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METODOS DE ANALISIS DE SEMILLAS

I. INTRODUCCION
A fin de minimizar los riesgos que implica utilizar semillas que no
tienen una adecuada capacidad para producir buenas cosechas, es de
fundamental import ancia realizar un control de calidad y dentro de este se
ven involucrados los diferentes mt odos tiles y confiables para
det erminar las principales caractersticas de una semilla de alta calidad, es
decir cuando es pura, tiene germinacin, alto vigor, est libre de
enfermedades y tiene buena confirmacin.
st a prctica es utilizada en forma cada vez ms frecuente, ya que
en general y por diversas razones, en t odo los cultivos en que se
requieren semillas se producen problemas que afectan tant o a product os
de semillas como a tcnicas y agricultores.
st e aspect o adquiere mayor relevancia an, al considerar que la
comercializacin de semilla en el pas y en el e!terior es cada vez ms
e!igente en la calidad demandada.
s important e destacar que un oport uno cont rol de calidad de la
semilla repercutir directamente en la produccin y es de conocimiento
que el valor de un anlisis de semilla tiene una incidencia ba"sima en los
cost os direct os comparando con los futuros resultados que se obtendrn.
n el presente t raba" o se muestran principales t cnicas de anlisis
de semillas como til herramienta en el cont rol de calidad para la t oma de
decisiones inmediatas, a mediano y a largo plazo.
II. OBJETIVO
#ar a conocer la import ancia de aplicar los mtodos de anlisis para
determinar semillas de calidad.
$resentar las diferentes tcnicas especificas utilizadas en los
laborat ori os de anlisis de semillas, a fin de determinar los diversos
atribut os de estas, como la calidad gentica, fisiologa, fsica y
sanitaria.
$resentar ensayos de investigacin, donde se han empleado estas
t cnicas a fin de respaldar su importancia.
III. ASPECTOS IMPORTANTES EN LA GERMINACIN
PROCESO DE GERMINACION
s una secuencia de event os que dan como resultado la
t ransformacin de un embrin en estado quiescente en un plntula.
n el proceso de la germinacin puede dividirse arbitrariamente en
varios event os% &'( mbibin ) el proceso fsico de absorcin de agua. &*(
)Activacin ) la puesta en marcha de la maquinaria de sntesis y
degradacin. &+( #ivisin y elongacin celular &,( -uptura de la cubierta
seminal por el embrin. &.( st ablecimiento de la plntula como ente
aut nomo. /os efect os de esta charla nos limitaremos a considerar las
relaciones del proceso de germinacin con los factores ambientales que
cont rolan la misma.
REQUISITOS PARA QUE OCURRA LA GERMINACIN
Asumiendo que no e!isten mecanismos de latencia que impidan
germinacin, se requiere de la concurrencia de varios factores para que el
embrin cont enido en la semilla reinicie su desarrollo.
A. Absorcin d !"#!
mbibicin% s un caso especial de un fenmeno fsico denominado
difusin, y como t al, se da s e!iste una gradiente de difusin. 0e
caracteriza por un aument o de volumen de la sustancia o cuerpo que
embibe y est ntimamente relacionada con las propiedades de materiales
coloidales.
/as partculas coloidales en al semilla forman una red miscelar,
medianamente rgida, en la que cargas elct ricas de signos opuest os estn
orientadas en una manera definida. 1uando el agua penet ra en la semilla,
una fraccin ocupa los espacios libres y ot ra se une qumicamente a las
sustancias de que estn compuestas las semillas.
l volumen de las semillas aumenta con la embibicin, pero el
volumen final del sistema &semilla 2 agua( es menor que la suma de los
volmenes individuales iniciales de semillas y agua3 esta contraccin del
sistema es prueba de la ocupacin de los espacios libres dent ro de la
semilla y de la absorcin de agua en la matriz coloidal.
/a tasa de embibicin se ve afectada por varios fact ores que
pueden det erminar la respuesta a germinacin de las semillas.
$. Pr%!bi&id!d d &! c#bir'! s%in!&
l caso ms evidente es el de semillas cuyas cubiertas son t ot al )
mente impermeables al agua, e". semillas duras de leguminosas, de
algodn, etc. 0in embargo, tambin se dan e"emplos en que la pene )
t racin de agua es restringida y no impedida.
(. Concn'r!cin d& !"#!
n general, la embibicin es ms rpida cuando la semilla est en
cont act o con agua pura que cuando el agua contiene solutos. l principio
que opera es el de presin de difusin del agua. #e aqu que las semillas
absorben agua ms lentamente en suelos secos o salinos, no solo porque
hay menos agua, sino que t ambin es causa de una menor presin de
difusin del agua.
). T%*r!'#r!
l calor es una forma de energa. 1uando se calienta el agua que
est en cont act o con la semilla, parte de la energa suministrada se
invierte en aumentar la difusin de agua, por lo tant o, aumenta la tasa de
absorcin de agua, dentro de ciert os lmites. 0e ha encont rado
e!perimentalmente que un aument o de '451 en la t emperat ura duplica la
tasa de absorcin al inicio del proceso de embibicin.
+. Prsin ,idros'-'ic!
1onforme el agua penetra en las semillas, sta provoca un aument o
de volumen y presin en las membranas celulares. 6gualmente, las
membranas celulares oponen resistencia de igual magnitud, la que resulta
en un aument o de la presin de difusin del agua interna, aumentando su
difusin hacia afuera y por lo tant o disminuyendo la tasa de absorcin de
la semilla.
.. Ar! d &! s%i&&! n con'!c'o con !"#!
1onsiderando ot ros fact ores constantes, la t asa de absorcin de
agua es proporcional a la magnitud del rea de las semillas en contact o
con el agua. n algunas clases de semilla ciertas regiones son ms
permeables que ot ras. "emplo% el hilo en las semillas de leguminosas.
/. 0#r1!s in'r%o&c#&!rs
0on en general fuerzas de naturaleza elctrica. 1ualquier aument o
en estas fuerzas disminuye la presin de difusin del agua y por tant o la
tasa de absorcin de las semillas. l efect o de estas fuerzas es ms
evidente en el suelo. 0uelos de ba" o cont enido de agua su"etan
tenazmente la humedad mediante fuerzas intermoleculares.
2. Di3rnci!s n'r s*cis
Algunas especies absorben agua ms rpidamente que ot ras.
"emplo% semilla de algodn absorbe agua ms lentamente que la semilla
de fri"ol.
4. Absorcin di3rnci!& *or r"!nos d &! s%i&&!
/as semillas estn compuestas de diversos rganos. st os se
pueden agrupar, arbitrariamente en las siguientes cat egoras%
a( 1ubierta seminal &t esta, pericarpo, etc. (
b( 7e"idos nut ritivos de reserva &cotiledones, endosperma, perisperma,
et c. (
c( "e embrionario &compuest o de radcula, plmula y estructuras
asociadas(.
st os componentes absorben agua a diferentes velocidades y
magnitudes. 0e ha hallado que en semillas de algodn, maz y fri"ol la
m!ima hidratacin ocurre en las primeras *, horas de embibicin, y que%
&a( la cubierta seminal funciona como rgano de t ransporte de agua, con
su curva caracterstica de absorcin3 &b( el endosperma y los cotledones
absorben agua lentamente3 actan como reservo ros de agua y no como
estruct uras activas de absorcin3 &c( el e"e embrionario absorbe agua
rpida y continuamente.
Con'nido d ,#%d!d %5ni%o *!r! 6# oc#rr! "r%in!cin.
1ada especie necesita absorber un ciert o mnimo de humedad para
que ocurra germinacin.
0e ha encont rado que las semillas con alto cont enido de prot ena
necesitan un cont enido de humedad mayor que semillas con niveles ba"os
de prot ena3 est o se puede observar en los siguientes e"emplos &7abla l(.
T!b&! $. 1ontenido de humedad necesario para que ocurra la
germinacin de algunas semillas de especies cultivadas.
