UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS-ESPE

INGENIERIA EN BIOTECNOLOGA
INMUNOLOGA
INFORME DE LABORATORIO



Nombres: Lizeth Salazar, Daniela Snchez
Fecha: 15/05/2014 NRC:
Practica N: 3

1. TEMA: FAGOCITOSIS. INMUNIDAD NATURAL

2. INTRODUCCIN

2.1 JUSTIFICACIN

2.2 OBJETIVOS
2.3 HIPTESIS

3. MARCO TERICO

4. MATERIALES Y MTODOS
5. RESULTADOS
Se estableci un control negativo y un control positivo. El control negativo pertenece al
frotis realizado con sangre venosa no infectada; mientras que el control positivo
corresponde al frotis realizado con sangre incubada con E. coli. En la Tabla 1 se presenta
los resultados obtenidos a partir del conteo de leucocitos en el control negativo. Se
encontr un total de 10 monocitos y 14 leucocitos polimorfonucleares en 20 campos
pticos observados.
Tabla 1.- Resultados del conteo de monocitos y leucocitos polimorfonucleares en el
control negativo realizado en 20 campos pticos.

N de campo
ptico
N de monocitos
N de leucocitos
polimorfonucleares
1 1 1
2 0 0
3 1 0
4 0 0
5 0 1
6 0 1
7 1 0
8 0 0
9 1 0
10 0 0
11 0 2
12 1 2
13 0 1
14 1 0
15 0 0
16 1 1
17 1 1
18 0 1
19 1 2
20 1 1
TOTAL 10 14

En la siguiente figura se observa el campo ptico 1 constituido por un monocito y un
leucocito polimorfonuclear.






















En el control positivo se observ un total de 26 monocitos y de 35 leucocitos
polimorfonucleares en 20 campos pticos analizados. En la Tabla 2 se presenta las
observaciones realizadas.




Figura 1. Fotografa del campo ptico 1 del control negativo que
muestra A) un monocito y B) un leucocito polimorfonuclear. Tincin
Wright. Aumento: 1000X. (Tomada por D. Snchez)
A
B
Tabla 2.- Resultados del conteo de monocitos y leucocitos polimorfonucleares en el
control positivo realizado en 20 campos pticos.

N de campo
ptico
N de monocitos
N de leucocitos
polimorfonucleares
1 2 2
2 1 3
3 1 2
4 2 1
5 1 2
6 1 2
7 1 3
8 1 1
9 3 2
10 1 1
11 1 2
12 1 1
13 2 3
14 1 2
15 1 1
16 1 1
17 1 2
18 2 1
19 2 1
20 1 2
TOTAL 27 35


En el control positivo, adems se observ lisis celular de monocitos y leucocitos
polimorfonucleares en varios campos pticos. A continuacin se presenta una fotografa
del campo ptico N4.






















Para encontrar el promedio total de fagocitosis se utiliz la siguiente expresin
matemtica:

Donde:












Figura 1. Fotografa del campo ptico N4 del control positivo que
muestra A) un monocito y B) lisis celular en un leucocito
polimorfonuclear. Tincin Wright. Aumento: 1000X. (Tomada por D.
Snchez)
A
B
En la Tabla 3 se observa el promedio total de fagocitosis para el control positivo y
negativo. Para el control negativo el promedio total de fagocitosis es de aproximadamente
1 bacteria/clula; mientras que para el control positivo es de 2 bacterias/clula
aproximadamente.

Tabla 3.- Promedio total de fagocitosis para el control positivo y negativo.

CONTROL PMT PNT
PROMEDIO
TOTAL DE
FAGOCITOSIS
POSITIVO 1,35 1,75 1,55
NEGATIVO 0,5 0,7 0,6



6. DISCUSIN

La fagocitosis es un medio por el cual las clulas corporales humanas se oponen a la
infeccin. Los macrfagos junto con los granulocitos neutrfilos poseen gran capacidad
fagoctica y se denominan como fagocitos profesionales, por lo tanto, desempean un
papel en la defensa directa de los microorganismos interviniendo en la inmunidad innata
(Totora, 2007. Geneser, 2003). De esta manera, se observa que el nmero de clulas
fagocticas en el control positivo es mayor que en el control negativo, debido a la infeccin
producida por la bacteria E. coli.
Segn Abbas et al., 2012 los neutrfilos constituyen el tipo de clulas sanguneas ms
abundantes (4400 nmero medio por microlitro), lo cual se pudo observar en esta
prctica, pues tanto en el control positivo, como en el negativo el nmero de neutrfilos
super al nmero de monocitos.
Se observ que el promedio total de fagocitosis en el control positivo fue 1,552 bacterias/
clulas; segn Placencia (s.f), se trata de una fagocitosis incipiente, mientras que para el
control negativo el promedio total de fagocitosis de 0,61 bacteria/clula constituye una
fagocitosis negativa.

