UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERA QUIMICA

LABORATORIO BIOQUMICA
Realizado por: Ma. Gabriela Vanegas H.


LABORATORIO DE BIOQUMICA
TINCIN GRAM
RESUMEN (Qu se hizo?, Como se hizo?, Qu se obtuvo?, Que se concluy?, DESCRIPTORES
MNIMO 4 )

1. OBJETIVOS
1.1. Conocer tcnicas de reconocimiento de bacterias
1.1. Realizar una tincin simple y diferenciada de bacterias procedentes de distintas muestras
naturales
1.2. Familiarizarse con los materiales y equipos del laboratorio


2. TEORIA
2.1. Tincin Simple
2.2. Tincin Diferenciada
2.3. Frotis
2.4. Bacterias Gram Positivas y Gram Negativas

3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Fundamento del mtodo (Resumido, claro y exacto)

3.2. Materiales y Equipos
3.2.1. Asa de Siembra
3.2.2. Lmpara de Alcohol
3.2.3. Microscopio
3.2.4. Portaobjetos
3.2.5. Cubreobjetos
3.2.6. Gotero
3.2.7. Piceta

3.3. Sustancias y reactivos
3.3.1. Alcohol Etlico C2H5OH
3.3.2. Agua Destilada H2O
3.3.3. Muestra Bacteriana de lquida (Yogurt)
3.3.4. Violeta de Genciana C25H30ClN3
3.3.5. Safranina C20H19ClN4
3.3.6. Lugol KI

3.4. Procedimiento

PARTE A: FIJACIN
3.4.1. Lavar meticulosamente con agua y jabn un portaobjetos. Aplicar alcohol y secar
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3.4.2. Esterilizar el asa bacteriana en la llama de un mechero hasta que la punta se torne
incandescente
3.4.3. En la mitad del portaobjetos, colocar una pequea gota de agua destilada. Con el asa
fra transferir una pequea cantidad de muestra al portaobjetos y mezclar con el agua,
extenderla bien de manera que se forma una pelcula delgada sobre la superficie
disponible
Nota: Cuando se toma la muestra a partir de un cultivo lquido no es necesario poner la
gota de agua en el portaobjetos
3.4.4. Secar la preparacin al aire con movimientos horizontales leves
3.4.5. Fijar la preparacin pasando brevemente el porta (con la muestra hacia arriba) cuatro
o cinco veces por la llama. No debe calentarse demasiado
3.4.6. Proceder a la tincin

PARTE A: TINCIN
3.4.7. Se agrega a la muestra bacteriana una gota de violeta de genciana (colorante) durante
dos minutos.
3.4.8. Se enjuaga con agua destilada.
3.4.9. Se agrega dos gotas de lugol (mordiente) por 2 minutos.
3.4.10. Se decolora con Acetona (decolorante)
3.4.11. Se enjuaga con agua destilada
3.4.12. Se agrega una gota de Safranina (colorante de contraste)
3.4.13. Se seca suavemente.
PARTE C: OBSERVACIN
3.4.14. Colocar una gota de aceite de inmersin y observar el objetivo de inmersin a
travs del microscopio

3.5. Observaciones

Tabla XYZ
Observaciones Experimentales
Procedimiento Observacin


Tabla XYZ
Descripcin Morfolgica de la muestra observada

Observacin







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4. DISCUSIN (Situaciones puntuales)

5. CONCLUSIONES (Mnimo 4)

6. APLICACIONES INDUSTRIALES (Mnimo 4 resumidas)

7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
7.1. Citas Bibliogrficas
7.2. Bibliografa

8. ANEXOS
8.1. Diagrama del equipo
8.2. Reporte fotogrfico de bacterias observadas
8.3. Grfico de Bacterias gram positivas y gram negativas

9. CUESTIONARIO
9.1. Con qu finalidad se fija la muestra de microorganismos en el portaobjetos
9.2. Describa cual es la funcin en la tincin de cada uno de los colorantes, mordiente y
decolorante utilizado en la prctica.
9.3. Que caractersticas hacen que una bacteria sean gram positiva o gram negativa
9.4. Realice un cuadro con 5 bacterias gram positivas y 5 gram negativas junto con la
enfermedad que producen.
9.5. Enliste bacterias gram positivas y gram negativas que sean utilizadas en la industria,
especifique el producto