Famlia Enterobacteriaceae

(Enterobactrias)
Bactrias Gram negativas
Cocos
Neisseria
meningitidis,
N. gonorrhoeae
Cocobacilos
Haemophylus
influenza , Pasteurella,
Brucella, Bordetella
pertussis.
Bacilos
Vbrios
Campylobacter jejuni,
Vibrio cholerae
Lactose +
Rapidos fermentadores
da lactose
Klebsiella, E. coli,
Enterobacter
Fermentam lactose
lentamente
Citrobacter, Serratia,
outros
Lactose -
Oxidase -
Oxidase +
Shigella, Salmonella,
Proteus, Yersinia e
outros
Pseudomonas,
Acinetobacter.
Oxidase -
Enterobactrias
Famlia Enterobacteriaceae

Shigella
Salmonella
Yersinia
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Proteus
Serratia
Enterobacter
Morganella
Providencia
Patgenos primrios
Organismos capazes de causar
doenas sempre
Patgenos oportunistas
Organismos que podem causar doenas
em determinadas condies ou em
alguns hospedeiros
(mais de 25 gneros, centenas de espcies e subespcies e
milhares de sorotipos)
(Propriedades bioqumicas, estruturas antignicas e hibridizao e
sequenciamento de cidos nuclicos)
TESTES\ESPCIES
Escherichia
coli
Salmonella
Shigella
dysenteriae
Shigella
sonnei
Klebsiella
pneumoniae
Klebsiella
rhinoscleromatis
Enterobacter
cloacae
Enterobacter
aerogenes
Hafnia
spp.
Serratia
marcescens
Proteus
vulgaris
Proteus
mirabilis
GLICOSE GS + + - - + + + + + d + +
ARABINOSE + + + + + + + - - -
LACTOSE +* D - (+) + - + + - - - -
MALTOSE + + +- +- + + + + + + + -
MANITOL + + - + + + + + + + - -
SORBITOL + + + + + + - - - -
SACAROSE d - - (+) + + + + -x + + (+)
TREALOSE + + + + + + + + (+) +
CITRATO - + - - + - + + + + +- +(+)
MALONATO - D - - + + d + +- - - -
VERMELHO DE METILA + + + + - + - - - - + +
VOGES-PROSKAUER - - - - + - + + + D d d
REDUO DE NITRATO + + + + + + + + + + + +
HIDRLISE DE GELATINA - D - - (d) (d) (+) ((+)) - + + +
PRODUO H
2
S - + - - - - - - - - + +
INDOL + - d - d d - - - - + -
LISINA + + - - - - - + + + d d
UREASE - - - - - - (d) (d) - - + +
FENILALANINA - - - - - - - - - - + +
MOTILIDADE +- + - - - - + + + + + +

D = diferentes reaes em diferentes espcies de um gnero
d = diferentes reaes em diferentes isolados
(d) = diferentes reaes em diferentes isolados tardiamente
X = reaes tardias e irregularmente positivas (mutantes)
(+) = reaes tardias, mas sempre positivas
((+)) = liquefao muito lenta
DIFERENCIAO BIOQUMICA DE ENTEROBACTRIAS
Fonte: Manual BERGEY 8 edio)
Maior (mais variada) coleo de
bacilos Gram negativos
Enterobacteriaceae
Mais frequentemente associado a microbiologia
clnica ( 20 espcies 95% das infeces)
cerca de 35% das septicemias, 70% das ITUs, muitas
infeces gastrintestinais, meningite.
Habitat: So ubiquitrios (solo, gua, vegetao,
microbiota do trato intestinal de animais e homem)
(coliformes termotolerantes)
Stios de infeces com membros da famlia
listados em ordem de prevalncia
Origem das doenas por Enterobactrias

-Reservatrio animal (Salmonella, Yersinia)
-Carreador humano (Shigella, Salmonella Typhi)
-Transmisso endgena (E. coli) (ou veiculada)
Enterobacteriaceae
Doenas tanto em animais de produo
como de companhia
Desde sepses, diarrias e meningites em recm
nascidos at processos como mastites, abortos,
infeces urogenitais.
Patogenicidade x Metabolizao da lactose

Lac (-) Geralmente patognicas (Salmonella,
Yersinia, Shigella)

