CINTICA ENZIMTICA

Y ALOSTERISMO
ENZIMTICO




La cintica enzimtica nos permite conocer los ndices cuantitativos de como las
reacciones son catalizadas por las enzimas, tambin saber el orden y los pasos del
proceso en que las enzimas originan los productos por medio de los sustratos.
Adems se aplica en la forma en que los estados de estrs fisiolgicos afectan la
homeostasis, en farmacologa la cintica ha permitido el descubrimiento y desarrollo de
nuevos frmacos as como conocer su modo de accin, en base a los procesos
fisiolgicos que se presentan en nuestro organismo, para en ciertos casos reducir las
catlisis enzimticas que pueden llegar en cierto modo afectar el correcto
funcionamiento del en el organismo.
Para observar de manera detallada y ms precisa las reacciones que se presentan se
hace una medicin por medio de ecuaciones balanceadas donde trata de explicar que
la materia no se crea ni se destruye solo se transforma que en este caso los sustratos
terminan creando sus respectivos productos donde adems estas reacciones pueden
ser reversibles es decir, de sustratos a productos o de productos a sustratos,
por ejemplo:
Sustratos: A, B
Productos: P, Q
Sin embargo en ciertos casos los reactivos dan como resultado sus productos por
medio de la termodinmica donde esta vez la reaccin no ser reversible, es decir solo
ira en una direccin, por ejemplo:
Sustratos: A, B
Productos: P, Q

Uno de los factores que se presentan en la cintica enzimtica es la velocidad de una
reaccin que es el cambio de la concentracin de un reactante o producto por unidad
de tiempo.
Para entender cmo se analiza la velocidad de una reaccin qumica es por medio de
una reaccin simple por ejemplo: en donde A ser el reactante que dar a B



Para calcula la velocidad se emplea la siguiente formula:

Donde para el caso de la concentracin esta ser
medida en Moles mientras que el tiempo se medir
en segundos, por lo tanto la frmula de velocidad
quedara de la siguiente manera:
[A]: concentracin del reactante A
[t]: concentracin del tiempo

La concentracin es negativa debido a que el reactante va desapareciendo a medida
que va reaccionando y se transforma en el producto B y ser equivalente conforme
vaya apareciendo el producto.
Cuando hablamos de variacin corresponde a una concentracin final menos la inicial,
como en los reactantes la concentracin final es ms pequea que la inicial el valor es
negativo.

Otra manera de calcular la velocidad es posible si conocemos las concentraciones
iniciales de los reactantes empleando la siguiente formula:
Donde [A] y [B] son las concentraciones de los reactantes
k= constante cintica
m y n: ordenes parciales de la reaccin
k solo puede ser calculada experimentalmente y que es directamente proporcional a la
velocidad de una reaccin a mayor constante mayor ser la velocidad mientras que el
orden parcial de la reaccin (m y n) nos informa el mecanismo por el cual se est
llevando a cabo y este tambin se calcula de manera experimental





Una reaccin enzimtica para que podamos medir su eficiencia y su eficacia podemos
conocer la velocidad de reaccin, esta es el reactante transformndose en producto en
un determinado tiempo, por lo que esta ser una velocidad. Entre ms reactante
tengamos, ms grande tendr que ser la velocidad de la reaccin y conforme disminuya
el reactante, el producto tendera a ascender.

Conforme se est llevando a cabo la reaccin, se ver que la energa de activacin que
posee el reactante tendera a ser llevada al pico mximo por medio de la enzima y de all
su energa de activacin bajara y se dispersar para que el producto resultante termine
con poca energa de activacin para que de esta forma se pueda utilizar, y a la vez ser
estable.

Para que se pueda llevar a cabo el proceso enzimtico, es necesario que las molculas
se acerquen para poder reaccionar el reactivo con el sitio activo, y tener la energa de
activacin alta para que la enzima pueda llevar a cabo su trabajo. Teniendo en cuenta
que esta energa no puede ser aadida por terceros porque de lo contrario afectara la
reaccin, o incluso alterara las molculas implicadas. Esto ocurre por alteraciones o
elevacin de temperatura la cual incrementa la energa cintica de las molculas;
tambin ocurre por la concentracin de las proporciones de reactivos con respecto a la
enzima.



Ecuacin de Michaelis Menten
En 1913 Leonor Michaelis y Maud Menten propusieron un modelo para la medicin
sistemtica de las velocidades enzimticas. Segn este modelo la enzima se une al
sustrato, para formar el complejo enzima sustrato, el sustrato durante el estado de
transicin se convierte en producto, luego tras un corto lapso de tiempo el producto se
disocia de la enzima.
Tambin se introdujo una nueva constante: Km, la constante de Michaelis. Es
caracterstica de una enzima y su sustrato concreto, y refleja la afinidad de la enzima
por ese sustrato. El Km es numricamente igual a la concentracin de sustrato a la cual
la velocidad de la reaccin es igual a 1f2V mx. El Km no vara con la concentracin de la
enzima.

