CROMATOGRAFA DE COLUMNA EMPACADAS

*Jos Gabriel Gutirrez Gonzlez, *Edis Santiago Daz Badel,*Francisco Carlos Silgado
Ledesma.

*jggutierrezquimiko@gmail.com
Facultad de Ciencias Bsicas
Departamento de Qumica
Universidad de Crdoba.
Resumen: En la implementacin de tcnicas cromatograficas la base fundamental es la
seleccin y manejo adecuado de la columna, para el caso que se muestra a continuacin
se utiliz una columna empacada con fase estacionaria de slice y una fase mvil de
H
2
SO
4
y HNO
3
y adems se adiciono una mezcla de permanganato de potasio y
dicromato de potasio, lo que permiti que se observaran en la columnas diferentes
colores (amarilla, roja y morada).
Palabras claves: columna empacada, fase mvil, slice, fase estacionaria.
Summary: in implementing the foundation chromatographic techniques is the proper
selection and use of the column, for the case shown below was used a column packed
with alumina stationary phase and a mobile phase of H2SO4 and HNO3 and also added a
mixture of potassium permanganate and potassium dichromate, which allowed the
columns will be observed in different bands colors (yellow, red and purple).
Keywords: packed column, mobile phase, slice, stationary phase.
INTRODUCCION
La cromatografa es una tcnica que
permite la separacin de los
componentes de una mezcla debido a la
influencia de dos efectos contrapuestos.
a) Retencin. Efecto producido sobre los
componentes de la mezcla por una fase
estacionaria, que puede ser un slido o
un lquido anclado a un soporte slido.
b) Desplazamiento. Efecto ejercido sobre
los componentes de la mezcla por una
fase mvil, que puede ser un lquido o
un gas.

El fenmeno de migracin de los
componentes de una mezcla a lo largo
de la fase estacionaria, impulsados por la
fase mvil, recibe el nombre de elucin.
La mezcla a separar se deposita sobre la
fase estacionara, mientras que la mvil
atraviesa el sistema desplazando a los
componentes de la mezcla a distinta
velocidad, dependiendo de la magnitud
de sus interacciones relativas con ambas
fases. Las dos fases se eligen de forma
que los componentes de la muestra se
distribuyan de modo distinto entre la fase
mvil y la fase estacionaria. Aquellos
componentes que son fuertemente
retenidos por la fase estacionaria se
mueven lentamente con el flujo de la fase
mvil; por el contrario los componentes
que se unen dbilmente a la fase
estacionaria, se mueven con rapidez.
Como consecuencia de la distinta
movilidad, los componentes de la
muestra se separan en bandas o zonas
discretas que pueden analizarse
cualitativa y/o cuantitativamente.

FUNDAMENTOS TEORICOS
Es el mtodo ms utilizado para la
separacin de compuestos orgnico a
escala preparativa. La fase estacionaria
se deposita en el interior de una columna
de vidrio que termina con una placa
porosa que impide su paso y en un
estrechamiento con una llave. La mezcla
se deposita sobre la parte superior de la
fase estacionaria mientras que la fase
mvil atraviesa el sistema. Los
compuestos van saliendo por separado
de la columna y se recogen en
fracciones, los ms polares quedan ms
retenidos y para que salgan
generalmente hace falta aumentar la
polaridad del disolvente. El tiempo
necesario para eluir un compuesto de la
columna se llama tiempo de retencin.

El adsorbente ms utilizado para
cromatografa de columna es gel de
slice, aunque tambin se puede emplear
almina y florisil. La elucin de la
cromatografa puede realizarse por
gravedad o mediante presin (Flash
chromatography), la diferencia en ambos
casos est en el tamao de las partculas
de gel de slice (0,063-0,200 nm, slice
de columna, 0,040-0,063 nm, slice
flash). Debido a que la disminucin del
tamao de las partculas de adsorbente
conduce a una separacin ms eficaz, la
cromatografa a media presin (flash)
proporciona mejores resultados, adems
de ser ms rpida.
Las variables que ms influyen en la
eficacia de la separacin en
cromatografa de columna y utilizando
gel de slice como adsorbente son las
siguientes;
a) Dimetro de la columna y cantidad de
gel de slice. La altura del adsorbente
est relacionada con la diferencia de Rf
de los componentes de la mezcla. El
dimetro de la columna con la cantidad
de producto a separar.
b) Eleccin del disolvente. El disolvente
tiene que conducir a una buena
separacin de los componentes de la
mezcla en capa fina, utilizndose en
muchos casos mezclas de disolventes y
se realiza una elucin en gradiente. Una
de las mezclas ms utilizadas es
hexano/acetato de etilo.


MATERIALES Y REACTIVOS
Permanganato de potasio
cido sulfrico
cido ntrico
Algodn
Bureta
slice
Agua destilada
Tubos de ensayo
Beacker de 100ml
Pipeta de 10ml
METODOLOGIA
Se prepararon soluciones de cido
sulfrico y cido ntrico al 0,5M luego se
procedi a introducir una pequea
cantidad de algodn en la parte inferior
de una bureta para posteriormente
rellenar con slice hasta
aproximadamente 12 cm de longitud.
Seguidamente se agreg un poco de
cido ntrico hasta que este eluyera a
travs de la columna despus se agreg
la mezcla de permanganato y dicromato
(10ml) y se esper durante un tiempo
determinado, finalmente se continuo
agregando cido ntrico hasta que se
observaran trazas coloreadas de
distintos colores que indican la
separacin, de igual manera se concluy
con cido sulfrico


ANALISIS

Para el procedimiento anterior se
observ claramente el buen rendimiento
de la separacin ya que el proceso se
llev a cabo con solventes adecuados
sin embargo hay que tener en cuenta los
tiempos en los que transcurre la
separacin ya que la tendencia mundial
de los anlisis qumicos es mejorar
dichas tcnicas y hacerlas ms
reproducibles en menor tiempo.
NUMERO TIEMPO(min) ABS
1 0:00.0 1,031 530
2 2:00.0 2,493 530
3 4:00.0 1,837 530
4 6:00.0 2,230 530
5 8:00.0 2,641 530
6 10:00.0 0,222 470
7 12:00.0 0,056 470
8 14:00.0 0,024 470
9 16:00.0 0,026 470
10 18:00.0 0,034 470
CONCLUSIN

Segn la experiencia realizada de
cromatografa en columna podemos
concluir que obtuvimos un resultado
positivo, ya que se observaron las
bandas de distintos colores lo que indica
una buena separacin de los
componentes de la mezcla y podemos
deducir que la columna de slica gel
proporciona una buena separacin, pero
debemos tener en cuenta que la slica
gel debe estar bien homogenizada para
que nuestro flujo no se vea interrumpido
por impurezas (en este caso burbujas).








REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Anlisis qumico e instrumental
moderno.Frederic Walton
Harnold, Harold F. Walton, J
Reyes - P. 323.