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Bacteria

Bacteria

Rango temporal: Arcaico - Holoceno


Escherichia coli aumentada 15 000 veces.
Clasificacin cientfica
Imperio: Prokaryota (Mayr 1998)

Dominio: Bacteria (Ehrenberg 1828,Woese et al
1990)
Filos
Gram positivas (monodrmicas)
Actinobacteria
Firmicutes
Gram negativas (didrmicas)
Acidobacteria
Aquificae
Bacteroidetes
Chlamydiae
Chlorobi
Chloroflexi
Chrysiogenetes
Cyanobacteria
Deferribacteres
Deinococcus-Thermus
Dictyoglomi
Fibrobacteres
Fusobacteria
Gemmatimonadetes
Lentisphaerae
Nitrospirae
Planctomycetes
Proteobacteria
Spirochaetes
Synergistetes
Thermodesulfobacteria
Thermomicrobia
Thermotogae
Verrucomicrobia
Las bacterias son microorganismos procariotas que presentan un tamao de unos
pocos micrmetros (por lo general entre 0,5 y 5 mde longitud) y diversas formas incluyendo
filamentos, esferas (cocos), barras (bacilos), sacacorchos (vibrios) y hlices (espirilos). Las
bacterias son clulas procariotas, por lo que a diferencia de las clulas
eucariotas (de animales, plantas, hongos, etc.), no tienen elncleo definido ni presentan, en
general, orgnulos membranosos internos. Generalmente poseen una pared celular y sta se
compone de peptidoglicano. Muchas bacterias disponen de flagelos o de otros sistemas de
desplazamiento y son mviles. Del estudio de las bacterias se encarga la bacteriologa, una
rama de la microbiologa. La presencia frecuente de pared de ppticoglicano junto con su
composicin en lpidos de membrana son la principal diferencia que presentan frente a
las arqueas, el otro importante grupo de microorganismos procariotas.
Las bacterias son los organismos ms abundantes del planeta. Son ubicuas, se encuentran en
todos los hbitats terrestres y acuticos; crecen hasta en los ms extremos como en los
manantiales de aguas calientes y cidas, en desechos radioactivos,
1
en las profundidades
tanto del mar como de la corteza terrestre. Algunas bacterias pueden incluso sobrevivir en las
condiciones extremas delespacio exterior. Se estima que se pueden encontrar en torno a 40
millones de clulas bacterianas en un gramo de tierra y un milln de clulas bacterianas en un
mililitro de agua dulce. En total, se calcula que hay aproximadamente 510
30
bacterias en el
mundo.
2

Las bacterias son imprescindibles para el reciclaje de los elementos, pues muchos pasos
importantes de los ciclos biogeoqumicosdependen de stas. Como ejemplo cabe citar
la fijacin del nitrgeno atmosfrico. Sin embargo, solamente la mitad de los filosconocidos de
bacterias tienen especies que se pueden cultivar en el laboratorio,
3
por lo que una gran parte
(se supone que cerca del 90%) de las especies de bacterias existentes todava no ha sido
descrita.
En el cuerpo humano hay aproximadamente diez veces tantas clulas bacterianas como
clulas humanas, con una gran cantidad de bacterias en la piel y en el tracto
digestivo.
4
Aunque el efecto protector del sistema inmunitario hace que la gran mayora de
estas bacterias sea inofensiva o beneficiosa, algunas bacterias patgenas pueden causar
enfermedades infecciosas, incluyendo clera,difteria, escarlatina, lepra, sfilis, tifus, etc. Las
enfermedades bacterianas mortales ms comunes son las infecciones respiratorias, con una
mortalidad slo para la tuberculosis de cerca de dos millones de personas al ao.
5

En todo el mundo se utilizan antibiticos para tratar las infecciones bacterianas. Los
antibiticos son efectivos contra las bacterias ya que inhiben la formacin de la pared celular o
detienen otros procesos de su ciclo de vida. Tambin se usan extensamente en la agricultura
y la ganadera en ausencia de enfermedad, lo que ocasiona que se est generalizando
la resistencia de las bacterias a losantibiticos. En la industria, las bacterias son importantes
en procesos tales como el tratamiento de aguas residuales, en la produccin
de mantequilla, queso, vinagre, yogur, etc., y en la fabricacin de medicamentos y de otros
productos qumicos.
6

Aunque el trmino bacteria inclua tradicionalmente a todos los procariotas, actualmente la
taxonoma y la nomenclatura cientfica los divide en dos grupos. Estos dominios evolutivos se
denominan Bacteria y Archaea (arqueas).
7
La divisin se justifica en las grandes diferencias
que presentan ambos grupos a nivel bioqumico y gentico.
ndice
[ocultar]
1 Historia de la bacteriologa
2 Origen y evolucin de las bacterias
3 Morfologa bacteriana
4 Estructura de la clula bacteriana
o 4.1 Estructuras intracelulares
o 4.2 Estructuras extracelulares
o 4.3 Endosporas
5 Metabolismo
6 Movimiento
7 Reproduccin
8 Crecimiento
9 Gentica
10 Interacciones con otros organismos
o 10.1 Comensales
o 10.2 Mutualistas
o 10.3 Patgenos
11 Clasificacin e identificacin
12 Filogenia
o 12.1 Filos bacterianos
13 Uso de las bacterias en la tecnologa y la industria
14 Galera
15 Vase tambin
16 Referencias
17 Enlaces externos
Historia de la bacteriologa[editar]


Anton van Leeuwenhoek, la primera persona que observ una bacteria a travs de un microscopio.
La existencia de microorganismos fue conjeturada a finales de la Edad Media. En el Canon de
medicina (1020), Ab Al ibn Sn (Avicena) planteaba que las secreciones corporales estaban
contaminadas por multitud de cuerpos extraos infecciosos antes de que una persona cayera
enferma, pero no lleg a identificar a estos cuerpos como la primera causa de
las enfermedades. Cuando la peste negra (peste bubnica) alcanz al-ndalus en el siglo XIV,
Ibn Khatima e Ibn al-Jatib escribieron que las enfermedades infecciosas eran causadas por
entidades contagiosas que penetraban en el cuerpo humano.
8

9
Estas ideas sobre el contagio
como causa de algunas enfermedades se volvi muy popular durante el Renacimiento, sobre
todo a travs de los escritos de Girolamo Fracastoro.
10

Las primeras bacterias fueron observadas por Anton van Leeuwenhoek en 1683 usando
un microscopio de lente simple diseado por l mismo.
11
Inicialmente las
denomin animlculos y public sus observaciones en una serie de cartas que envi a
la Royal Society.
1213

14
Marc von Plenciz (s.XVIII) afirm que las enfermedades contagiosas
eran causadas por los pequeos organismos descubiertos por Leeuwenhoek. El nombre
de bacteria fue introducido ms tarde, en 1828, por Ehrenberg, deriva del griego -
, bacterion -a, que significa bastn pequeo.
15
En 1835 Agostino Bassi, pudo demostrar
experimentalmente que la enfermedad del gusano de seda era de origen microbiano, despus
dedujo que muchas enfermedades como el tifus, la sfilis y el clera tendran un origen
anlogo. En las clasificaciones de los aos 1850 se ubic a las bacterias con el
nombre Schizomycetes dentro del reino vegetal y en 1875 se las agrup junto a las algas
verdeazuladas en Schizophyta.
16



Enfermos de clera.
Louis Pasteur demostr en 1859 que los procesos de fermentacin eran causados por el
crecimiento de microorganismos, y que dicho crecimiento no era debido a lageneracin
espontnea, como se supona hasta entonces. (Ni las levaduras, ni los mohos, ni los hongos,
organismos normalmente asociados a estos procesos de fermentacin, son bacterias).
Pasteur, al igual que su contemporneo y colegaRobert Koch, fue uno de los primeros
defensores de la teora germinal de las enfermedades infecciosas.
17
Robert Koch fue pionero
en la microbiologa mdica, trabajando con diferentes enfermedades infecciosas, como
el clera, el carbunco y latuberculosis. Koch logr probar la teora germinal de las
enfermedades infecciosas tras sus investigaciones en tuberculosis, siendo por ello
galardonado con el premio Nobel en Medicina y Fisiologa, en el ao 1905.
18
Estableci lo que
se ha denominado desde entonces los postulados de Koch, mediante los cuales se
estandarizaban una serie de criterios experimentales para demostrar si un organismo era o no
el causante de una determinada enfermedad. Estos postulados se siguen utilizando hoy en
da.
19

Aunque a finales del siglo XIX ya se saba que las bacterias eran causa de multitud de
enfermedades, no existan tratamientos antibacterianos para combatirlas.
20
En 1882 Paul
Ehrlich, pionero en el uso de tintes y colorantes para detectar e identificar bacterias, descubre
la tincin del bacilo de Koch (tincin de Ziehl Neelsen) que poco despus es perfeccionada por
Ziehl y Neelsen independientemente.
21
En 1884 se descubre la tincin Gram. Erlich recibi el
premio Nobel en 1908 por sus trabajos en el campo de la inmunologa y en 1910 desarroll el
primer antibitico por medio de unos colorantes capaces de teir y matar selectivamente a
las espiroquetas de la especie Treponema pallidum, la bacteria causante de la sfilis.
22

Un gran avance en el estudio de las bacterias fue el descubrimiento realizado por Carl
Woese en 1977, de que las arqueas presentan una lnea evolutiva diferente a la de las
bacterias.
23
Esta nueva taxonoma filogentica se basaba en la secuenciacin del ARN
ribosmico 16S y divida a los procariotas en dos grupos evolutivos diferentes, en unsistema
de tres dominios: Arquea, Bacteria y Eukarya.
24

Origen y evolucin de las bacterias[editar]


rbol filogentico mostrando la divergencia de las especies modernas de su ancestro comn en el
centro.
25
Los tres dominiosestn coloreados de la siguiente forma; las bacterias en azul, lasarchaeas en
verde, y las eucariotas de color rojo.

Los seres vivos se dividen actualmente en tres dominios: bacterias (Bacteria), arqueas
(Archaea) y eucariontes (Eukarya). En los dominios Archaea y Bacteria se incluyen los
organismos procariotas, esto es, aquellos cuyas clulas no tienen un ncleo
celular diferenciado, mientras que en el dominio Eukarya se incluyen las formas de vida ms
conocidas y complejas (protistas, animales, hongos y plantas).
El trmino "bacteria" se aplic tradicionalmente a todos los microorganismos procariotas. Sin
embargo, la filogenia molecular ha podido demostrar que los microorganismos procariotas se
dividen en dos dominios, originalmente denominados Eubacteria y Archaebacteria, y ahora
renombrados como Bacteria y Archaea,
26
que evolucionaron independientemente desde un
ancestro comn. Estos dos dominios, junto con el dominioEukarya, constituyen la base
del sistema de tres dominios, que actualmente es el sistema de clasificacin ms ampliamente
utilizado en bacteriologa.
27

El trmino Mnera, actualmente en desuso, en la antigua clasificacin de los cinco
reinos significaba lo mismo que procariota, y as sigue siendo usado en muchos manuales y
libros de texto.
Los antepasados de los procariotas modernos fueron los primeros organismos (las primeras
clulas) que se desarrollaron sobre la tierra, hace unos 3.800-4.000 millones aos. Durante
cerca de 3.000 millones de aos ms, todos los organismos siguieron siendo microscpicos,
siendo probablemente bacterias y arqueas las formas de vida dominantes.
28

29
Aunque existen
fsiles bacterianos, por ejemplo los estromatolitos, al no conservar su morfologa distintiva no
se pueden emplear para estudiar la historia de la evolucin bacteriana, o el origen de una
especie bacteriana en particular. Sin embargo, las secuencias genticas s se pueden utilizar
para reconstruir la filogenia de los seres vivos, y estos estudios sugieren que arqueas y
eucariontes estn ms relacionados entre s que con las bacterias.
30

En la actualidad se discute si los primeros procariotas fueron bacterias o arqueas. Algunos
investigadores piensan que Bacteria es el dominio ms antiguo con Archaea y Eukarya
derivando a partir de l,
27
mientras que otros consideran que el dominio ms antiguo es
Archaea.
31
Se ha propuesto que el ancestro comn ms reciente de bacterias y arqueas
podra ser un hipertermfilo que vivi entre 2.500 y 3.200 millones de aos atrs.
32

33
En
cambio, otros cientficos sostienen que tanto Archaea como Eukarya son relativamente
recientes (de hace unos 900 millones de aos)
34

35
y que evolucionaron a partir de una
bacteria Gram-positiva (probablemente una Actinobacteria), que mediante la sustitucin de la
pared bacteriana de peptidoglicano por otra de glicoprotena dara lugar a un
organismo Neomura.
36

37

Las bacterias tambin han estado implicadas en la segunda gran divergencia evolutiva, la que
separ Archaea de Eukarya. Se considera que las mitocondrias de los eucariontes proceden
de la endosimbiosis de una proteobacteria alfa.
38

39
En este caso, el antepasado de los
eucariontes, que posiblemente estaba relacionado con las arqueas (el organismo Neomura),
ingiri una proteobacteria que, al escapar a la digestin, se desarroll en el citoplasma y dio
lugar a las mitocondrias. stas se pueden encontrar en todos los eucariontes, aunque a veces
en formas muy reducidas, como en los protistas amitocondriales. Despus, e
independientemente, una segunda endosimbiosis por parte de algn eucarionte mitocondrial
con una cianobacteria condujo a la formacin de los cloroplastos de algas y plantas. Se
conocen incluso algunos grupos de algas que se han originado claramente de acontecimientos
posteriores de endosimbiosis por parte de eucariotas hetertrofos que, tras ingerir algas
eucariotas, se convirtieron en plastos de segunda generacin.
40

41

Morfologa bacteriana[editar]


Existen bacterias con mltiples morfologas.
Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaos y formas. La mayora presentan un
tamao diez veces menor que el de las clulas eucariotas, es decir, entre 0,5 y 5 m. Sin
embargo, algunas especies como Thiomargarita namibiensis y Epulopiscium fishelsoni llegan
a alcanzar los 0,5 mm, lo cual las hace visibles al ojo desnudo.
42
En el otro extremo se
encuentran bacterias ms pequeas conocidas, entre las que cabe destacar las
pertenecientes al gnero Mycoplasma, las cuales llegan a medir solo 0,3 m, es decir, tan
pequeas como los virus ms grandes.
43

La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos
tipos morfolgicos, lo que se conoce como pleomorfismo. De todas formas, podemos distinguir
tres tipos fundamentales de bacterias:
Coco (del griego kkkos, grano): de forma esfrica.
Diplococo: cocos en grupos de dos.
Tetracoco: cocos en grupos de cuatro.
Estreptococo: cocos en cadenas.
Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en racimo.
Bacilo (del latn baculus, varilla): en forma de bastoncillo.
Formas helicoidales:
Vibrio: ligeramente curvados y en forma de coma, juda o cacahuete.
Espirilo: en forma helicoidal rgida o en forma de tirabuzn.
Espiroqueta: en forma de tirabuzn (helicoidal flexible).
Algunas especies presentan incluso formas tetradricas o cbicas.
44
Esta amplia variedad de
formas es determinada en ltima instancia por la composicin de la pared celular y
el citoesqueleto, siendo de vital importancia, ya que puede influir en la capacidad de la
bacteria para adquirir nutrientes, unirse a superficies o moverse en presencia de
estmulos.
45

46

A continuacin se citan diferentes especies con diversos patrones de asociacin:
Neisseria gonorrhoeae en forma diploide (por pares).
Streptococcus en forma de cadenas.
Staphylococcus en forma de racimos.
Actinobacteria en forma de filamentos. Dichos filamentos suelen rodearse de una vaina
que contiene multitud de clulas individuales, pudiendo llegar a ramificarse, como el
gnero Nocardia, adquiriendo as el aspecto del micelio de un hongo.
47



Rango de tamaos que presentan las clulasprocariotas en relacin a otros organismos ybiomolculas.
Las bacterias presentan la capacidad de anclarse a determinadas superficies y formar un
agregado celular en forma de capa denominado biopelcula o biofilme, los cuales pueden tener
un grosor que va desde unos pocos micrmetros hasta medio metro. Estas biopelculas
pueden congregar diversas especies bacterianas, adems de protistas y arqueas, y se
caracterizan por formar un conglomerado de clulas y componentes extracelulares,
alcanzando as un nivel mayor de organizacin o estructura secundaria
denominada microcolonia, a travs de la cual existen multitud de canales que facilitan la
difusin de nutrientes.
48

49
En ambientes naturales tales como el suelo o la superficie de las
plantas, la mayor parte de las bacterias se encuentran ancladas a las superficies en forma de
biopelculas.
50
Dichas biopelculas deben ser tenidas en cuenta en las infecciones bacterianas
crnicas y en los implantes mdicos, ya que las bacterias que forman estas estructuras son
mucho ms difciles de erradicar que las bacterias individuales.
51

Por ltimo, cabe destacar un tipo de morfologa ms compleja an, observable en algunos
microorganismos del grupo de lasmixobacterias. Cuando estas bacterias se encuentran en un
medio escaso en aminocidos son capaces de detectar a las clulas de alrededor, en un
proceso conocido como percepcin de qurum, en el cual todas las clulas migran hacia las
dems y se agregan, dando lugar a cuerpos fructferos que pueden alcanzar los 0,5 mm de
longitud y contener unas 100.000 clulas.
52
Una vez formada dicha estructura las bacterias
son capaces de llevar a cabo diferentes funciones, es decir, se diferencian, alcanzando as un
cierto nivel de organizacin pluricelular. Por ejemplo, entre una y diez clulas migran a la parte
superior del cuerpo fructfero y, una vez all, se diferencian para dar lugar a un tipo de clulas
latentes denominadas mixosporas, las cuales son ms resistentes a la desecacin y, en
general, a condiciones ambientales adversas.
53

Estructura de la clula bacteriana[editar]


Estructura de la clula bacteriana. A-Pili; B-Ribosomas; C-Cpsula; D-Pared celular; E-Flagelo; F-Citoplasma;
G-Vacuola; H-Plsmido; I-Nucleoide; J-Membrana citoplasmtica.
Las bacterias son organismos relativamente sencillos. Sus dimensiones son muy reducidas,
unos 2 m de ancho por 7-8 m de longitud en la forma cilndrica (bacilo) de tamao medio;
aunque son muy frecuentes las especies de 0,5-1,5 m.
Al tratarse de organismos procariotas, tienen las caractersticas bsicas correspondientes
como la carencia de un ncleodelimitado por una membrana aunque presentan un nucleoide,
una estructura elemental que contiene una gran molcula circular de ADN.
El citoplasma carece de orgnulos delimitados por membranas y de las formaciones
protoplasmticas propias de las clulas eucariotas. En el citoplasma se pueden
apreciar plsmidos, pequeas molculas circulares de ADN que coexisten con el nucleoide,
contienen genes y son comnmente usados por los procariontes en la conjugacin. El
citoplasma tambin contiene vacuolas (grnulos que contienen sustancias de reserva)
y ribosomas (utilizados en la sntesis de protenas).
Una membrana citoplasmtica compuesta de lpidos rodea el citoplasma y, al igual que las
clulas de las plantas, la mayora posee una pared celular, que en este caso est compuesta
por peptidoglicano (murena). La mayora de bacterias, presentan adems una segunda
membrana lipdica (membrana externa) rodeando a la pared celular. El espacio comprendido
entre la membrana citoplasmtica y la pared celular (o la membrana externa si esta existe) se
denomina espacio periplsmico. Algunas bacterias presentan una cpsula y otras son capaces
de desarrollarse como endosporas, estados latentes capaces de resistir condiciones extremas.
Entre las formaciones exteriores propias de la clula bacteriana destacan los flagelos y los pili.
Estructuras intracelulares[editar]


La membrana citoplasmtica de las bacterias es similar a la de plantas y animales, si bien generalmente no
presenta colesterol.
La membrana citoplasmtica bacteriana tiene una estructura similar a la de plantas y
animales. Es una bicapa lipdica compuesta fundamentalmente de fosfolpidos en la que se
insertan molculas de protenas. En las bacterias realiza numerosas funciones entre las que
se incluyen las de barrera osmtica, transporte,biosntesis, transduccin de energa, centro de
replicacin de ADN y punto de anclaje para los flagelos. A diferencia de las membranas
eucariticas, generalmente no contiene esteroles (son excepcionesmicoplasmas y
algunas proteobacterias), aunque puede contener componentes similares
denominadoshopanoides.
Muchas importantes reacciones bioqumicas que tienen lugar en las clulas se producen por la
existencia degradientes de concentracin a ambos lados de una membrana. Este gradiente
crea una diferencia de potencial anloga a la de una batera elctrica y permite a la clula, por
ejemplo, el transporte de electrones y la obtencin de energa. La ausencia de membranas
internas en las bacterias significa que estas reacciones tienen que producirse a travs de la
propia membrana citoplasmtica, entre el citoplasma y el espacio periplsmico.
54

Puesto que las bacterias son procariotas no tienen orgnulos citoplasmticos delimitados por
membranas y por ello presentan pocas estructuras intracelulares. Carecen dencleo
celular, mitocondrias, cloroplastos y de los otros orgnulos presentes en las clulas
eucariotas, tales como el aparato de Golgi y el retculo endoplasmtico.
55
Como excepcin,
algunas bacterias contienen estructuras intracelulares rodeadas por membranas que pueden
considerarse primitivos orgnulos. Ejemplos son los tilacoides de lascianobacterias, los
compartimentos que contienen amonio monooxigenasa en Nitrosomonadaceae y diversas
estructuras en Planctomycetes.
56

Como todos los organismos vivos, las bacterias contienen ribosomas para la sntesis de
protenas, pero stos son diferentes a los de eucariotas.
57
La estructura de los ribosomas y
el ARN ribosomal de arqueas y bacterias son similares, ambos ribosomas son de tipo
70S mientras que los ribosomas eucariotas son de tipo 80S. Sin embargo, la mayora de las
protenas ribosomiales, factores de traduccin y ARNt arqueanos son ms parecidos a los
eucariticos que a los bacterianos.
Muchas bacterias presentan vacuolas, grnulos intracelulares para el almacenaje de
sustancias, como por
ejemplo glucgeno,
58
polifosfatos,
59
azufre
60
opolihidroxialcanoatos.
61
Ciertas especies
bacterianas fotosintticas, tales como las cianobacterias, producen vesculas internas de gas
que utilizan para regular su flotabilidad y as alcanzar la profundidad con intensidad de luz
ptima y/o unos niveles de nutrientes ptimos.
62
Otras estructuras presentes en ciertas
especies son los carboxisomas (que contienen enzimas para la fijacin de carbono) y
los magnetosomas (para la orientacin magntica).


