos dolorosos no se realicen en la cama del #ospital para que el ni*o no asocie el dolor con el cuarto del #ospital. 1i la persona est dentro del campo visual del ni*o, puede imitar el comportamiento que el m.dico necesita que tenga el ni*o, tal como a rir la oca.
o

3>E3A>AC6R0 60)A096, 3A>A 50 ETA2E0 ( 3>(CE7626E09( 7ado el nivel de desarrollo del ni*o !de A a 8 a*o", #acer una peque*a preparacin antes del examen ser de poco eneficio, pero algunas consideraciones pueden aliviar la ansiedad de los padres. Antes del examen, se de e sa er que el ni*o pro a lemente va a llorar $ que puede ser necesario inmovilizarlo. ,a mejor manera en que un padre puede a$udar a su #ijo durante el procedimiento es estar all $ demostrarle su cari*o. El llanto es una respuesta normal al am iente extra*o, a las personas que no le son familiares, a la inmovilizacin $ a la separacin de sus padres. El e . puede llorar ms por estas razones que por la misma incomodidad del

examen o procedimiento. 1a er esto desde el principio, al igual que tener informacin especfica so re el examen, puede a$udar a disminuir posteriormente la ansiedad que siente un padre en cuanto a lo que va a ocurrir. 3ara ma$or informacin, ver el examen apropiado. ,A 623(>9A0C6A 7E ,A 602('6,6UAC6R0 A los e .s les falta control fsico, coordinacin $ capacidad para seguir instrucciones que los ni*os ma$ores $ los adultos normalmente poseen. 1e puede usar la inmovilizacin durante un procedimiento o en otras situaciones para garantizar la seguridad del e .. Al e . se lo puede inmovilizar con las manos o con dispositivos fsicos. 3or ejemplo, si el e . necesita una radiografa, es necesario que no se mueva para que los resultados sean claros. Adems, mientras se estn tomando las placas en los estudios radiolgicos $ nucleares, todo el personal de e salir del cuarto temporalmente $, en estos casos, se #ace la inmovilizacin por seguridad del e .. 1i se efect4a una venopuncin para o tener una muestra de sangre o empezar una va 6', la inmovilizacin es importante para prevenir una lesin al e ., $a que si se mueve mientras le estn insertando la aguja, la lesin puede lastimar el sistema venoso, alg4n #ueso, tejido o nervios. ,a ma$ora de los exmenes $ procedimientos requieren una precisin extrema para o tener los resultados deseados, $a sea para colocar una va 6' correctamente, asegurarse de los resultados exactos de un examen o evitar lesiones al e .. El personal sanitario de e #acer uso de cualquier medio para garantizar la seguridad $ ienestar del e .. Adems de la inmovilizacin, #a$ otras medidas como los medicamentos, la o servacin $ los monitores. 75>A09E E, 3>(CE7626E09(% ,a presencia de los padres puede a$udar al e . durante el procedimiento, especialmente si es posi le mantener el contacto fsico con el e .. En caso de llevarse a ca o en el #ospital o en el consultorio del m.dico, los padres tienen ma$or oportunidad de estar presentes. 1i a los padres no se les #a pedido estar al lado de su #ijo, pero les gustara estar con el ni*o, se les recomienda preguntar al m.dico si esto es posi le. 1i los padres piensan que pueden indisponerse o sentirse mu$ ansiosos, lo mejor es que traten de guardar las distancias, pero manteni.ndose a la vista del ni*o. En caso de no sentirse en capacidad de estar presentes, pueden dejar un o jeto que le sea familiar al ni*o para que lo reconforte. (9>A1 C(0167E>AC6(0E1% ,imitar el n4mero de extra*os que entran $ salen del cuarto durante el procedimiento, $a que esto puede aumentar la ansiedad.

1olicitar que el personal que #a pasado la ma$or parte del tiempo con el ni*o sea quien lleve a ca o el procedimiento. 1olicitar el uso de anest.sico, cuando sea apropiado, para reducir el grado de incomodidad que va$a a sentir el ni*o. 1olicitar que los procedimientos dolorosos no se realicen en la cuna del #ospital para que el ni*o no relacione el dolor con la cuna. 2uc#os #ospitales tienen salas de tratamiento especiales donde se llevan a ca o los procedimientos. 2ostrar al e . lo que los padres o el m.dico necesitan que el e . #aga con imitacin, como a rir la oca. "I" IO&R#-/#: 8. 1nc#ez 2. 2anual de procedimientos en ateriologa clnica. Editorial 3resencia ,tda. Ba. Edicin. Das#ington, 8VV;. 2. 3gina infecto=normas de ioseguridad del ministerio de salud p4 lica= urugua$ $ttp:%%&&&.infecto.edu.u'% 3. 3rocedimientos en micro iologa clnica=sociedad espa*ola de enfermedades infecciosas $ micro iologa clnica. $ttp:%%&&&.seimc.or(% C. A ra#am, 2. >udolp#, Iulien. >udolp#Ws 3ediatrics. 9Oentiet# Edition, 8VVP. ?. >. 2artnez $ 2artnez. ,a 1alud del 0i*o $ el Adolescente. Cuarta edicin, ;AA8. 2anual 2oderno. 3aginas% PBA, PCH, VH?. P. Ies4s :umate, (nofre 2u*oz. 2anual de infectologa clnica. 7ecimosexta edicin, ;AA8. 2.ndez Editores. 3ginas ?V=P?. @. Iames ,arcom e.5rinar$ 9ract 6nfection 6n C#ildren. Clinical revieO. Clinical evidence. /2I 8VVV+B8V%88@B=88@? ! BA (cto er " H. Ec#everri I. Enfermedad diarreica infecciosa. 6nfecciones en 3ediatra. ;a. Edicin. 2c-raO Hill, 8VV@% ;HV=BAP. V. /e#rman, :liegman, Har in. 9ratado de 3ediatria% 0elson. 2ac-raO=Hill. Ed. ;AAA. 3ag% HP@, VHV, V;;, 8VAC. 10. 2edline% $ttp:%%medlineplus.(ov%spanis$% 88. 6mgenes propias. (s invito a que particip.is activamente en este captulo, dejando vuestras aportaciones en la Seccin de comentarios

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