1ultivo 1ontenido de humedad
8az &9ea mays( +4. .:
0oya &;lycine ma!( .4. 4:
-emolacha &<et a ssp. ( +'. 4:
Algodn &;ossypium spp. ( .4)... 4:
=iguerilla &-icinus comunis( +*)+>. 4:
Arroz &?ryza sativa( +*)+.. 4:
Avena &Avena sativa( +*)+>. 4:
8an &Arachis hypogaea( .4)... 4:
Adaptado de <urc@, <. and A. 1. #elouche. 'B.B. Cater
absorpti on by seeds. $roc. A?0A ,B%',*
1onviene aclarar que la relacin suelo)semilla en lo que a absorcin
de agua se refiere es un tant o ms complicada. /a evidencia e!perimentar
enseDa que el hecho de que la semilla necesite un cont enido de humedad
alt o para germinar no implica que su germinacin se ret arde por esa
condicin. $or regla general, la velocidad de emergencia se reduce
conforme la humedad del suelo se acerca al punt o de marchitez3 en
algunas especies tambin se reduce el porcenta"e de emergencia en
condiciones de escasa humedad del suelo.
l e!ceso de agua pude ser tan pernicioso para la semilla como la
carencia. 0 el nivel de agua llega a e!cluir o restringir la penet racin de
o!geno a la semilla, la germinacin se retarda o no ocurre, en un gran
nmero de especies. n ot ras no se han observado daDos. "emplo, la
germinacin de semilla de arroz se puede acelerar por inmersin3 por el
cont rario, la inmersin de semilla de fri"ol por perodos relativamente
cort os puede causar daDos reversos.
Eact ores miscelneos que afectan la absorcin de agua.
ntre los ms import antes se cuentan%
$. M!d#r1. 0emilla de maz cosechada en estado de FlecheF absorbe
agua ms rpidamente que semillas en estados avanzados de
madurez.
(. Co%*osicin Q#5%ic! d &! s%i&&!. 0emillas con alto contenido
de prot ena absorben ms volumen de agua y ms rpidamente que
semillas almidonosas. 0emillas con altos cont enidos de aceite, pero
de ba"o cont enido de prot ena se comportan parecido a semillas
almidonosas.
). Ed!d. 1onforme avanzan en edad, las semillas tienden a absorber
agua ms rpidamente. st e fenmeno se considera asociado a la
prdida de integridad de las membranas celulares.
B. E3c'o d &! '%*r!'#r!
l proceso de germinacin, como t odos los procesos fisiolgicos
est afectado por la t emperat ura. $ara cada clase de semillas e!iste una
temperatura mnima y una m!ima en la que ocurre la germinacin.
Adems, dent ro del rango temperatura mnima)m!ima, e!iste un punt o en
el que se obtiene m!ima germinacin y sta ocurre ms rpidamente3 este
punt o corresponde a la temperatura ptima. st as temperaturas se
conocen como las t emperat uras cardinales de germinacin.
-ango de temperaturas de germinacin
$. T%*r!'#r! %5ni%!. $or deba"o de esta t emperat ura los
procesos de germinacin no se pueden det ectar visualmente,
dentro de un perodo razonable de tiempo.
<a"as temperaturas pero por encima del punt o de congelacin
no son letales a las semillas.
(. T%*r!'#r! %-7i%!. s la temperatura por encima de la
cual los mecanismos de germinacin no operan y por lo tant o
no se da crecimiento del embrin. n cont raste con la
temperatura mnima, la m!ima es fcil de determinar ya que
temperaturas superiores a la m!ima causan daDos
irreversibles a las semillas &e!cepcin a esta regla son las
semillas que entran en latencia a altas t emperat uras(.
). T%*r!'#r! *'i%!. sta se puede definir como la
temperatura a la cual se da el porcenta"e m!imo de
germinacin en un mnimo de tiempo.
0i representamos el rango de t emperat uras en que ocurre
germinacin como lnea.
8nima ptima m!ima
se pueden hacer varias observaciones%
a. n el rango temperatura mnima)ptima los porcenta"es de
germinacin no son sustancialmente diferentes &siempre que el
factor tiempo no sea limitante(, pero la germinacin ocurre ms
rpida mente conforme nos desplazamos haca la t emperat ura
ptima.
b. 1onsiderando el segment o t emperat ura ptima)m!ima, los
porcenta"es de germinacin tienden a disminuir conforme nos
desplazamos haca la temperatura m!ima3 en algunas especies
puede ocurrir que a t emperat uras superiores a la ptima las semillas
que s germinan lo hagan ms rpidamente que a la temperatura
ptima. 0in embargo, la velocidad de germinacin tambin
disminuye en las cercanas de la m!ima.
7emperaturas cardinales de algunas semillas
1ultivo 7emperatura 7emperatura 7emperatura
mnima &51( ptima &51( m!ima &51(
Arroz '4)'* +4)+G ,4),*
8az H)'4 +*)+. ,4),,
7rigo +). '.)+' +4),+
7omate *4 *4)+. +.),4
0oya H +* ,4
Condicin 3isio&"ic! d &! s%i&&!
A menudo el efect o de la t emperat ura sobre la germinacin est
ntima mente relacionada con la condicin fisiolgica de la semilla.
0emilla recin cosechada presenta requerimientos muy especficos de
temperatura para poder germinar. $or e"emplo, semilla de arroz recin
colectada germina me"or a +*51 que a *.51. st e fenmeno est
relacionado con latencia. 1onforme se pierde la latencia, el ptimo de
temperatura puede variar hacia t emperat uras ms altas o ms ba"as y el
rango de temperaturas dent ro de las que ocurre germinacin se ampla.
1on el det erioro, las semillas tienden a necesitar temperaturas especficas
para que ocurra germinacin.
T%*r!'#r!s !&'rn!s
Aquellos de ustedes que estn familiarizados con las pruebas de
germinacin, saben que semillas de muchas especies se prueban
alternando ba"as y altas temperaturas, como por e"emplo *4)+451 > *.)
+451, et c. 0e acostumbra mantener la t emperat ura ms ba"a durante '>
horas y la alta durante H horas.
st a alternacin de t emperat uras pret ende duplicar las
fluctuaciones diurnas de t emperat ura que se dan en la naturaleza.
In'r!ccions
/os efect os de la t emperat ura sobre la germinacin tienen
caractersticas muy especiales cuando se t rat a de semillas latentes. /a
germinacin de algunas semillas me"ora notablemente ba"o condiciones de
ba"a t emperat ura &recordemos el mtodo de romper latencia denominado
estratificacin(3 ot ras semillas responden favorablemente a t rat amientos
con temperaturas altas &"emplo% arroz(.
Algunas semillas que necesitan luz para germinar ofrecen
respuestas interesantes a la t emperat ura. $or e"emplo, la semilla de
lechuga germina en la oscuridad a t emperat uras menores de *451, pero
necesitan de luz para germinar a temperaturas por arriba de *451.
/as giberelinas, hormonas vegetales de mucha import ancia en los
procesos de germinacin, e!tiende el rango de t emperat uras en la que
puede ocurrir la germinacin de algunas especies3 la semilla de llantn
&$lantago spp. ( germina ba" o luz u oscuridad a *451. A t emperat uras
superiores a *451 necesita de luz para germinar, pero a +451 se embibe la
germinacin casi t ot almente, an ba"o condiciones de luz. 0i la semilla se
t rat a con una disolucin de cido giberlico &*44).44 ppm( se rest ablece
la capacidad germinativa a +451, con o sin la presencia de luz.
C. Prsnci! d o75"no
st e es, quizs, el requisito de germinacin ms olvidado por los
analistas de semillas. ;eneralmente se da por un hecho que la atmsfera
suple t odas las necesidades para la germinacin de las semillas. 0in
embargo, no se debe olvidar que entre el o!geno y el agua se establece
un proceso de competencia. sta relacin competitiva se origina de la
ba"a solubilidad del o!geno en agua y de las diferencias tan not ables que
e!isten entre los coeficientes de difusin del o!geno en el agua y en el
aire. /a actividad respirat oria de la semilla puede cont rolarse por
velocidad con que el o!geno llega a los mitocondrias de las clulas
fisiolgicamente activas de las semillas. l efecto combinado de
solubilidad y difusibilidad reduce la tasa de difusin de o!geno de 4. *4.
mlIcmJ ! seg. >. G ! '4
) G
mlIcmJ ! seg. #e lo anterior es fcil deducir que
el e!ceso de humedad en el sust rat o de germinacin &o en el suelo( reduce
not ablemente la disponibilidad de o!geno a las semillas en germinacin.
/as necesidades de o!geno cambian con las diferentes fases de
germinacin. 0e ha encont rado que la semilla de lechuga es indiferente a
la presencia o ausencia de o!geno durante la embibicin, pero requiere
de o!geno durante la emergencia de la radcula. =allazgos similares se
han hecho en semilla de maz, en la que la emergencia de la radcula
puede ocurrir dent ro de un rango muy amplio de concentraciones de
o!geno. 0in embargo a concent raciones de o!geno menores que la del
aire el desarrollo y crecimiento de la radcula se reduce drsticamente.