Elementos del citoesqueleto de Caulobacter crescentus. En la figura, estos elementos procariticos se
relacionan con sus homlogos eucariotas y se hipotetiza su funcin celular.
63
Debe tenerse en cuenta que las
funciones en la parejaFtsZ-MreB se invirtieron durante la evolucin al convertirse en tubulina-actina.
Las bacterias no tienen un ncleo delimitado por membranas. El material gentico est
organizado en un nico cromosomasituado en el citoplasma, dentro de un cuerpo irregular
denominado nucleoide.
64
La mayora de los cromosomas bacterianos son circulares, si bien
existen algunos ejemplos de cromosomas lineales, por ejemplo, Borrelia burgdorferi. El
nucleoide contiene el cromosoma junto con las protenas asociadas y ARN. El
orden Planctomycetes es una excepcin, pues una membrana rodea su nucleoide y tiene
varias estructuras celulares delimitadas por membranas.
56

Anteriormente se pensaba que las clulas procariotas no posean citoesqueleto, pero desde
entonces se han encontrado homlogos bacterianos de las principales protenas del
citoesqueleto de los eucariontes.
65
Estos incluyen las protenas estructurales FtsZ (que se
ensambla en un anillo para mediar durante la divisin celular bacteriana) y MreB (que
determina la anchura de la clula). El citoesqueleto bacteriano desempea funciones
esenciales en la proteccin, determinacin de la forma de la clula bacteriana y en la divisin
celular.
66

Estructuras extracelulares[editar]
Las bacterias disponen de una pared celular que rodea a su membrana citoplasmtica. Las
paredes celulares bacterianas estn hechas de peptidoglicano (llamado
antiguamente murena). Esta sustancia est compuesta por cadenas depolisacrido enlazadas
por pptidos inusuales que contienen aminocidos D.
67
Estos aminocidos no se encuentran
en las protenas, por lo que protegen a la pared de la mayora de las peptidasas. Las paredes
celulares bacterianas son distintas de las que tienen plantas y hongos, compuestas
de celulosa y quitina, respectivamente.
68
Son tambin distintas a las paredes celulares
de Archaea, que no contienen peptidoglicano. El antibitico penicilina puede matar a muchas
bacterias inhibiendo un paso de la sntesis del peptidoglicano.
68



Paredes celulares bacterianas.Arriba: Bacteria Gram positiva. 1-membrana citoplasmtica, 2-pared celular, 3-
espacio periplsmico.Abajo: Bacteria Gram negativa. 4-membrana citoplasmtica, 5-pared celular, 6-
membrana externa, 7-espacio periplsmico.
Existen dos diferentes tipos de pared celular bacteriana denominadas Gram-positiva y Gram-
negativa, respectivamente. Estos nombres provienen de la reaccin de la pared celular a
la tincin de Gram, un mtodo tradicionalmente empleado para la clasificacin de las especies
bacterianas.
69
Las bacterias Gram-positivas tienen una pared celular gruesa que contiene
numerosas capas de peptidoglicano en las que se inserta cido teicoico. En cambio, las
bacterias Gram-negativas tienen una pared relativamente fina, consistente en unas pocas
capas de peptidoglicano, rodeada por una segunda membrana lipdica (la membrana externa)
que contiene lipopolisacridos y lipoprotenas.
Las micoplasmas son una excepcin, pues carecen de pared celular. La mayora de las
bacterias tienen paredes celulares Gram-negativas; solamente son Gram-
positivas Firmicutes y Actinobacteria. Estos dos grupos eran antiguamente conocidos como
bacterias Gram-positivas decontenido GC bajo y bacterias Gram-positivas de contenido GC
alto, respectivamente.
70
Estas diferencias en la estructura de la pared celular dan lugar a
diferencias en la susceptibilidad antibitica. Por ejemplo, la vancomicina puede matar
solamente a bacterias Gram-positivas y es ineficaz contra patgenos Gram-negativos, tales
como Haemophilus influenzae o Pseudomonas aeruginosa.
71
Dentro del filo Actinobacteria
cabe hacer una mencin especial al gnero Mycobacterium, el cual, si bien se encuadra
dentro de las Gram positivas, no parece serlo desde el punto de vista emprico, ya que su
pared no retiene el tinte. Esto se debe a que presentan una pared celular poco comn, rica
en cidos miclicos, de carcter hidrfobo y ceroso y bastante gruesa, lo que les confiere una
gran resistencia.


Helicobacter pylori visto al microscopio electrnico, mostrando numerosos flagelossobre la superficie celular.
Muchas bacterias tienen una capa S de molculas de protena de estructura rgida que cubre
la pared celular.
72
Esta capa proporciona proteccin qumica y fsica para la superficie celular
y puede actuar como una barrera de difusin macromolecular. Las capas S tienen diversas
(aunque todava no bien comprendidas) funciones. Por ejemplo, en el
gnero Campylobacteractan como factores de virulencia y en la especie Bacillus
stearothermophilus contienen enzimas superficiales.
73

Los flagelos son largos apndices filamentosos compuestos de protenas y utilizados para el
movimiento. Tienen un dimetro aproximado de 20 nm y una longitud de hasta 20 m. Los
flagelos son impulsados por la energa obtenida de la transferencia deiones. Esta
transferencia es impulsada por el gradiente electroqumico que existe entre ambos lados de la
membrana citoplasmtica.
74



Escherichia coli presenta unas 100-200 fimbrias que utiliza para adherirse a las clulas epiteliales o al tracto
urogenital.
Las fimbrias son filamentos finos de protenas que se distribuyen sobre la superficie de la
clula. Tienen un dimetro aproximado de 2-10 nm y una longitud de hasta varios m. Cuando
se observan a travs del microscopio electrnico se asemejan a pelos finos. Las fimbrias
ayudan a la adherencia de las bacterias a las superficies slidas o a otras clulas y son
esenciales en la virulencia de algunos patgenos.
75
Los pili son apndices celulares
ligeramente mayores que las fimbrias y se utilizan para la transferencia de material gentico
entre bacterias en un proceso denominado conjugacin bacteriana.
76



Estructuras extracelulares bacterianas: 1-cpsula, 2-glicocalix (capa mucosa), 3-biopelcula.
Muchas bacterias son capaces de acumular material en el exterior para recubrir su superficie.
Dependiendo de la rigidez y su relacin con la clula se clasifican en cpsulas y glicocalix.
La cpsula es una estructura rgida que se une firmemente a la superficie bacteriana, en tanto
que el glicocalix es flexible y se une de forma laxa. Estas estructuras protegen a las bacterias
pues dificultan que sean fagocitadas por clulas eucariotas tales como
los macrfagos.
77
Tambin pueden actuar como antgenos y estar implicadas en el
reconocimiento bacteriano, as como ayudar a la adherencia superficial y a la formacin de
biopelculas.
78

La formacin de estas estructuras extracelulares depende del sistema
de secrecin bacteriano. Este sistema transfiere protenas desde el citoplasma al periplasma o
al espacio que rodea a la clula. Se conocen muchos tipos de sistemas de secrecin, que son
a menudo esenciales para la virulencia de los patgenos, por lo que son extensamente
estudiados.
79

Endosporas[editar]
Vase tambin: Endospora


Bacillus anthracis (teido prpura) desarrollndose en el lquido cefalorraqudeo. Cada pequeo segmento es
una bacteria.
Ciertos gneros de bacterias Gram-positivas, tales
como Bacillus, Clostridium, Sporohalobacter, Anaerobacter y Heliobacterium, pueden
formar endosporas.
80
Las endosporas son estructuras durmientes altamente resistentes cuya
funcin primaria es sobrevivir cuando las condiciones ambientales son adversas. En casi
todos los casos, las endosporas no forman parte de un proceso reproductivo,
aunque Anaerobacter puede formar hasta siete endosporas a partir de una clula.
81
Las
endosporas tienen una base central de citoplasma que contiene ADN y ribosomas, rodeada
por una corteza y protegida por una cubierta impermeable y rgida.
Las endosporas no presentan un metabolismo detectable y pueden sobrevivir a condiciones
fsicas y qumicas extremas, tales como altos niveles de luz ultravioleta, rayos
gamma, detergentes, desinfectantes, calor, presin y desecacin.
82
En este estado durmiente,
las bacterias pueden seguir viviendo durante millones de aos,
83

84
e incluso pueden sobrevivir
en la radiacin y vaco del espacio exterior.
85
Las endosporas pueden tambin causar
enfermedades. Por ejemplo, puede contraerse carbunco por la inhalacin de endosporas
de Bacillus anthracis y ttanos por la contaminacin de las heridas con endosporas
de Clostridium tetani.
86

Metabolismo[editar]
Artculo principal: Metabolismo microbiano


Filamento (una colonia) decianobacteria fotosinttica.
En contraste con los organismos superiores, las bacterias exhiben una gran variedad de
tipos metablicos.
87
La distribucin de estos tipos metablicos dentro de un grupo de bacterias
se ha utilizado tradicionalmente para definir su taxonoma, pero estos rasgos no corresponden
a menudo con las clasificaciones genticas modernas.
88
El metabolismo bacteriano se
clasifica con base en tres criterios importantes: el origen del carbono, la fuente de energa y
los donadores de electrones. Un criterio adicional para clasificar a los microorganismos que
respiran es el receptor de electrones usado en la respiracin.
89

Segn la fuente de carbono, las bacterias se pueden clasificar como:
Hetertrofas, cuando usan compuestos orgnicos.
Auttrofas, cuando el carbono celular se obtiene mediante la fijacin del dixido de
carbono.
Las bacterias auttrofas tpicas son las cianobacterias fotosintticas, las bacterias verdes del
azufre y algunas bacterias prpura. Pero hay tambin muchas otras especies quimiolitotrofas,
por ejemplo, las bacterias nitrificantes y oxidantes del azufre.
90

Segn la fuente de energa, las bacterias pueden ser:
Fototrofas, cuando emplean la luz a travs de la fotosntesis.
Quimiotrofas, cuando obtienen energa a partir de sustancias qumicas que son oxidadas
principalmente a expensas del oxgeno (respiracin aerobia) o de otros receptores de
electrones alternativos (respiracin anaerobia).
Segn los donadores de electrones, las bacterias tambin se pueden clasificar como:
Litotrofas, si utilizan como donadores de electrones compuestos inorgnicos.
Organotrofas, si utilizan como donadores de electrones compuestos orgnicos.
Los organismos quimiotrofos usan donadores de electrones para la conservacin de energa
(durante la respiracin aerobia, anaerobia y la fermentacin) y para las reacciones
biosintticas (por ejemplo, para la fijacin del dixido de carbono), mientras que los
organismos fototrofos los utilizan nicamente con propsitos biosintticos.


Bacterias del hierro en un regato. Estos microorganismos quimiolitotrofos obtienen la energaque necesitan
por oxidacin del xido ferroso a xido frrico.
Los organismos que respiran usan compuestos qumicos como fuente de energa, tomando
electrones del sustrato reducido y transfirindolos a un receptor terminal de electrones en una
reaccin redox. Esta reaccin desprende energa que se puede utilizar para sintetizar ATP y
as mantener activo el metabolismo. En los organismos aerobios, el oxgeno se utiliza como
receptor de electrones. En los organismos anaerobios se utilizan como receptores de
electrones otros compuestos inorgnicos tales como nitratos, sulfatos o dixido de carbono.
Esto conduce a que se lleven a cabo los importantes procesos biogeoqumicos de
la desnitrificacin, la reduccin del sulfato y laacetognesis, respectivamente. Otra posibilidad
es la fermentacin, un proceso de oxidacin incompleta, totalmente anaerbico, siendo el
producto final un compuesto orgnico, que al reducirse ser el receptor final de los electrones.
Ejemplos de productos de fermentacin reducidos son el lactato (en la fermentacin
lctica), etanol (en la fermentacin alcohlica), hidrgeno, butirato, etc. La fermentacin es
posible porque el contenido de energa de los sustratos es mayor que el de los productos, lo
que permite que los organismos sinteticen ATP y mantengan activo su metabolismo.
91

92
Los
organismos anaerobios facultativos pueden elegir entre la fermentacin y diversos receptores
terminales de electrones dependiendo de las condiciones ambientales en las cuales se
encuentren.
Las bacterias litotrofas pueden utilizar compuestos inorgnicos como fuente de energa. Los
donadores de electrones inorgnicos ms comunes son el hidrgeno, el monxido de carbono,
el amonaco (que conduce a la nitrificacin), el hierro ferroso y otros iones de metales
reducidos, as como varios compuestos de azufre reducidos. En determinadas ocasiones, las
bacterias metanotrofas pueden usar gas metano como fuente de electrones y como sustrato
simultneamente, para el anabolismo del carbono.
93
En la fototrofa y quimiolitotrofa aerobias,
se utiliza el oxgeno como receptor terminal de electrones, mientras que bajo condiciones
anaerbicas se utilizan compuestos inorgnicos. La mayora de los organismos litotrofos son
auttrofos, mientras que los organismos organotrofos son hetertrofos.
Adems de la fijacin del dixido de carbono mediante la fotosntesis, algunas bacterias
tambin fijan el gas nitrgeno usando la enzimanitrogenasa. Esta caracterstica es muy
importante a nivel ambiental y se puede encontrar en bacterias de casi todos los tipos
metablicos enumerados anteriormente, aunque no es universal.
94
El metabolismo microbiano
puede jugar un papel importante en la biorremediacin pues, por ejemplo, algunas especies
pueden realizar el tratamiento de las aguas residuales y otras son capaces de degradar los
hidrocarburos, sustancias txicas e incluso radiactivas. En cambio, las bacterias reductoras de
sulfato son en gran parte responsables de la produccin de formas altamente txicas de
mercurio (metil- y dimetil-mercurio) en el ambiente.
95

Movimiento[editar]
Vase tambin: Flagelo bacteriano


Los diferentes tipos de disposicin de los flagelos bacterianos: A-Monotrico; B-Lofotrico; C-Anfitrico; D-
Peritrico.
Algunas bacterias son inmviles y otras limitan su movimiento a cambios de profundidad. Por
ejemplo, cianobacterias y bacterias verdes del azufre contienen vesculas de gas con las que
pueden controlar su flotabilidad y as conseguir un ptimo de luz y alimento.
96
Las bacterias
mviles pueden desplazarse por deslizamiento, mediante contracciones o ms comnmente
usando flagelos. Algunas bacterias pueden deslizarse por superficies slidas segregando una
sustancia viscosa, pero el mecanismo que acta como propulsor es todava desconocido. En
el movimiento mediante contracciones, la bacteria usa su pilus de tipo IV como gancho de
ataque, primero lo extiende, anclndolo y despus lo contrae con una fuerza notable
(>80 pN).
97

El flagelo bacteriano es un largo apndice filamentoso helicoidal propulsado por un motor
rotatorio (como una hlice) que puede girar en los dos sentidos. El motor utiliza como energa
un gradiente electroqumico a travs de la membrana. Los flagelos estn compuestos por
cerca de 20 protenas, con aproximadamente otras 30 protenas para su regulacin y
coordinacin.
96
Hay que tener en cuenta que, dado el tamao de la bacteria, el agua les
resulta muy viscosa y el mecanismo de propulsin debe ser muy potente y eficiente. Los
flagelos bacterianos se encuentran tanto en las bacterias Gram-positivas como Gram-
negativas y son completamente diferentes de los eucariticos y, aunque son superficialmente
similares a los arqueanos, se consideran no homlogos.


El flagelo bacteriano es un apndice movido por un motor rotatorio. El rotor puede girar a 6.000-17.000rpm,
pero el apndice usualmente slo alcanza 200-1000 rpm. 1-filamento, 2-espacio periplsmico, 3-codo, 4-
juntura, 5-anillo L, 6-eje, 7-anillo P, 8-pared celular, 9-esttor, 10-anillo MS, 11-anillo C, 12-sistema de
secrecin de tipo III, 13-membrana externa, 14-membrana citoplasmtica, 15-punta.
Segn el nmero y disposicin de los flagelos en la superficie de la bacteria se distinguen los
siguientes tipos: un solo flagelo (monotrico), un flagelo en cada extremo (anfitrico), grupos de
flagelos en uno o en los dos extremos (lofotrico) y flagelos distribuidos sobre toda la superficie
de la clula (peritricos). En un grupo nico de bacterias, las espiroquetas, se presentan unos
flagelos especializados, denominados filamentos axiales, localizados intracelularmente en el
espacio periplsmico, entre las dos membranas. Estos producen un movimiento rotatorio que
hace que la bacteria gire como un sacacorchos desplazndose hacia delante.
96

Muchas bacterias (tales como E. coli) tienen dos tipos de movimiento: en lnea recta (carrera)
y aleatorio. En este ltimo, se realiza un movimiento tridimensional aleatorio al combinar la
bacteria carreras cortas con virajes al azar.
98
Las bacterias mviles pueden presentar
movimientos de atraccin o repulsin determinados por diferentes estmulos. Estos
comportamientos son denominados taxis, e incluyen diversos tipos como la quimiotaxis,
la fototaxis o la magnetotaxis.
99

100
En el peculiar grupo de las mixobacterias, las clulas
individuales se mueven juntas formando ondas de clulas, que terminarn agregndose para
formar los cuerpos fructferos caractersticos de este gnero.
101
El movimiento de las
mixobacterias se produce solamente sobre superficies slidas, en contraste con E. coli, que es
mvil tanto en medios lquidos como slidos.
Varias especies de Listeria y Shigella se mueven dentro de las clulas husped apropindose
de su citoesqueleto, que normalmente movera los orgnulos. La polimerizacin de actina crea
un empuje en un extremo de la bacteria que la mueve a travs del citoplasma de la clula
husped.
102

Reproduccin[editar]


Modelo de divisiones binarias sucesivas en el microorganismo Escherichia coli.
En las bacterias, el aumento en el tamao de las clulas (crecimiento) y la reproduccin por
divisin celular estn ntimamente ligados, como en la mayor parte de los organismos
unicelulares. Las bacterias crecen hasta un tamao fijo y despus se reproducen por fisin
binaria, una forma dereproduccin asexual.
103
En condiciones apropiadas, una bacteria Gram-
positiva puede dividirse cada 2030 minutos y una Gram-negativa cada 1520 minutos, y en
alrededor de 16 horas su nmero puede ascender a unos 5.000 millones (aproximadamente el
nmero de personas que habitan la Tierra). Bajo condiciones ptimas, algunas bacterias
pueden crecer y dividirse muy rpido, tanto como cada 9,8 minutos.
104
En la divisin celular se
producen dos clulas hijas idnticas. Algunas bacterias, todava reproducindose
asexualmente, forman estructuras reproductivas ms complejas que facilitan la dispersin de
las clulas hijas recin formadas. Ejemplos incluyen la formacin de cuerpos fructferos
(esporangios) en las mixobacterias, la formacin de hifas enStreptomyces y la gemacin. En
la gemacin una clula forma una protuberancia que a continuacin se separa y produce una
nueva clula hija.
Por otro lado, cabe destacar un tipo de reproduccin sexual en bacterias,
denominadaparasexualidad bacteriana. En este caso, las bacterias son capaces de
intercambiar material gentico en un proceso conocido como conjugacin bacteriana. Durante
el proceso una bacteria donante y una bacteria receptora llevan a cabo un contacto mediante
pelos sexuales huecos o pili, a travs de los cuales se transfiere una pequea cantidad
de ADN independiente o plsmido conjugativo. El mejor conocido es el plsmido F de E. coli,
que adems puede integrarse en el cromosoma bacteriano. En este caso recibe el nombre de
episoma, y en la transferencia arrastra parte del cromosoma bacteriano. Se requiere que
exista sntesis de ADN para que se produzca la conjugacin. La replicacin se realiza al
mismo tiempo que la transferencia.
Crecimiento[editar]