Lac (+) Geralmente no patognicas (E. coli,
Serratia, Enterobacter)
Enterobacteriaceae
-
Shigella
Salmonella
Proteus
Providncia
Morganella
+
Escherichia
Klebsiella
Enterobacter
Serratia
Lactose + Lactose -
Bacilos Gram negativos (0,3 a 1 x 1 a 6 m)






Escherichia coli. (Ann C. Smith, University of
Maryland, College Park, MD)
Klebsiella pneumoniae (Ann C. Smith,
University of Maryland, College Park, MD)
No esporulados
Caractersticas Gerais

Maioria possui flagelo (peritrquios)
(exees Klebsiella, Shigella, Yersinia e
alguns sorotipos de salmonelas
(Salmonella Gallinarum e S. Pullorum)

Todas reduzem nitratos a nitritos
O teste revelado
atravs da adio de 3
gotas do reativo de
Griess A com 3 gotas do
reativo de Griss B no
caldo nitrato
???
Caractersticas Gerais
So oxidase negativas






Escherichia coli. (Ann C. Smith, University
of Maryland, College Park, MD)
Pseudomonas aeruginosa (Ann C. Smith,
University of Maryland, College Park, MD)
Oxidao do Citocromo C pelo O
2

Para fenilenodiamina oxidado pela enzima
adquirindo cor vermelha
Pseudomonas (+) Enterobactrias (-)
?

Catalase positivas
Caractersticas Gerais
Caractersticas Gerais
Todas fermentam glicose (dextrose)
Ferm. Butilenogliclica:(Voges Proskauer-VP+)
cido pirvico Butilenoglicol
Ferm. cido mista:(Vermelho metila - VM+)
cido pirvicocidos succnico, ltico
e frmico (em alguns casos CO
2
+ H
2
)
Fermentao cido mista (Shigella, E. coli)
Caractersticas Gerais
+
No
inoculado
No
inoculado
+
Fermentao butilenogliclica (Klebsiella,
Enterobacter sp)
Caractersticas Gerais
Enterobactrias no resistem a luz solar,
dessecao, pasteurizao e desinfetantes
comuns

Morfologia da colnia no Agar Sangue de
pouco valor, pois so colnias parecidas
(exceto Klebsiella-Mucide)

Quimio-organotrficos Fermentaco
Respiraco aerbia
(Facultativos) Respiraco anaerbia
Caractersticas Gerais
Klebsiella pneumoniae
Agar Sangue
E. coli
Agar Sangue e MacConkey

Meios diferenciais e seletivos so usados para
avaliao inicial de colnia (MacConkey, XLD
(XILOSE LISINA DESOXICOLATO), Hoektoen
Entrico (HE)
Lactose (-)
Lactose (-)
(Meio Cromognico)
(E. coli/coliformes em alimentos e
gua)
HardyCHROM SS, First and Only
Chromogenic Media for both Salmonella
and Shigella
Obs. Todos os meios para isolamento de enterobactrias
permitem a identificao de Salmonella, Shigella ou ambas.
(Porm normalmente utiliza-se de meios de
enriquecimento)
E. coli
(Eosin Methilen Blue - EMB)
gar Hoektoen (HE)
E. coli
Salmonella Enteritidis
Meio de Salmonella-Shigella ( SS)
Meio de XLD
(XILOSE LISINA DESOXICOLATO)

Proteus sp
Salmonella
Estrutura antignica das Enterobactrias
100 tipos
85 tipos
>170 tipos
Fimbria
Bacilo Gram
negativo
Membrana externa com
lipopolissacardeo (LPS)
(Endotoxina-Fator de Virulncia
das Gram negativas)
Peptideoglicano
Composio de uma unidade de LPS


Lipdeo A
(Parte txica)
Polissacardeo
Responsvel por muitas manifestaes sistmicas das infeces por bactrias
Gram negativas, que ativa o complemento, causa liberao de citocinas,
leucocitose, trombocitopenia, coagulao intravascular disseminada, febre,
diminuio da circulao perifrica, choque e morte.
(Polissacardeo O)
(Core)
-Lipopolissacardeo (LPS) Responsvel pela produo de febre
(resposta pirognica) e alteraes vasculares e ao direta sobre os
mecanismo das reaes de hipersensibilidade no especfica.
Fatores de Virulncia
Fatores de Virulncia
Genes do fatores de virulncia Localizados em plasmdeos
ou cromossomos (ilhas de patogenicidade)
-Fmbrias (Adesinas): Tipos mais variados (Tipo 1 a mais
comum) e com especificidades para algumas clulas
hospedeiras.
E.coli K88-Leites, K99-Bezerros, CFAI e CFAII-Humanos)
-Sistemas de secreo de enzimas hidrolticas e protenas de
patogenicidade (T1SS, T2SS, T3SS, T4SS, T5SS e T6SS)
(Yersinia, Salmonella, Shigella, EPEC)
Obs: So 6 tipos
Os tipos I e IV
Bactrias G(+) e G(-)

