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Resultados e Discusso

Primeiramente calcula-se a diferena entre a absorbncia das amostras e o tubo controle. O tubo controle deveria ter a maior absorbncia j que o mesmo no possui a enzima adicionada, porm, isso no aconteceu. O tubo que foi incubado a !"# teve a maior absorbncia e por isso, esse valor ser utilizado como novo controle. $sse erro foi possivelmente devido a fal%as laboratoriais. &abela '( )bsorbncias lidas para cada temperatura &emperatura /"# 1!"# 2!"# /!"# *!"# !"# 0!"# 3 "# &ubo #ontrole )bs. *+! nm !,!!! !,! 1 !,!*0 !,!* !,!** ',*20 !,*3! ',10' ',2 ! ,&ubo controle - )bs. *+! nm. ',* 0 ',/ / ',/0! ',/0' ',/0+ !,!!! !,3/0 !,+* -

4essa diferena obtida encontra-se a 5nidade de )tividade de 6-amilase j que esta est definida como ' 5nidade de atividade !,!!' de absorbncia por minuto de reao por m7 de enzima comercial. #omo e8emplo de clculo usou-se &90!"#( ' 5:::::!,!!' ;:::::!,3/0 ;93/0 5 <uando a enzima foi adicionada %ouve / minutos de reao( 3/0 5:::: / minutos =:::::::' minuto =9 '3',* 5>min ) 6-amilase f?n@ica comercial estava em soluo e sua concentrao era de '/ A7>+!! m7. Bos tubos onde a mesma rea@iu foi adicionado !,/ m7. '/ A7:::::+!! m7 C::::::!,/ m7 C9 !,!1 / A7 D necessrio saber o quanto % de unidades de atividade enzimtica,5>m7.. '3',* 5>min ::::: !,!1/ A7 E::::::::::::'!!! A7 E9 /'!3111,111 5>min.m7

) fFrmula @eral ento( 5nidades de )tividade de 6-amilase 5nidades de )tividade de 6-amilase 5nidades de )tividade de 6-amilase 9 ::::::::::::,&ubo controle - )bs. *+! nm.:::::::: ,min. de reao.G,abs. por min..G,concentrao de enzima. 9 ,&ubo controle - )bs. *+! nm. /G!,!!'G,!,!!!!1 /. 9 ,&ubo controle - )bs. *+! nm.G/111111,111

&abela +( $feito da &emperatura na )tividade de 5nidades de 6-amilase &emperatura /"# 1!"# 2!"# /!"# *!"# !"# 0!"# 3 "# &ubo #ontrole )bs. *+! nm !,!!! !,! 1 !,!*0 !,!* !,!** ',*20 !,*3! ',10' ',2 ! 5nidade de )tividade de 6amilase 5>m7 de enzima comercial 0 03111,111 02!!!!! 02+****,** 021+!!! 021 111,111 ! /'!3111,111 '2+2!!! H )tividade Ielativa ---33,//0 33,0 2 33,31 '!! ---*!,//* '*,0

Jrfico '( )tividade Ielativa da 6-amilase

)o observar o @rfico e a tabela pode-se perceber que %ouve erros ao realizar o e8perimento. $m vez de a enzima apresentar uma fai8a Ftima de temperatura, em todas as temperaturas foram obtidas altas atividades relativas. $ssas @randes diver@Kncias podem ter ocorrido devido a variaLes de temperatura, tempo e8cessivo no ban%o-maria, erro na adio da pequena quantidade de soluo de iodo e erro de leitura no espectrofotMmetro.

)lm disso, o valor de )tividade de 6-amilase na temperatura de /"# no se encai8a em nen%uma fai8a Ftima de micror@anismos por isso foi desconsiderada no clculo. 4e acordo com a literatura, a fai8a de temperatura Ftima da 6-amilase pelo Aspergillus niger de /!"# a *!"#. $ssas amilases f?n@icas, com as provenientes do Aspergillus niger e do Aspergillus oryzae, so usadas como suplemento na atividade amilolNtica, ou seja, so usadas com o propFsito de aumentar o n?mero de monossacarNdeos e dissacarNdeos fermentveis aumentando assim o rendimento da fermentao. ,B)JO4)EO&P)B)Q I$$4,'331.. Bo @rfico +, percebe-se que o ponto m8imo da curva est entre /!"# e *!"#, portanto, a 6-amilase utilizada possivelmente pertencente Aspergillus niger. <uanto Rs outras 6-amilases utilizadas na ind?stria alimentNcia, essas so enzimas bacterianas. Bo caso do Bacillus licheniformes a fai8a de temperatura de atuao em torno de 3!"# e '!!"# e por isso uma enzima termoestvel, o que muito favorvel j que al@uns processos biotecnolF@icos ocorrem em altas temperaturas ,JOS$T et al., +!!/.. U a 6-amilase pertencente ao Bacillus subtilis tem uma fai8a Ftima de temperatura entre */"# e !"#, uma fai8a com temperaturas consideravelmente altas e isso desejvel j que a %idrFlise de um carboidrato comple8o pode ocorrer em temperaturas mais altas e para assim evitar contaminao com micror@anismos, um ponto crNtico na ind?stria alimentNcia ,V$C$II) $& al, +!!2..

Concluso
)o realizar uma comparao entre dados da literatura e o @rfico obtido pela leitura no espectofotMmetro percebe-se que a fai8a de temperatura em que as atividades enzimticas so maiores na fai8a de /!"# a *!"# o que levou a concluso de que a 6-amilase utilizada proveniente do fun@o Aspergillus niger.

Referncias Bibliogrficas
JOS$T, $.Q J5$C, S. ). 5.Q S)I&OB, B.Q TO7W), I. Enzimas termoestveis: fontes, produo e aplicao industrial, +!!/. 4isponNvel em(X %ttp(>>YYY.scielo.br>scielo.p%pZpid9T!'!!-2!2++!! !!!'!!!+/[script9sci:artte8t\. )cesso em( +* de abril de +!'2. B)JO4)EO&P)B), &.Q I$$4, J. Enz mes in !ood "rocessing. 1 ed. )cademic Press Onc., '331. V$C$II), I. P.Q VOIV), ]. ^. T. 7.Q SOI$OI), ^. ).Q 7OS) U. 7.Q POI&O ). 7. ].Q #P)W$T ). #. E#trao li$uido%li$uido da amilase produzida pelo Bacillus Subtilis no sistema de duas fases a$uosas, +!!2. 4isponNvel em(X %ttp(>>sbbq.iq.usp.br>arquivos>re@ional>+!!+>cdresumo>$stendido>!11.pdf\. )cesso em( +* de abril de +!'2.

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