Fases del crecimiento bacteriano.
El crecimiento bacteriano sigue tres fases. Cuando una poblacin bacteriana se encuentra
en un nuevo ambiente con elevada concentracin de nutrientes que le permiten crecer
necesita un perodo de adaptacin a dicho ambiente. Esta primera fase se denomina fase de
adaptacin o fase lag y conlleva un lento crecimiento, donde las clulas se preparan para
comenzar un rpido crecimiento, y una elevada tasa de biosntesis de las protenas necesarias
para ello, como ribosomas, protenas de membrana, etc.
105
La segunda fase de crecimiento se
denomina fase exponencial, ya que se caracteriza por el crecimiento exponencial de las
clulas. La velocidad de crecimiento durante esta fase se conoce como la tasa de
crecimiento k y el tiempo que tarda cada clula en dividirse como eltiempo de generacin g.
Durante esta fase, los nutrientes son metabolizados a la mxima velocidad posible, hasta que
dichos nutrientes se agoten, dando paso a la siguiente fase. La ltima fase de crecimiento se
denomina fase estacionaria y se produce como consecuencia del agotamiento de los
nutrientes en el medio. En esta fase las clulas reducen drsticamente su actividad metablica
y comienzan a utilizar como fuente energtica aquellas protenas celulares no esenciales. La
fase estacionaria es un perodo de transicin desde el rpido crecimiento a un estado de
respuesta aestrs, en el cual se activa la expresin de genes involucrados en la reparacin del
ADN, en el metabolismo antioxidante y en el transporte de nutrientes.
106

Gentica[editar]


Esquema de la conjugacin bacteriana. 1-La clula donante genera un pilus. 2-El pilus se une a la clula
receptora y ambas clulas se aproximan. 3-El plsmido mvil se desarma y una de las cadenas de ADNes
transferida a la clula receptora. 4-Ambas clulas sintetizan la segunda cadena y regeneran un plsmido
completo. Adems, ambas clulas generan nuevos pili y son ahora viables como donantes.
La mayora de las bacterias tienen un nico cromosoma circular cuyo tamao puede ir desde
slo 160.000 pares de bases en la bacteria endosimbionte Candidatus Carsonella ruddii
107
a
los 12.200.000 pares de bases de la bacteria del suelo Sorangium
cellulosum.
108
Las espiroquetas del gnero Borrelia (que incluyen, por ejemplo, a Borrelia
burgdorferi, la causa de la enfermedad de Lyme) son una notable excepcin a esta regla pues
contienen un cromosoma lineal.
109
Las bacterias pueden tener tambinplsmidos, pequeas
molculas de ADN extra-cromosmico que pueden contener genes responsables de
la resistencia a los antibiticos o factores de virulencia. Otro tipo de ADN bacteriano proviene
de la integracin de material gentico procedente debacterifagos (los virus que infectan
bacterias). Existen muchos tipos de bacterifagos, algunos simplemente infectan y rompen las
clulas husped bacterianas, mientras que otros se insertan en el cromosoma bacteriano. De
esta forma se pueden insertar genes del virus que contribuyan al fenotipo de la bacteria. Por
ejemplo, en la evolucin de Escherichia coli O157:H7 y Clostridium botulinum, los genes
txicos aportados por un bacterifago convirtieron a una inofensiva bacteria ancestral en un
patgeno letal.
110

111



Imagen de un bacterifago (virus que infecta bacterias).
Las bacterias, como organismos asexuales que son, heredan copias idnticas de genes, es
decir, son clones. Sin embargo, pueden evolucionar por seleccin natural mediante cambios
en el ADN debidos a mutaciones y a la recombinacin gentica. Las mutaciones provienen de
errores durante la rplica del ADN o por exposicin a agentes mutagnicos. Las tasas de
mutacin varan ampliamente entre las diversas especies de bacterias e incluso entre
diferentes cepas de una misma especie de bacteria.
112
Los cambios genticos pueden
producirse al azar o ser seleccionados por estrs, en donde los genes implicados en algn
proceso que limita el crecimiento tienen una mayor tasa de mutacin.
113

Las bacterias tambin pueden transferirse material gentico entre clulas. Esto puede
realizarse de tres formas principalmente. En primer lugar, las bacterias pueden recoger ADN
exgeno del ambiente en un proceso denominado transformacin. Los genes tambin se
pueden transferir por un proceso detransduccin mediante el cual un bacterifago introduce
ADN extrao en el cromosoma bacteriano. El tercer mtodo de transferencia de genes es
por conjugacin bacteriana, en donde el ADN se transfiere a travs del contacto directo (por
medio de un pilus) entre clulas. Esta adquisicin de genes de otras bacterias o del ambiente
se denomina transferencia de genes horizontal y puede ser comn en condiciones
naturales
114
La transferencia de genes es especialmente importante en la resistencia a los
antibiticos, pues permite una rpida diseminacin de los genes responsables de dicha
resistencia entre diferentes patgenos.
115

Interacciones con otros organismos[editar]
A pesar de su aparente simplicidad, las bacterias pueden formar asociaciones complejas con
otros organismos. Estas asociaciones se pueden clasificar
como parasitismo,mutualismo y comensalismo.
Comensales[editar]
Debido a su pequeo tamao, las bacterias comensales son ubicuas y crecen sobre animales
y plantas exactamente igual a como creceran sobre cualquier otra superficie. As, por
ejemplo, grandes poblaciones de estos organismos son las causantes del mal olor corporal y
su crecimiento puede verse aumentado con el calor y el sudor.
Mutualistas[editar]
Ciertas bacterias forman asociaciones ntimas con otros organismos, que les son
imprescindibles para su supervivencia. Una de estas asociaciones mutualistas es la
transferencia de hidrgeno entre especies. Se produce entre grupos de bacterias
anaerobias que consumen cidos orgnicos tales como cido butrico o cido propinico y
producen hidrgeno, y las arqueas metangenas que consumen dicho hidrgeno.
116
Las
bacterias en esta asociacin no pueden consumir los cidos orgnicos cuando el hidrgeno se
acumula a su alrededor. Solamente la asociacin ntima con las arqueas mantiene una
concentracin de hidrgeno lo bastante baja para permitir que las bacterias crezcan.
En el suelo, los microorganismos que habitan la rizosfera (la zona que incluye la superficie de
la raz y la tierra que se adhiere a ella) realizan la fijacin de nitrgeno, convirtiendo el
nitrgeno atmosfrico (en estado gaseoso) en compuestos nitrogenados.
117
Esto proporciona
a muchas plantas, que no pueden fijar el nitrgeno por s mismas, una forma fcilmente
absorbible de nitrgeno.
Muchas otras bacterias se encuentran como simbiontes en seres humanos y en otros
organismos. Por ejemplo, en el tracto digestivo proliferan unas mil especies bacterianas.
Sintetizan vitaminas tales como cido flico, vitamina K y biotina. Tambin fermentan
los carbohidratos complejos indigeribles y convierten las protenas de la leche en cido lctico
(por ejemplo, Lactobacillus).
118

119

120
Adems, la presencia de esta flora intestinal inhibe el
crecimiento de bacterias potencialmente patgenas (generalmente por exclusin competitiva).
Muchas veces estas bacterias beneficiosas se venden como suplementos
dietticos probiticos.
121

Patgenos[editar]


Micrografa electrnica con colores realzados que muestra a la especieSalmonella typhimurium (clulas rojas)
invadiendo clulas humanas en cultivo.
Slo una pequea fraccin de las bacterias causan enfermedades en los seres humanos: de
unas 151.500 especies encontradas, slo 538 (un 0,36%) son patgenas.
122
An as son una
de las principales causas de enfermedad y mortalidad humana, causando infecciones tales
como el ttanos, la fiebre tifoidea, la difteria, la sfilis, el clera, intoxicaciones alimentarias,
la lepra y la tuberculosis. Hay casos en los que la etiologa o causa de una enfermedad
conocida se descubre solamente despus de muchos aos, como fue el caso de la lcera
pptica y Helicobacter pylori. Las enfermedades bacterianas son tambin importantes en la
agricultura y en la ganadera, donde existen multitud de enfermedades como por ejemplo
la mancha de la hoja, la plaga de fuego, la paratuberculosis, el aublo bacterial de la pancula,
la mastitis, la salmonela y el carbunco.
Cada especie de patgeno tiene un espectro caracterstico de interacciones con sus
huspedes humanos. Algunos organismos, tales como Staphylococcus o Streptococcus,
pueden causar infecciones de la piel, pulmona, meningitis e incluso sepsis, una respuesta
inflamatoria sistmica que produce shock, vasodilatacin masiva y muerte.
123
Sin embargo,
estos organismos son tambin parte de la flora humana normal y se encuentran generalmente
en la piel o en la nariz sin causar ninguna enfermedad.
Otros organismos causan invariablemente enfermedades en los seres humanos. Por ejemplo,
el gnero Rickettsia, que son parsitos intracelulares obligados capaces de crecer y
reproducirse solamente dentro de las clulas de otros organismos. Una especie de Rickettsia
causa el tifus, mientras que otra ocasiona la fiebre de las Montaas Rocosas. Chlamydiae,
otro filo de parsitos obligados intracelulares, contiene especies que
causan neumona, infecciones urinarias y pueden estar implicadas en enfermedades
cardacas coronarias.
124
Finalmente, ciertas especies tales como Pseudomonas
aeruginosa, Burkholderia cenocepacia y Mycobacterium avium son patgenos oportunistas y
causan enfermedades principalmente en las personas que sufren inmunosupresin o fibrosis
qustica.
125

126

Las infecciones bacterianas se pueden tratar con antibiticos, que se clasifican como
bactericidas, si matan bacterias, o como bacterioestticos, si solo detienen el crecimiento
bacteriano. Existen muchos tipos de antibiticos y cada tipo inhibe un proceso que difiere en el
patgeno con respecto al husped. Ejemplos de antibiticos de toxicidad selectiva son
el cloranfenicol y la puromicina, que inhiben el ribosoma bacteriano, pero no el ribosoma
eucariota que es estructuralmente diferente.
127
Los antibiticos se utilizan para tratar
enfermedades humanas y en la ganadera intensiva para promover el crecimiento animal. Esto
ltimo puede contribuir al rpido desarrollo de la resistencia antibitica de las poblaciones
bacterianas.
128
Las infecciones se pueden prevenir con medidas antispticas tales como la
esterilizacin de la piel antes de las inyecciones y con el cuidado apropiado de los catteres.
Los instrumentos quirrgicos y dentales tambin son esterilizados para prevenir la
contaminacin e infeccin por bacterias. Los desinfectantes tales como la leja se utilizan para
matar bacterias u otros patgenos que se depositan sobre las superficies y as prevenir la
contaminacin y reducir el riesgo de infeccin.
La siguiente tabla muestra algunas enfermedades humanas producidas por bacterias:
Enfermeda
d
Agente Principales sntomas
Brucelosis Brucella spp.
Fiebre ondulante, adenopata, endocarditis, neu
mona.
Carbunco Bacillus anthracis Fiebre, ppula cutnea, septicemia.
Clera Vibrio cholerae Diarrea, vmitos, deshidratacin.
Difteria Corynebacterium diphtheriae
Fiebre, amigdalitis, membrana en la garganta,
lesiones en la piel.
Escarlatina Streptococcus pyogenes Fiebre, amigdalitis, eritema.
Erisipela Streptococcus spp. Fiebre, eritema, prurito, dolor.
Fiebre Q Coxiella burnetii
Fiebre alta, cefalea intensa, mialgia,
confusin, vmitos, diarrea.
Fiebre
tifoidea
Salmonella typhi, S. paratyphi
Fiebre alta, bacteriemia, cefalalgia, estupor,
tumefaccin de la mucosa nasal, lengua tostada,
lceras en el
paladar,hepatoesplenomegalia, diarrea,
perforacin intestinal.
Legionelosi
s
Legionella pneumophila Fiebre, neumona
Neumona
Streptococcus
pneumoniae,Staphylococcus aureus,
Klebsiella
pneumoniae, Mycoplasmaspp., Chlamydi
a spp.
Fiebre alta, expectoracin amarillenta y/o
sanguinolenta, dolor torcico.
Tuberculosi
s
Mycobacterium tuberculosis
Fiebre, cansancio, sudor
nocturno, necrosis pulmonar.
Ttanos Clostridium tetani Fiebre, parlisis.
Clasificacin e identificacin[editar]
Artculo principal: Clasificacin cientfica


Cultivo de E. coli, donde cada punto es una colonia.
La clasificacin taxonmica busca describir y diferenciar la amplia diversidad de especies
bacterianas poniendo nombres y agrupando organismos segn sus similitudes. Las bacterias
pueden clasificarse con base en diferentes criterios, como estructura celular, metabolismo o
con base en diferencias en determinados componentes como ADN, cidos
grasos, pigmentos, antgenos o quinonas.
129
Sin embargo, aunque estos criterios permitan la
identificacin y clasificacin de cepas bacterianas, an no quedaba claro si estas diferencias
representaban variaciones entre especies diferentes o entre distintas cepas de la misma
especie. Esta incertidumbre se deba a la ausencia de estructuras distintivas en la mayora de
las bacterias y a la existencia de la transferencia horizontal de genes entre especies
diferentes,
130
la cual da lugar a que bacterias muy relacionadas puedan llegar a presentar
morfologas y metabolismos muy diferentes. Por ello, y con el fin de superar esta
incertidumbre, la clasificacin bacteriana actual se centra en el uso de tcnicas moleculares
modernas (filogenia molecular), tales como la determinacin
del contenido de guanina/citosina, la hibridacin genoma-genoma o la secuenciacin de ADN
ribosmico, el cual no se ve involucrado en la transferencia horizontal.
131

El Comit Internacional de Sistemtica de Procariotas (ICSP) es el organismo encargado de la
nomenclatura, taxonoma y las normas segn las cuales son designados los procariotas.
132
El
ICSP es responsable de la publicacin del Cdigo Internacional de Nomenclatura de
Bacterias (lista de nombres aprobados de especies y taxones bacterianos).
133
Tambin publica
la Revista Internacional de Bacteriologa Sistemtica (International Journal of Systematic
Bacteriology).
134
En contraste con la nomenclatura procaritica, no hay una clasificacin oficial
de los procariotas porque la taxonoma sigue siendo una cuestin de criterio cientfico. La
clasificacin ms aceptada es la elaborada por la oficina editorial del Manual Bergey de
Bacteriologa Sistemtica (Bergey's Manual of Systematic Bacteriology) como paso preliminar
para organizar el contenido de la publicacin.
135
Esta clasificacin, conocida como "The
Taxonomic Outline of Bacteria and Archaea" (TOBA), est disponible en Internet.
136
Debido a
la reciente introduccin de la filogenia molecular y del anlisis de las secuencias de genomas,
la clasificacin bacteriana actual es un campo en continuo cambio y plena expansin.
137

138

La identificacin de bacterias en el laboratorio es particularmente relevante en medicina,
donde la determinacin de la especie causante de una infeccin es crucial a la hora de aplicar
un correcto tratamiento. Por ello, la necesidad de identificar a los patgenos humanos ha dado
lugar a un potente desarrollo de tcnicas para la identificacin de bacterias.


Streptococcus mutans visualizado con la tincin de Gram. Cada pequeo punto de la cadena es una bacteria.
La tcnica de tincin de membranas de bacterias de Gram, desarrollada por Hans Christian
Gram en 1884,
139
ha supuesto un antes y un despus en el campo de la medicina, y consiste
en teir con tintes especficos diversas muestras de bacterias en un portaobjetos para saber si
se han teido o no con dicho tinte.
140

Una vez se han adicionado los tintes especficos en las muestras, y se ha lavado la muestra
pasados unos minutos para evitar confusiones, hay que limpiarlas con unas gotas de alcohol
etlico. La funcin del alcohol es la de eliminar el tinte de las bacterias, y es aqu donde se
reconocen las bacterias que se han tomado: si la bacteria conserva el tinte, es una Gram
positiva, las cuales poseen una pared ms gruesa constituida por varias decenas de capas de
diversos componentes proteicos; en el caso de que el tinte no se mantenga, la bacteria es
una Gram negativa, la cual posee una pared de una composicin diferente. La funcin
biolgica que posee sta tcnica es la de fabricar antibiticos especficos para esas bacterias.
Esta tincin es empleada en microbiologa para la visualizacin de bacterias en muestras
clnicas. Tambin se emplea como primer paso en la distincin de diferentes especies de
bacterias,
141
considerndose bacterias Gram positivas a aquellas que se tornan de color
violeta y Gram negativas a las que se tornan de color rojo.
142

143

En el anlisis de muestras clnicas suele ser un estudio fundamental por cumplir varias
funciones:
Identificacin preliminar de la bacteria causante de la infeccin.
Consideracin de la calidad de la muestra biolgica para el estudio, es decir, permite
apreciar el nmero de clulas inflamatorias as como de clulas epiteliales. A mayor
nmero de clulas inflamatorias en cada campo del microscopio, ms probabilidad de que
la flora que crezca en los medios de cultivo sea la representativa de la zona infectada. A
mayor nmero de clulas epiteliales sucede los contrario, mayor probabilidad de
contaminacin con flora saprfita.
Utilidad como control de calidad del aislamiento bacteriano. Las cepas bacterianas
identificadas en la tincin de Gram se deben corresponder con aislamientos bacterianos
realizados en los cultivos. Si se observan mayor nmero de formas bacterianas que las
aisladas, entonces hay que reconsiderar los medios de cultivos empleados as como la
atmsfera de incubacin.
Filogenia[editar]
Artculo principal: Filogenia bacteriana
Las relaciones filogenticas de los seres vivos son motivo de controversia y no hay un acuerdo
general entre los diferentes autores. Muchos rboles filogenticos, en especial los
de ARNr 16S y 23S, muestran que los grupos basales son filos termfilos
como Aquificae y Thermotogae,
144
lo que reforzara el origen termfilo de los dominios
Archaea y Bacteria. En cambio, algunos rboles genmicos muestran a Firmicutes (Gram
positivos) como el clado ms antiguo.
145
Segn las teoras de Cavalier-Smith la mayor
divergencia se encuentra en un grupo fotosinttico que
denomina Chlorobacteria (Chloroflexi).
35
Otros estudios filogenticos genmicos o proteicos
colocan en una posicin basal aPlanctomycetes, Proteobacteria u otros filos. Finalmente se ha
propuesto que hubo una temprana divergencia entre dos
supergrupos: Gracilicutes y Terrabacteria;
146
demostrando en suma que actualmente no existe
un filogenia bacteriana estable como para conocer con certeza la historia evolutiva bacteriana
ms temprana. Esto debido con toda probabilidad al fenmeno de la transferencia gentica
horizontal, tpica de los organismos procariotas.
Filos bacterianos[editar]
Los principales filos bacterianos se pueden organizar dentro de un amplio criterio filogentico
del siguiente modo:
Grupos termfilos: De acuerdo con la mayora de rboles filogenticos moleculares son
los ms divergentes, formando un grupo parafiltico basal.
Son termfilos ehipertermfilos con metabolismo quimiotrofo, respiracin anaerobia y
estructura Gram negativa (de doble membrana).
Aquificae. Pequeo grupo de bacterias quimiolitotrofas, termfilas o hipertermfilas.
Se las encuentra en manantiales calientes, pozos sulfurosos y fuentes
hidrotermalesocenicas.
Thermotogae. Un filo de hipertermfilos, anaerobios obligados, hetertrofos
fermentativos.
Dictyoglomi. Comprende una sola especie de hipertermfilo, quimioorganotrofo y
aerobio.
Deinococcus-Thermus o Hadobacteria. Pequeo grupo
de quimiorganotrofos extremfilos altamente resistentes. Unas especies soportan el
calor y el fro extremo, mientras que otras son resistentes a la radiacin y a las
sustancias txicas.
Thermodesulfobacteria: Termfilas reductoras de sulfato.
Caldiserica. Bacteria termfila anaerobia.
Grupos probablemente relacionados con los termfilos:
Deferribacteres. Pequeo grupo de bacterias acuticas anaerobias.
Chrysiogenetes Comprende una sola especie de quimiolitoauttrofo. Tiene una
bioqumica y una forma de vida nicas: en vez de respirar oxgeno,
respira arseniato.
Synergistetes. Bacteria anaerobia.
Nitrospirae. Grupo de quimiosintticos oxidantes de nitrgeno y algunos son
termfilos.
Grupos Gram positivos o Posibacteria. Bacterias Gram positivas o monodrmicas (de
una sola membrana celular).
Firmicutes o Endobacteria. Es el grupo ms extenso y comprende a las
bacterias Gram positivas con contenido GC bajo. Se encuentran en diversos hbitats,
incluyendo algunos patgenos notables. Una de las familias, Heliobacteria, obtiene su
energa a travs de la fotosntesis, otros son endosimbiticas sin pared celular
(Mollicutes) y otros tienen una pseudo membrana externa (Negativicutes).
Actinobacteria. Un extenso filo de bacterias Gram positivas de contenido GC alto. Son
comunes en el suelo aunque algunas habitan en plantas y animales, incluyendo
algunos patgenos. Algunas forman colonias en forma de hifas (Actinomyces).
Grupos fotosintticos tempranos: De metabolismo fotolitoauttrofo, didrmicos y
frecuentemente coloniales.
Chlorobacteria
Chloroflexi (bacterias verdes no del azufre). Pequeo filo de bacterias que
realizan la fotosntesis anoxignica mediante bacterioclorofila, por lo que no
producenoxgeno. Su va de fijacin del carbono tambin difiere de la de otras
bacterias fotosintticas. Son aerobias facultativas y tpicamente filamentosas.
Thermomicrobia. Pequeo filo de termfilos fotosintticos.
Cyanobacteria (algas verde-azuladas). El grupo ms importante de bacterias
fotosintticas. Presentan clorofila y realizan la fotosntesis oxignica. Son unicelulares
o coloniales filamentosas.
Gracilicutes o Hydrobacteria: El clado Gracilicutes est bien consensuado en los
diferentes rboles filogenticos. Son el mayor grupo de bacterias Gram
negativas,quimiohetertrofos en su mayora, de hbitat acutico o relacionado con
animales y plantas como comensal, mutualista o patgeno.
Spirochaetes. Bacterias quimiohetertrofas con forma alargada tpicamente enrollada
en espiral que se desplazan mediante rotacin. Muchas producen enfermedades.
Grupo FCB o Sphingobacteria.
Fibrobacteres. Pequeo filo de que incluye muchas de las bacterias estomacales
que permiten la degradacin de la celulosa en los rumiantes.
Chlorobi (bacterias verdes del azufre). Es un pequeo filo de
bacterias fototrofas mediante bacterioclorofila y anaerobias obligadas. Una
especie es termfila y vive en fuentes hidrotermales.
Bacteroidetes. Un extenso filo de bacterias con amplia distribucin en el medio
ambiente, incluyendo el suelo, sedimentos, agua de mar y el tracto digestivo de
los animales. Es un grupo heterogneo que incluye aerobios obligados o
anaerobios obligados, comensales, parsitos y formas de vida libre.
Acidobacteria. Pequeo filo de bacterias acidfilas comunes en el suelo. Incluye
una bacteria fototrofa usando bacterioclorofila.
Gemmatimonadetes. Aerobios del suelo y el fango.
Grupo PVC o Planctobacteria
Planctomycetes. Bacterias principalmente acuticas aerobias encontradas en
agua dulce, salobre y marina. Su ciclo biolgico implica la alternancia entre
clulasssiles y flageladas. Se reproducen por gemacin.
Verrucomicrobia. Comprende bacterias terrestres, acuticas y algunas asociadas
con huspedes eucariotas.
Chlamydiae. Un pequeo grupo de parsitos intracelulares obligados de las
clulas eucariotas.
Lentisphaerae. Pequeo grupo de bacterias recientemente descubiertas en aguas
marinas y hbitats terrestres anaerobios.
Proteobacteria (bacterias prpuras y relacionadas). Es un grupo muy diverso y
extenso. La mayora son hetertrofas, otras son fermentadoras como
las enterobacterias y muchas causan enfermedades como las ricketsias que son
parsitos intracelulares. Los rizobios son endosimbiontes al realizar la fijacin de
nitrgeno en las plantas, lasbacterias prpuras son fototrofas con bacterioclorofila y
las mixobacterias forman agregados multicelulares.
Fusobacteria. Bacterias hetertrofas anaerobias causantes de infecciones en humanos.
Constituyen uno de los principales tipos de flora del aparato digestivo.
Uso de las bacterias en la tecnologa y la industria[editar]
Muchas industrias dependen en parte o enteramente de la accin bacteriana. Gran cantidad
de sustancias qumicas importantes como alcohol etlico, cido actico, alcohol
butlico y acetona son producidas por bacterias especficas. Tambin se emplean bacterias
para el curado de tabaco, el curtido de cueros, caucho, algodn, etc. Las bacterias (a
menudo Lactobacillus) junto con levaduras y mohos, se han utilizado durante miles de aos
para la preparacin de alimentos fermentados tales como queso, mantequilla,encurtidos, salsa
de soja, chucrut, vinagre, vino y yogur.
147