D. L#1
/a e!posicin a la luz estimula la germinacin de semillas de
muchas especies silvestres y agrcolas. n la gran mayora de los casos se
estimula la germinacin mediante e!posicin a luz ro"a &>>4 nm K >>44
A5( y se inhibe con luz de G+4 nm de longitud de onda. n esta reaccin
a condiciones lumincas est involucrado el fitocromo. La habamos
mencionado que en la respuesta a la luz influye t ambin la temperatura de
germinacin. Aunque est fuera del lmite de esta charla discutir ms
profundamente las relaciones ent re luz y germinacin, vale la pena
mencionar algunas observaciones que pueden revestir carcter prctico.
Algunas semillas que normalmente no requieren de luz para germinar,
e"emplo, t omat e y pepino, pueden t ornarse fot osensibles si se e!ponen a
luz de G+4 nm. Mna vez que la germinacin haya sido inhibida por
e!posicin a esa calidad de luz, el efecto inhibitorio puede revertirse
mediante e!posicin a luz de >>4 nm.
n un gran nmero de especies la necesidad por luz puede ser
reemplazada por t rat amient os con cido giberlco.
LATENCIA
=asta el momento hemos descrito las condiciones ambientales
necesarias para que ocurra la germinacin de las semillas. A menudo
sucede que algunas semillas rodeadas de lo que podra llamarse un
ambiente ptimo para germinacin, t emperat ura y agua favorables, buena
disponibilidad de o!geno, no logran germinar. ste fenmeno se
denomina latencia. #ebe distinguirse este trmino del que se utiliza para
describir semillas que no ger minan por carencia de condiciones
ambientales adecuadas3 estas semillas se denominan quiescentes.
TIPOS DE LATENCIA
$. In%!d#r1 d& %brin
st e tipo de latencia comprende casos que van desde semillas con
embriones t ot almente indiferenciados hasta ot ras con embriones
diferenciados pero que continan su desarrollo despus de que la semilla
se desprende de la planta madre. #e modo que en algunos casos es difcil
det erminar si el desarrollo posterior del embrin corresponde a etapas
finales de maduracin de la semilla o a la fase inicial de germinacin. $or
e"emplo, las semillas del fresno &Erannus spp. ( estn morfolgicamente
maduras al desprenderse de la planta original, y sin embargo contina su
desarrollo hasta aumentar al doble su t amaDo antes de que sea capaz de
embibir agua.
(. I%*r%!bi&id!d d &! c#bir'! s%in!&
n la "erga de los analistas, las semillas con cubierta seminal
impermeable al agua se denominan Fsemillas durasF. st e tipo de latencia
es muy comn en la familia /eguminosae, pero se da tambin en
8alvaceae, 1henopodiaceae, /ilaceae y 0olanaceae.
/a test a act a como barrera al agua3 la simple rupt ura de cubierta
permite la penet racin del agua y la germinacin ocurre sin
cont ratiempos. st o se puede lograr manualmente o por medio mecnicos
o qumicos.
). Rsis'nci! %c-nic! !& ds!rro&&o d& %brin.
l origen de este tipo de latencia, impuesta por resistencia
mecnica de la cubierta seminal al crecimiento del embrin, hoy da se
considera casi obsolet o. n algunas especies de -osaceae se ha
encont rado que aunque es ciert o que se requiere de grandes presiones
para romper el duro endocarpo que envuelve a la semilla, tambin
cont ribuye a imponer el estado de latencia la presencia de algunos
inhbidores endgenos.
+. B!8! *r%!bi&id!d ! "!ss d &! c#bir'! s%in!&.
/a germinacin de muchas especies de ;ramneae se favorece
daDando la cubierta seminal mediante t rat amiento con cido o
escarificacin mecnica. st e tipo de latencia es frecuente en arroz y en
semilla de muchas gramneas forra"eras.
.. L!'nci! d& %brin
!9 Ncsid!d d &#1.
La hemos mencionado que las semillas algunas especies
necesit an luz para germinar. nt re estas se cuentan las semillas de
tabaco y lechuga. stas semillas slo responden al estmulo
lumnico cuando estn embebidas de agua, y la respuesta est
afectada por la presencia de la cubierta seminal y de la t emperat ura
de germinacin. 0e ha encontrado que si los embriones se re )
mueven de la semilla, sin causarles daDo pueden germinar en la
oscuridad.
b9 Ncsid!d d n3ri!%in'o
/as semillas de algunas especies requieren de t rat amient os a
ba"as t emperat uras &.)'451( para poder germinar. n algunas
especies la necesidad de t rat amientos a ba"a t emperat ura se puede
sustituir con trat amientos con cido giberlico.
st e tipo de latencia est asociado con la presencia de inhibi )
dores de germinacin yI o con niveles endgenos insuficientes para
promover germinacin de cido giberlico. l inhibidor de
germinacin ms poderoso que se conoce es el cido absccico,
pero e!isten ot ros como la cumarina, el cido cafeico, el cido
feralico, et c. . /a inhibicin establecida por el cido absccico solo
puede revestirse con la aplicacin de ctocininas tales como la
Ninetina y la zeatna. l bloqueo establecido por los ot ros
inhibidores se puede neut ralizar con la aplicacin de cido
giberlico. /a aplicacin de au!inas como cido indolacitico son
inefectivas para neut ralizar el efect o de los inhibidores de gercin.
/os tipos de latencia mencionados no son mutuamente
e!cluyentes3 algunas especies presentan dos o ms tipos de
latencia. Afortunadamente est os casos no se dan en las especies de
valor agrcola.
/. L!'nci! sc#nd!ri!
Algunos tipos de semillas no latentes, si se colocan en un ambiente
de germinacin desfavorable, pueden entrar en una fase de latencia o
inducida. $or e"emplo, algunas variedades de lechuga que requieren luz
para germinar, ent ran en estado de latencia y se convierten en
fot osensibles si se les coloca a embibir agua a +.51. st a latencia
inducida puede revertirse mediante aplicacin de cido giberlico.
IV. CARACTERISTICAS DEL MUESTREO DE SEMILLAS
l muest ro de semillas es de fundamental import ancia. 0e denomina
lote a una cantidad especifica de semillas, identificables fsicamente.
s necesario que la muest ra enviada al laborat orio sea
representativa del lote complet o.
/a t oma correcta de muest ras se basa en la e!traccin de muestras
elementales, cuyo nmero depender del t amaDo y peso del lote &1uadro(.
/as muestras elementales debern ser mezcladas para conformar una
muestra global, de un peso mnimo, la que deber ser enviada al
laborat orio bien identificada.
l tamaDo de la muestra obtenida deber ser de por lo menos
'. 444gr. para porot o, so"a, maz y ot ras especies con semillas de tamaDo
similar3 de .44gr. en el caso de t rigo, avena y ot ras semillas de tamaDo
similar y entre '.4 a *.4gr. para semillas ms chicas.
/ast omas se deben realizar en los niveles superior, medio e inferior
de la estiba, vagn, contenedor, et c.
C#!dro
0rc#nci! d %#s'ro
/?70 7A8AO? #/ /?7 Po. # 7?8A0
GRANEL hasta .44 @g
de .4' a +. 444 @g
de +. 44' a *. 444 @g
de *4. 44' a ms
' cI+44 @g &. ms(
* cI.44 @g &'4 ms(
+ cIG44 @g &,4 ms(
BOLSAS hasta .
de > a +4
de +' a ,44
' de cada bolsa
. &' de cada + bolsas(
'4 &' de cada '4 bolsas(
de ,4' a ms H4 &' de cada G bolsas(
V. ANALISIS DE LAS PRINCIPALES CARACTERISTICAS DE
CALIDAD DE SEMILLA
l anlisis de semilla brinda informacin y establece un estndar
para determinar el nivel de calidad.