Os tipos II, III, V e VI -
Bactrias G(-)
Na ausncia do T3SS
a bactria perde sua
virulncia
Fatores de Virulncia
A. Esquema do sistema de secreo tipo III, aqui apresentado com dois anis atravessando a membrana e a agulha
surgindo da superficie da bactria. As proteinas efetoras e translocadoras esto estocadas. B. Esquema do SSTT
em operao. As proteinas translocadoras formam um poro na membrana da clula alvo e as proteinas efetoras so
translocadas para o citosol da clula alvo. C. Microscopia eletrnica da superficie de bactria com agulhas do
SSTT. Baseado, com modificaes, em Troisfontaines P. and Cornelis G. R., Physiology, 20:326-339, 2005
-Siderforos (ex. enterobactina e aerobactina) e Hemolisinas
Fatores de Virulncia
Enterobactina de E. coli
Hemolisinas ( e )
Fatores de Virulncia
-Produo de bacteriocinas Colicinas, Marcescina.
-Variao de fase antignica: A expresso dos antgenos
capsulares K e flagelares H esto sob controle gentico do
micro-organismo. Cada um desses antgenos pode ser
alternadamente expresso ou no (variao de fase), uma
caracterstica que protege a bactria da morte mediada
pelo anticorpo.
-Exotoxinas:
Exemplos: Enterotoxina (LT) de um sorotipo de E.coli
(ETEC): AMPc secreo de gua e cloretos e inibe
reabsoro de sdio.
A luz intestinal fica distendia por lquidos e gases
hipermotilidade explosiva e diarria aquosa.

Klebsiella pneumoniae Algumas cepas podem produzir
enterotoxinas (Infeces no aparelhos intestinal, respiratrio, e
genital em animais) (Ex. Metrites em equinos).

Shigella dysenteriae Exotoxina ao de enterotoxina e
neurotoxina.

Fatores de Virulncia
Comensal Isolado comum da microbiota do clon e sua
presena no intestino contribui para o seu normal
funcionamento
(presena na gua um indicador de contaminao fecal)

Oportunista Patgeno potencial para humanos (inmeras
doenas) e para quase todas as espcies animais.

Existem tipos de E.coli especializadas Pattipos
Espcie mais importante do gnero e tambm a mais verstil
Outras espcies so: Escherichia hermannii, E. vulneris,
E. blattae, E. fergusonii.
Escherichia coli (Theodor Von Escherich (1885)
Atualmente 200 sorotipos
Caractersticas
Colnia seca, rosa (lactose positiva) com rea
rosa ao redor quando crescida em MacConkey

Escherichia coli
E. coli
K. pneumoniae
TESTES\ESPCIES
Escherichia
coli
Salmonella
Shigella
dysenteriae
Shigella
sonnei
Klebsiella
pneumoniae
Klebsiella
rhinoscleromatis
Enterobacter
cloacae
Enterobacter
aerogenes
Hafnia
spp.
Serratia
marcescens
Proteus
vulgaris
Proteus
mirabilis
GLICOSE GS + + - - + + + + + d + +
ARABINOSE + + + + + + + - - -
LACTOSE +* D - (+) + - + + - - - -
MALTOSE + + +- +- + + + + + + + -
MANITOL + + - + + + + + + + - -
SORBITOL + + + + + + - - - -
SACAROSE d - - (+) + + + + -x + + (+)
TREALOSE + + + + + + + + (+) +
CITRATO - + - - + - + + + + +- +(+)
MALONATO - D - - + + d + +- - - -
VERMELHO DE METILA + + + + - + - - - - + +
VOGES-PROSKAUER - - - - + - + + + D d d
REDUO DE NITRATO + + + + + + + + + + + +
HIDRLISE DE GELATINA - D - - (d) (d) (+) ((+)) - + + +
PRODUO H
2
S - + - - - - - - - - + +
INDOL + - d - d d - - - - + -
LISINA + + - - - - - + + + d d
UREASE - - - - - - (d) (d) - - + +
FENILALANINA - - - - - - - - - - + +
MOTILIDADE +- + - - - - + + + + + +