148

Las bacterias tienen una capacidad notable para degradar una gran variedad de compuestos
orgnicos, por lo que se utilizan en el reciclado de basura y en biorremediacin. Las bacterias
capaces de degradar los hidrocarburos son de uso frecuente en la limpieza de los vertidos de
petrleo.
149
As por ejemplo, despus del vertido del petrolero Exxon Valdez en 1989, en
algunas playas de Alaska se usaron fertilizantes con objeto de promover el crecimiento de
estas bacterias naturales. Estos esfuerzos fueron eficaces en las playas en las que la capa
de petrleo no era demasiado espesa. Las bacterias tambin se utilizan para la
biorremediacin de basuras txicas industriales.
150
En la industria qumica, las bacterias son
utilizadas en la sntesis de productos qumicos enantiomricamente puros para uso
farmacutico o agroqumico.
151

Las bacterias tambin pueden ser utilizadas para el control biolgico de parsitos en
sustitucin de los pesticidas. Esto implica comnmente a la especie Bacillus
thuringiensis(tambin llamado BT), una bacteria de suelo Gram-positiva. Las subespecies de
esta bacteria se utilizan como insecticidas especficos para lepidpteros.
152
Debido a su
especificidad, estos pesticidas se consideran respetuosos con el medio ambiente, con poco o
ningn efecto sobre los seres humanos, la fauna y la mayora de los insectos beneficiosos,
como por ejemplo, los polinizadores.
153

154



Cristales de insulina.
Las bacterias son herramientas bsicas en los campos de la biologa, la gentica y
la bioqumica moleculares debido a su capacidad para crecer rpidamente y a la facilidad
relativa con la que pueden ser manipuladas. Realizando modificaciones en el ADN bacteriano
y examinando los fenotipos que resultan, los cientficos pueden determinar la funcin
de genes, enzimas y rutas metablicas, pudiendo trasladar posteriormente estos
conocimientos a organismos ms complejos.
155
La comprensin de la bioqumica celular, que
requiere cantidades enormes de datos relacionados con la cintica enzimtica y la expresin
de genes, permitir realizar modelos matemticos de organismos enteros. Esto es factible en
algunas bacterias bien estudiadas. Por ejemplo, actualmente est siendo desarrollado y
probado el modelo del metabolismo de Escherichia coli.
156

157
Esta comprensin del
metabolismo y la gentica bacteriana permite a la biotecnologa la modificacin de las
bacterias para que produzcan diversas protenas teraputicas, tales como insulina, factores de
crecimiento yanticuerpos.
158

159

Galera[editar]


Mycobacterium tuberculosis(Actinobacteria)


Thermus aquaticus(Deinococcus-Thermus)


Oenococcus oeni(Firmicutes)


Bacillus cereus(Firmicutes)


Staphylococcus aureus(Firmicutes)


Campylobacter jejuni(Proteobacteria)


Bordetella bronchiseptica(Proteobacteria)

E-coli-in-color.jpg
Escherichia coli(Proteobacteria)


Vibrio cholerae(Proteobacteria)


Leptospira(Spirochaetes)


Treponema pallidum(Spirochaetes)
Vase tambin[editar]
Bacterifago
Bacteriologa
Biotecnologa
Extremfilo
Microbiologa
Nanobio
Cdigo Internacional de Nomenclatura de Bacterias
Enfermedades bacterianas
Microbiota normal
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Enlaces externos[editar]
Wikimedia Commons alberga contenido multimedia sobre Bacteria.
Wikispecies tiene un artculo sobre Bacteria.
Wikcionario tiene definiciones y otra informacin sobre bacteria.
Bacterias: Cmo transformaron la Tierra
agronlin.tripod.com; datos sobre bacterias
Crea un cultivo de bacterias
Todar's Online Textbook of Bacteriology




GENERALIDADES DE BACTERIAS
Dr. Jos Molina Lpez joseml@unam.mx
Dra. Teresa Uribarren Berrueta berrueta@unam.mx
Departamento de Microbiologa y Parasitologa, Facultad de Medicina, UNAM.
CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS
De acuerdo al Arbol de la Vida de Woese, microbilogo creador de la nueva taxonoma molecular
basada en la comparacin entre especies de la fraccin 16s del ARN ribosomal, se proponen 3
dominios Archaea, Bacteria y Eucarya, en los que se incluye a todos los seres vivos, aunque
existen controversias.

rbol de la vida segn Carl Woese.
J. Deacon. University of Edinburgh
Los dominios Archeae y Bacteria corresponden a las clulas procariotas, una de cuyas
caractersticas es la de carecer de membrana nuclear. Con base en el estudio de fsiles y
modelos, se calcula que emergieron hace unos 3.6 - 4 billones de aos. Su importancia radica en
el hecho de haber desarrollado una pared celular o membrana externa que les confiri, desde el
principio, de autonoma y proteccin con respecto a su medio ambiente. Desde entonces
constituyeron la forma de vida ms abundante en el planeta en trminos de biomasa y nmero de
especies.

A pesar de su menor complejidad en relacin a Eucarya, los integrantes de los
dominios Archeae y Bacteria pueden vivir en hbitats extremos: se les encuentra en las
profundidades de la Tierra, sobreviviendo gracias al lento catabolismo del carbono orgnico
depositado en los sedimentos, y en las profundas fuentes hidrotermales submarinas.

Se acepta la aparicin del dominio Eukarya, con membrana nuclear y orgnulos ms
desarrollados, desde hace unos dos billones de aos; de este dominio derivan todos los
organismos eucariontes uni y multicelulares.
Otra clasificacin de los seres vivos muy utilizada es la propuesta por Whitaker y Margulis. Ellos
clasifican a los organismos en cinco reinos, Animalia, Plantae, Fungi, Protista y Monera, en ste
ltimo reino se incluyen todas las bacterias.
IMPORTANCIA DE LAS BACTERIAS

Los miembros pertenecientes a los dominios Bacteria y Archaea son las formas ms abundantes
en el planeta. Las bacterias constituyen una proporcin significativa por lo que respecta al peso
corporal de los diferentes hospederos (desde 0.5 k hasta unos 2.5 k). Su biomasa total lleg a
estimarse en 3.5 1014 kg de carbono. Sin embargo, en 2008 solo se aceptaban ~7,000 especies
microbianas, versus 300 000 especies de plantas y 1 250 000 de animales, lo cual no refleja la
biodiversidad total de las bacterias. (Achtman et al., 2008).

La Bacteriologa es una disciplina de la Microbiologa, que ha estado presente a lo largo de la
historia de la humanidad. Las bacterias son responsables de millones de muertes de personas a
nivel mundial. Entre algunas enfermedades infecciosas bacterianas, causantes de grandes
epidemias que han mermado la poblacin, se encuentran: la difteria, clera, tuberculosis, sfilis,
ttanos, tos ferina, y fiebre tifoidea. Sin embargo, tambin existen infecciones bacterianas que
aunque estn asociadas en menor frecuencia como causa de muerte, son un problema de salud
pblica en pases en vas de desarrollo como el nuestro, entre las que podemos mencionar:
diarreas (causadas por Shigella o Escherichia coli), infecciones de vas urinarias,
faringoamigdalitis, gonorrea, tracoma y brucelosis.

Otro aspecto de primordial importancia en bacteriologa es la microbiota del cuerpo humano, en
especial del tracto gastrointestinal. Se estima que en el intestino de un ser humano adulto, existe
un billn (1012) de microorganismos por mililitro de contenido fecal y alberga entre 500 y 1000
diferentes especies bacterianas. La mayora de esos microorganismos pertenecen
al Dominio Bacteria, que incluye tanto a bacterias gramnegativas como grampositivas. La
microbiota intestinal difiere de una persona a otra y esa diversidad se ha visto en la composicin
del lumen (heces) y de la mucosa (epitelial), aunque el genotipo del hospedero es ms importante
en determinar la microbiota intestinal que la dieta, edad y estilo de vida.

La microbiota intestinal esta implicada en una gran variedad de funciones en el hospedero,
involucrando cambios en el epitelio intestinal, modulacin inmune, movimiento intestinal y el
metabolismo de algunas drogas. La microbiota tambin est involucrada en la degradacin de
algunas toxinas y carcingenos que se ingieren en la dieta, sntesis de micronutrientes,
fermentacin de substancias del alimento, ayuda en la absorcin de electrolitos y minerales;
asimismo afecta el desarrollo y diferenciacin de los enterocitos, a travs de la produccin de
cidos grasos de cadena corta. Finalmente, la microbiota previene la colonizacin del intestino por
bacterias patgenas como: Escherichia coli, Salmonella, Clostridium y Shigella.

Actualmente se ha resaltado el papel que tiene la microbiota en la obesidad del humano. Las
actividades metablicas de la microbiota intestinal facilitan la extraccin de caloras de los
alimentos ingeridos y el almacenaje de esas caloras en el tejido adiposo del hospedero, para su
posterior utilizacin y proveen energa y nutrimentos para el desarrollo y proliferacin microbiana.
Las diferencias en la recuperacin de energa en los individuos puede ofrecer una explicacin
fisiolgica del porqu algunos pacientes presentan obesidad, pero no comen en abundancia. Se ha
sugerido que la microbiota intestinal de algunas personas tiene una eficiencia metablica
especfica y que ciertas caractersticas en la composicin de la microbiota pueden predisponer a
obesidad.

Por otra parte, las bacterias presentan un metabolismo tan diverso que les permite llevar a cabo
funciones tales como: La fijacin de nitrgeno (conversin de nitrgeno gaseoso a amonio), la
fijacin de una cantidad importante de CO2, la metanognesis (produccin biolgica de metano),
as como la reduccin de azufre y fierro.

Hay bacterias con capacidad para metabolizar los plaguicidas clorados e hidrocarburos.
Actualmente se trabaja en la produccin de polmeros bacterianos biodegradables para sustituir a
los plsticos sintticos. Adems, mediante a procesos vigentes a nivel industrial, las bacterias se
utilizan en la produccin de antibiticos (bacitracina, cefalosporina, cloranfenicol, cicloheximida,
lincomicina, nistatina, penicilina, polimixina B, estreptomicina, son algunos de ellos); vitaminas tales
como la vitamina B12 y la riboflavina, cuya sntesis es ms fcil por fermentacin; aminocidos, por
fermentacin directa o sntesis enzimtica, entre ellos el cido asprtico y la fenilalanina
(ingredientes del aspartame), el cido glutmico (empleado como saborizante bajo la forma de
glutamato monosdico), la lisina (aditivo alimentario). Por lo que respecta a enzimas microbianas,
stas se producen comercialmente y se emplean en la elaboracin de jarabes edulcorantes,
detergentes, ablandadores de carnes.

Las aplicaciones prcticas de las bacterias en la ingeniera gentica incluyen: vacunas virales
(citomegalovirus, hepatitis B, sarampin, rabia); protenas y pptidos (insulina, factor estimulante
del crecimiento, interfern alfa, interfern beta, factor de necrosis tumoral y otros que an no se
encuentran en el mercado); vegetales y animales transgnicos; regulacin y terapia gnicas.
TIPIFICACIN BACTERIANA
La tipificacin de las bacterias se basa en el estudio de sus caractersticas mediante tcnicas que
oscilan entre las ms sencillas tinciones y los ms complejos estudios moleculares. Una tcnica til
y de bajo costo consiste en la tincin de Gram y posterior observacin de la muestra mediante el
microscopio de luz para estudiar las bacterias, su forma, tipo de agrupacin y color: grampositivas
o gramnegativas. La mayor parte de las bacterias puede ser ubicada en uno de estos dos grupos o
en un tercero, de acuerdo a la cido-alcohol resistencia que presenten (Ziehl-Neelsen).

Algunas propiedades genticas y fisiolgicas constituyen herramientas utilizadas para definir
algunas caractersticas de las cepas, como los serotipos y biotipos, determinacin de especies en
algunos grupos de bacterias, produccin de toxinas. Los mtodos ms sensibles se basan en el
anlisis del material gentico. Cabe mencionar que stos han diversificado sus objetivos; se
emplean en la identificacin de subgrupos de genes esenciales para el crecimiento, colonizacin,
adhesin e invasin bacterianos (un ejemplo es el IVET - siglas de "in vivo expression technology"),
desarrollada para seleccionar los genes activos nicamente durante la infeccin).
MORFOLOGA BACTERIANA

Las bacterias que tienen forma esfrica u ovoide se denominan cocos. Y si se tien de azul con el
Gram, se les llama grampositivos. Cuando los cocos se agrupan en cadenas, se les denomina
estreptococos y cuando lo hacen en racimos, se les llama estafilococos; tambin se pueden
agrupar en pares que reciben el nombre de diplococos. Las bacterias en forma de bastn reciben
el nombre de bacilos. Si al teirlos con el Gram quedan de color rojo, se les denomina
gramnegativos. Los bacilos curvados que presentan espirales se llaman espirilos, rgidos; algunas
bacterias en espiral presentan formas fcilmente reconocibles, como las espiroquetas, semejantes
a un tornillo o sacacorchos, flexibles. Las bacterias que carecen de pared celular tienen gran
plasticidad (micoplasmas) y adoptan una variedad de formas. Las bacterias esfricas tienen un
tamao promedio de 1 micrmetro de dimetro, mientras que los bacilos miden 1.5 de ancho por 6
micrmetros de largo.

Diferentes formas y agrupamientos que presentan las bacterias.
Imagen: Mariana Ruiz, en Wikimedia Commons. Modificada por Molina J.
Ejemplos de formas y tincin bacterianas:

SEM. Staphylococcus aureus. Cocos Gram
positivos. CDC/ Matthew J. Arduino, DRPH
SEM. Escherichia coli. Bacilos cortos gram
negativos no esporulados, flagelados.
CDC/Janice Haney Carr

Campo oscuro. Treponema pallidum. Se le
ubica dentro de las espiroquetas. CDC
SEM. Leptospira interrogans.
Borrelia, Leptospira y Treponema conforman las
familias de espiroquetas patgenas. CDC
Formas de agrupamiento y divisin bacterianos (cocos):

GENTICA BACTERIANA
El genoma bacteriano consiste en uno o ms cromosomas, que contienen los genes necesarios y
una gran variedades de plsmidos que generalmente codifican para genes no esenciales. El
cromosoma est constituido por una doble hebra de DNA circular. Presenta dominios de
superenrrollamiento debido a que se dobla y tuerce para ser almacenado en la clula, que en
promedio, mide 1 micrmetro. Este genoma mide entre 1 - 6 millones de pares de bases de DNA
(es decir, de 1 - 6 Mb).
El nombre nucleoide sirve para identificar a este DNA no confinado por una membrana. Cuando la
clula se encuentra en fase logartmica (de crecimiento rpido) pueden encontrarse varias copias
cromosmicas, completas o parciales. Las bacterias son microorganismos organismos haploides y
se dividen por fisin binaria, cuyo tiempo de generacin varia desde 20 minutos hasta varias horas.
Las bacterias pueden intercambian material gentico mediante tres mecanismos: transformacin,
conjugacin y transduccin.
Plsmidos. Algunas bacterias poseen elementos genticos extracromosomales, llamados
plsmidos, son pequeos fragmentos circulares de doble cadena de DNA que se mantienen en un
nmero estable y contienen los genes necesarios para replicarse y para su transferencia a otras
clulas, as como para sintetizar toxinas, algunas estructuras de superficie (adhesinas) y para la
resistencia a antibiticos (plsmidos R).
Bacterifagos, conocidos tambin como "fagos", son parsitos intracelulares (virus) de bacterias.
Estn constituidos por DNA o RNA y protenas. Si lisan a la bacteria infectada se habla de una
infeccin ltica; si se integran al genoma bacteriano y se encuentran en estado quiescente
(profagos con el potencial de producir fagos) se habla de una bacteria en estado lisognico. Debe
considerarse la abundancia de fagos en el planeta, con una estimacin de >1031 y el hecho de
que fagos y las bacterias hospederas coexisten en prcticamente todos los ecosistemas. Los
encuentros entre ambos llevan a la seleccin de fagos evolucionados que se adaptan en respuesta
a las defensas bacterianas.
Transposones e integrones. Los transposones son segmentos de DNA de gran movilidad,
simples o compuestos; dan lugar a mutaciones, ya sea por insercin o prdida de genes o
diseminacin de los mismos entre clulas. Cabe sealar que en los transposones se encuentran
habitualmente los genes que determinan la sntesis de toxinas, factores de adhesin, virulencia o
resistencia a algunos antibiticos. Mientras que los integrones son elementos genticos capaces
de captar y expresar genes en casetes de resistencia a antibiticos. Tanto los transposones como
los integrones pueden estar integrados en plsmidos y/o en el cromosoma bacteriano.

Islas de patogenicidad. Las islas de patogenicidad son secuencias de DNA que se caracterizan
por contener genes asociados a virulencia y que pueden estar tanto en plsmidos, como en el
cromosoma bacteriano. Poseen tambin elementos genticos mviles, como transposasa e
integrasas, que les permiten insertarse en ciertos sitios dentro del genoma bacteriano. Tienen un
tamao de entre 10 y 500 kpb (miles de pares de bases). Entre los genes de virulencia asociados a
virulencia asociados a estas islas de patogenicidad tenemos: adherencia, produccin de toxinas,
invasividad, resistencia a antibiticos y formacin de biopelculas.
ESTRUCTURA BSICA
Citoplasma:
En el citoplasma se encuentran todas las enzimas necesarias para divisin y metabolismo
bacterianos, asimismo, cuenta con ribosomas de menor tamao en relacin a clulas eucariotas,
pero no presenta mitocondrias, retculo endoplsmico ni cuerpo de Golgi; las enzimas para el
transporte de electrones se encuentran en la membrana citoplsmica. Los pigmentos requeridos
por bacterias fotosintticas se localizan en vesculas debajo de la mencionada membrana. Las
reservas se observan como grnulos insolubles (azufre, glucgeno, fosfatos y otros). La base del
citoplasma es parecida a un gel en la que se identifican vitaminas, iones, agua, nutrimentos,
desechos, el nucleoide y plsmidos.