Mn lote de alta calidad esta en funcin de las siguientes
caractersticas que son medidas en los laborat orios de diferentes
compaDas%
1. ;erminacin &viabilidad(
2. $ureza
3. Qigor
4. 0anidad
.. $ An-&isis d &! :i!bi&id!d
; Pr#b! s'-nd!r d "r%in!cin
n una prueba de germinacin estndar, las semillas se colocan en
condiciones ideales de luz y temperatura para inducir la germinacin. /as
condiciones requeridas para llenar los requisitos legales se especifican en
las normas para ensaye de semillas, las cuales pueden incluir tipos de
prueba, condiciones ambientales y duracin de las pruebas.
n los laborat ori os para ensaye de semillas se emplean varias
tcnicas para germinar las semillas. /as semillas pequeDas se colocan en
chat olas de germinacin &que no sean de acero galvanizado, que contiene
sales de zinc t !icas(. 7ambin resultan tiles las ca"as de plstico, las
ca"as de cart n encerado o las de $etri cubiertas. l papel absorbente se
cort a en dos partes pequeDas &secantes( y las semillas pequeDas se
colocan encima o entre dos capas. ?t ros medios para la germinacin son
el algodn absorbente, t oallas de papel, papel filtro &cinco capas(, y para
semillas grandes, arena, vermiculita, perlita o tierra &'>mm(. /os
recipientes se colocan en condiciones especiales en las cuales controlan
temperatura, humedad y luz. $ara evitar el desarrollo de
microorganismos, t odo el material y equipo debe conservarse
escrupulosamente limpio, esterilizado cuando sea posible y con la
cantidad de agua cuidadosamente regulada. Po se debe formar una
pelcula de agua al alrededor de las semillas, ni el medio de germinacin
debe estar t an hmedo que aparezca una pelcula de agua cuando se
aprieta con un dedo. $ara evitar el secado, la humedad en el germinador
debe ser de B4: o ms. /os recipientes con arena deben conservarse muy
bien cerrados. Po se debe agregar agua durante la prueba.
$ara pruebas de granos de cereales es comn usar el sistemas de
t oallas enrolladas. 0e doblan sobre las semillas varias capas de t oallas de
papel mo"adas &de unos *. H ! +. > !m(, luego se enrollan en cilindros y se
coloca verticalmente en una germinadora.
Mna prueba de germinacin de ordinario dura de una a cuat ro
semanas, pero en semillas de rboles, de ba"a germinacin y con letargo,
puede durar hasta unos t res meses. n la primera semana se puede hacer
una Rprimera cuentaS y las semillas germinadas se descart an para hacer
despus una cuenta formal. Al final de la prueba las semillas se dividen en
&a( plntulas normales, &b( semillas duras, &c( semillas en letargo y &d(
plntulas anormales ms semillas muertas o en putrefaccin.
;eneralmente, una plntula normal debe t ener una raz y un tallo bien
desarrollados, aunque el criterio de Rplntulas normalesS vara con la
especie de semilla. /as Rplntulas anormalesS pueden ser causadas por la
edad de la semilla o por malas condiciones de almacenamiento3 daDos por
insectos, enfermedades o mecnicos, sobredosis de fungicidas, daDo por
heladas, deficiencia de minerales y &manganeso y boro en chcharo y
fri"ol( o materiales t !icos presentes a veces en las charolas metlicas de
germinacin, en el substrat o o en el agua de las caDeras. 1ualquier
semilla que no germine se debe e!aminar para det erminar la posible razn
de ello. /as Rsemillas durasS no haban absorbido agua. /as semillas en
letargo son aquellas macizas, hinchadas y libres de mohos, pero que
muestran un brotamiento irregular o nulo.
; Pr#b! con %brions s*!r!dos
/a prueba con embriones separados se aplica para det erminar la
viabilidad de semillas de rboles y arbust os leDosos cuyos embriones
necesitan largos periodos de postmaduracin antes de que pueda
efectuarse la verdadera germinacin. n esta prueba se separa al embrin
de las semillas y se hace germinar solo.
/as semillas se remo"an con algunos de los mtodos siguientes
durante uno o cuat ro das, hasta que estn hinchados por complet o% &a( en
agua que corra lentamente, &b( en agua en reposo a menos de '.513 o
&c(en agua en reposo a *451 haciendo cuando menos dos cambios de agua
al da.
n la preparacin de las semillas para la separacin de los
embriones resulta satisfactorio almacenarlas durante t res das a dos
semanas en turba hmeda y a temperatura fra. /a separacin del embrin
debe hacerse con t odo cuidado para evitar daDarlo. 1uando e!istan
cubiertas duras, como el endocarpo de las semillas de los frutales de
hueso, deben quitarse primero.
/as cubiertas humedecidas de las semillas se cortan con una ho"a de
afeitar o una nava"a afilados, en condiciones de limpieza, pero no
estriles, de preferencia deba"o de un vidrio. l embrin se separa con
t odo cuidado. 0i hay presente un endospermo grande, se pueden cort ar
las cubiertas de las semillas y cubrir las semillas con agua. #espus de
alrededor de media hora, flotarn los embriones o se pueden separar con
facilidad.
/os procedimientos para poner a germinar a los embriones
separados son similares a los que se utilizan para semillas intactas,
utilizando ca"as de $etri con un substrat o hmedo, como papel secante o
papel filtro. /os embriones se colocan obre el papel filtro de manera que
no se t oquen. /os recipientes se colocan en luz, a temperatura de 'H a
**51. 1on t emperat uras superiores, se puedan desarrollar mohos que
interfieren con la prueba. l tiempo necesario para la prueba vara de tres
das a t res semanas.
/os embriones no viables se t ornan suaves, de color pardo y se
pudren en un plazo de dos a diez das. /os embriones viables permanecen
macizos y muest ran alguna indicacin de viabilidad, dependiendo de la
especie. /os tipos de respuesta que se presentan incluyen la apert ura de
los cotiledones, desarrollo de la clorofila y el crecimiento de la radcula y
de la plmula. /a rapidez y el grado de desarrollo dan cierta indicacin
del vigor de las semillas.
; Pr#b! d :i!bi&id!d #'i&i1!ndo ''r!1o&io
Ob8'o
l ob"et o de esta prctica es hacer una estimacin rpida de la
capacidad germinativa de un lote de semilla.
M!'ri!&s < M='odos
$9 So&#cions
$repare una solucin de t et razolio al ': pIv, disolviendo . g de la
sal en .44 ml de agua destilada. l p= de la solucin debe estar
comprendido ent re > y H, para lograr una tensin ptima. 0 el p= final
de la solucin es , o menos, ent onces agregue a la solucin de tet razolo
'. H'> g de N=
*
$?
,
y +. .>+ g de Pa *=$?
,
*=
*
?. nvase la solucin
restant e en una bot ella mbar y en un sitio oscuro y fresco.
(9 Pr*!r!cin d &!s s%i&&!s *!r! & ns!<o
/a interpret acin de los resultados se facilita cuando la semilla se
ablanda en agua antes de seccionarla o punzarla &para facilitar la
penet racin del reactivo(.
l ablandamiento se puede lograr colocando las semillas sobre
t oallas hmedas de papel &'*)'> horas( o colocndolas en un bea@er con
agua durante +), horas a +451.
)9 Pr*!r!cin d &! s%i&&! *!r! 'incin
!. A*&ic!b& ! s%i&&!s d !rro1> !:n!> sor"o < %!51.
=aga un cort e a lo largo del e"e longitudinal de la semilla con
una nava"a afilada. s conveniente que remueva las semillas
del papel t oalla una a una para evitar que sequen y
endurezcan. Mna vez que haya hecho el corte a '44 semillas,
distribyala en sendos platos pet ri y cbralos con la solucin
de t et razolio al 4. ':. 1oloque las muestras en una cmara de
incubacin a ,.T 1 durante dos horas.
b. A*&ic!b& ! s%i&&! d so<! < 3ri8o&.
/a semilla de est os cultivos, previamente ablandada en agua
puede ser colocada en plat os pet ri y cubrirse con la solucin
de tet razolio. /a remocin de la cubierta seminal, aunque
disminuye el tiempo requerido para la tincin, no es requisito
indispensable. #istribuya la muest ra de '44 semillas en
sendos platos pet ri. 1ubra con la solucin de tet razolio al
': y colquelas en una cmara de incubacin a ,.51 durante
dos horas.
c. A*&ic!b& ! c!3=.
/a semilla de este cultivo debe ablandarse en agua por un
perodo no menor de G* horas.
-emueva el pericarpio y distribuya las '44 semillas en sendos
platos pet ri y cbralos con la solucin de 79 al ':. 1oloque
los platos petri en una cmara incubadora a ,. T 1 por espacio
de '> horas.
In'r*r'!cin d &os rs#&'!dos
/a interpret acin inteligente de los resultados obtenidos depende
de &')( conocimiento de las est ructuras de la semilla, &*)( conocimiento
de los mecanismos de la prueba y sus limitaciones, &+)( combinacin de
las caractersticas de la tincin obt enida con ot ros rasgos visibles de
aspect os de calidad, &,)( e!periencia en efectuar ensayos comparativos de
germinacin.
