CARBOHIDRATOS Y LIPIDOS GMEZ L., Joshua Andrs; GUZMAN T., Wilmar Bolvar; MAFLA., Julin Andrs; MERA G.

, Julin. Universidad de San Buenaventura Seccional Cali. Facultad de Ingenieras. Programa de Ingeniera Agroindustrial. Segundo semestre. Marzo 19/ 2010 I) RESUMEN:

Durante este laboratorio, se tomaron unos determinados compuestos orgnicos tales como: solucin de glucosa, leche, clara de huevo, solucin sacarosa, leche deslactosada, suspensin de almidn, entre otros. Para as por medio de unos determinados cidos (que en este caso sern los reactivos en la experimentacin) se vern y se reconocern los lpidos, el colesterol, el almidn, el glucgeno, la sacarosa, la lactosa y la glucosa en cada uno de los diferentes compuestos orgnicos que se mencionaron anteriormente. Palabras claves: determinacin, lpidos, colesterol, almidn, glucgeno, sacarosa, lactosa y glucosa II) INTRODUCCION:

Carbohidratos: Los carbohidratos son los compuestos orgnicos ms abundantes de la biosfera y a su vez los ms diversos. Normalmente se los encuentra en las partes estructurales de los vegetales y tambin en los tejidos animales, como glucosa o glucgeno. Estos sirven como fuente de energa para todas las actividades celulares vitales. Son complejos terciarios en los cuales el hidrgeno y el oxgeno estn en igual proporcin que el agua. Los ms comunes son los sacridos, los cuales se dividen tambin en monosacridos o azcares simples, disacridos y polisacridos. Como ejemplos tenemos a:

SACAROSA

Los carbohidratos se pueden clasificar en: Monosacridos: Llamados tambin azcares simples. Son los azcares ms Sencillos, no se hidrolizan y contienen de 3 a 6 tomos de carbono (desde Triosas hasta hexosas). Los ms importantes son la glucosa, la sacarosa, xilosa y fructosa. Oligosacridos: Son polmeros de monosacridos que se pueden hidrolizar produciendo un bajo nmero de monosacridos. Comprenden desde disacridos hasta hexasacridos. El ms notable es la lactosa (disacrido). Polisacridos: Son compuestos formados por la unin de muchos monosacridos. Se hidrolizan produciendo muchas molculas de monosacridos. El ms importante es el almidn. Con respecto a la configuracin de un carbohidrato, la estructura patrn es el aldehdo glicrido. El glcido que tiene el ltimo oxidrilo del carbono asimtrico hacia la derecha pertenece a la serie D. En caso contrario, es de la serie L. D y L son imgenes especulares y tambin antpodas pticos, pero las letras D y L no se refieren al sentido del poder rotatorio. Existen reactivos que pueden identificar a los Carbohidratos: Reaccin de Lugol: La coloracin producida se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn. No es por tanto, una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta producto de haber identificado una cetosa. Este mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico. Procedimiento:

Reaccin de benedict Identifica azcares reductores (aquellos que tienen su OH anomrico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El reactivo de Benedict consta de:

Sulfato cprico. Citrato de sodio. Carbonato anhidro de sodio. Adems se emplea NaOH para alcalinizar el medio. El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino, el ion cprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O). El medio alcalino facilita que el azcar est de forma lineal, puesto que el azcar en solucin forma un anillo de piransico o furansico. Una vez que el azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion cprico en solucin. En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetopentosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario enlico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cprico). Los disacridos como la sacarosa (enlace (1 2)O) y la trehalosa (enlace (11)O), no dan positivo puesto que sus OH anomricos estn siendo utilizados en el enlace glucosdico. En resumen, se habla de azcares reductores cuando tienen su OH anomrico libre, y stos son los que dan positivo en la prueba de Benedict. La accin reductora se manifiesta mediante una solucin de sulfato cprico (SO4Cu) de color azul, que pasa a xido cuproso (Cu2O) de color rojo ladrillo que precipita. El reactivo utilizado es el de Benedict o el de Fehling, que contienen sulfato cprico. Una turbidez verde-amarillenta en los resultados indica un 0,1-0,3% de azcar reductor. Un precipitado de color mbar anaranjado, indica ms de un 1,5% de azcar reductor.