Estructura general bacteriana
BIODIDAC. Modificada.
Pared celular:
Con la tincin de Gram, una proporcin importante de bacterias puede dividirse en dos grandes
grupos: grampositivas (se observan de color azul - debido al colorante cristal violeta) y
gramnegativas (pierden el cristal violeta y conservan la safranina - se aprecian de color rojo o
rosado). La tcnica se basa en las diferencias fsicas fundamentales de la pared celular y emplea
colorantes catinicos (cristal violeta y safranina), que se combinan con elementos cargados
negativamente.
Las bacterias grampositivas cuentan con tres capas externas: cpsula (en algunos casos), pared
celular gruesa y membrana citoplsmica. Las bacterias gramnegativas presentan cpsula
(algunas), una pared celular delgada, membrana externa (que equivale al lipopolisacrido) y una
membrana interna (citoplasmtica).
La pared celular le da forma a la bacteria y su composicin vara entre bacterias. En bacterias
grampositivas, consiste de varias capas de peptidoglucano (formado por los azcares N-
acetilglucosamina ms N-acetilmurmico y un tetrapptido) que retienen el cristal violeta utilizado
en la tincin de Gram; otros componentes de la pared incluyen redes de cido teicoico y cido
lipoteicoico. Las bacterias gramnegativas cuentan con dos membranas (una externa y una
interna) as como una capa delgada de peptidoglucano entre ambas, en el llamado espacio
periplsmico.

Esquema. Pared celular bacteria grampositiva. T. Uribarren B. Esquema. Pared celular bacteria gramnegativa. T. Uribarren B.
La membrana citoplsmica:
Debajo de la pared celular se encuentra la membrana citoplasmtica, la capa ms interna,
compuesta por protenas y fosfolpidos (bicapa lipdica). Sus funciones son la permeabilidad
selectiva y transporte de solutos (la mayor parte de las molculas que la atraviesan no lo hacen de
forma pasiva), la fosforilacin oxidativa en los organismos aerbicos, la liberacin de enzimas
hidrolticas y el reciclamiento de receptores.

Lipopolisacrido (LPS):
Formado por fosfolpidos y protenas de membrana externa. El LPS est constituido por tres partes
bioqumicamente diferentes: una cadena de azcares, el polisacrido llamado antgeno somtico u
O, se utiliza para tipificar cepas bacterianas, una porcin lipdica, el lpido A, que est anclado a
los lpidos de la membrana) y es txica para el humano y animales. Entre ambos se encuentra el
polisacrido central, llamado core.
Los llamados bacilos cido-alcohol resistente (BAAR) como Mycobacterium, presentan una pared
compuesta de una capa muy delgada de peptidoglucano, una gran cantidad de lpidos (60%),
principalmente cidos miclicos, responsables en parte de la acido-alcohol resistencia, as como de
la hidrofobicidad y de la consistencia "de cera" de estos microorganismos. Los peptidoglucanos les
confieren una forma estable e impiden la smosis ltica. La tcnica que se utiliza para teir estas
bacterias, se denomina de Ziehl-Neelsen y es una mezcla de fucsina bsica y fenol, calor y
contraste con azul de metileno; al finalizar la tcnica, los organismos cido-alcohol resistentes se
aprecian rojos, mientras que el fondo se tie de azul.
Espacio periplsmico:
Este espacio que se ubica entre la membrana interna y la membrana externa presente solo en las
bacterias gramnegativas. Contiene protenas de unin para los sustratos especficos, enzimas
proteolticas y quimiorreceptores. Es una solucin densa, con alta concentracin de
macromolculas, y participa e en la regulacin de la osmolaridad con respecto al medio externo

Cpsula y glicoclix:
Es una cubierta de grosor vartiable formada habitualmente por unidades de polisacridos,
protenas o ambos. Si est bien estructurada y se encuentra bien adherida a la clula, se le
denomina cpsula; si por el contrario, tiene estructura mal definida y su adhesin es dbil, se le
conoce como glicoclix. De acuerdo a su estructura qumica, puede ser flexible o rgida. La rigidez
le confiere la caracterstica de una matriz impermeable. Determina la adhesin a superficies
(biopelculas), constituye una barrera de proteccin contra la fagocitosis y los anticuerpos e impide
la desecacin y la accin de otros agentes. Acta como barrera de difusin ante algunos
antibiticos. Ejemplos de bacterias con cpsula son Streptococcus pneumoniae y Haemophilus
influenzae.

Bacillus cereus. Flagelos. CDC.
Flagelos:
Son apndices filamentosos y muy finos compuestos por la protena flagelina dispuesta en fibras
helicoidales y con apariencia lisa, anclados a la pared celular. Presentan un gancho, que une el
filamento al cuerpo basal (parte motora). Su funcin es el desplazamiento de la clula mediante
movimientos variables de rotacin. Su distribucin es variable, as como su nmero.
Independientemente del mecanismo de locomocin que desplieguen las bacterias, ste les permite
responder en sentido positivo o negativo a gradientes fisicoqumicos (quimiotropismo,
fototropismo). Son muy antignicos.
Pili y Fimbrias:
Estructuras ms delgadas y cortas que los flagelos. Actan como rganos de fijacin entre clulas
(bacteria - bacteria, bacteria - clula eucariota) Tambin se les relaciona con la formacin de
biopelculas y la conjugacin (pilis sexuales). Factores de relevancia en la colonizacin. Ejemplo:
las fimbrias de Streptococcus pyogenes contienen el principal factor de virulencia, la protena M.
Espora:
La espora es una estructura formada por algunas especies de bacterias grampositivas, por
ejemplo: Clostridium y Bacillus. Es una estructura altamente diferenciada cuyas caractersticas le
confieren gran resistencia ante el medio ambiente y agentes nocivos. En ambientes hostiles sufre
cambios estructurales y metablicos que dan lugar a una clula interna en reposo, la endospora,
que puede ser liberada como una espora. Son altamente resistentes a la desecacin, calor, luz
ultravioleta y agentes qumicos (bacteriocidas).
Son altamente resistentes a la desecacin, calor, luz ultravioleta y agentes qumicos bacteriocidas.
CRECIMIENTO Y METABOLISMO
La multiplicacin celular es una consecuencia directa del crecimiento y da lugar, en el caso de las
bacterias, a colonias, mediante un sistema de reproduccin asexual denominado divisin binaria.
Los procesos sintticos involucrados en el crecimiento bacteriano incluyen ms de 2 000
reacciones bioqumicas.
La velocidad de crecimiento es el cambio en nmero de bacterias por unidad de tiempo, y se
expresa como el tiempo de generacin, que es el tiempo necesario para que se duplique una
bacteria o una poblacin de ellas.
En un sistema cerrado o cultivo en medio no renovado se obtiene una curva de crecimiento tpica
que se ha dividido en cuatro fases: fase de latencia, fase exponencial, fase estacionaria y fase de
muerte. La fase de latencia se caracteriza por la adaptacin de los microorganismos, no se
presenta cuando el inoculo es nuevo y si el inoculo proviene de un cultivo viejo, requiere de este
periodo de adaptacin. La mayor parte de las bacterias crece de forma exponencial, aunque hay
una serie de condiciones que influyen (nutrimentos en el medio, temperatura, factores genticos).
En la fase estacionaria no hay una modificacin neta en el nmero de clulas, existe un frgil
equilibrio que desaparece eventualmente cuando an las bacterias metablicamente activas
mueren, debido a productos txicos y falta de nutrimentos (factores presentes en la fase
estacionaria) aunados a enzimas liberadas por la lisis bacteriana.

Produccin de energa:
En las bacterias, la conservacin intracelular de energa tambin ocurre principalmente por medio
de la sntesis de ATP. Los mtodos usados por las bacterias para generar este ATP son
principalmente:

Respiracin aerbica: Proceso metablico en el que el oxgeno molecular es el aceptor final de
electrones. El oxgeno es reducido a agua. Utilizada por bacterias aerbicas.

Respiracin anaerbica: En este proceso, el aceptor final de electrones son otros compuestos,
tales como nitratos o sulfatos. Utilizada por bacterias anaerobias obligadas, aunque algunas, sobre
todo las de mayor importancia mdica, utilizan la fermentacin. Existen las bacterias facultativas,
que pueden utilizar los dos tipos de respiracin aerbica y anaerbica.

Fermentacin: Aqu un intermediario orgnico derivado de un sustrato capaz de ser fermentado, es
el aceptor final de electrones. Un ejemplo: la fermentacin de glucosa (sustrato) a cido lctico; un
producto intermediario, el piruvato, es el aceptor final de electrones
Vnculos.
Nota: En la mayor parte de los casos, el acceso a las editoriales es directo. En algunos casos se
requiere de la instalacin de "cookies" para acceder a sus artculos. Ante un vnculo roto, pueden
localizar el artculo seleccionado mediante su DOI (Digital Object Identifier). La bsqueda puede
realizarse mediante Google (por acuerdo con la DOI Agency). Todos los artculos pueden
descargarse dentro del campus universitario, y fuera de l, mediante a travs de los servicios de la
Biblioteca Mdica Digital o la DGB (Direccin General de Bibliotecas), con su clave personal.
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- Pierre-Edouard Fournier, Michel Drancourt, Philippe Colson, Jean-Marc Rolain, Bernard La Scola,
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ltima revisin 11 febrero 2014


Generalidades de las Bacterias
Fany B. | Etiquetas: Unidad 2

Que son las bacterias?
Son seres generalmente unicelulares que pertenecen al grupo de los protistos inferiores. . Existen
evidencias de que fueron las primeras formas vivas que habitaron el planeta. Del estudio de las
bacterias se encarga la bacteriologa una rama de la micriobiologa.

Las bacterias tienen una estructura menos compleja que la de las clulas de los organismos
superiores: son clulas procariotas (su ncleo est formado por un nico cromosoma y carecen de
membrana nuclear). Igualmente son muy diferentes a los virus, que no pueden desarrollarse ms
dentro de las clulas y que slo contienen un cido nucleico.

En el cuerpo humano hay aproximadamente diez veces ms clulas bacterianas que humanas;
buena parte de ellas en la piel y en el tracto digestivo. Aunque el efecto protector del sistema
inmune hace que la gran mayora de estas bacterias sea inofensiva o beneficiosa, algunas bacterias
patgenas pueden causar enfermedades infecciosas, incluyendo clera, lepra , sfilis, difteria, etc.
Las enfermedades bacterianas mortales ms comunes son las que afectan vas respiratorias, con
una mortalidad cercana a los dos millones de personas al ao si se tiene en cuenta slo la
tuberculosis .
Desde el pasado siglo comenz el uso de antibiticos para tratar las infecciones bacterianas. Los
mismos inhiben la formacin de la pared celular o bloquean la sntesis proteica bacteriana. El uso
extenso e indiscriminado de estos productos en los tratamientos humanos, en la agricultura y la
ganadera, ha conllevado a la aparicin creciente de cepas antibiorresistentes, un problema muy
serio, casi tanto como las propias enfermedades que justifican su existencia, por ello, con
justificada razn, a este fenmeno que se acrecienta en la actualidad, se le ha denominado la
epidemia invisible del siglo XX .

o Morfologa de las bacterias:
Es un parmetro que est determinado genticamente, pero los valores concretos para cada raza
o tipo de bacterias vienen influidos por una serie de condiciones ambientales (nutrientes, sales,
temperatura, tensin superficial, etc.).Lo que se puede afirmar con seguridad es que son invisibles
al ojo humano. El tamao de las bacterias vara dependiendo de las especies entre menos de 1 m
y 250 m; siendo lo ms habitual entre 1 y 10 m. Una caracterstica de las clulas bacterianas es
la alta proporcin que existe entre el rea de la superficie y el volumen de la clula. Esto significa
que poseen una gran superficie a travs de la cual pueden entrar nutrientes para alimentar a un
pequeo volumen; con lo cual pueden realizar muchas reacciones metablicas y crecer
rpidamente. As, por ejemplo Escherichia coli tarda 20 minutos en dividirse mientras que una
clula de mamfero en laboratorio tarda de 13 a 24 horas.

o Clasificacion de las bacterias por su forma
Segn su forma y disposicin celular las bacterias pueden ser:
o Cocos: suelen ser redondeadas aunque pueden ser ovoides o elpticas. Se dividen en 4 formas
diferentes, segn el numero de cocos que contienen:
4. Diplococos: esta formado por 2 pares de cocos.
5. Estreptococos: estn formados por cadenas de 4 a 20 cocos.
6. Tetradas: estn formados por cadenas de cocos a lo largo de planos diferentes.
7. Estafilococos: estn formados por grupos irregulares de cocos, aveces de gran tamao.
o Bacilos :suelen ser redondeados, rectos, en forma de huso o cuerno. Se dividen 4 formas
diferentes:
9. Bacilos: son en forma de vara.
10. Diplobacilos: son dos bacilos juntos.
11. Estreptobacilos: son cadenas de bacilos.
12. Empalizadas: son bacilos que se junta lado con lado o en figuras X, V o Y.
o Helicoidal: Estos se presentan en dos formas:
14. Los espirilos: Que tienen pocas espinas que a veces se parece a una coma
15. Las espiroquetas: con muchas vueltas a modo de sacacorchos














o Estructura de las Bacterias
-Cpsula: no es constante, es una capa gelatinosa de tamao y composicin variable formada de
polisacridos.
-Pared celular: es rgida, dctil y elstica. Su originalidad reside en la naturaleza qumica del
compuesto macromolecular que le confiere su rigidez. Formada por peptiglucal y cido teitoico.
-Membrana celular: semejante a la membrana celular, es una envoltura que rodea al citoplasma.
-Citoplasma: masa de materia viva donde se encuentran los ribosomas (que intervienen en la
fabricacin de protenas) y granos de grasa o de glcidos que le sirven de almacn. En las bacterias
auttrofass se encuentran cromatforos, donde se almacena la clorofila.
-Plasmidio: formado por DNA, de forma circular.
-Flagelos: no existen ms que en ciertas especies. Filamentosos y de longitud variable, constituyen
los rganos de locomocin. Segn las especies, pueden estar implantados en uno o en los dos
polos de la bacteria o en todo su entorno. Constituyen el soporte de los antgenos "H". En algunos
bacilos Gram negativos se encuentran Pili, que son apndices ms pequeos que los cilios y que
tienen un papel fundamental en gentica bacteriana.
-Pili: estructura que sirve de adherencia a la superficie. Sirve de puente citoplasmtico entre la
transferencia de informacin gentica.
-Ribosomas: son grnulos y se componen generalmente de RNA.
-Mesosoma: repliegue de la membrana celular, tiene gran importancia en la divisin celular y la
reparacin de la clula.





Estructura bacteriana curso virtual



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Mtodos para aislar bacterias
Escrito por Karen Curinga | Traducido por Carlos M. Bez








Se utilizan varios mtodos para aislar bacterias.
Photos.com/Photos.com/Getty Images
Las bacterias son esenciales para el apropiado funcionamiento de los ecosistemas.
Descomponen los organismos muertos y reciclan materia orgnica transformndola en
nutrientes minerales. Aislar bacterias en un cultivo puro ayuda a los investigadores a estudiar
y ganar entendimiento sobre las propiedades fisiolgicas de ciertos organismos que no es
posible recabar en una base de estudio ms amplia. Las diferentes bacterias prefieren
diferentes condiciones fsicas y qumicas. Algunas tienen un lmite de tolerancia. Por esta
razn, se utilizan varios mtodos para aislar y estudiar microbios.
Otras personas estn leyendo
Cmo cultivar y contar microorganismos en un laboratorio de microbiologa
Cmo medir el crecimiento de bacterias en placas de Petri
Placa de diseminacin
El mtodo de aislamiento por diseminacin en placa es unprocedimiento en el cual el
investigador disemina una mezcla diluida de clulas sobre una superficie de agar,
utiliza una varilla doblada de vidrio esterilizada, de tal forma que cada clula crece en
su propia colonia separada. Los cultivos son incubados por un periodo de tiempo
especfico. En el medio slido aparece un crecimiento macroscpicamente visible o un
grupo de microorganismos, cada colonia representando un cultivo puro. Luego de que
las colonias han crecido, son contadas y se calcula el nmero de bacterias en la muestra
original.
Placa vertida
El procedimiento de placa vertida se utiliza extensivamente conbacterias y hongos y
tambin puede producir colonias aisladas. Se prepara una muestra bacteriolgica
diluida. El investigador introduce una pequea cantidad dentro de un plato de petri
vaco. Se vierte agar derretido dentro del plato de petri que contiene la muestra. El agar
y la muestra se mezclan meticulosamente al cubrir el plato e inclinarlo y revolverlo
suavemente. Se le da tiempo para que el agar se vuelva gel mientras se asienta sobre la
superficie plana. Los platos recubiertos se invierten y se dejan incubar por un periodo
de tiempo especfico. Las colonias son luego observadas y contadas, y se registra la
informacin.
Placa estriada
El mtodo de estras en placa es el procedimiento clsico para aislar cepas de bacterias.
El investigador esteriliza un lazo de alambre con una llama. Luego de enfriarse, el lazo
de alambre es colocado en una placa de agar estril. El investigador sumerge el lazo
dentro de la muestra, recogiendo miles de bacterias, y a continuacin realiza estras
con el lazo en la superficie de agar. Luego de esterilizar nuevamente el lazo y dejar que
se enfre, el investigador arrastra el lazo a travs del recorrido anterior, levantando un
grupo de bacteriasy realiza otra estra en un rea diferente del agar.
Este procedimiento se repite varias veces. Los platos cerrados son incubados por un
periodo de tiempo especfico, luego del cual se observa el crecimiento bacteriano.
Placa de exposicin
La exposicin de un medio estril al ambiente demuestra la tcnica asptica. El
investigador etiqueta dos placas de agar de nutrientes para una comparacin y
observacin posterior y se las deja descubiertas. Se permite que una placa de agar
permanezca como est, exponindola al ambiente por un corto periodo de tiempo. La
segunda placa es expuesta a una fuente de posibles contaminantes, tales como un
estornudo, tos o dedos colocados en contacto directo con la superficie de agar. Las
placas se cubren, invierten e incuban a temperatura ambiente por un periodo de
tiempo antes de la observacin.
Ms galeras de fotos
Estos animalitos te sorprendern
Las peores traducciones de la historia
Aprende a ser feliz
Referencias
Biotech Univ: aislamiento y cultivos puros
Hendrix: tcnicas de microbiologa
Colegio Clermont de la Universidad de Cincinnati: tcnica de placa vertida para la enumeracin
bacteriana



Laboratorio de
Microbiologia
Aislamiento de Bacterias mediante el Mtodo
Siembra en Placa por Estrias
OBJETIVO:

Demostracin de los medios de defensa del husped en la
piel y garganta mediante el mtodo de siembra en placa por
estra.

MATERIAL MATERIAL
BIOLGICO
Cajas de petri con Agar- Sangre (GS) Exudado faringeo
Cajas de petri con Manitol sal Agar (MSA) Solucin salina estril
Cajas de petri con Agar vogel y Jonson (AVJ) Raspado de piel
Cajas de petri con Agar Estafilococo S110
Mechero Fisher
Asa de platino
Hisopos estriles

INTRODUCCIN

La piel (en condiciones normales) es una barrera que impide
la penetracin de los grmenes, por ello acta como
mecanismo de defensa. Los mamferos son frecuentemente
infectados por algunas de las bacterias preexistentes en su
medio ambiente, aunque en general viven en equilibrio con
estos microorganismos, mantenindoles limitados a zonas
relativamente superficiales de su organismo. Sin embargo las
bacterias infecciosas producen enfermedades al invadir
tejidos ms profundos. Por lo tanto para mantener la salud, el
husped debe defenderse constantemente frente a la invasin
por parte de las bacterias.

Los factores mecnicos, qumicos y microbianos
desempean un papel importante al restringir la colonizacin
de las bacterias a las superficies corporales.

Factores mecnicos: Las superficies epiteliales de la piel y
de las mucosas constituyen barreras que resultan ms o
menos impermeables a las bacterias. La impermeabilidad de
la piel es mayor que en la mayora de las mucosas. Cuando
se altera la integridad de la superficie epitelial, pueden
desarrollarse infecciones subcutneas. Las bacterias que
causan ms frecuentemente estas infecciones son las que
existen habitualmente en la superficie cutnea, folculos
pilosos y glndulas sudorparas en la piel, es decir los
estafilococos.

Factores qumicos: La acidez de las secreciones gstricas
mantienen sin duda la esterilidad habitual del estmago. El
Ph bajo de la piel (3-5), debido en gran parte a los productos
cidos del metabolismo bacteriano, frena sin duda el
crecimiento de muchos microorganismos que toman contacto
con sus superficie.

Factores microbianos: El antagonismo microbiano inhibe
el crecimiento de muchas bacterias y hongos potencial mente
patgenos en lugares superficiales donde de no ser as,
podran producirse enfermedades.

La flora de la regin farngea presenta problemas peculiares
para el aislamiento e identificacin de microorganismos, por
lo tanto se refiere a los componentes de la flora normal como
a microorganismos con accin patgena. Es importante
recordar que algunos microorganismos tienen capacidad
patgena definida y su presencia es un indicio claro de
enfermedades, en tanto que otros, llamados oportunistas,
guardan una posicin ambigua y pueden encontrarse tanto
como componentes de la flora normal, como asociados a
procesos patolgicos, causados por otros microorganismos
que son verdaderos responsables (por ejemplo los virus) Los
estafilococos estn entre las primeras bacterias que se
reconocieron como patgenas, y se descubrieron por primera
vez a principios de la dcada de1880.