La relacin de la velocidad con la concentracin de la enzima: la velocidad de la
reaccin es directamente proporcional a la concentracin de la enzima a todas las
concentraciones de sustrato.

La orden de la reaccin cuando la [S1] es mucho menor que la km la velocidad de la
reaccin es aproximadamente proporcional a la concentracin del sustrato. Se dice
entonces que la velocidad de la reaccin es de primer orden con respecto al sustrato.
Cuando [S1] es mucho mayor que la Km' la velocidad es constante e igual a la V mx. La
velocidad de la reaccin es entonces independiente de la concentracin del sustrato y
se dice que la reaccin es de orden cero con respecto a la concentracin del sustrato.

Grfico de Lineweaver-Burk

Es la forma de medicin de la Km y de la Vmax mediante la ecuacin de Michaelis-
Menten en su forma lineal, tambin se puede denominar de doble reciproco, primero
se invierte la ecuacin, luego se factoriza y se simplifica para quedar la ecuacin de una
lnea recta.
Esta grafica puede usarse de igual manera para determinar los mecanismos cinticos de
los inhibidores de una enzima.

Constante y eficiencia cataltica

Las propiedades cinticas de una enzima tambin pueden utilizarse para determinar su
eficacia cataltica. La constante enzimtica puede ser considerada tambin como el
nmero de recambio.
Esta se calcula como la Vmax sobre el nmero de sitios activos.
Los beneficios de una kcat alta solo pueden obtenerse si la Km es suficientemente baja.
De este modo, la eficiencia cataltica de enzimas se expresa mejor en trminos de la
proporcin de estas dos constantes cinticas, kcat/Km.



Ecuacin de Hill

Esta ecuacin sirve para poder determinar la cooperacin de una enzima, el grado de
cooperacin se identifica como n o coeficiente de Hill, si n es igual a 1 la conducta
cintica es simple, si es mayor a uno, la cooperacin es positiva y si es menor a uno la
cooperatividad es negativa.
Mientras mayor es el valor para n, ms alto es el grado de cooperacin, y ms
sigmoideo ser el grafico de vi contra [S].


Inhibidores enzimticos
Las molculas que reducen la actividad de una enzima, denominadas inhibidores
Se pueden describir 3 tipos de inhibicin:
Inhibicin competitiva Los inhibidores competitivos se unen de forma reversible a la
enzima libre, y no al complejo ES, para formar un complejo enzima-inhibidor (El).

Inhibicin acompetitiva En la inhibicin acompetitiva, el inhibidor slo se une al
complejo enzima-sustrato, y no a la enzima libre


Inhibicin no competitiva En algunas reacciones catalizadas porenzimas el inhibidor
puede unirse tanto a la enzima como al complejo enzima-sustrato:


Representacin Lineweaver-Burk
Distinguen entre inhibidores competitivos y no competitivos, y simplifican la evaluacin
de constantes de inhibicin


Grfico de Dixon
Se emplea como una alternativa para el grafico de Lineweaver-Burk, para determinar
constantes de inhibicin




Reacciones secuenciales o de desplazamiento nico
Ambos sustratos deben combinarse con la enzima para formar un complejo ternario
antes de que pueda proceder la catlisis (bi-bi)




Reacciones ping pong
Comprenden catlisis covalente y una forma transitoria, modificada, de la
enzima.
Son de doble desplazamiento.


Creacin de frmacos
Muchos frmacos actan como inhibidores de enzimas las enzimas constituyen
blancos naturales para la creacin de frmacos que son tanto potentes como
especficos. La cinetica enzimatica define condiciones de investigacin apropiadas.
El conocimiento de la conducta cintica de la enzima de inters se necesita para
seleccionar condiciones de valoracin apropiadas que detectan con facilidad la
presencia de un inhibidor.
Muchos frmacos se metabolizan in vivo
Enzimas presentes en el paciente o en el agente patgeno actan sobre frmacos,
dicho proceso se denomina metabolismo de frmaco.
Tambin se requiere transformacin metablica para convertir un precursor
farmacolgico inactivo, o pro frmaco, en su forma biolgicamente activa




Son una forma de regular las enzimas y los productos,
Son protenas:
OLIGOMRICAS (con varias subunidades)
Con centros reguladores:
Para unin de un ACTIVADOR
Para unin de un INHIBIDOR
Y centro activo (en una o en varias subunidades)
Formas:
R: forma activa (se forma product)
T: forma inactiva
Las subunidades
Unin de ACTIVADOR:
Forma R. Gran afinidad.
Si activador es sustrato: HOMOALOSTERISMO.
Si activador es otra molcula: HETEROALOSTERISMO.
Unin de INHIBIDOR:
Forma T: tensa
Se frena la actividad.
Inhibicin por producto final
Enzimas alostricos al comienzo de ruta metablica.

Producto final: inhibidor alsterico de uno de los productos
enzimas de la va metablica.