#ebe tenerse en consideracin que el te"ido embrionario sano
absorbe el 79 lentamente y por lo tant o el color desarrollado es ro" o
plido. 7e"idos embrionarios afectados por enve"ecimiento, congelacin
o daDo mecnico tiende a t eDirse de ro" o intenso. /a presencia de te"ido
firme y sin tincin es refle"o de la no penet racin de la solucin de 79 y
no necesariamente te"ido muert o. 1ambios bruscos de color ent re t e"idos
firmes, te"idos normalmente y t e"idos flcidos no teDidos indican que ste
ltimo es t e"ido muert o. #ebe t ambin, adems del color y sus t onos,
ponerse atencin a ot ros fact ores. 7urgor de los te"idos, presencia de
fracturas, cavidades hechas por insectos debe anotarse.
l analista debe estar familiarizado con la localizacin de reas
meristemticas en los embriones. n gramneas, estas zonas incluye los
e!tremos de la radcula. n gramneas, estas zonas incluye los e!tremos
de la radcula, las raicillas seminales y la base de la plmula. 0i el rea
muerta incluye el mosocotilo y la raz seminal, el embrin es incapaz de
desarrollarse.
n leguminosas y ot ras semillas de dicotiledneas los te"idos
meristemticos se localizan en la plmula y la radcula.
E7*rsin n#%=ric! d rs#&'!dos
1alcule el porcent a"e de semilla viable de cada repeticin. 1onviene
y calcule el resultado promedio de cada muestra. 1ompare sus resultados
con los obt enidos mediante la prueba standard de germinacin.
.. ( An-&isis d *#r1!
$ureza fsica , el ob"etivo del anlisis de pureza es det erminar%
a. /a composicin en peso de la muestra que se analiza y por
consiguiente la composicin del lote de semillas y
b. /a identidad de las distintas especies de semillas contaminantes y
de las partculas de materia inerte constituyentes de la muestra.
#efinicin de los 1omponentes de la 8uestra
0e consideran t res componentes% semillas puras, ot ras semillas y
materia inerte.
0emilla $ura
/a semilla pura comprender las indicadas por el e!pedidor o
encont radas como predominantes en el anlisis, incluyendo t odas las
variedades bot nicas de dicha especie. 0e considera pura, las semillas
normales o intactas, las maduras, las de tamaDo inferior al normal,
arrugadas, enfermas o germinadas, siempre que puedan ser identificadas
como pertenecientes a la especie analizada.
7ambin se considera semilla pura, los fragmentos de semillas
resultantes de rot uras, cuyo t amaDo sea superior a la mitad de su tamaDo
inicial. Po obstante, las semillas de leguminosas con el tegumento o test a
t ot almente desprendido se consideran materia muert e.
?t ras 0emillas
n ot ras semillas se incluirn las semillas y seudosemillas de
cualquier especie distinta a la de la semilla pura. /a separacin de las
semillas de ot ros cultivos en el anlisis de pureza, deber hacerse cuando
se tiene la absoluta certeza de su identificacin3 en el caso contrario, se
de"ar en la fraccin de semilla pura.
8ateria 6nert e
n materia inerte se incluirn materiales tales como% piedras,
partculas de suelo, granos de arena, tallos, pedazos de ho"a, races,
glumas, glumelas y ot ros fragmentos de plantas o de semillas de plantas
silvestres o cultivadas que estn dent ro de las siguientes condiciones%
a. 0emillas de especies o variedades consideradas como de ot ras
plantas, quebradas o daDadas, cuyos fragment os sean iguales o
inferiores a la mitad del t amaDo original de la semilla.
b. 0emillas que se encuent ren enteramente desprovistas de su t esta o
t egumentos.
c. Aquellas semillas que han ido transformadas por los hongos en
esclerocios, masas esporferas de caries o agallas de nemt odos.
8ateriales
8uestra de semilla remitida
=omogeneizador
<alanzas
/upas
$inzas
7ar"etas de -egistros
8et odologa
/a muest ra representativa del lote de semilla enviada al laborat orio
para ser sometida al anlisis es denominada Rmuestra remitida o de
laborat orioS. sta muestra debe homogeneizarse, y despus se le reduce
al peso mnimo para constituir la Rmuestra de t raba" oS.
/a muest ra de t raba"o &o la submuestra( despus de pesada, se
clasificar en sus componentes% semilla pura, semillas de ot ros cultivos y
materia inerte.
n general, la separacin se basar en un e!amen de cada partcula
de la muestra, det erminando a qu componentes pertenece, aunque en
algunos casos son obligatorios procedimientos especiales.
/a separacin de la semilla pura se puede efectuar visual o
mecnicamente, segn sean las caract ersticas de las semillas, de forma
que no se modifique su capacidad de germinar.
#espus de la separacin de los tres componentes, se realiza la
identificacin de las semillas encont radas de ot ros cultivos.
/os laborat orios deben poseer muestrarios de semillas debidamente
catalogadas en familias y, dent ro de stas, por orden alfabtico en
gneros y especies.
n seguida se procede el pesa"e de la materia inerte y las semillas
de ot ros cultivos, anotndose los resultados en la t ar" eta de t raba"o en
laborat orio. l peso de la fraccin pura, se puede det erminar por
diferencia de peso, est o es, peso inicial menos el peso de la materia inerte
y semillas de ot ros cultivos, o por el pesa"e direct o.
l nmero adecuado de cifras decimales de las pesadas para
calcular los porcenta"es con una cifra decimal, es el que se indica a
continuacin%
PESO DE LA MUESTRA DE TRABAJO EN GRAMOS
PM8-? #
#168A/0
8enos de ' ,
' a B, BBB +
'4 a BB, BBB *
'44 a BBB, BBB '
'444 ms 4
1lculo y !presin de los -esultados
l porcenta"e en peso de cada constituyente se calcular con una
cifra decimal.
/os porcenta"es se basarn en la suma de los pesos de los
componentes, no en el peso inicial de la muestra de t raba" o3 no obstante,
la suma de los pesos de los componentes deber compararse con el peso
inicial como comprobacin de una posible perdida de material o cualquier
ot ro error.
$ara el clculo de los porcenta"es se utilizan las siguientes
formulas%
: de semillas puras% U K $p ! '44
$t
#onde%
$p K es el peso de las semillas puras
$t K es el peso t ot al de la muestra
: de semillas de ot ros cultivos L K $oc ! '44
$t
/as semillas de las plantas cultivadas germinan generalmente t ant o en luz
como en oscuridad. /a e!igencia de luz para germinar en
det erminadas especies est relacionada con un tipo de dormancia.
/a germinacin es promovida por iluminacin con la regin ro"a del
espect ro &>44)G44 nm(. Adems se ha det erminado una inhibicin
m!ima en la fa"a del infrarro" o &G*4)G>4 nm(. 1uando las semillas
se someten alternativamente a irradiaciones con estas dos fa"as de
longitud de onda, la ltima irradiacin es la responsable de la
respuesta.
-eferente a la sensibilidad luminosa, e!iste una amplia variacin en las
respuestas germinativas. A inicios del siglo UU fue descubiert o que
la germinacin de algunas especies era inhibida por la luz, en t ant o
que, en ot ras la germinacin era promovida.
Algunas semillas solamente germinan con e!tensa e!posicin a la luz y
ot ras con breve e!posicin a pesar de muchas presentarse
indiferentes a la luminosidad. 1iertas semilla germinan solamente a
oscuras y ot ras necesitan de un largo o cort o fot operodo diario.
/a germinacin no solamente est relacionada con la presencia o ausencia
de luz, sino que t ambin con la calidad de esta luz. /a calidad de
luz durante la maduracin de la semilla es un import ante fact or
cont rolador de la germinacin.
n general, los fact ores% luz y la t emperat ura no tienen accin
independiente sobre la germinacin de semillas. $or lo tant o, la
temperatura "uega un papel important e en la germinacin de las
semillas fot osensibles &sensible a la luz(.
/ee t odo en% l proceso de ;erminacin V /a gua de <iologa
htt p% IIbiologia.laguia*444. comIbotanicaIel)proceso)de)
germinacionWi!zz*Uf,A*<nM
/a necesidad de luz para cada especie en su germinacin est de acuerdo
a sus requerimientos para su desarrollo en estado natural, ya sea la
especie pionera o del bosque maduro o crezca en el bosque ba"o
t ropical, en el bosque andino o en el pramo% /as especies del piso
ba"o t ropical generalmente son helifitas o semiheliofitas, tienen
altas demandas de luz, mientras que para la mayora de las especies
de la zona alta andina o bosques nublados, las necesidades de luz
son ms ba"as &esciofitas(. /a polisombra o umbrculo a utilizar
debe t rat ar de reducir la entrada de luz ent re un .4 a G. :,
t rat ando de asimilar a las condiciones naturales de la especie , con
el fin de reducir la evaporacin del agua del germinador, aminorar
el impact o de las lluvias y evitar sobrecalentamiento del sust rat o al
recibir los rayos direct os del sol.