Se encuentran ampliamente distribuidos por la naturaleza, y
a menudo forman parte de la flora bacteriana de la piel y el
tracto respiratorio superior; muchas de las especies que se
encuentran en el hombre son comensales. La especie
predominante patgena para el hombre es
el staphylococcus aureus, constituye la causa ms
comn de las infecciones supurativas para el hombre. El
aislamiento de S. aureus a partir del exudado farngeo y
exudado de piel, no tiene importancia diagnstica, ya que se
considera parte de la flora normal de la faringe y
nasofaringe, por lo que no tiene significado clnico.

PROCEDIMIENTO:
A) Raspado de piel

1.- Limpiar y esterilizar el rea a trabajar con fenol al 5%
2.- Prender el mechero fischer cerca de donde se va a
trabajar, si es posible colocar otro
3.- Humedecer el hisopo en solucin salina estril, pasarlo
sobre la superficie de la piel (con o sin pelo)
4.- Descargar el hisopo en dos cajas de petri con el medio
ya preparado. (Es recomendable que para cada dos cajas se
utilice un solo hisopo con muestra). No retires
completamente las tapas de los medios de cultivo para evitar
que se contaminen
5.- quemar el hisopo y tirarlo.
6.- Esteriliza el Asa de platino hasta el rojo vivo, enfralo
introducindolo en un extremo del Agar
7.- Realiza el sembrado de los microorganismos por el
mtodo de estra utilizando el asa y como se muestra en la
figura. Evita destapar completamente la tapa de los medios
de cultivo.
8- Repetir el mismo proceso con otro hisopo estril y con
solucin salina para otras dos cajas . siembra por estra
utilizando el Asa de platino y as hasta que se terminen se
sembrar todos los medios preparados.
9.- Incubar a 37C por 24-48 horas y observar
resultados.10.- Repite el mismo procedimiento pero ahora
toma muestra de la faringe con hisopos estriles en las zonas
afectadas como: amgdalas, pared posterior de la faringe, en
general cualquier rea que manifiesta signos de inflamacin,
exudados y lceras, procurando no tocar con el hisopo la
lengua.



B) CULTIVO DE BACTERIAS A PARTIR DE UN
FROSTIS FARNGEO


OBJETIVOS
Comprender el concepto de colonia bacteriana, medio
de cultivo y halo de inhibicin
Conocer las tcnicas de siembra y cultivo de bacterias
Ser consciente de la importancia de la higiene y el
cuidado en la manipulacin de materiales biolgicos.
Comprender la importancia de la eliminacin de los
residuos orgnicos
Conocer el instrumental de laboratorio necesario en
microbiologa y los procedimientos para su utilizacin
MATERIALES
Depresor de lengua
Torunda o hisopo estril
Placas de agar-sangre
Asa de siembra
Rotulador de vidrio
Cinta adhesiva
Contenedor de residuos orgnicos

DESARROLLO DE LA PRCTICA
Antes de empezar
No se puede tocar nada que vaya a tomar contacto con
la muestra biolgica con las manos (depresor, asa de
siembre, torunda,...) para evitar contaminaciones.
Una vez utilizado este material ha de ser eliminado en
un contenedor especial. Estos contenedores sern llevados
posteriormente a una planta de tratamiento de residuos
biolgicos, donde sern incinerados.
Todos los materiales o muestras tomadas deben estar
perfectamente identificados: nombre, grupo, fecha e
indicativo del tipo de muestra.
Las placas sembradas deben sellarse con cinta adhesiva
al finalizar para evitar su contaminacin o la nuestra.
Al acabar la prctica, se deben lavar bien las manos.

Toma de la muestra
Se abre con cuidado, por un extremo, el depresor de
madera,sin tocar el otro extremo para
mantenerlo estril.
Distribuidos por parejas, uno de los miembros de la
pareja sujeta con el depresor la lengua del otro,
colocndola pegada al suelo de la boca, manteniendo
despejada la abertura bucal.
CON CUIDADO, se introduce una torunda y se
tocan suavemente las amgdalas, en donde se encuentran
bacterias, intentando evitar el contacto con la lengua u
otras zonas. Es normal que se provoque un reflejo de
arcada. En este caso, se separa la torunda y se vuelve a
intentar.
Al finalizar, se tira el depresor al
contenedorde desechos orgnicos.
Se tapa la torunda y se rotula con el nombre del
donante y la fecha, indicando con una F, que se trata de un
frotis farngeo.

Siembra A continuacin se toma una placa de agar-sangre y
se procede a la siembra del material recogido con la torunda
o Hisopo. Se extrae la funda de la torunda y se
pasa SUAVEMENTE por la superficie, cubriendo el rea
sealada en el dibujo como (A) Al finalizar, se tira el
hisopo al contenedor de desechos orgnicos.

Aislamiento
Para intentar que las colonias crezcan separadas tomamos un
asa de siembra y se realizan resiembras en dos zonas:
(B) Tocando con el asa la zona (A) se realiza una lnea
zig-zagueante SUAVEMENTE sobre la superficie (no hay
que perforar la superficie del agar-sangre) (C) Sin tocar las
anteriores zonas. Se tapa y se sella la placa con cinta
adhesiva.
Se rotula la tapa indicando el nombre del donante, su
grupo-clase, la fecha y la F (de frotis farngeo).






Incubacin y observacin
Se llevan las placas a incubar a 37C (temperatura corporal),
durante 24 horas. Tras este perodo se recogen las placas y
SIN ABRIR se observa el crecimiento bacteriano.
Al finalizar la prctica se entregan las placas al profesor para
que sean destruidas junto con el resto de material empleado.

OBSERVACIN
El medio de cultivo agar-sangre es un medio nutritivo
general, no selectivo, en el cual pueden crecer casi todos los
tipos de microorganismos. Su nombre deriva de que contiene
un 5-10% de sangre desfibrinada (no coagula) extrada de
caballo, conejo o, sobre todo, de carnero.
Las bacterias existentes en la faringe pueden ser de dos tipos:
Flora bacteriana propia o normal, de vida saprofita
(crecen sobre restos de comida).
Flora patgena, que provoca enfermedades
(especialmenteStreptococcus pyogenes,
responsable de la faringitis aguda, la fiebre
reumtica, angina estreptoccica,
escarlatina, erisipela)

Al tomar una muestra de la faringe, las bacterias existentes
empiezan a dividirse. De una bacteria se forman miles o
millones, dando lugar a una colonia, visible a simple vista.
Todas las bacterias de una colonia son genticamente
idnticas a la bacteria que las origin e iguales entre s.
Las resiembras tienen por objetos intentar conseguir que se
formen colonias aisladas de la masa principal.
Al contener el medio de cultivo glbulos rojos (agar-sangre)
si existiera algn microorganismo patgeno se producira la
destruccin de estos glbulos rojos, ya que estas bacterias
tienen enzimas que rompen las paredes de los glbulos rojos,
y se formara un halo de hemlisis: alrededor de la
colonia de bacterias patgenas se forma una zona
transparente. As se detecta su presencia en la faringe.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS:

A) REACCIONES POSITIVAS EN DISTINTOS
MEDIOS

GELOSA SANGRE
Para el aislamiento, cultivo y deteccin de actividad
hemoltica de Staphylococcus, Streptococcus y otros
microorganismos fastidiosos. Se observan colonias blancas
casi grises, Grandes, convexas de consistencia butircea,
Presentan bordes regulares. Se observa que Presenta
hemlisis. Las colonias en medio slido son redondeadas,
uniformes, Estos crecen rpidamente a 37 C pero tienden a
formar pigmentos mejor a temperatura ambiente (20 C).

MANITOL SAL AGAR (MSA)
Se utiliza como medio selectivo, para cultivar y enumerar
especies clnicas de estafilococos El manitol cuando es
utilizado por los microorganismos, vira de su color
original rojo a amarillo. Se observan colonias chicas,
blancas, convexas, de consistencia butircea , presentan
bordes irregulares. S. aureus Manitol sal Colonia amarilla S.
epidermidis Manitol sal Colonia incolora

AGAR VOGEL Y JONSON (AVJ)
Para la deteccin de Staphylococcus aureus coagulasa-
positivo, se observan colonias negras Pequeas. bordes
irregulares con halo amarillo. Para S. epidermidis y otros
Pequeas, negro-grisceos, sin halo, El medio presenta un
vire de rojo plido a amarillo.

ESTAFILOCOCO S110
S110 Colonias blancas un poco amarillentas, Se observan
colonias chicas, convexas, De consistencia butircea y
bordes Regulares.
B) DESCRIPCIN DEL TIPO DE COLONIAS
OBTENIDAS
Observar las colonias obtenidas y describirlas teniendo en
cuenta las siguientes caractersticas:
Forma: Puntiforme, Circular, Rizoide, Irregular,
Filamentosa.
Tamao: Grande (ms de 3Mm.), Mediana (2-3Mm.),
Pequea (1-2 Mm.)
Color: Reportar el color final despus de la incubacin
Borde: Entero, Ondulado, Lobulado, Filamentoso,
Ondeado
Elevacin: Plano, Elevado, Convexo, Pulvinado,
Umbonado
Superficie: Suave, Brillante, Rugosa, Plegada, Seca,
Polvorienta

Resultados:














Cuestionario:

Cuando los microorganismos pueden causar dao en
nuestro organismo?
Pueden causar enfermedades o infecciones en el organismo.
Los problemas de las infecciones dependen del tipo
de patgeno, el modo como se transfiere, dosis
o concentracin de patgenos, persistentes de los
microorganismos y la resistencia de la persona infectada.

Que tipo de bacterias son encontradas con mayor
frecuencia en nuestra piel y que pretenden aislarse en
esta practica?
Los mas frecuente son los Staphylococcus y
los Streptococcus.

Que finalidad tiene humedecer el hisopo
con solucin salina estril?
Para que al tomar la muestra de la garganta de nuestro
compaero no lo contamine con algunas otras bacterias en el
aire y tambin para que el hisopo este limpio y nos permita
realizar la muestra.

Por que no es recomendable utilizar el mismo hisopo
para descargar en las cinco cajas de Petri con los medios
ya preparados?
Porque si no habra una envoltura de
bacterias, tambin tomando en cuenta que solamente se
prepararon los medios especialmente para las bacterias en las
que son adecuadamente para ellas, tambin se tomara en
cuenta la higiene que tendramos al hacer nuestro trabajo.

Por qu se recomienda enfriar el asa de platino en el
medio de cultivo ya preparado antes de realizar el
sembrado por estras de los microorganismos?
Para que el asa quede estril completamente y no se deshaga
lo que es el agar y se pueda realizar el cultivo
adecuadamente.

En qu consiste el aislamiento por estras?
Consiste en cargar el asa con la muestra y
hacer estras paralelas en la cuarta parte de la superficie de la
placa; se quema el asa, se enfra, se gira la placa 90 y se
vuelve a estriar tocando 3 o 4 veces el rea sembrada
inicialmente y cubriendo otro cuarto de placa. Por ultimo, sin
quemar el asa, se estra el resto de la superficie sin sembrar.

Observaciones:
Dibuja y Colorea todos los resultados obtenidos de las 48
horas de haber sido incubados.




Conclusin
Durante los cultivos que realizamos pudimos observar que
en nuestro organismo existen bacterias, en la cual
se demostr que en la piel tenemos defensa contra los efectos
de estos microorganismos que se encuentran alrededor, lo
que hay que mantener una buena higiene y saber eliminar los
desechos para evitar la contaminacin.



Tecnicas y metodos de aislamiento y
seleccin de microorganismos
Publicado en septiembre 26, 2012
TCNICAS BSICAS PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS: SIEMBRA Y
ESTUDIO DE BACTERIAS
INTRODUCCIN
Para efectuar el estudio de los microorganismos, se han diseado diversos mtodos que
permiten cultivarlos bajocondicione artificiales, en los que es posible cultivarlos bajo
condiciones experimentales y manejar un solo tipo demicroorganismo. Una de las tcnicas ms
usadas en el laboratorio de microbiologa consiste en transferir unamuestra microbiolgica de
un ambiente determinado a un medio de cultivo, lo que permite obtener cultivosmicrobianos. A
l efectuar este procedimiento, es necesario considerar que en el rea de trabajo, existen muchos
otros microorganismos; debido a esto, es necesario tomar precauciones para impedir que stos
penetren ycontaminen los cultivos en estudio. Por otra parte, para considerar no slo el aspecto
nutricional, sino tambin lascondiciones ambientales de su hbitat natural, por lo que en el
medio de cultivo se debe ajustar el pH yconcentracin de sales y durante la incubacin
condiciones tales como la temperatura, aireacin, la luminosidad. La aplicacin de estos
procedimientos ha permitido propagar a los microorganismos en cultivos mixtos, as comosu
aislamiento y la obtencin de cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio,
caracterizacin, aplicacin y control de los mismos. La forma de sembrarlos y cultivarlos
depende del tipo de microorganismo y propsitoespecfico del estudio.
Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo de ste en
medios de cultivo ycondiciones de laboratorio controladas. La poblacin de microorganismos
desarrollada en un medio se denominacultivo. Cuando ste contiene una sola especie de
microorganismo, se denomina cultivo puro o axnico, cuandocontiene ms de una especie de
microorganismos se denomina cultivo mixto.
.Un cultivo tipo contiene una especie conocida de microorganismos y es conservada en el
laboratorio para realizar diversos ensayos y estudios.Un cultivo axnico consiste en una sola
especie microbiana, proveniente de una sola clula. Los cultivos axnicosson muy raros en la
naturaleza. En los medios naturales -por ejemplo, en el suelo, agua, o en el cuerpo humano-
existen cultivos mixtos. En un cultivo mixto, viven muchas y diferentes especies de forma
conjunta.
Un cultivoaxnico se obtiene artificialmente en el laboratorio. A la hora de obtener un cultivo
axnico se han de tomar precauciones especiales, ya que los microorganismos estn por todas
partes, en la naturaleza, en el laboratorio yen los instrumentos y recipientes usados en los
experimentos. Estos microorganismos no deseados ocontaminantes deben ser eliminados de un
cultivo para que ste pueda ser axnico. El segundo paso paraobtener un cultivo axnico es
inocular o introducir, una sola clula de un microorganismo en un medio slido o liquido,
esterilizado previamente. De esta manera, aislamos un solo microorganismo del resto y se
podrmultiplicar en condiciones favorables. Un clon est constituido por una poblacin de
clulas descendientes de unsolo microorganismo. Una colonia es un clon lo suficientemente
grande como para ser visible sobre la superficiede un medio slido.Un cultivo microbiano que
ha estado creciendo por cierto tiempo en el mismo tubo o matraz, debe ser transferidoa un
medio de cultivo nuevo, de otra manera el crecimiento y sobrevivencia no pueden continuar. En
estatransferencia se deben considerar dos aspectos bsicos referentes a: no introducir
microorganismos indeseables(contaminantes) y concentracin o carga microbiana de la muestra
(inculo) a sembrar.
Dispositivos empleados en la transferencia de muestras microbianas:
Los utensilios utilizados para la transferencia de muestras son los siguientes:
Hisopo, pipeta (para uso microbiolgico sonterminales y la parte superior o boquilla debe estar
protegida con filtro de algodn), pipeta pasteur, cable de Kolle o portasa con alambre de platino
dispuesto en forma de: aguja, asa, esptula y/o gancho.
En la transferencia de microorganismos se emplean agujas, asas de inoculacin, hisopos,
pipetas o pipetaspasteur que debern esterilizarse previamente. La utilizacin de estos
dispositivos, as como de los diferentes medios de cultivo tienen aplicaciones especficas. Por
ejemplo:
Los medios lquidos se preparan en tubos o matraces que se cubren con tapones de algodn o
tapones especiales. Un cultivo lquido puede ser transferido mediante un asa microbiolgica, un
hisopo, pipeta o pipeta pasteur; el inculo se deposita dentro del caldo o medio lquido. En este
tipo de cultivos los microorganismos presentan un desarrollo particular que se manifiesta en la
superficie o a travs de todo el lquido. Una de las ventajas que presenta este tipo de cultivo se
refiere a laposibilidad de agitarlos acelerando la velocidad de microorganismos anaerobios, por
otra parte, en este tipo de cultivos, las poblaciones se encuentran suspendidas y e fcil
homogenizarlas, lo que permite estandarizar laconcentracin del inculo. La desventaja que
presentan, es que en ellos e difcil detectar contaminacin a simple vista.
Los medios semislidos se preparan en tubos, se inoculan con aguja de siembra (asa recta) o
pipeta pasteur; en este ltimo caso es necesario calentar el medio y cuando se encuentra en
estado lquido y a una temperatura de aproximadamente 42C se agrega el inculo, se
homogeniza y se deja solidificar. Estos medios se emplean para estudiar la movilidad de los
microorganismos y para favorecer la separacin de microorganismos con diferentes
requerimientos de oxgeno.
Los medios slidos se preparan en tubos o matraces dependiendo de la cantidad o de las
necesidades, despusde esterilizarlos, estos se inclinan o vierten en cajas de petri. La siembra se
realiza con el asa, inoculando lasuperficie del agar con mucha suavidad; en estos medios, los
microorganismos al multiplicarse forman agregados que se hacen visibles a simple vista; a
estos agregados se les denominan colonias, las que presentancaractersticas que varan con el
tipo de microorganismo cultivado y el medio de cultivo empleado. En cualquier medio de
cultivo es de primordial importancia ajustar el pH, ya que an cuando la mayora de
losmicroorganismos crecen mejor en pH neutro, algunos requieren de pH alcalino o cido, por
lo que al proporcionar un pH adecuado se favorecer el crecimiento del microorganismo de
inters y la obtencin del cultivo. Con este mismo propsito durante la incubacin se deben
proporcionar las condiciones adecuadas para el microorganismoen estudio. El crecimiento
ptimo de los microorganismos se presenta a temperaturas que la mayora de las veces estn
relacionadas con la de su hbitat natural. Algunos microorganismos crecen por debajo de 15C,
otros requieren temperaturas ms elevadas (30 a 45C) y algunos hasta 80C. Para alcanzar y
mantener estas temperaturas se puede usar una incubadora microbiolgica o un bao de agua a
temperatura constante, en tanto que para lo microorganismos que presentan su
crecimientoptimo a temperaturas entre 20 y 25C se pueden incubar en la gaveta o cajn del
laboratorio, a temperaturaambiente. En general las incubadoras microbiolgicas satisfacen las
necesidades en cuanto a los rangos de temperatura requeridas por los microorganismos. La
desventaja que tienen es que estos aparatos funcionan con are seco, lo que determina la
deshidratacin de los medios de cultivo. Por lo tanto, el crecimiento de cualquier cultivo
experimental que se realice en incubadora no debe prolongare por ms de nueve das.
Con relacin a las necesidades gaseosas, no todos los microorganismo crecen en presencia de
oxgeno atmosfrico; los que slo crecen en presencia de are se llamanaerobios obligados; los
que slo crecen en ausencia de oxgeno sedenominananaerobios obligados o estrictos, un
tercer grupo se adapta a las dos condiciones y se le conocecomo facultativos. Existe una cuarta
categora que comprende bacterias que requieren oxgeno, pero slo loutilizan cuando ste
existe en concentraciones reducidas; a estos se les llama microaeroflicos.
El desarrollo de estos diferentes grupos se favorece mediante la agitacin de los cultivos o
mediante la exclusin de oxgeno para lo que se emplean sustancias reductoras o
equipos especiales.Las bacterias son organismos procariticos, se encuentran ampliamente
distribuidas en la naturaleza, habitan enel agua, el suelo, en la superficie o en el interior de
plantas y animales incluyendo al hombre. Pueden vivir en forma libre o en simbiosis con otros
organismos, ya sea como parsitos, comensales o mutualistas.Fisiolgicamente este grupo
presenta caractersticas muy variables, hay bacterias mviles e inmvilesfotosintticas y
quimiotrficas, auttrofas y hetertrofas; se desarrollan en un rango muy amplio de
temperatura, pH y condiciones gaseosas. En el estudio de cultivos bacterianos algunos de los
criterios que se emplean para caracterizarlas incluyen: tamao, morfologa celular, forma de
agrupacin, reaccin a la tincin de Gram, formacin de esporas, movilidad, presencia de
inclusiones de reserva y caractersticas culturales en medios lquidos y slidos en los que
presentan patrones de desarrollo en cuanto a la forma, tamao, elevacin y color de las
colonias.
Tcnicas de siembra
Mtodo de siembra por estra en placa
Es el mtodo ms fcil y el ms usado para obtener cultivos axnicos. Para ello, con un asa de
siembra se tomauna muestra de la poblacin mixta y a continuacin se hacen estras sobre la
superficie de un medio slidopreparado en una placa Petri (a las placas Petri tambin se les
denomina simplemente placas). Conforme se van haciendo estras en zigzag con el asa, cada
vez se van depositando en la superficie del medio menosmicroorganismos. A continuacin, se
flamea el asa, se toca en la regin donde se han realizado las ltimasestras y se contina la
siembra con la misma tcnica, en la superficie de medio sin sembrar an. Repitiendo
esteproceso varias veces se logra separar clulas individuales. A continuacin, las placas se
incuban en un lugar adecuado, permitiendo que las clulas aisladas experimenten un nmero
suficiente de divisiones para formar colonias visibles. Aunque cada colonia posiblemente
representa un clon derivado de una sola clula, no podemos asegurarlo. Quizs, dos clulas
quedaron depositadas tan juntas que han originado una nica colonia mixta. Por tanto, para
asegurarnos de que hemos obtenido un cultivo axnico, conviene repetir el procedimiento a
partir deuna colonia bien aislada en la primera placa. Las colonias que se desarrollen la segunda
vez, sern, casi con todaseguridad, cultivos axnicos.
Mtodos de vertido en placa y extensin en placa
En estos mtodos, las suspensiones de clulas microbianas se diluyen antes de su siembra en
placa. Se siguenestas tcnicas cuando la muestra contiene tantos microorganismos, que la
dilucin no se puede realizar en una sola etapa. Por ejemplo, una suspensin con mil millones
de clulas por mililitro debe ser diluida 10
veces paraobtener una suspensin con un centenar de clulas por mililitro, Por tanto, se realizan
diluciones seriadas (envarias etapas), normalmente de diez en diez, pero a veces de cien en
cien.
Para realizar diluciones de diez endiez, se aade 1 ml de la suspensin bacteriana a 9 ml (de
medio estril o solucin salina, igualmente estril. Se agita vigorosamente para diluir las clulas
y el proceso se repite cuantas veces sea necesario. A continuacin, sepuede proceder de dos
maneras diferentes.
En el mtodo de vertido en placa, las muestras diluidas se mezclan con agar fundido y se
vierten en placa. Algunas colonias quedarn embebidas en el agar y otras crecern en la
superficie. Las colonias superficiales se extendern y sern ms grandes.
En el segundo mtodo (extensin en placa), las muestras diluidas se siembrandirectamente en
la superficie de la placa de agar, extendindolas con avuda de un asa de Diralsky de cristal
estril. La suspensin se absorbe en el agar, dejando las clulas microbianas sobre la superficie.
En ambas tcnicas las placas se incuban hasta la aparicin de las colonias. Como en el mtodo
de siembra por estra, no existe la seguridad de que las colonias que aparecen en las placas
sembradas por extensin o en el agar solidificado sembrado por el mtodo del vertido en placas
sean cultivos axnicos hasta que se repita el proceso. Las dos tcnicas de siembra por dilucin
presentan la ventaja de que permiten obtener un mayor nmero decolonias aisladas que el
mtodo de siembra por estra, por tanto se eligen cuando se ha de seleccionar una cepa a partir
de una mezcla con varios tipos de microorganismos. Para obtener un cultivo axnico mediante
este mtodo:
(a) Hacer diluciones seriadas de la suspensin bacteriana hasta obtener una muestra con slo
unos pocoscientos de bacterias-
(b) verter la muestra en un tubo con agar a sobrefusin, mezclar y verter el contenido en una
placa Petri.
(c) Despus de la incubacin, se desarrollan colonias en el agar (ms pequeas) y en su
superficie (ms grandes).
Mtodo de aislamiento por siembra por estra en placa: Para obtener un cultivo axnico:
(a) esterilizar un asa de siembra por flameado en la llama de un mechero.
(b) introducirla en la suspensin bacteriana para recoger una muestra.
(c) sembrar haciendo estras sobre la superficie de un medio slido en una placa Petri, y
(d) volver a esterilizar el asa, tocar en la zona de la placa ya sembrada y hacer un segundo
grupo de estras enuna regin nueva de la placa. Repetir el proceso una tercera y una cuarta vez,
hasta conseguir que los grupos de clulas se diluyan y se separen clulas aisladas.
(e) Despus de la incubacin, se desarrollan colonias aisladas. Para estar seguro de que el
cultivo es puro, repetir el proceso entero; para ello tomar una colonia aislada y sembrar por
estras una segunda placa.