D = diferentes reaes em diferentes espcies de um gnero
d = diferentes reaes em diferentes isolados
(d) = diferentes reaes em diferentes isolados tardiamente
X = reaes tardias e irregularmente positivas (mutantes)
(+) = reaes tardias, mas sempre positivas
((+)) = liquefao muito lenta
DIFERENCIAO BIOQUMICA DE ENTEROBACTRIAS
Fonte: Manual BERGEY 8 edio)
IMVIC (+ + - -)
Infeces - Srie de patogenias (Colibaciloses)

Animais jovens so mais susceptveis colibacilose entrica
(bezerros < de 10 dias, cordeiros < de 2 semanas, leites
neonatos ou logo aps o desmame)
Em humanos atingem principalmente crianas.





Infeces gastrintestinais Diferentes Patotipos

Septicemias, Mastite, Abortamentos, Endometrite, Cistite,
Nefrite, Artrite, Osteomielite, Endocardite, Pneumonia,
Conjuntivite, salpingite em aves,
Escherichia coli
Ahmed ety al. Nature Reviews Microbiology 6, 387-394 (May 2008)
A absoro de elementos genticos mveis (fagos, plasmdeos de virulncia, ilhas de patogenicidade), e
perda de pores de DNA-cromossmico em linhagens distintas de E. coli, possibilitou surgimento de clones
de diferentes patotipos de E. coli associados a sintomas de doenas especficas.
LEE - locus of enterocyte effacement; PAIs - pathogenicity island; pEAF - enteropathogenic E. coli
adhesion-factor plasmid; pENT- enterotoxin-encoding plasmids; Stx - Shiga-toxin-encoding bacteriophage.
(ETEC Enterotoxignica E. coli)
(EIEC Enteroinvasiva E. coli)

(UPEC-Uropatognica E. coli)
(EPEC Enteropatognica E. coli)

(EHEC Enterohemorrgica E. coli)
E. coli comensal
Plasmdeos
Ilhas de patogenicidade
Outras E. coli
-APEC
-NMEC, etc
Enterotoxignica (ETEC) (diarria do viajante)
Aderem a entercitos do intestino delgado e induzir diarria aquosa
pela secreo das enterotoxinas termo-lbeis (LTI e LtII)
(imunognicas e relacionada com a toxina colrica) e termo-estveis
(STa e STb) (no imunognica).

-desidratao
-acidose metablica
-morte
Obs. A maioria dos casos de colibacilose entrica
em bezerros e leites esto nesta categoria;
A diarria causada por ETEC em bezerros ocorre
em animais < de 1 semana de idade;
Sorotipos importantes O8, O9 e O101.
Enteropatognica (EPEC) - lactentes e crianas; surtos em berrios de
hospitais e creches; fezes com muco mais sem sangue

Aderem aos entercitos do intestino delgado e destroem a arquitetura das microvilosidades,
induzindo a formao de leses do tipo attaching/effacing Desarranjos do citoesqueleto so
acompanhados por uma resposta inflamatria e diarria.
1-Aderncia inicial,
2-Translocao de protena utilizando sistema de secreo do tipo III,
3-Formao pedestal
Bezerros com mais de 4 meses de idade so afetados por EPEC;
Leses (vilosidades) similares ocorrem em sunos, cordeiros e ces;
EPEC ocorre em bezerros de 2 dias a 4 meses de idade e determinam
deficincia na absoro e digesto.
Enteroagregativa (EAEC) - Adere ao epitlio do intestino delgado e
grosso em um biofilme espesso e elabora enterotoxinas e citotoxinas
secretoras Diarria aquosa persistente (por mais de duas semanas).
No est devidamente esclarecida a importncia destes microrganismos
nas infeces nos animais;
Duas enterotoxinas termoestvel,
-EAST-I, semelhante STa de ETEC, que promove
aumento do GMP cclico intracelular;
-toxina antigenicamente relacionada com uma
hemolisina:
Enterohemorrgica (EHEC ex. sorotipo 0157: H7) (diarria
hemorrgica e sndrome hemoltico-urmica (HUS).
Induzem a leso do tipo attaching and effacing , porm no clon.
A caracterstica distintiva a elaborao de toxina de Shiga (Stx), a
absoro sistmica que leva a potenciais complicaes fatais