/uz
s obvio que mientras ms al sur uno avanza, menos horas de luz hay.
$ero apart e de est o, en los bosques sureDos reina la sombra, creada
por un lado por ot ros rboles y por ot ro lado por un dominio de
das nublados y muchas plantas "venes estn acost umbradas a estas
condiciones, y si se e!ponen a la luz fuerte de la primavera I verano
santiaguino mueren rpidamente. As se comportan por e"emplo los
avellanos, raul y muchas ot ras plantas. $or lo tant o, con las
plantas sureDas hay que tener mucho cuidado de no sobree!ponerlas
al sol.
/as plantas cost eras, por la nubosidad casi constante tambin pueden
beneficiar de algo de sombra.
n cuant o a las dems plantas, no tienen mayores problemas para
adaptarse a las condiciones de e!posicin a la luz solar en
0antiago.
1. Las semillas deben germinar tanto en los envases expuestos a la luz como
en los que han permanecido en la oscuridad.
Las plantas cultivadas en la oscuridad suelen ser mucho ms altas que las
cultivadas a la luz (las plantas en la oscuridad siguen creciendo en busca de la
luz)
Mientras que las plantas cultivadas con luz se ponen verdes (debido al
desarrollo de los cloroplastos, que son verdes permiten a la planta capturar la
luz), las otras plantas cultivadas en la oscuridad permanecen amarillas.
Preguntas de seguimiento:
1.
!. "#or qu$ crees que las plantas necesitan luz%
"#or qu$ las plantas crecen ms altas en la oscuridad%
"&u$ pasar'a con tus plantas si continuaran creciendo sin luz%
"&u$ pasar'a si a las plantas cultivadas en oscuridad se le quita la cubierta de
aluminio se de(an crecer ahora a la luz%
)i repitieras el experimento. "*btendr'as los mismos resultados%
"&u$ pasar'a si se utiliza otro tipo de semillas%
Existe una gran variedad de respuestas en la germinacin de las semillas con respecto a la luz. Entre
las plantas cultivadas se ha visto que no requieren luz para germinar, pues lo hacen de igual manera en
la luz que en la oscuridad. En cambio, muchas semillas silvestres tienen comportamientos diferenciales
con respecto a la luz. Existen aquellas que slo germinan en la oscuridad, aquellas que slo germinan
bajo luz continua, otras que requieren de un periodo breve de iluminacin para germinar y otras ms que
son indiferentes a la presencia de luz u oscuridad. Al igual que en el caso de las temperaturas
alternantes, las semillas encuentran en la naturaleza ambientes lumnicos muy diversos! bajo
la vegetacin, en un hueco, bajo la hojarasca, bajo tierra, etc"tera.
Ecolgicamente la luz es un factor de gran importancia. #etermina la posicin en el suelo donde va a
germinar una semilla$ controla la germinacin bajo el dosel de las ramas de los rboles, y al interactuar
con la temperatura participa en el control estacional del rompimiento de la latencia %captulo &'.
Algunas semillas slo requieren luz para germinar cuando estn reci"n colectadas, mientras que en
otras este efecto persiste hasta por un a(o y en otras ms, se desarrolla durante el almacenamiento. )or
lo tanto, es un factor en el cual la edad de la semilla tambi"n es determinante.
*a sensibilidad de las semillas de muchas especies a la luz, aumenta en relacin con el tiempo de
imbibicin. El almacenaje de semillas bajo condiciones de humedad relativa alta es suficiente para
hacerlas sensibles a la luz.
*as primeras investigaciones que analizaron con detalle el efecto de la luz en la germinacin se llevaron
a cabo con semillas de lechuga. #emostraron que dentro del espectro de luz haba tres regiones que
afectaban la germinacin y la latencia! a' el azul, alrededor de los +,- nm, b' el rojo, alrededor de los
.,- nm y c' el rojo lejano, alrededor de los /,- nm %0igura 1&.2'. 3e encontr que la luz roja rompe la
latencia y promueve la germinacin, mientras que la luz azul y la roja lejana inhiben la germinacin.
4ambi"n se encontr que la alternancia de iluminaciones provoca una reversin de la estimulacin y la
inhibicin de la germinacin. *a germinacin de las semillas de lechuga es estimulada por la luz roja
pero puede inhibirse si posteriormente se iluminan con luz infrarroja. 3i ms tarde se iluminan con luz
roja se vuelve a inducir la germinacin. *a luz roja estimula la germinacin y la luz infrarroja la inhibe.
3e puede repetir esta alternancia y obtener esta respuesta numerosas veces. *a naturaleza de la 5ltima
iluminacin ser la que determine la respuesta germinativa.
0igura 1&.2. Efecto de varias longitudes de onda en el rompimiento de la latencia de semillas de lechuga.
6stas, que generalmente permanecan latentes en la oscuridad, fueron irradiadas con suficiente luz roja
para obtener una germinacin potencial de ,-7 en el lote experimental. #espu"s fueron sometidas a luz
de diferentes longitudes de onda y se pusieron a germinar en la oscuridad, contndose el n5mero que
germin despu"s de un da. 3e puede ver claramente que la luz naranja8roja %.--8/-- nm' rompe la
latencia y promueve la germinacin, mientras que la luz infrarroja %/2-8/9- nm' principalmente, pero
tambi"n la azul %+2-8 ,-- nm', inhiben la germinacin reimponiendo la latencia %tomado de :e;ley y
:lac<, =>92'.
Este fenmeno responde al espectro de actividad del pigmento vegetal llamado fitocromo %0', el cual
existe en dos formas interconvertibles. Este pigmento se comporta de la siguiente manera!
En la oscuridad, el pigmento no puede romper la latencia de las semillas. ?uando la semilla se pone
bajo la luz, este pigmento absorbe la luz roja %por lo que se le llama Fr' y rpidamente se convierte en
una forma que s es activa en el rompimiento de la latencia %inicio de la germinacin', pero que a su vez
absorbe luz roja lejana %por tanto se le llama0rl'. *a absorcin de luz roja lejana por Frl hace que
rpidamente se revierta a Fr$ la latencia no se rompe y no hay germinacin.
1gual que en otros muchos fenmenos en los que interviene la luz, el efecto depende tanto de la
intensidad como de la duracin de la iluminacin. *a respuesta germinativa @estimulacin e inhibicin
@ estar en funcin tanto de la intensidad de la luz como de su duracin, o sea de la energa total
de irradiacin. 3in embargo, las transformaciones del fitocromo requieren muy poca energa e
irradiaciones de unos cuantos segundos o minutos pueden ser suficientes para romper la latencia y
germinar. Algunas otras requieren mucho ms tiempo, dependiendo de las cubiertas de la testa que
act5an como un filtro.
En la figura 1&.A%a' se muestra el espectro de absorcin del fitocromo. *a forma 0rpresenta el pico de
absorcin alrededor de los ..- nm. Bna vez convertido a Frl el pico se corre hacia los /A- nm. #ebido a
la menor absorcin de Frl se requieren mayores niveles de energa para revertirlo que los que se
necesitan para convertir a la forma Fr. )or lo tanto, para lograr la fotorreversin en una semilla se
requieren mayores niveles de energa de luz roja lejana que de luz roja. Bn hecho importante es que las
dos curvas se sobreponen %zona sombreada'. Esto significa que a cierta longitud de onda que es
absorbida tanto por el Fr como por el Frl, en un conjunto de mol"culas de fitocromo se producen
transformaciones fotoqumicas simultneamente en ambas direcciones. Aunque "stas se producen a
diferentes velocidades y se establece un equilibrio representado por la proporcin de Frl C Ftotal,
llamado f%de la letra griega phi'. )or ejemplo, cuando el Fr se irradia con luz de ..- nm, se forma Frl$
pero este Frl tambi"n absorbe esa longitud de onda %..- nm', as que algo se revierte a Fr hasta
producir cierto equilibrio, que en este ejemplo es la existencia de 9-7 de Frl %0igura 1&.A%b''. )or lo
tanto, no puede haber una conversin total de todo el Fr a Frl, a5n bajo una longitud de onda en la cual
el Fr absorbe a su mximo.
0igura 1&.A. A' Espectro de absorcin del fitocromo en sus formas Fr y Frl. )uede verse que hay una
sobreposicin entre ambos espectros. *a forma Fr absorbe luz roja y se convierte a una forma activa
que rompe la latencia y a su vez absorbe luz roja lejana pasando a la forma Frl. :' 0otoequilibrio del
fitocromo resultado de la proporcin total de Frl C Fr. Es producto de las transformaciones fitoqumicas
que se dan, ya que Fr y Frl absorben una cierta longitud de onda, ocurriendo transformaciones en
ambos sentidos debido al sobrelapamiento en las curvas de absorcin de la figura %A' %tomado de
:e;ley y :lac<, =>92'.