3.2.4 El crecimiento de los cultivos axnicos
Una vez que se obtiene un cultivo puro, normalmente se ha de propagar (se le hace crecer de
nuevo). Seguramente, el investigador desear obtener ms clulas para poder trabajar con ellas.
Para cultivar microorganismos en el laboratorio, se ha de preparar un medio de cultivo, lquido
o slido, con todos los nutrientes necesarios para su crecimiento. Los medios slidos se hacen
generalmente, aadiendo agar a los lquidos (
LA IMPORTANCIA DE SER CULTIVO PURO
Todos los microbilogos saben que han de trabajar con cultivos axnicos (puros) para que sus
experimentos sean significativos. Pero incluso los microbilogos ms experimentados han
cometido errores alguna vez. Esto le sucedi a Ralph Wolfe, uno de los microbilogos
americanos ms distinguidos.
En 1960 Wolfe obtuvo un cultivo puro de la bacteria Methanobacillus omelianskii. Este
microorganismo es anaerobio estricto, capaz de producir metano (gas natural). Wolfe quera
conocer de qu manera M. omelianski produca gas metano a partir de etanol y anhdrido
carbnico. El procedimiento estaba claro; tena que lisar la bacteria y aislar las enzimas que
catalizan la reaccin, en un tubo de ensayo. Esto, aunque suena bastante simple, haba sido
intentado previamente por otros investigadores y todos haban fracasado. Wolfe lo intent
durante todo un ao y tampoco tuvo xito. De repente lo consigui: una solucin de enzima.
sintetizaba metano en un tubo de ensayo! Se trataba de un descubrimiento espectacular, hasta
que un colega se pregunt si el cultivo era axnico.
Wolfe decidi volver a aislar el culfivo, pero en vez de aadir etanol yanhdrido carbnico al
mismo, aadi hidrgeno y anhdrido carbnico. En el nuevo medio se desarrollaron colonias,
pero cuando se transfirieron al medio con etanol y anhdrido carbnico no crecieron.
¿Qu haba sucedido? Un colega, M.J. Wolin, se dio cuenta de lo que estaba
sucediendo. Aunque M. omelianskii originaba colonias uniformes y aisladas en el medio
original, se trataba de una mezcla de dos bacterias. Una, designada cepa S, converta el etanol
en hidrgeno gas. La otra, designada cepa M, converta el hidrgeno gas y el anhdrido
carbnico en metano. Ninguna de las dos poda crecer sola con etanol y anhdrido carbnico.
Todos los experimentos de Wolfe se haban realizado con un cultivo mixto y tuvieron que
repetirse para averiguar qu enzimas pertenecan a la cepa S y cules a la cepa M.
Qu leccin puede aprenderse de la historia de Wolfe? Primero, que los problemas tcnicos
(tales como obtener un cultivo axnico), aunque son tan bsicos que se explican en los textos
introductorios, son reales e importunan a los ms prestigiosos investigadores. Segundo, que
incluso un buen microbilogo puede equivocarse. Algunas especies pueden crecer juntas (para
formar un consorcio) y parecer un cultivo axnico cuando realmente no lo son.
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2 PENSAMIENTOS EN TECNICAS Y METODOS DE AISLAMIENTO Y SELECCIN DE MICROORGANISMOS
1. Silvia Martnez Hernndez 510 en septiembre 28, 2012 en 2:01 am dijo:
El vdeo nos habla acerca de la inoculacin de los medios lquidos & la siembra de medios
slidos, & nos hace mencin de que los inoculos pueden provenir de medios biolgicos o
muestras.
Nos hace referencia en cuanto a los materiales para sembrar as como la limpieza &
esterilizacin de los mismos, ya que nuestro cultivo no debe contaminarse de ser as no sirve.
Los materiales que se pueden utilizar para sembrar son el asa bacteriolgica, el hilo & la
esptula, nos va diciendo paso a paso lo que debemos hacer en cada tipo de cultivo, tambin
nos hace referencia que en los medios de cultivo o muestras que se tienen en los tubos de
ensayo al quitar el algodn no debemos poner est en la mesa de trabajo si no que se debe de
tener en mano. De igual forma nos dice que debemos marcar el material que utilicemos para
evitar confusiones, que es lo que el profesor siempre nos hace referencia en las prcticas.
Nos hace mencin de los tipos de estras que se llevan acabo la primera es la que conocemos
normalmente, estra cruzada, la segunda es por cuadrante que se marca la caja petri con 4 lneas
perpendiculares & se siembra de arriba abajo sin salir del cuadrante marcado, & tenemos las
estras de 45 que son estras paralelas.
Debemos darnos cuenta que sea cual sea el tipo de siembra el asa siempre se debe flamear, por
ltimo nos hablan de una siembra con una esptula que se esteriliza con etanol & fuego & se
comienza a extender el cultivo.
De forma personal a mi este vdeo me sirvi para mejorar en la hora de la prctica & evitar
contaminaciones en mi cultivo mtodos estndar.
Responder
2. Canales tamara en enero 10, 2014 en 12:42 am dijo:
Profe buenas tardes gracias por la informacin me es de mucho uso
Responder
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Identificacin bacteriana

Este artculo o seccin necesita referencias que aparezcan en una publicacin
acreditada, como revistas especializadas, monografas, prensa diaria o
pginas de Internet fidedignas. Este aviso fue puesto el 9 de septiembre de
2010.
Puedes aadirlas o avisar al autor principal del artculo en su pgina de discusin
pegando: {{subst:Aviso referencias|Identificacin
bacteriana}} ~~~~
Identificacin bacteriana es el ejercicio prctico en el que se ejercen las pruebas de
identificacin bacteriana. En la medicina general es comn que llegue un paciente con
sntomas de alguna infeccin bacteriana, el determinar un diagnstico y poder interpretar qu
bacteria caus la molestia al paciente es aventurado, pues hay muchas bacterias que causan
las mismas enfermedades, por eso es conveniente realizar pruebas de identificacion, que son
sumamente importantes para un buen diagnstico de cualquier patologa.
Cada gnero, inclusive especie, tiene diferentes reacciones cuando se les enfrentan diferentes
reactivos, esto se hace a partir de un cultivo puro, ya la bacteria aislada, con estas pruebas
podremos decir casi con exactitud de que gnero y qu especies que esta bacteria. A estas
pruebas se les ha llamado como primarias, secundarias y Complementarias.
1. Pruebas Primarias[editar]
Para la identificacin de las bacterias en el laboratorio es importante conocer sus
caractersticas morfolgicas, la reaccin a la tincin de Gram, agrupacin, propiedades,
morfologa colonial, reacciones metablicas como produccin de enzimas y reacciones de
xido-fermentacin.
La identificacin bacteriana primaria se basa en los siguientes puntos:
Tincin de Gram: Revela la forma de la bacteria, agrupacin y grupo taxonmico al que
pertenece: Gram positivo o Gram negativo.
Tincin de Ziehl Neelsen: Las bacterias Alcohol-cido resistentes (BAAR), son difciles
de cultivar, tal vez y en un agar sangre muestre algo de crecimiento, por eso es til esta
tincin de identificacin primaria.
Tincin de esporas: La espora es un mecanismo de defensa generalmente de los
gneros Bacillus y Clostridium.
Prueba de catalasa: La catalasa es una enzima que descompone al perxido de
hidrgeno en oxgeno y agua, esta enzima es similar a la estructura de la hemoglobina.
Excluyendo al gnero Streptococcus y algunos otros la mayora de las bacterias aerobias
y anaerobias facultativas tienen catalasa.
La base de esta prueba es demostrar la presencia de la enzima catalasa, colocando 2 o 3
gotas al cultivo.
El resultado es positivo si en la colonia hay efervescencia. Ejemplos:
Catalasa (+): Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas
sp.
Catalasa (-): Streptococcus spp.
Prueba de oxidasa: Bsicamente es la deteccin de la enzima oxidasa, muy til en la
identificacin de bacterias Gram (-). La reaccin de la oxidasa se debe a la presencia del
sistema de citocromo-oxidasa, la cual activa citocromos reducidos por oxgeno molecular,
por la transferencia de un aceptor al estado terminal del sistema de transferencia de
electrones.
El sistema de citocromos est generalmente presente en organismos aerbicos. Un resultado
positivo a la oxidasa consiste en una serie de reacciones en las cuales un componente auto-
oxidable del sistema de citocromo es al final catalizado. Utilizando un tubo capilar con
tetrametil-p-phenylendiamina al 1%, se adiciona una pequea cantidad a un cultivo bacteriano
colocado sobre un papel filtro y obtenemos las siguientes reacciones: una reaccin positiva
(presencia de oxidasa) se indica por la apariencia de un color prpura obscuro en el papel, en
menos de 10 segundos; al contrario una reaccin negativa, que consiste en una ausencia de
color prpura, indica segn los ejemplos:
Oxidasa (+): Pasteurella multocida
Oxidasa (-): Escherichia coli
cido de la Glucosa: La mayora de las bacterias de inters mdico usan la glucosa
como fuente de carbono, como parte importante de su metabolismo. Se determina si la
bacteria usa la glucosa produciendo cido y/o gas a partir de dicho carbohidrato. En un
tubo con agua peptonada al 1% tapado, y un tubo de Durham, se inocula la bacteria por
agitacin teniendo cuidado de no mover el tubo de Durham e incubndolo 24 horas y 37C
se obtienen los siguientes resultados.
Si la bacteria usa la glucosa producir cido y/o gas, por lo tanto el agua peptonada se
observar rosa, si produce gas, se observar una burbuja en el tubo de Durham. Ejemplos:
cido y gas a partir de la glucosa: Escherichia coli
Negativo a produccin de gas: Proteus stuartii.
Prueba de O/F: para realizar esta prueba se usa el medio bsico de Hugh y Leisfon con
un pH de 7.1. Es un medio semislido de color verde que se inocula por picadura,
contiene carbohidratos como: glucosa, lactosa, sacarosa o maltosa al 10%. Como
indicador de pH tiene Azul de bromotimol. Se usa en dos tubos, uno sin aceite y otro con
acetie o vaselina sellndolo. Se inoculan los dos tubos con la bacteria por picadura y se
mantiene a 37C por 24 horas, obtenindose:
TUBO ABIERTO TUBO SELLADO INTEPRETACIN
Amarillo Verde Oxidacin (aerobio)
Amarillo (anaerobio facultativo) Amarillo Fermentacin
Verde (anaerobio estricto) Amarillo Fermentacin
Verde Verde Negativo (NH
3
)
Prueba de Motilidad: Llamada tambin de la gota suspendida. Algunas bacterias son
mviles por presentar flagelo, los flagelos son encontrados principalmente en las formas
bacilares y pueden presentarse en nmero y posicin variados(monotricos, peritricos,
etc.). La base de esta prueba es determinar si la bacteria es mvil o inmvil. Con un asa
de inoculacin se le coloca a un cubreobjetos un poco de muestra y se le agrega una gota
de agua destilada. Se coloca sobre un portaobjetos y se observa al microscopio.
Podremos observar si las bacterias tienen movimientos rectilneos o curvos y en todas
direcciones. Ejemplos:
Motilidad (+): como en Pseudomonas auruginosa.
Motilidad (-): como en Pasteurella multocida.
2. Pruebas Secundarias.[editar]
La identificacin se fundamenta en la comparacin del microganismo que deseamos identificar
con los microorganismos de identidad conocida. La exactitud de la identificacin depende de
la eficacia del trabajo preparatorio as como su grado. Estas pruebas se clasifican de la
siguiente manera:
Simples: Citrato, Malonato, MR-VP, Nitrato y Leche Tornasol.
Mltiples: TSI, LIA y SIM.
Especiales: Coagulasa, Hialuronidasa y Acriflavina.


IDENTIFICACIN DE UNA CEPA BACTERIANA


Existen diferentes sistemas de clasificacin de bacterias, pero el ms comnmente
utilizado es el Bergey's Manual of Determinative Bacteriology.
La identificacin de una bacteria es su asignacin a un taxn segn una clasificacin
dada. Consiste en la determinacin de las caractersticas fenotpicas y/o genotpicas y
la comparacin de estas caractersticas con los diferentes taxones de la clasificacin
considerada. Las caractersticas a determinar y su nmero depende principalmente
del tipo de bacteria y del fin que se persigue en la identificacin.
A continuacin se propone un esquema de trabajo para la identificacin de una cepa
bacteriana desde el punto de vista bioqumico (Biotipo):
1) Obtener un cultivo puro
2) Examen microscpico de clulas vivas y de frotis teido por coloracin Gram. Se
determina as la forma y el Gram del microorganismo en estudio. Tambin es
importante determinar la agrupacin y la presencia de esporas y otras caractersticas
morfolgicas de inters.
3) Determinar las caractersticas nutricionales (en general se desprenden de los
mtodos empleados en el aislamiento y cultivo anteriores); fotoauttrofos,
fotohetertrofos, quimioauttrofos, quimiohetertrofos.
4) Realizacin de pruebas primarias: En la siguiente tabla, modificada del Cowan &
Steel's Manual of Identification of medical bacteria, se utilizan un grupo de pruebas,
denominadas pruebas primarias, con las cuales se puede determinar el gnero, grupo
de gneros o en algn caso familia a la que pertenece un aislamiento. Las pruebas
primarias son: Gram, morfologa, catalasa, oxidasa, OF, fermentacin de glucosa,
esporas, crecimiento en aerobiosis y anaerobiosisy movilidad.
5) Realizacin de pruebas secundarias y terciarias a efectos de llegar a especie. Estas
dependern del gnero o familia determinado. (ej: produccin de pigmentos,
produccin deindol a partir de triptofano, produccin de coagulasa, de fenilalanina
deaminasa, etc.)
Serotipo
A los efectos de realizar identificaciones ms rpidas, o cuando las pruebas
bioqumicas no son concluyentes, se recurre al uso de antisueros especficos.
Los antgenos bacterianos pueden ser capsulares, somticos (O) que corresponden al
lipopolisacrido de la pared de los Gram negativos, flagelares (H), y los antisueros se
identifican con esas letras y el nmero o letra del antgeno correspondiente.
En una primera identificacin se usan sueros polivalentes y para la caracterizacin
serolgica se usan sueros monovalentes dentro de cada tipo de antgeno.
Existen en el comercio antisueros para caracterizacin de: Salmonella, Shigella,
E.coli, Haemophilus, etc.
Tambin se pueden utilizar mtodos de cromatografa gaseosa para identificar
productos metablicos, en particular para la identificacin de bacterias anaerobias no
esporuladas como: Bacteroides, Fusobacterium, etc.

Se puede expresar el nombre de una cepa de la siguiente manera:

Yersinia entercoltica 4 03
gnero especie biotipo serotipo

ENSAYOS BIOQUIMICOS
La identificacin de un aislamiento bacteriano puede realizarse utilizando diferentes
combinaciones de caractersticas y diferentes criterios en la evaluacin de similitudes.
Los ensayos bioqumicos tradicionalmente utilizados, llamadas pruebas bioqumicas
convencionales, generalmente determinan la actividad de una va metablica
(conjunto de reacciones qumicas) a partir de un sustrato que se incorpora en un
medio de cultivo y que la bacteria al crecer transforma o no.
Existen diferentes sistemas que facilitan la realizacin de tales ensayos, porque
proponen el mejor conjunto de pruebas bioqumicas para la identificacin de un
grupo bacteriano, porque simplifican la interpretacin de un resultado utilizando un
valor numrico, porque proveen los reactivos listos para su uso o porque son
totalmente automatizables.
Las pruebas o ensayos bioqumicos, son pruebas simples que se han desarrollado
para demostrar en forma clara una determinada caracterstica bioqumica como
presencia o ausencia de una determinada actividad enzimtica, grupo de enzimas o
determinada va metablica, crecimiento a una determinada temperatura, crecimiento
en presencia de inhibidores, etc. No significan de ninguna manera un estudio
profundo del metabolismo bacteriano.
Para llevarlas a cabo, se pueden utilizar diferentes sistemas de trabajo (medio de
cultivo, indicador, revelador, etc.) que puede ser diferente an para el mismo ensayo
si se trata de diferentes microorganismos. Por ejemplo se debe suplir con factores de
crecimiento el medio de cultivo para estudiar la fermentacin de distintos azcares
cuando se sabe que el microorganismo en estudio es exigente.
A la determinacin de la especie se puede llegar segn diversos sistemas (manuales de
identificacin, comerciales, etc.).
a) Los comerciales utilizan modificaciones de las pruebas bioqumicas
convencionales, ya sea sustratos deshidratados, tiras de papel de filtro impregnadas en
reactivos o pequeos compartimentos con medios listos para sembrar. En todos los
casos se emplean cdigos numricos para la interpretacin de resultados.
Los sistemas comerciales ms comnmente usados son :
* BBL, ENTEROTUBE II (Becton Dickinson). Es un sistema para usar en la
identificacin de Enterobacterias, definida como bastones Gram -, aerobios o
anaerobios facultativos, oxidasa (-). Consiste en un tubo de plstico con 12 medios de
cultivo contenidos en compartimentos individuales que se inoculan simultneamente
en una etapa y permiten la deteccin de 15 caractersticas bioqumicas.
* OXI/FERM TUBE II, (Becton Dickinson). Es un sistema listo para usar para la
identificacin de bastones gram (-), aerobios o anaerobios facultativos, oxidasa (+).
Consiste en un tubo de plstico de 12 medios de cultivo que permite la realizacin
simultnea de 14 pruebas bioqumicas.
* API 20 E. Es un sistema estandarizado para la identificacin de Bacterias Gram -.
Consiste en una plantilla con microtubos conteniendo medios de cultivo deshidratados
que se reconstituyen al agregar una suspensin bacteriana. Permite la realizacin de
23 pruebas bioqumicas a partir de una nica colonia bacteriana.