Propagao da doena Alimentos
ex. carne moda crua,
leite cru, verduras cruas
contaminadas.
De 1 a 15% dos casos de colite
hemorrgica podem evoluir para um
quadro de sndrome hemoltico-
urmica destruio dos eritrcitos e
falha aguda dos rins.
Afetam bezerros com 4 a 28 dias de idade
Leso vascular caracterstica da doena
edematosa dos sunos (frequentemente
fatal em leites desmamados)
Enteroinvasiva (EIEC) - Invade a clula epitelial do clon (plasmdeo
ipaH), lisa o fagossomo e se move atravs das clulas por nucleao
microfilamentos de actina. Produz disenteria (diarria aquosa com
sangue) devido a invaso e destruio da mucosa intestinal
NO fermentar a lactose; identificados atravs de sondas de DNA

So bioquimicamente e sorologicamente
semelhantes Shigella;

Colibacilose dos pintinhos

Causam colite erosiva hemorrgica
Virotype Virulence Factors Disease
ETEC Pili; LT, ST
a
, ST
b
Diarrhea
EAEC Bundle-forming pili (BFP); EAST Diarrhea
EPEC Pili; effacing enteroadherence Diarrhea
EHEC Effacing enteroadherence; Shig a-like toxin Diarrhea; dysentery;
HUS
EIEC Invasins (no SLT) Diarrhea; dysentery
Ex. ETEC
-Esta condio pode se desenvolver em estgios terminais de
animais que sofrem de colibacilose entrica;
-Cepas que causam colisepticemia geralmente so invasivas;
-A patognese no elucidada, mas acredita-se que a endotoxina
desempenha um papel importante;
-Os principais sorotipos em animais so O78:K80 em bovinos, leites
O26 e O165, aves O1, O2 e O78:K80.
COLISEPTICEMIA
Fala-se em APEC (Avian pathogenic E. coli)
Produzir infeces clinicas (Salmoneloses)
importantes em seres humanos e animais
(ruminantes- bovinos de 4 a 6 semanas)
(Trato gastrintestinal e Sepses)
Salmonella
Grupo de organismos grande e complexo ;
agrupados por antgenos O, H e Vi (de
virulncia)
Salmonella pathogenicity islands (SPIs)
Wester&Hensel. Microbes and infection, v. 3, n. 7, 549-559, 2001.

Gastroenterite aguda ou intoxicao alimentar
Fonte = Animais de estimao, ovos e carne
de frango mal cozidos, utenslios de cozinha
contaminados
Ocorre 8 a 36 horas aps a ingesto
Requer uma elevada carga microbiana para a
infeco
Auto-limitada em indivduos saudveis
(antibiticos e agentes antidiarricos podem
prolongar os sintomas)
Salmonella
Nomenclatura do gnero Salmonella
Espcie Sub-Espcie Sorotipo Sorogrupo
Enterica Enterica (I) Paratyphi A

A
Typhimurium
Paratyphi B
Bredeney

B
Choleraesuis
Montevideo
Oranienburg
Paratyphi C

C1
Newport


C2
Typhi
Enteritidis
Gallinarum
Pullorum
Dublin

D
Anatum
Butantan
Give

E
Salamae (II) Daressalam


Arizonae (IIIa)


Diarizonae (IIIb)


Houtenae (IV)

Houten
Indica (VI)