Este equilibrio es el que permite a la semilla detectar la calidad de la luz del medio ambiente en que se
encuentra, particularmente con respecto a la proporcin rojoCrojo lejano. #e esta manera la germinacin
de la semilla se restringe a aquellos ambientes que poseen cierta calidad de luz. As, semillas que
requieren un valor relativamente alto de fno germinarn cuando la luz haya sido filtrada por las hojas
verdes del dosel, pues es una luz rica en longitudes de onda rojo lejano, y la germinacin se producir
en ambientes ms abiertos, ms adecuados para el crecimiento de la plntula.
*eer ms! http!CC;;;.monografias.comCtrabajos9/Csemilla8y8su8composicionCsemilla8y8su8
composicion2.shtmlDixzz2Ef>j9ggf
hola para que una semilla germine es importante que no le entre ning5n rayo de luz, en este
caso los que se dedican a hacer semilleros, los preparan en bandejas y las ponen en
cuartos oscuros hasta su germinacin, cada semilla tiene das de germinacin
distintantas, por ejemplo la semilla de lechuga le germina de A a , das ya aparecer
la germinacin, en este caso es importante que se revice todos los dias de todas las
que se sembraron aparace un signo de nacimiento de la nueva plata inmediatamente
se debe de sacar y poner a la luz, aunque sea la 5nica en germinar, en este caso las
otras saldrn luego o del todo no lo har, si no se saca a tiempo las primeras
germinadas a la luz es muy posible que esa planta no sea de una buena calidad.
Es importante que la germinacin depende de la calidad de la semilla, la condicin de
la oscuridad para su rpida germinacin y sacarlas las germinadas a la luz para un
buen desarrollo.
descubrimosXqueXelXprocesoXdeXgerminacinXenXlaXoscuridadXesX
msX rpidoX peroX lasX plantasX queX seX obtenanX noX t enanX
pigmentacin, X yaX queX alX noX
haberX luzX noX tenanX clorofila.X 7ambinX nosX dimosX cuentaX deX queX
elX crecimientoX eraX
directamenteX proporcionalX aX laX cantidadX deX aguaX inicialX conX laX
queX fueX regada.
#escubrimosXqueXelXcrecimientoXdeXlasXlente"asXeraXmsXrpidoXqueXelXdeX
habichuelasXyX
garbanzosXyaXqueXfueronXlasXprimerasXenXgerminar, XperoXunaXvezXpasadaX
laXsemanaXdeX
germinacinXlasXqueXalcanzaronXunaXmayorXalturaXfueronXlasXhabichuelas.
st udioXdelXdesarrollo%
Y /ente"as%X presentaronX unaX colorX blanquecinoX conX t allasX largosX yX
delgadosX yX
ho"asXpequeDasXenXlaXyemaXterminal
Y =abichuelas%X desarrollaronX t allosX msX gruesosX yX grandesX ho"asX
at erciopeladasX
deXcolorXverdeXintenso.XAlXcrecerXdesprendanXoloresXqueXatraanXaXlosX
insectos.
Y ;arbanzos%X presentabanX unX granX nmeroX deX pequeDasX ho"asX aX loX
largoX delX
delgadoX tallo.XAlXigualXqueXlasXhabichuelasXdesprendaXoloresXqueX
at raanXaXlosX
insectos. XXEueronXlasXmuestrasXaXlasXqueXmsXhongosXdesrrollaron.
Z1ul es la razn por la cual nuest ra semilla de lente"a logro la
germinacin en un medio sin acceso a una fuente lumnica al igual
que en un medio con una fuente de luz[ L porque en uno hubo
mayor grado de crecimiento en uno que en ot ro[
Zporque la semilla de la lente"a, logro una germinacin e!puesta a la luz y
la oscuridad[ Z a que se debe que se obtuvieran resultados
diferentes[
/as semillas deben germinar t ant o en los envases e!puest os a la luz como
en los que han permanecido en la oscuridad. /as plantas cultivadas
en la oscuridad suelen ser mucho ms altas que las cultivadas a la
luz &las plantas en la oscuridad siguen creciendo en busca de la
luz(. 8ientras que las plantas cultivadas con luz se ponen verdes
&debido al desarrollo de los cloroplastos, que son verdes y permiten
a la planta capturar la luz(, las ot ras plantas cultivadas en la
oscuridad permanecen amarillas.
Por que l a semi l l a de l a l ent ej a, l ogr o una ger mi nac i n expues t a
a l a l uz y l a oscur i dad? A qu se debe que se obt uv i er an
r esul t ados di f er ent es?
as semi l l as deben ger mi nar t ant o en l os envases expues t os a l a
l uz como en l os que !an per manec i do en l a oscur i dad" as
pl ant as cul t i v adas en l a oscur i dad suel en ser muc !o m#s al t as
que l as cul t i v adas a l a l uz, por l o que se pr esent a el
f ot ot r opi s mo $ l as pl ant as en l a oscur i dad si guen cr eci endo en
busca de l a l uz% " &i ent r as que l as pl ant as cul t i v adas con l uz se
ponen ver des con sus t al l os m#s gr uesos y su apar i enci a es m#s
r obus t a $ debi do al desar r ol l o de l os cl or opl as t os, que son ver des
y per mi t e n a l a pl ant a capt ur ar l a l uz% ' l as ot r as pl ant as
cul t i v adas en l a oscur i dad per manecen amar i l l en t as, con t al l os
m#s del gados y su apar i enc i a es m#s dbi l "
(oncl usi ones
) *ambi n exi st en f act or es i nt er nos que modi f i c an l a
ger mi nac i n, ent r e el l os t enemos l a madur ez que pr esent an l a
semi l l a' cuando l as di st i nt as est r uc t ur as de l a semi l l a !an
compl et ado su desar r ol l o, d#ndose por f i nal i zada cuando el
embr i n !a al canzado su m#xi mo desar r ol l o y l a vi abi l i dad de
l as mi s mas, cuando el per + odo de t i empo dur ant e el cual l as
semi l l as conser van su capaci dad par a ger mi nar , es un per + odo
var i abl e y depende del t i po de semi l l a y de l as condi ci ones de
al macena mi en t o"
&adur ez de l as semi l l as"
,eci mos que una semi l l a es madur a cuando !a al canzado su
compl et o desar r ol l o t ant o desde el punt o de vi st a
mor f ol gi co como f i si ol gi co"
a madur ez mor f ol gi c a se consi gue cuando l as di st i nt as
est r uc t ur as de l a semi l l a !an compl et ado su desar r ol l o,
d#ndose por f i nal i zada cuando el embr i n !a al canzado su
m#xi mo desar r ol l o" *ambi n, se l a r el aci ona con l a
des!i dr at ac i n de l os di f er ent es t ej i dos que f or man l a
semi l l a" a madur ez se suel e al canzar sobr e l a mi s ma
pl ant a, si n embar go, exi st en al gunas especi es que
di semi nan sus semi l l as ant es de que se al cance, como
ocur r e en l as semi l l as de -i n.go bi l oba o de muc !as
or qu+ deas, que pr esent an embr i ones muy r udi men t a r i os,
apenas di f er enc i ados"
Aunque l a semi l l a sea mor f ol gi ca me n t e madur a, muc!as de
el l as pueden segui r si endo i ncapaces de ger mi nar por que
necesi t an exper i men t a r a/n una ser i e de t r ansf or mac i ones
f i si ol gi cas" o nor mal es que r equi er an l a pr di da de
sust anci as i n!i bi dor as de l a ger mi nac i n o l a acumul ac i n
de sust anci as pr omo t or as" 0n gener al , necesi t an r eaj us t es
en el equi l i br i o !or monal de l a semi l l a y1 o en l a
sensi bi l i dad de sus t ej i do par a l as di st i nt as sust anci as
act i v as"
a madur ez f i si ol gi ca se al canza al mi s mo t i empo que l a
mor f ol gi ca, como en l a mayor + a de l as especi es
cul t i v adas' o bi en puede !aber una di f er enci a de semanas,
meses y !ast a a2os ent r e ambas"

3i abi l i dad de l as semi l l as"
a vi abi l i dad de l as semi l l as es el per + odo de t i empo dur ant e el
cual l as semi l l as conser van su capaci dad par a ger mi nar " 0s
un per + odo var i abl e y depende del t i po de semi l l a y de l as
condi ci ones de al macena mi en t o"
At endi endo a l a l ongev i dad de l as semi l l as, es deci r , el t i empo
que l as semi l l as per manecen vi abl es, pueden !aber
semi l l as que ger mi nan, t odav+ a, despus de decenas o