Otros sistemas:
Quintet 3H de Diagnostics Pasteur para Enterobacterias.
API 10S, versin miniaturizada del API 20 E
API Listeria
API NH (Neisseria - Haemophilus)
Existen tambin sistemas de identificacin comerciales para levaduras:
API 20 C (Para levaduras del gnero Candida)
Auxacolor de Diagnostics Pasteur
Fongiscreen 4H de Diagnostics Pasteur (Para identificacin de levaduras de inters
mdico)
b) En la Ctedra se desarroll un sistema para la identificacin de Enterobacterias
que consta de nueve pruebas bioqumicas convencionales (SYS 9E). Este sistema
identifica las 23 especies ms frecuentemente aisladas de muestras clnicas. Est
integrado por las siguientes pruebas: produccin de H2S en agar triple azcar hierro
(TSI), fenilialanina deaminasa, produccin de indol, descarboxilacin de lisina,
descarboxilacin de ornitina, crecimiento en citrato, fermentacin de arabinosa,
fermentacin de sorbitol y produccin de acetona (VP).
En esquema, la realizacin de una prueba bioqumica implica:
1) Cultivar el microorganismo en un medio que contiene un determinado sustrato o
inhibidor y luego de la incubacin visualizar el crecimiento y la degradacin de un
sustrato, ya sea por viraje de un indicador o por agregado de un reactivo revelador de
la presencia del sustrato, o de algn producto de su degradacin.
2) Cultivar el microorganismo en un medio de propagacin que contenga el sustrato
de una enzima inducible y luego de la incubacin demostrar la actividad enzimtica.
En todos los casos se debe tener un cultivo fresco (18-24 hrs. de incubacin) en un
medio en que el microorganismo se desarrolla en forma ptima, a pH, fuerza inica,
atmsfera y temperatura adecuados.
Siempre que se prepara un nuevo lote de medio de cultivo para una prueba, deben
llevarse a cabo los correspondientes controles de calidad, sembrando en dicho medio
una cepa positiva y otra negativa para ese test.
Si bien existen una gran variedad de pruebas bioqumicas empleadas con fines de
identificacin, se enumerarn a continuacin solo las que se utilizan ms
frecuentemente, agrupadas segn el tipo de ensayo y se denominan segn su nombre
corriente.

1) Enzimas vinculadas con la respiracin
a) oxidasa
b) catalasa
2) Descomposicin de azcares simples, cidos orgnicos y otros
2.1) Requerimientos de oxgeno
OF (xido-fermentacin)
Crecimiento en caldo tioglicolato
2.2) Produccin de cido, o cido y gas
Fermentacin de carbohidratos
2.3) Deteccin de enzimas y vas metablicas
a) RM-VP (rojo de metilo - Voges Proskauer)
b) Gluconato
c) O.N.P.G. (orto nitro -D-galactopiransico)
d) Esculina
e) Hipurato
3) Fuente nica de carbono
a) citrato
b) malonato
c) hipurato para coliformes
4) Utilizacin de compuestos nitrogenados
4.1) Reduccin de nitrato
a) asimilacin
b) denitrificacin
4.2) Descomposicin de carbohidratos aminocidos y otros
a) indol
b) H
2
S
c) Fenilalanina
d) Lisina, arginina, ornitina
e) Urea
5) Ensayos combinados
a) TSI (Triple Azcar Hierro)
b) LIA (Agar Hierro Lisina)
c) Bilis esculina
6) Deteccin de exoenzimas
a) lecitinasa
b) proteasas, coagulasa
c) amilasas
d) celulasas
e) desoxirribonucleasas
f) accin de microorganismos sobre la sangre (hemolisinas)
7) Miscelneos
a) KCN
b) Bilis
c) produccin de pigmentos
8) Test de crecimiento o inhibicin
a) Temperatura
b) NaCl
c) Antibiticos

TABLA MODIFICADA DE COWANS & STEEL PARA IDENTIFICACION DE BATERIAS
HETERTROFAS

tincin gram
(cultivo
fresco)
+ + + + + + + +
forma coco coco coco coco
bast
n
bast
n
bast
n
bast
n
bast
n
bast
n
bast
n
bast
n
coc
o
agrupacin
racim
os
racim
os
caden
as
tetrad
as

par
es
crecimiento
aerobio
+ + + + + + + + + + + +
crecimiento
anaerobio
+ + + + + + + +
esporas + + +
movilidad + o + o + o + o
+
o
+ o - +
catalase + + + + + + + + +
oxidase + + + +
fermentacin
de
glucosa a
acido
o a
acido+gas
+ + + +
+ (o
)
+ + +
O/F O F F O
Micrococcus X
Staphylococc
us
X
Streptococcu
s
X
Lactococcus X
Enterococcus X
Leuconostoc X
Pediococcus X X
Aerococcus X
Lactobacillus X
Clostridium X
Bacillus X X
Alcaligenes X
Pseudomona
s
X
Enterobacter
ias
X
Aeromonas X
Chromobacte
rium
X
Neisseria X

Bibliografa:
http://bilbo.edu.uy/~microbio/identific02.html

Pruebas bioqumicas primarias.
Publicado en 27 septiembre, 2011de MicrobitosBlog






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Las pruebas bioqumicas primarias son usadas para determinar el gnero de la
mayoria de las bacterias.
1. Tincin de GRAM.
2. Prueba de catalasa.
3. Prueba de oxidasa.
4. Prueba de oxidacin/fermentacin conocida como OF.
5. Motilidad.
Nota: Para identificar el gnero de las Enterobacterias se usan otras pruebas
bioquimicas llamadas IMVIC que se compone de cuatro pruebas: Indol, Rojo
de Metilo, Voges-Proskauer y Citrato.
Tincin de GRAM.
Fue creada en 1884 por el mdico danes Hans Christian Gram, Esta tincin nos
permite separar a la mayora de las bacterias en dos grupos las gram positivas que
se tien de color violeta y las gram negativas que se tie de color rosa. La diferencia
en la tincin radica en las estructuras de la pared celular de las bacterias.
Pared celular de las bacterias Gram positivas.

Se observa la capa gruesa de peptidoglicano y la ausencia de lipopolisacaridos.Pared celular de las
bacterias Gram negativas.

Se puede observar el entrecruzamiento de los cidos teicoicos.

Pared celular de bacterias Gram negativas.

Se observa el lipopolisacarido, y la poca cantidad de peptidoglicano.

Se observa bajo con tenido de pptido glicano y alto contenido de lipidos en forma de lipopolisacaridos.

Reactivos usados en la tincin de Gram.
Agua estril para realizar el frotis.
Cristal violeta tambin conocido como violeta de genciana.
Safranina.
Una mezcla de alcohol-acetona 1:1.
Agua corriente para enjuagar.
Tcnica de la tincin de Gram.
De preferencia la tincin debe ser realizada sobre un recipiente para que los
desechos sean desechados adecuadamente.
Frotis bacteriano.
Con la ayuda de un mechero, flamear un asa bacteriolgica hasta el rojo vivo y
esperar a que enfre un poco.
Tomar con el asa una gota de agua estril y agregarla en un portaobjetos.
Flamear nuevamente el asa y esperar a que enfre.
Tomar con el asa un poco de muestra bacteriana a partir de una colonia aislada.
Despus agregar la muestra en la gota de agua que esta en el portaobjetos y
homogeneizar suavemente con movimientos circulares.
Esperar que seque al aire libre o poner durante uno o dos segundos con la llama
de un mechero para fijar la muestra, teniendo en cuenta que el calor no debe ser
directo (slo se pasa por la llama), puesto que el calor excesivo puede cambiar la
morfologa celular de las bacterias a observar.
Tincin.
1Agregar cristal violeta, solo el suficiente para que se cubra el extendido
bacteriano.
dejar actuar durante 60 segundos.
2Agregar el lugol, solo el suficiente, dejar actuar durante 60 segundos.
3Enjuagar con agua corriente.
4Agregar una o dos gotas de alcohol-acetona e inmediatamente enjuagar con agua
corriente.
5Agrgar Safranina, solo la suficiente, Dejar actuar durante 60 segundos.
6Enjuagar con agua corriente.
7Dejar secar a temperatura ambiente.
8Observar en un microscopio ptico con un objetivo 100X usando aceite de
inmersin.

Resumen de los pasos de la tincin de Gram.

Bacilos Gram positivos

Bacilos Gram negativos

Fundamento de la tincin de Gram.
**Los lavados con agua tienen el objetivo de arrastrar mecnicamente el exceso de
colorante y quitar el alcohol-acetona.
**El colorante cristal violeta es de naturaleza bsica y por lo tanto tiene afinidad
por sustancias cargadas negativamente como la pared celular de
cualquier bacteria.por lo que bacterias Gram positivas y Gram negativas son
teidas de color violeta.
**Un mordiente es una sustancia que aumenta la fijacin de algn colorante sobre
una superficie determinada, en este caso el cristal violeta aumenta su fijacin a la
pared clular bacteriana usando de mordiente al lugol, en la pared bacteriana el
lugol forma un complejo con el cristal violeta insoluble en agua lo que evita que se
disuelva y se pierda el colorante durante el enjuague.Ya sabemos que la pared de
los Gram positivos son ricos en cidos teicoicos no saturados estos muestran gran
afinidad por los agentes oxidantes, todos los mordientes por ejemplo el lugol son
agentes oxidantes y su efecto en general consiste en dar un caracter mas cidez de
los cidos teicoicos lo que aumenta la afinidad de estos por el colorante bsico
cristal violeta.
**La mezcla de alcohol-acetona es un disolvente orgnico que decolora la pared
bacteriana disolviendo el complejo cristal violeta-lugol, esta decoloracin no afecta
a las bacterias Gram positivas, hay varias explicaciones al respecto, les menciono
las dos ms aceptadas.
-Una teora dice: El alcohol-acetona, deshidrata la pared rica en peptidoglicano de
los microorganismos grampositivos lo cual cierra los poros de la pared, propiciando
una barrera que no permite la salida del complejo cristal violeta-lugol. En la pared
de las bacterias gramnegativas hay poco pptido glicano y una gran cantidad de
lpidos estos ltimos son disueltos por el alcohol-acetona, lo que permite el escape
del complejo cristal violeta-lugol.
-Otra teora dice: Las bacterias Gram positivas tienen una capa muy gruesa de
peptidoglicano con gran cantidad de enlaces entrecruzados de cidos teicoicos los
cuales son poco solubles en alcohol-acetona formando una especie de barrera en la
pared bacteriana que no permite la slida del complejo cristal violeta-lugol por
ende se retiene el cristal violeta-lugol en la pared en el proceso de decoloracin.
**La safranina es un colorante catinico que tie las paredes bacterianas ya que
estas tienen compuestos cargados negativamente, por consiguiente las bacterias
Gram negativas se tien de color rosa, sin embargo las bacterias Gram positivas no
se tien debido a que su pared clular esta saturada del colorante cristal violeta y
esto no permite la entrada de la safranina.
Factores que considerar en la tincin de Gram.
No se debe sobrepasar los tiempos de tincin y decoloracin.
Los cultivos viejos hacen que las bacterias Gram positivas se tian parcial o
totalmente de color rosa.
Hay que tomar en cuenta que el agua usada en el frotis se encuentre en el rango
de Ph 7-7.8 ya que:
Los grampositivos pueden hacerse gramnegativos al aumentar la acidez.
Los gramnegativos pueden hacerse grampositivos al aumentar la alcalinidad.
DAR CLIC AQUI. Realiza la tincin de Gram de forma interactiva,
recuerda realizar correcatamente los pasos. La prueba interactiva pertenece
y se obtuvo del: Virtual Iteractive Bacteriology Laboratory. Michigan State
University.

Prueba de la oxidasa.
Esta prueba esta basada en la identificacin de una enzima bacteriana llamada
citocromoC oxidasa y para reducir el nombre se le dice oxidasa.
Todas las bacterias aerobias obtienen su energa en forma de ATP a partir del
proceso de respiracin tambin llamado cadena respiratoria, este se lleva a cabo en
la membrana celular bacteriana, en las siguientes lineas se dara una breve
explicacin de la cadena respiratoria solo con la finalidad de entender de donde
proviene y que realiza la enzima citocromoC oxidasa, entiendase que todo este
proceso tiene la finalidad de producir ATP. En la respiracin hay una secuencia de
enzimas y transportadores que pasan los electrones desde sus sustratos hasta
llegar al citocromoC, la enzima llamada citocromoC oxidasale quita electrones
al citocromoC, estos electrones son transferidos por la enzima al oxgeno siendo
este el ltimo aceptor de electrones en la cadena respiratoria, finalmente debido a
que el oxgeno tiene un exceso de electrones puede atraer tomos de Hidrgeno
formando dos posibles productos: Agua o perxido de hidrgeno.
Reactivos usados en la prueba de oxidasa.
Se utilizan colorantes cromgenos que actan como aceptadores artificiales de
electrones que sustituyen de cierta manera al oxigeno usado por la bacteria, los
ms usados son:
Tetrametil-p-fenilendiamina.
Dimetil-p-fenilendiamina.
Indofenol.
El reactivo basado en una disolucin acuosa de tetrametil-p-fenilendiamina al 1%,
es el ms comn y recibe el nombre de reactivo de Kovacs. Este reactivo se puede
impregnar en discos o fragmentos de papel filtro grueso. En el comercio ya se
venden tiras o discos impregnados con el reactivo.
Fundamento bsico: El reactivo de Kovacs es incoloro pero al ponerlo en
contacto con la enzima citocromoC oxidasa cambia a un color morado debido a que
el tetrametil-p-fenilendiamina es una amina aromtica y la oxidacin de esta
produce quinolonas de color morado-azulado. Para mayores detalles checa la
bibliogrfia en especial el libro de Mac Fadin.
Como realizar la prueba de la oxidasa.
Se toma con un palillo grueso de madera una muestra bacteriana a partir de una
colonia aislada proveniente de un cultivo de 24h.
La muestra se pone en contacto con la tira o disco impregnado.
Se debe observar una coloracin morada en un lapso no mayor a 30segundos para que
sea positivo, de lo contrario el resultado es negativo.
Control positivo: Pseudomonas aeruginosa. Control negativo: Escherichia
coli.


El color azul-morado en el disco se interpreta como oxidasa positiva.

La carencia de color en el disco se interpreta como oxidasa negativa.

Factores a considrerar en la pueba de oxidasa.
No considerar un resultado positivo despus de 30seg ya que el oxigeno molecular del
ambiente oxida al reactivo.
No usar asa bacteriolgica metlica ya que la mayora de estas con tienen hierro y este
es capaz de oxidar el reactivo dando nos falsos positivos.
No realizar la prueba de bacterias que provienen de colonias obtenidas de medios de
cultivos que contienen glucosa u otro carbohidrato ya que la fermentacin del
carbohidrato inhibe a la oxidasa dando como resultado falsos negativos en la prueba.
Para realizar la prueba usar bacterias provenientes de medios de cultivo como son:
Agar sangre, Agar BHI, agar tripticasa soya, agar nutritivo, agar Mueller Hinton.
DAR CLIC AQUI, Realiza de forma interactiva la prueba de oxidasa. La
prueba interactiva pertenece y se obtuvo del: Virtual Iteractive Bacteriology
Laboratory. Michigan State University.

Prueba de la catalasa.
DAR CLIC AQUI Y realiza la prueba de catalasa de forma
interactiva. La prueba interactiva pertenece y se obtuvo del: Virtual Iteractive
Bacteriology Laboratory. Michigan State University.
Fundamento de la pruebe de catalasa.
El perxido de hidrgeno es el producto final del metabolismo oxidativo de
carbohidratos, a esta va metablica recibe el nombre de metabolismo aerobio-
oxidativo.
La acumulacin del perxido es muy toxico por lo que la mayora de las bacterias
aerobias y anaerobias facultativas exceptuando a Streptococcus sp. producen una
enzima llamada catalasa que degrada el perxido de hidrgeno obteniendo agua y
oxigeno gas.
Tcnica e interpretacin de la prueba.
El reactivo utilizado en la prueba es el perxido de hidrogeno al 30%, Hay
diferentes tcnicas para realizar la prueba la mas comn es poner una gota de
perxido en el portaobjetos y posteriormente con un palillo plano tomar un poco de
bacteria a partir de una colonia aislada, si se observa el burbujeo
generalmente intenso significa que hay produccin de oxgeno por lo
tanto se entiende que hay presencia de la enzima catalasa., hay bacterias
que dan una reaccin positiva debil aunque son las menos.

Reaccin de la catalsa.
Control positivo: Stahylococcus aureus
Control negativo: Streptococcus pyogenes


Burbujeo catalasa positivo, carencia de burbujeo catalasa negativo.

Prueba de oxidacin y fermentacin tambin
conocida como OF.
Las bacterias ocupan diferentes vas metablicas para obtener sus nutrientes y la
energa, casi todas las bacterias consumen algn tipo de carbohidrato generalmente
el mas utilizado por las bacterias es la glucosa, usan la va oxdativa, fermentativa o
ambas.
La va oxidativa utiliza oxgeno, un sinnimo es va aerobia. El metabolismo
fermentativo no utiliza oxigeno, sinnimo metabolismo anaerobio.
Peptona. 2g
NaCl. 5g
D-glucosa. 10g
Azul de bromotimol. 0.03g
Agar. 3g
Fosfato dipotasico. 0.3g
Agua. 1000m
Ingredientes del medio OF.
Ph debe ser 7.1, que dara un color verde en la preparacin.

Fundamento de la prueba bioqumica de OF.
El metabolismo oxdativo de la glucosa produce cidos dbiles, por lo tanto en la
prueba bioqumica se utiliza de indicador el azul de bromotimol que tiene un vire
de ph menor respecto al rojo de fenol, ya que son cidos dbiles se agrega una
mayor cantidad de glucosa hasta el 1%, para que se produzca una mayor cantidad
de cidos y se alcance mas fcilmente el vire del indicador. El metabolismo de las
peptonas produce sustancias alcalinas que podran disminuir el Ph del medio
evitando as evidenciar la presencia de los cidos dbiles producidos por la via
oxidativa, para solucionar esto el medio tiene poca cantidad de peptonas hasta el
2% respecto a la D-glucosa.
Ph de vire del azul de bromotimol: 6-7
cido: Amarillo Alclino: Verde.
En el tubo sin aceite: La produccin de cidos dbiles reducira el ph del medio
esto ser evidenciado gracias al indicador producindose una coloracin amarilla
en todo el tubo, aunque puede variar su intensidad.
En el tubo con aceite: La fermentacin de la glucosa produce cidos fuertes
respecto a los que produce la va oxidativa, ejemplo de estos cidos son el cido
lctico, cido frmico, cido actico, entre otros. El medio se acidifica y el vire del
indicador da como resultado una coloracin amarilla intensa en la totalidad del
tubo.
Tcnica de la prueba.
Se van a usar dos tubos, utilizando un asa recta la cual se flamea en el mechero, se
puede enfriar en agar estril, despus se toma un poco de bacteria a partir de una
colonia aislada posteriormente se inoculan ambos tubos por el mtodo de picadura
y finalmente se preparan las condiciones de los tubos, un tubo se cerrara su tapa de
tal forma que quede floja con la intencin de que entre algo de oxigeno, al segundo
tubo se le agregara 1.5-2ml de aceite mineral estril y la tapa se cerrara
completamente, se incubarn durante 24h.

Inoculacin por picadura.
Interpretacin y lectura de la prueba bioqumica de OF.


Ambos tubos verdes se interpreta como: negativo o no sacarolitico debido a que no consume glucosa.

Interpreatcin de tubos amarillo, amarillo: Fermentador facultativo y se reporta como: F

Cuando el tubo abierto es amarillo y el tubo con aceite es verde se interpreta como reaccin oxidativa y se
reporta como: O

Control positivo oxidativo: Pseudomonas aeruginosa
Control positvo fermentador: Escherichia coli
Control sin cambios, no consume glucosa: Moraxella sp

Prueba de motilidad.
La motilidad se puede observar por un crecimiento turbio lejos de la picadura
realizada en la inoculacin de los medios OF o en un medio SIM, este mtodo es de
confianza variable ya que la picadura se pudo haber hecho chueca o irregular lo que
nos darian falso positivo. Para evitar este factor se realiza la tcnica de gota
suspendida bacteriana.
Tcnica de gota suspendida: Agregar sobre un portaobjetos una gota de
solucin fisiolgica salina estril, ponerle un poco de muestra bacteriana,
homogeneizar de tal forma que la gota no se extienda mucho, ponerle encima un
cubreobjetos al que previamente se le a puesto una base de 4 bolitas pequeas de
plastilina con el objetivo de evitar que aplaste totalmente la gota con bacteria,
finalmente observar al microscopio con un objetivo de 40X. Se alcanzan haber
bacterias muy pequeas y casi translcidas moverse a velocidad variable, observar
al menos de 5-10 bacterias recorrer todo el campo de visin para declarase una
motilidad positiva. La mayora de las bacterias motiles son de morfologa bacilar o
sea Bacilos., Pero no todos los bacilos son motiles.
Bibliografa consultada.
Koneman, Diagnostico bacteriolgico, texto y atlas a color, 6ed, Panarmericana,
Argentina, 2006.
MacFadin, Pruebas bioqumicas para la identificacin de bacterias de importancia
clnica,3ed, Panarmericana, Argentina, 2003.
Bailey y Scott, Diagnostico bacteriolgico, 12ed Panamericana, Argentina, 2007.

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