Ferlac
Bongori

Bongori Bongor
Fonte. Zuniga (2006)
(1478)
(498)
(94)
(327)
(71)
(12)
(21)
Total (2501)
Genticamente so duas espcies (so mais de 2501 sorotipos)
doenas so do tipo gastrintestinais e sepses
Bovinos
Aves domsticas
Eqinos e
outros
Bovinos,Sunos,
Ovinos, Outros
Sunos
Humanos (parece ser
susceptvel a todos os sorotipos)
Vrias espcies animais
Rpteis e aves
Fontes de contaminao de Salmonella na Avicultura
Thiennimitr et al. Salmonella: the host and its microbiota. Current Opinion in Microbiology, v.15, n.02, p.108-114, 2012.
A Salmonella utiliza seus fatores de virulncia (flagelos, T3SS-1 e T3SS-2) para invadir o epitlio e
sobreviver nas clulas mononucleares. A resposta inflamatria resulta na liberao de um
antimicrobiano (lipocalina-2) que sequestra o agente quelante de ferro (enterobactina) produzido pela
microbiota, mas no inibe o quelante salmoquelina, produzida pela Salmonella. Espcies reativas de
oxignio (ROS) gerados por neutrfilos que migram para o lmen intestinal oxidam compostos de
enxofre produzindo um aceptor de eltrons (tetrationato) para a respirao anaerbia de Salmonella
garantindo ao patgeno vantagens para a multiplicao e transmisso
Patogenia
TESTES\ESPCIES
Escherichia
coli
Salmonella
Shigella
dysenteriae
Shigella
sonnei
Klebsiella
pneumoniae
Klebsiella
rhinoscleromatis
Enterobacter
cloacae
Enterobacter
aerogenes
Hafnia
spp.
Serratia
marcescens
Proteus
vulgaris
Proteus
mirabilis
GLICOSE GS + + - - + + + + + d + +
ARABINOSE + + + + + + + - - -
LACTOSE +* D - (+) + - + + - - - -
MALTOSE + + +- +- + + + + + + + -
MANITOL + + - + + + + + + + - -
SORBITOL + + + + + + - - - -
SACAROSE d - - (+) + + + + -x + + (+)
TREALOSE + + + + + + + + (+) +
CITRATO - + - - + - + + + + +- +(+)
MALONATO - D - - + + d + +- - - -
VERMELHO DE METILA + + + + - + - - - - + +
VOGES-PROSKAUER - - - - + - + + + D d d
REDUO DE NITRATO + + + + + + + + + + + +
HIDRLISE DE GELATINA - D - - (d) (d) (+) ((+)) - + + +
PRODUO H
2
S - + - - - - - - - - + +
INDOL + - d - d d - - - - + -
LISINA + + - - - - - + + + d d
UREASE - - - - - - (d) (d) - - + +
FENILALANINA - - - - - - - - - - + +
MOTILIDADE +- + - - - - + + + + + +

D = diferentes reaes em diferentes espcies de um gnero
d = diferentes reaes em diferentes isolados
(d) = diferentes reaes em diferentes isolados tardiamente
X = reaes tardias e irregularmente positivas (mutantes)
(+) = reaes tardias, mas sempre positivas
((+)) = liquefao muito lenta
DIFERENCIAO BIOQUMICA DE ENTEROBACTRIAS
Fonte: Manual BERGEY 8 edio)
TSI Triplice accar e ferro
(0,1% Glicose, 1% Lactose e 1%
Sacarose)
A. Salmonella sp.
B. Escherichia coli
C. Unknown
D. Proteus mirabilis
A
B
C
D
E
A- No inoculado, B- P. aeruginosa,
C- E. coli, D- Salmonella Typhimurium,
E- Shigella flexneri
Produo de gs por
Salmonella ????
Meio de TSI
Febre tifide (Salmonella Typhi) e outras febres
entricas
febre prolongada
bacteremia
Envolvimento do sistema RE, particularmente
do fgado, bao, intestino, mesentrio
H disseminao para vrios rgos
Salmonella
Bacteremia
Estado de portador
Organismos so eliminados junto com as fezes
Vescula biliar o local de refgio dos
organismos (remoo de vescula biliar pode
ser a nica soluo para estado de portador)
Salmonella
Todas as espcies causam desinteria bacilar
(fezes com sangue, muco e numerosos leuccitos)
(Prottipo do patgeno entrico invasivo) ( EIEC)
Humanos so os mais importantes reservatrios
conhecidos (e outros primatas)
S. dysenteriae , S. flexneri, S. boydii, S. sonnei (mais
comum)
Transmisso fecal-oral
Menos de 200 bacilos so necessrios para a
infeco em indivduos saudveis (elevada virulncia)

Shigella sp
Caractersticas gerais
No mveis,
No produz gs a partir da fermentao da glicose ,
No hidrolisa uria
No produz H
2
S em TSI
Lisina decarboxilase negativa
ONPG (Ortho-nitrophenyl beta-D-galactopyranoside
semelhante a lactose) positivo (lactose retardada +)
Organismos frgeis
Possuir O e alguns tm antgenos K

