Morte Celular

Elisama Azevedo
Universidade Federal do Rio de Janeiro
Polo avanado de Xerm
Morte Celular
Apoptose Necrose
Clulas privadas de
fatores mantenedores da
sobrevivncia;
Danificadas;
Senescentes
Processo no fisiolgico que
ocorre aps leso aguda
Derrame
Sofrem lise e liberam seus
contedos citoplasmtico e
nuclear no ambiente
REAO INFLAMATRIA
Apoptose
Apoptose
Apoptose
Eliminam clulas desnecessrias;
Encolhem e condensam;
Citoesqueleto colapsa;
Envelope nuclear se desfaz;
Cromatina nuclear se condensa e
quebra em fragmentos;
Superfcie celular com bolhas corpos
apoptticos.
Apoptose
Apoptose
Diferenas entre apoptose e necrose
A- vivel
B-lise e extravasamento do
contedo intracelular (necrose)
C-condensao da cromatina
prximo a membrana
D- corpos apoptticos
E- necrose em estgios finais da
apoptose
F- viveis (laranja de acridina
penetra na clula e incorpora-se ao
DNA)
G- necrticas perda da
integridade de membrana.
H- viveis apoptticas
apoptticas recentes (grnulos
com cromatina condensada e
fragmentada) a clula j entrou
em apoptose
I- viveis no apoptticas
comearam a perder a integridade
de membrana.
J- livres de cromatina
Apoptose
Apoptose
Sinais bioqumicos das clulas apoptticas
Endonuclease cliva DNA cromossmico em diferentes
tamanhos que podem ser reconhecidos por eletroforese;
tcnica de TUNEL Enzima desoxinucleotidil-transferase
terminal TdT adiciona cadeias do desoxinucleotdeo (dUTP)
marcado s extremidades 3-OH
fosfatidilserina exposta na superfcie celular (marcador de
apoptose) que se liga a anexina V/FITC (fluorescente)
Sinalizao para o macrfago fagocitar clula e inibindo o
processo de inflamao e fabricao de citocinas.
Apoptose
Eletroforese demonstrando o
resultado da ao das endonucleases.
TUNEL- Enzima desoxinucleotidil-
transferase terminal TdT adiciona
cadeias do desoxinucleotdeo (dUTP)
marcado s extremidades 3-OH
Apoptose
Apoptose depende de uma
cascata proteoltica
intracelular mediada por
caspases
Pr-caspases iniciadoras Pr-caspases executoras
Caspases
Existem precursores inativos (pr-caspases) ques so ativados para
produzir alteraes morfolgicas diretas ou indiretamente durante
a apoptose;

Iniciadoras ativadas por sinal de morte, ativam as caspases
executoras que medeiam a destruio celular diretamente.
O processo de morte celular termina quando as caspases
executoras ativam a maquinaria de degradao do DNA. As
caspases clivam duas enzimas de reparo de DNA a poli-ADP-ribose
e a Protena quinase de DNA e ento ocorre a fragmentao
ilimitada da cromatina.


Apoptose
Pr-caspase Iniciadoras: 8, 9 e 10 com longo domnio CARD
domnio de recrutamento de caspases

Pr-caspases Executoras: 3, 6 e 7 com pr-domnios N- terminal
curto denominados DED domnio efetor de morte.

A ativao das caspases ocorre quando uma molcula reguladora
especfica para caspases se liga no domnio CARD/DED. Essa
ativao pode fugir do controle e destruir a clula.
Para impedir que isso ocorra, inibidores de apoptose esto
disponveis para interagir com moduladores de morte celular,
impedindo a ativao no regulada das caspases.
Apoptose
Apoptose
Via das caspases (irreversvel)
Apoptose
Como a cascata
de caspases se
inicia?
Via extrnseca Via intrnseca
Apoptose
Via extrnseca
Protenas de sinalizao extracelular ligam-se a
receptores de morte na superfcie celular disparando
esta via;
Os receptores so homotrmeros e pertencem a
famlia dos receptores do fator de necrose tumoral
(TNF).
Apoptose
Complexo sinalizador
indutor de morte
FADD- Domnio de
morte associado a Fas
Clivagem e ativao das pr-caspases 8 e 10
Apoptose
Via intrnseca
As clulas tambm podem ativar programas de
apoptose de dentro da clula, em resposta a injria ou
outros estresses como quebra de DNA, falta de
oxignio, nutrientes, sinais de sobrevivncia
extracelulares;
Depende da liberao de protenas mitocondriais
que residem no espao intermembranas dessas
organelas;
Algumas das protenas liberadas ativam a cascata
proteoltica da caspase no citoplasma, levando a
apoptose.
Apoptose
Apoptose
Apoptose
Algumas vezes as clulas
devem recrutar a via
intrnseca para amplificar
o sinal apopttico...
Ativao de protenas Bcl2
Apoptose
Via Bcl2
Bcl2 serve para assegurar que clulas matem-se apenas
quando for apropriado;
Regulam a via intrnseca pelo controle da liberao de
citocromo c
Algumas Bcl2 so proapoptticas promovem apoptose pelo
aumento da liberao de protenas, outras so antiapoptticas e
inibem a apoptose bloqueando essa liberao.
Apoptose
Apoptose
Apoptose
Fatores de sobrevivncia
podem inibir a apoptose
de 3 maneiras:
Mecanismos de Inibio da
Apoptose
Apoptose
Bad pro
Bcl2 anti
IAPs protenas
inibidoras de
apoptose
Outras funes da Apoptose
No embrio:
Formao dos dedos das mos e dos ps do feto requer a
eliminao por apoptose do tecido localizado entre eles;
Na formao do sistema nervoso, um excesso de neurnios sero
eliminados mais tarde por apoptose, isso necessrio para que as
conexes sinapticas ocorram.
Granulcitos maduros no sangue perifrico tem um tempo de vida de 1 a 2 dias
antes de sofrer apoptose;
Seleo clonal das clulas T no timo (para eliminar linfcitos auto-reativos de
modo a evitar doenas auto-imunes;
Respostas imunolgicas celulares envolvem apoptose.
Apoptose
Sndrome auto-imune linfoproliferativa
Mutaes nos genes do receptor Fas, do ligante
de Fas ou da caspase 10;
Caracterizada pelo acmulo de linfcitos
maduros nos linfonodos e no bao causando
linfoadenopatia (aumento dos linfonodos) e
esplenomegalia (aumento do tamanho do bao)
Apoptose
Apoptose
Doenas Neurolgicas
Exemplos do mecanismo de morte celular
Acidente Vascular enceflico isqumico pode causar doena
neurolgica aguda
Necrose e ativao da caspase I Leso grave
Apoptose na periferia
Leso no grave
Circulao sangunea colateral
Inibidores de caspases podem reduzir o dano tecidual levando a uma melhora neurolgica.
O que importante...
Compreender a importncia da apoptose e seus
sinais intra, extracelulares e bioqumicos;
Reconhecer a ao das vias intrnseca e extrnseca
para promoo de apoptose;
Conhecer a ao da famlia das Bcl2
proapoptticas e antiapoptticas;
Conhecer as formas de inibio da apoptose por
fatores de sobrevivncia.
Pergunta-se
Explique detalhadamente os mecanismos de
apoptose pela via intrnseca e extrnseca.
elisamaazevedo@gmail.com