Procedimiento:

Reactivo de biuret: Es aquel que detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida. Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El Hidrxido de Potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar. Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un mtodo colorimtrico que permite determinar la concentracin de protenas de una muestra mediante espectroscopa ultravioleta-visible a una longitud de onda de 540 nm (para detectar el in Cu2+).

LPIDOS:

son un conjunto de molculas orgnicas, la mayora biomolculas, compuestas principalmente por carbono e hidrgeno y en menor medida oxgeno, aunque tambin pueden contener fsforo, azufre y nitrgeno, que tienen como caracterstica principal el serhidrofbicas o insolubles en agua y s en disolventes orgnicos como la bencina, el alcohol, el benceno y el cloroformo. En el uso coloquial, a los lpidos se les llama incorrectamente grasas, ya que las grasas son slo un tipo de lpidos procedentes de animales. Los lpidos cumplen funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas la de reserva energtica (triglicridos), la estructural (fosfolpidos de lasbicapas) y la reguladora (esteroides). Los lpidos son biomolculas muy diversas; unos estn formados por cadenas alifticas saturadas o insaturadas, en general lineales, pero algunos tienen anillos (aromticos). Algunos son flexibles, mientras que otros son rgidos o semiflexibles hasta alcanzar casi una total flexibilidad molecular; algunos comparten carbonos libres y otros forman puentes de hidrgeno. La mayora de los lpidos tiene algn tipo de carcter polar, adems de poseer una gran parte apolar o hidrofbico ("que le teme al agua" o "rechaza al agua"), lo que significa que no interacta bien con solventes polares como el agua. Otra parte de su estructura es polar o hidroflica ("que ama el agua" o "que tiene afinidad por el agua") y tender a asociarse con solventes polares como el agua; cuando una molcula tiene una regin hidrfoba y otra hidrfila se dice que tiene carcter anfiptico. La regin hidrfoba de los lpidos es la que presenta solo tomos de carbono unidos a tomos de hidrgeno, como la larga "cola" aliftica de los cidos grasos o los anillos de esterano del colesterol; la regin hidrfila es la que posee grupos polares o

con cargas elctricas, como el hidroxilo (OH) del colesterol, el carboxilo (COO) de los cidos grasos, el fosfato (PO4) de los fosfolpidos, etc. Los lpidos son un grupo muy heterogneo que usualmente se clasifican en dos grupos, atendiendo a que posean en su composicin cidos grasos (lpidos saponificables) o no lo posean (lpidos insaponificables). Lpidos saponificables Simples. Lpidos que slo contienen carbono, hidrgeno y oxgeno. Acilglicridos. Cuando son slidos se les llama grasas y cuando son lquidos temperatura ambiente se llaman aceites. FUNCIONES DE LOS LIPIDOS: Complejos. Son los lpidos que adems de contener en su molcula carbono, hidrgeno y oxgeno, tambin contienen otros elementos como nitrgeno, fsforo, azufre u otra biomolcula como un glcido. A los lpidos complejos tambin se les llama lpidos de membrana pues son las principales molculas que forman las membranas celulares. Fosfolpidos Fosfoglicridos Fosfoesfingolpidos Glucolpidos Cerebrsidos Ganglisidos Lpidos insaponificables Terpenoides Esteroides Eicosanoides Los lpidos desempean diferentes tipos de funciones biolgicas:

Funcin de reserva energtica. Los triglicridos son la principal reserva de energa de los animales ya que un gramo de grasa produce 9,4 kilocaloras en las reacciones metablicasde oxidacin, mientras que las protenas y los glcidos slo producen 4,1 kilocaloras por gramo. Funcin estructural. Los fosfolpidos, los glucolpidos y el colesterol forman las bicapas lipdicas de las membranas celulares. Los triglicridos del tejido adiposo recubren y proporcionan consistencia a los rganos y protegen mecnicamente estructuras o son aislantes trmicos. Funcin reguladora, hormonal o de comunicacin celular. Las vitaminas liposolubles son de naturaleza lipdica (terpenos, esteroides); las hormonas esteroides regulan elmetabolismo y las funciones de reproduccin; los glucolpidos actan como receptores de membrana; los eicosanoides poseen un papel destacado en la comunicacin celular,inflamacin, respuesta inmune, etc. Funcin transportadora. El transporte de lpidos desde el intestino hasta su lugar de destino se realiza mediante su emulsin gracias a los cidos biliares y a las lipoprotenas.