7. CONCLUSIONES

Se determin un control positivo (infectado con E.coli) y un control negativo para
analizar el proceso de fagocitosis in vitro.
Se determin la actividad fagoctica mediante el conteo de monocitos y leucocitos
polimorfonucleares y el clculo del promedio total de fagocitosis, el cual fue igual a
2 bacterias/clula en el control positivo y a 1 bacteria/clula en el control negativo,
lo cual demuestra una fagocitosis incipiente y una fagocitosis negativa,
respectivamente.

8. CUESTIONARIO
Qu defectos pueden presentar los fagocitos? Qu consecuencias
traen consigo?
Los fagocitos pueden presentar defectos quimiotcticos, en la adhesin, endocitosis,
destruccin y eliminacin de partculas ingeridas. La clasificacin de los sndromes
fagocticos de acuerdo al defecto funcional que los caracteriza se basa en tres grupos
principales: Neutropenias congnitas, defectos en la movilidad y defectos en la
destruccin microbial. Muchos de los defectos presentes en los fagocitos llevan casi
invariablemente a infecciones agudas severas recurrentes, que en algunos casos pueden
llegar a ser mortales para el individuo, entre ellas: la enfermedad granulomatosa crnica,
dficit de adhesin leucocitaria, sndrome de hiperinmunoglogulina E, entre otros (Torres
et al., s.f).

Qu es una prueba opsonocitofgica?
Es una prueba relativa a la actividad fagocitaria producida por las opsoninas del suero
sanguneo y se realiza a travs del ndice fagocitario de los leucocitos, en especial de
macrfagos y neutrfilos, para establecer una relacin directa entre la intensidad de
fagocitosis y la resistencia del enfermo a la infeccin.

Qu importancia tiene para el individuo la liberacin de la
mieloperoxidasa al fagosoma?

Una vez que el lisosoma se fusiona con el fagosoma, libera la mieloperoxidasa, que acta
sobre los perxidos en presencia de haluros (I- y Cl-), para producir compuestos
halogenados muy txicos y de vida larga: cido hipocloroso, : cido hipocloroso (ClOH), e
hipoyodoso (IOH) (Iez, s.f.).

Qu mecanismos y seales participan en la formacin del xido ntrico?

La enzima NOS (xido ntrico-sintetasa) combina el oxgeno molecular con el nitrgeno
guanidino de la L-arginina, para generar xido ntrico (NO), que es txico para bacterias y
clulas tumorales. Los macrfagos de ratn (pero no los humanos) necesitan para activar
esta ruta a un nivel ptimo dos seales: interfern gamma (IFN-g ) para activar la enzima
NOS, y factor de necrosis tumoral (Iez, s.f.).

Discutir la importancia de la mieloperoxidasa y la formacin de
compuestos halogenados.
La formacin de compuestos halogenados es importante porque son parte de los
mecanismos bactericidas oxgeno-dependientes. Actan sobre la membrana bacteriana
produciendo peroxidacin de lpidos, rompimiento de protenas de membrana y de
uniones disulfuro entre ellas y formacin de uniones cruzadas entre lpidos (Universidad
de Chile)
Qu es y cules seran los receptores de los diferentes patgenos (PAMPS)?
Segn Abbas et al., 2012, receptores celulares para el reconocimiento del patrn son los
siguientes:




BIBLIOGRAFA

Abbas, A., Lichtman, A., Pillai S. 2012. Inmunologa celular y molecular. 7 edicin.
Elsevier. Espaa.
Geneser, F. (2003). Histologa sobre bases biomoleculares. 3 edicin. Editorial
Mdica Panamericana. Espaa.
Iez, E. (s.f.) Inmunidad Celular. Universidad de Granada. Espaa. Disponible en
el URL <<http://www.ugr.es/~eianez/inmuno/cap_13.htm>> [Fecha de consulta:
13/05/2014]

Placencia, R. (s.f.). Fagocitosis in vivo, inoculacin en animales de
experimentacin (prueba opsonocitofgica en cuy).
Totora, G., Funke, B., Case, C. (2007). Introduccin a la microbiologa. 9 edicin.
Editorial Mdica Panamericana. Argentina.
Torres, I., Marsn,V., Macas, C., Cos, Y.. (s.f). Instituto de Hematologa e
Inmunologa. Defectos en la fagocitosis. Aspectos clnicos, moleculares y
teraputicos. Disponible en el URL: <<
http://www.bvs.sld.cu/revistas/hih/vol20_1_04/hih02104.htm >> [Fecha de
consulta: 13/05/2014]
Universidad de Chile. Atlas de Inmunologa. Disponible en el URL: <<
http://atlas.med.uchile.cl/6.htm>> [Fecha de consulta: 13/05/2014]