(Vide Tabela de identificao de enterobactrias)
Shigella sp
Shigella consegue invadir o epitlio do lmen intestinal por meio de clulas-M. Aps atingir o epitlio,
invade clulas epiteliais e fagocitada por macrfagos residentes. A bactria escapa do fagossomo de
ambas as clulas, mas enquanto replica dentro das clulas epiteliais induz a apoptose em macrfagos,
provavelmente, por ativao de caspase-1 (Casp-1). Os macrfagos sofrem lise e liberam as citocinas
pr-inflamatrias IL-1 e IL-18. Juntamente, as IL-8 liberadas pelas clulas epiteliais invadidas sinalizam
para PMN (leuccitos polimorfonucleares ou neutrfilos). Estes PMN eventualmente resolvem o processo
infeccioso.
.
Coleta e Processamento
Se no forem processadas imediatamente, as
amostras devem ser colhidas em meios de
transporte (Cary-Blair, Amies ou Stuart)

Isolamento e Identificao
Local de orgem devem ser considerados, pois
enterobactrias em stios corporais estreis so
altamente significativos.
Rotineiramente cultivadas a partir de fezes
Diagnstico Laboratorial das Enterobactrias
Diagnstico Laboratorial das Enterobactrias
Identificao dos gneros de enterobactrias
(importante em microbiologia clnica e epidemiologia; base de muitos sistemas de identificao
comerciais (Enterotube, API-E)
Ver se usa ou no a lactose
Meios para isolamento e identificao de enterobactrias
A maioria dos laboratrios utiliza Agar Sangue, e um
meio seletivo/diferencial (MacConkey)
Para fezes, so usados meios altamente seletivos, como
Hektoen Entrico (HE), XLD ou SS juntamente com
MacConkey.
Maioria dos laboratrios utilizam um sistema de
identificao miniaturizado (API) ou automatizado
comercial, em vez de tubos mltiplos inoculados
manualmente Testes Bioqumicos
Diagnstico Laboratorial das Enterobactrias
O meio IAL / Rugai foi elaborado para triagem de enterobactrias e consiste
de nove provas em apenas um tubo de ensaio: indol (tampa), fermentao da
sacarose, fermentao da glicose, produo de gs, fenilalanina, uria, H2S,
lisina e motilidade.
Identificao de enterobactrias (Meio de EPM)
MEIO EPM (Fermentao da glicose, produo
de gs, H
2
S, uria, fenilalanina)
Inocular picando at o fundo e semear na superfcie, incubar com a
tampa frouxa 24hs/35oC.
Base:
Fermentao da glicose: cor amarela.
Produo de gs: formao de bolhas ou deslocamento do meio do
fundo do tubo.
Produo de H
2
S: Enegrecimento do meio em qualquer intensidade
Hidrlise da uria: Aparecimento da cor azul ou verde-azulada (reao
fraca) que se estende para a base do meio, envolvendo-a totalmente ou
no.

Superfcie:
Desaminao do Triptofano: aparecimento de cor verde-garrafa no
superfcie do meio. Quando a reao negativa, a superfcie do meio
adquire cor azul ou, raramente, amarela.
Identificao de enterobactrias usando MILi
MEIO MILi (Movimento, Indol e Lisina)
Fazer picada central apenas e incubar 24hrs/35
o
C

-Motilidade: A bactria mvel cresce alm da picada turvando parcial ou
totalmente o meio. A bactria imvel cresce somente na picada.

-Descarboxilao da Lisina: Quando a lisina descarboxilada, o meio
adquire cor prpura acentuada ou discreta. Quando o aminocido no
utilizado, o meio adquire cor amarela ntida nos seus 2/3 inferiores.
Considerar o teste positivo sempre que o meio no estiver amarelo

-Produo de indol: Aps a leitura dos testes de motilidade e lisina,
adicionar 3 a 4 gotas de reativo de Kovacs a superfcie do meio e agitar
levemente. Quando a bactria produz indol, o reativo adquire cor rosa ou
vermelha. Quando no o produz, o reativo mantm a sua cor inalterada.
Identificao de enterobactrias (citrato de
Simmons)
IMVIC (+ + - -) = E. coli)
Porque as fezes tm uma microbiota numerosa,
eficientes mtodos de triagem devem ser usados
para recuperar os patgenos.

Os patgenos entricos incluem Salmonella,
Shigella, Aeromonas, Campylobacter, Yersinia,
Vibrio, e E. coli 0157:H7
Pesquisa dos patgenos em fezes