III)

MATERIALES Y METODOS:

Determinacin de glcidos (materiales): 12 tubos de ensayo, 4 pinzas para tubos de ensayo, estufa, bao, beaker, pipetas de 5 ml y peras para pipetas. Reactivos: solucin de glucosa al 1%, solucin de sacarosa al 1%, suspensin de almidon al 1 %, leche, leche deslactosada, homogenizado de clulas hepticas,Reactivo de benedict y lugol. Mtodo para determinacin de glucosa (monosacridos): se toman tres tubos de ensayo y a cada uno se le agregan 2 ml de solucin glucosa, ahora a cada uno de los tubos se le agrega un reactivo diferente, entre el lugol, benedict y biuret. Una vez agregados los reactivos se colocan los tubos que tienen dentro benedict y biuret a bao de agua hirviendo durante 5 minutos. Mtodo para determinacin de sacarosa y lactosa(disacridos):

Mtodo para determinacin del almidon y el glucgeno (polisacridos):

Determinacion de lpidos (materiales): 5 tubos de ensayo, 3 pinzas para tubos de ensayo, pipetas de 5 ml, peras para pipetas, goteros y esptula. Reactivos: agua de grifo, clistales de sudan IV, aceite de mesa, coco, solucin de colesterol al 1 %, suspensin de yema de huevo al 10%, clara de huevo, solucin de acido aletico glacial y solucin de acido sulfrico.

Mtodos: Determinacin de lpidos:

Reconocimiento de colesterol:

Hiptesis: para determinar la presencia de carbohidratos y lpidos en una muestra debemos emplear sustancias que reaccionen especficamente con ellos IV) RESULTADOS Y DISCUSIN: Determinacin de glucosa: Antes de la reaccin Es incolora Despus de la reaccin Explicacin de lo ocurrido Este reactivo reacciona con algunos polisacridos como los almidones, glucgeno y ciertas dextrinas, formando un complejo de inclusin termolbil que se caracteriza por ser colorido, dando color diferente segn las ramificaciones que presente la molcula.

Tubo 1 Lugol glucosa

Pasa a ser de color marrn

Tubo 2 Reactivo benedict glucosa

Es incolora

Pasa a tener un color naranja Tubo 3 Reactivo biuret glucosa Sigue incolora Determinacin de sacarosa y lactosa: Es incolora

Reacciona dando este color a todos los azucares que son reductores. al tornar este color significa que hay ms de un 1,5% de azcar reductora en la muestra Esta muestra quedo igual porque el reactivo biuret solo sirve para identificar las protenas y la glucosa no posee estas.

Antes de la reaccin Tubo 1 Reactivo benedict (Color azul) Solucin sacarosa Tubo 2 Reactivo benedict Leche

Despus de la reaccin

Explicacin de lo ocurrido La sacarosa no tiene poder reductor, por tanto este reactivo no la puede determinar

Es incolora

No presento cambios (Color azul) La leche tiene glucosa por tanto tiene poder reductor y es detectada por el reactivo de forma que cambia su color. Este color significa que hay de .01-0.3% de azcar reductor en la muestra La leche tiene glucosa por tanto tiene poder reductor y es detectada por el reactivo de forma que cambia su color. Este color significa que hay de .01-0.3% de azcar reductor en la muestra

Es blanca

Amarilla Tubo 3 Reactivo benedict Leche deslactosada

Es blanca

Amarilla

Tubo 4 Reactivo biuret (color azul claro) solucin sacarosa No presenta cambios (Azul claro) Tubo 5 Reactivo biuret es blanca leche Amarillo oscuro y caf Tubo 6 Reactivo biuret Es blanca leche deslactosada Amarillo oscuro y caf Cambio a color porque la leche tiene un alto nivel proteico y este reactivo determina las protenas en los compuestos Cambio a color porque la leche tiene un alto nivel proteico y este reactivo determina las protenas en los compuestos La solucin sacarosa no tiene protenas y por eso queda intacta despus de agregrsele el reactivo

Es incolora

Determinacin de almidn y de glucgeno (polisacridos) Antes de la reaccin Tubo 1 es incolora con partculas blancas Despus de la reaccin Explicacin de lo ocurrido

Suspensin de almidn Lugol

El almidn es un polisacridos y que es determinado con el lugol octeniendose un color azul violeta Azul violeta

Tubo 2 Suspensin de almidn Reactivo benedict Verde con partculas cafs es incolora con partculas blancas El almidn est compuesto por dos glucosas lo que significa que presenta poder reductor y por tanto el reactivo benedict reacciona en ella

Tubo 3 Suspensin de almidn Reactivo biuret Color beige cristalino Tubo 4 Clulas hepticas Lugol Color beige Tubo 5 Clulas hepticas Reactivo benedict Verde oscuro Tubo 6 Clulas hepticas Reactivo biuret Es de color caf El reactivo benedict determino los azucares que tienen poder reductor en estas clulas Es de color caf Las clulas hepticas son portadoras de glucgeno (polisacrido) y el lugol determina este tipo de carbohidratos es incolora con partculas blancas El biuret determina la presencia de protenas en la suspensin de almidones

Es de color caf

Se mantuvo con el mismo color

No presenta protenas por tanto este reactivo no muestra ningn cambio en la muestra

Determinacin de lpidos:

Cmo reacciona el Sudan IV: - grasas neutras: se observan de color rojo vino. Que son grasas neutras? : Generalmente se las llaman grasas neutras y consisten principalmente en Triglicridos La mayora de los lpidos o grasas que consumimos provienen del grupo de los triglicridos que estn formados por una molcula de glicerol o glicerina a la que estn unidos tres cidos grasos de cada cadena. Los alimentos que generalmente ingerimos estn compuestos en la mayora de los casos por una combinacin de cidos grasos saturados y cidos grasos insaturados los primeros son ms difciles de ser usados por el organismo ya que tienen menos posibilidades de combinarse con otras molculas, estn limitadas por estar todos sus posibles puntos de enlace ya utilizados o

"saturados". Esta dificultad para combinarse con otros compuestos hace que sea difcil romper sus molculas en otras ms pequeas que atraviesen las paredes de los capilares sanguneos y las membranas celulares. Por eso, en determinadas condiciones pueden acumularse y formar placas en el interior de las arterias (arteriosclerosis). Grasas Saturadas: Se encuentran principalmente en aquellos alimentos de origen animal, por ejemplo, carne bovina, cordero, cerdo, pollo etc. Tambin estn presentes en la yema de los huevos, en los derivados lcteos tales como, cremas, natas, leche, queso etc., tambin tienen grades cantidades de grasas saturadas algunos mariscos especialmente, las gambas, langostas, cangrejos. Grasas Insaturadas: Cuando dichas grasas se presentan en forma lquida, reciben el nombre de aceites, los ms comunes de origen vegetal son, el aceite de maz, girasol, de soja etc. Cabe destacar que estos aceites pueden convertirse en compuestos semi slidos mediante el proceso qumico denominado hidrogenacin, por lo tanto esta grasa pasara a comportarse como saturada, este es el caso de productos como la manteca, margarina, mantequilla etc. - lipoides: rojo anaranjado Qu son? : Es un conjunto heterogneo de sustancias, tambin llamadas grasas, con la caracterstica comn de ser insolubles en agua. En la jerga bioqumica, sin embargo, se suele llamar lpido nicamente a la unin de un alcohol y uno o varios cidos grasos, y se denomina el resto como sustancias lipoides. Siguiendo esta denominacin, los lpidos son sustancias muy diversas y con muchos fines distintos, tanto estructurales como de reserva de energa. - fosfolpidos: se tien poco o nada Qu son? : Grasas Compuestas: Un grupo importante de este tipo de grasa son los fosfolpidos, este nombre se debe que incluyen fsforo en sus molculas. Entre otras cosas, forman las membranas de nuestras clulas y actan como detergentes biolgicos. Tambin cabe sealar al colesterol, sustancia indispensable en el metabolismo por formar parte de la zona intermedia de las membranas celulares, e intervenir en la sntesis de las hormonas. Son importantes en la coagulacin de la sangre. Otras grasas compuestas son las Lipoprotenas, formadas principalmente en el hgado por la unin de triglicridos, fosfolpidos o colesterol con protenas, dichos compuestos son importantes ya que forman parte del transporte de las grasas en la sangre.

Las lipoproteas de alta densidad son las que contienen mayor cantidad de colesterol y existe varios tipos de colesterol pero los ms importantes son los siguientes: Colesterol de baja densidad (LDL), conocido comnmente como Colesterol Malo Colesterol de alta densidad (HDL), conocido comnmente como Colesterol Bueno El primero se caracteriza por penetrar en el revestimiento interior de las arterias y causar arteriosclerosis, el segundo por el contrario, lucha contra la arteriosclerosis y la formacin de grasa en las arterias Los lpidos o grasas son la reserva energtica ms importante del organismo en los animales Esto es debido a que cada gramo de grasa genera ms del doble de energa que los dems nutrientes, con lo que para acumular una determinada cantidad de caloras slo es necesario la mitad de grasa de lo que sera necesario de glucgeno o protenas. Necesidades diarias de lpidos: Se recomienda que las grasas de la dieta no aporten ms de un 30 % de las necesidades energticas diarias. Los porcentajes recomendados de dicho aporte deberan ser 10 % de grasas saturadas (grasa de origen animal) 5 % de grasas insaturadas (aceite de oliva) 5 % de grasas poli insaturadas.

Antes de la reaccin Tubo 1 Aceite de mesa Sudan IV Amarillo denso

Despus de la reaccin

Explicacin de lo ocurrido

Rojo vivo (claro) Tubo 2 Aceite de coco Sudan IV Amarillo denso

Rojo turbio y se espeso casi al punto de ser solido Tubo 3 Aceite de almendras Sudan IV Rojo turbio Tubo 4 Aceite ricino Sudan IV Amarillo denso Amarillo denso

Al Contener grasas neutras y lipoides el sudan IV reacciona en ellas separndolas segn su composicin

Rojo vivo(oscuro), muy denso y espeso

Reconocimiento de colesterol: despus de la reaccin Tubo 1 Explicacin de lo ocurrido

Solucin de colesterol Acido acetilico glacial y sulfrico Tomo un color de caf oscuro Tubo 2 -Suspensin de yema de huevo -Acido acetilico glacial y sulfrico Se solidifico y no cambio su color Tubo 3 Clara de huevo Acido acetilico glacial y sulfrico Tomo color blanco espumoso V) COMCLUSIONES.

Los cidos desnaturalizan las protenas hacindoles perder su estructura nativa, y de esta forma su ptimo funcionamiento y a veces tambin cambian sus propiedades fsico-qumicas. Como podemos ver en estas experimentaciones las muestras se alteran fsica como qumicamente, ya sea perdiendo su solubilidad o cambiado su color.

Por medio de esta experimentacin podemos concluir que: Todos los monosacridos y disacridos a excepcin de la sacarosa, son reductores. La fructosa, glucosa y xilosa son monosacridos; la sacarosa y lactosa son disacridos; y el almidn es un polisacrido. El reactivo benedict solo acta en los azucares reductores. El reactivo biuret solo acta en las protenas. Por medio del lugol podemos identificar los polisacridos. Los cidos y las altas temperaturas desnaturalizan las protenas. Los cristales de sudan IV actan sobre las grasas neutras ponindolas de color rojo vivo y en los lipoides los pone de color rojo anaranjado. la desnaturalizacin es un cambio estructural de las protenas o cidos nuclecos, donde pierden su estructura nativa, y de esta forma su ptimo funcionamiento.

BIBLIOGRAFIA. CUERVO M., Ral A. Manual de prcticas de laboratorio de Biologa I. Universidad de San Buena Ventura. Cali.2010 http://www.scribd.com/doc/7244232/CARBOHIDRATOS http://es.wikipedia.org/wiki/Lpido http://es.wikipedia.org/wiki/Glcido http://es.wikipedia.org/wiki/Biuret http://www.scribd.com/doc/22570227/AZUCARESREDUCTORES http://books.google.com/books?id=HRr4MNH2YssC&pg=PA303&dq=carbohidratos&hl=es &cd=2#v=onepage&q=carbohidratos&f=false Libro Bioqumica, Jeremy M. Berg, Lubert Stryer, 2004 974 Libro Bioqumica, Jeremy Berg, Lubert Stryer, John Tymocz, edicin 6,editor: Reverte, 2008 http://html.rincondelvago.com/lipidos-y-sustancias-lipoides.html http://es.wikipedia.org/wiki/Desnaturalizacin_(bioqumica)