cent enas de a2os' se da en semi l l as con una cubi er t a
semi nal dur a como l as l egumi nos as" 0l caso m#s ext r e mo
de r et enc i n de vi abi l i dad es el de l as semi l l as de 4el umbo
nuci f er a encont r adas en &anc!ur i a con una ant i g5edad de
unos 678 a 988 a2os"
0n el ext r e mo opues t o t enemos l as que no sobr evi v en m#s que
al gunos d+ as o meses, como es el caso de l as semi l l as de
ar ce $ Acer % , sauces $:al i x% y c!opos $Popul us% que pi er den
su vi abi l i dad en unas semanas' o l os ol mos $ ;l mus% que
per manec en vi abl es < meses"
0n gener al , l a vi da medi a de una semi l l a se si t /a ent r e 7 y 67
a2os"
as semi l l as pi er den su vi abi l i dad por causas muy di ver sas"
Podr + amos pensar que muer en por que agot an sus r eser vas
nut r i t i v as, per o no es as+ , si no que conser v an l a mayor
par t e de l as mi s mas cuando ya !an per di do su capaci dad
ger mi na t i v a"
;na semi l l a ser # m#s l ongeva cuant o menos act i vo sea su
met abol i s mo" 0st o, a su vez, or i gi na una ser i e de
pr oduc t os t xi cos que al acumul ar se en l as semi l l as
pr oduce a l a l ar ga ef ect os l et al es par a el embr i n" Par a
evi t ar l a acumul ac i n de esas sust anci as bast ar # di s mi nui r
a/n m#s su met abol i s mo, con l o cual !abr emos
i ncr emen t a do l a l ongev i dad de l a semi l l a" =al ent i zar el
met abol i s mo puede consegui r se baj ando l a t emper a t u r a
y1 o des!i dr at ando l a semi l l a" as baj as t emper a t u r as dan
l ugar a un met abol i s mo muc!o m#s l ent o, por l o que l as
semi l l as conser vadas en esas condi ci ones vi ven m#s
t i empo que l as conser v adas a t emper at ur a ambi ent e" a
des!i dr at ac i n, t ambi n al ar ga l a vi da de l as semi l l as, m#s
que si se conser van con su !umedad nor mal " Per o l a
desecaci n t i ene unos l + mi t es' por debaj o del 6>) 7> en
!umedad se ve af ect ada el agua de const i t uc i n de l a
semi l l a, si endo per j udi c i al par a l a mi s ma"
0n r esumen podemos deci r que, par a al ar gar m#s t i empo l a vi da
de una semi l l a, st a debe conser v ar se en l as si gui ent es
condi ci ones? mant ener l a seca, dent r o de unos l + mi t es'
t emper a t u r as baj as y, r educi r al m+ ni mo l a pr esenci a de
ox+ geno en el medi o de conser vac i n"
donde%
$oc K es el peso de las semillas de ot ros cultivos
$t K es el peso t ot al de la muestra
: de materia inerte 9 K $mi ! '44
$t
#onde%
$mi K es el peso de la materia inerte
$t K es el peso t ot al de la muestra
l resultado de t odos los componentes, debe sumar '44:. /os
componentes menores de 4. 44: se indicarn con RtrazasS.
/os porcenta"es de semilla pura, ot ras semillas y materia inerte, se
anotarn en los espacios correspondientes de la t ar" eta de t raba"o en
laborat orio.
0i el resultado de un componente fuera nulo, se e!presar como 4. 4
en el espacio que le corresponda.
0emillas pura
/as definiciones de semilla pura significa que para las semillas
agrcolas y hortculas de los gneros que se indican a continuacin, se
clasifican como semilla pura, las est ruct uras siguientes%
Allium
0emilla con o sin tegument o, fragmento de semilla cuyo tamaDo sea
superior a la mitad de su t amaDo inicial, con o sin tegumento.
Apium
squizocarpo, con o sin pedicelo, a menos que sea evidente que no
contiene semillas. 8ericarpo, con o sin pedicelo, a menos que sea
evidente que no contiene semilla. Eragmento de mericarpo cuyo t amaDo
sea superior a la mitad de su t amaDo inicial, a menos que sea evidente que
no contiene semilla.
0emilla con el pericarpio &cubierta frutal( parcial o t ot almente
desprendido.
Asparagus
0emilla con o sin tegument o, fragmento de semilla cuyo tamaDo sea
superior a la mitad de su t amaDo inicial, si conserva parte de la t esta.
<eta
;lomrulos o fragment os de glomrulo retenido por una cibra
rect angular de *44mm ! +44mm, con luz de malla de '. . ! *4mm.
0acudida durante un minuto, contengan o no semillas.
<rassica
0emilla, si conserva part e de la test a. Eragment o de semilla cuyo
tamaDo sea superior a la mitad de su t amaDo inicial si conserva part e de
la testa.
1ucurbita
0emilla, con o sin tegument o. Eragment o de semilla cuyo t amaDo
sea superior a la mitad de su tamaDo inicial, con o sin tegument o.
/act uca
Aquenio, a menos que sea evidente que no contiene semilla.
Eragment o de aquenio cuyo t amaDo sea superior a la mitad de su tamaDo
inicial, a menos que sea evidente que no contiene semilla. 0emilla con el
pericarpio &cubierta frutal( parcial o t ot almente desprendido.
Eragmentado de semilla cuyo tamaDo sea superior a la mitad de su tamaDo
inicial, con el pericarpio &cubierta frutal( parcial o t ot almente
desprendido.
-aphanus
0emilla, si conserva part e de la test a. Eragment o de semilla cuyo
tamaDo sea superior a la mitad de su t amaDo inicial, si conserva parte de
la testa.
0olanun
0emilla, con o sin tegument o. Eragment o de semilla cuyo t amaDo
sea superior a la mitad de su tamaDo inicial, con o sin tegument o.
0orghum
spiguilla frtil, unidad al pedicelo de la espiguilla estril y
segment o del raquis, espiguilla frtil con glumas, lemmas y palea
cont eniendo una caripside y lemma estril unida. spiguilla, con glumas,
lemma y palea cont eniendo una caripside y lemma estril unidad.
1aripside. Eragmento de caripside cuyo t amaDo sea superior a la mitad
de su tamaDo inicial.
7rifolium
0emilla, si conserva parte de la test a. Eragmento se semilla cuyo
tamaDo sea superior a la mitad de su t amaDo inicial, si conserva parte de
la testa.
Qicia
0emilla, si conserva part e de la test a. Eragment o de semilla cuyo
tamaDo sea superior a la mitad de su t amaDo inicial, si conserva parte de
la testa.
9ea
1arispide. Eragmento de caripside cuyo t amaDo sea superior a la
mitad de su t amaDo inicial.
.. ) An-&isis d :i"or
/a viabilidad de la semilla es uno de los principales atribut os a
considerarse en cualquier evaluacin de calidad.
6sely &'B.G( define el vigor como la Rsuma t ot al de t odos los
at ribut os de la semilla que favorecen el establecimiento rpido y uniforme
de plntulas en el campoS.
C&!ss d *r#b!s d :i"or
$rueba #irectas
0e e!pone a las semillas, ba"o condiciones cont roladas en el
laborat orio, a los fact ores adversos &est ress( que se espera reduzcan la
emergencia en el campo.
1omo e"emplo la prueba del fro &1old 7est(, las pruebas directas,
son difciles de estandarizar entre laborat ori os y tienden a dar resultados
ms variables que las pruebas de germinacin.
$ruebas 6ndirectas
0on aquellas en las que se evala o mide una determinada
caracterstica de la semilla, que post eriormente se correlaciona con su
perfomance en el campo.
/a prueba de la conductividad elctrica es ot ra prueba indirecta,
que se emplea comnmente para arve"a & Pisum sativum(. n ella se mide
el contenido de elect rolitos li!iviados en agua deionizada en la cual se
han remo"ado las semillas por *, horas a *451.
?t ra de las pruebas es la del enve"ecimiento acelerado, en la cual se
somete a la semilla a condiciones de alta t emperat ura y humedad relativa
por un tiempo que vara segn la especie. st as condiciones inducen un
aumento en el ritmo de deterioro fisiolgico de la semilla, y por lo
general e!iste una buena correlacin entre el porcent a"e de semillas que
sobreviven al t rat amiento y el porcenta"e de emergencia en el campo.
$or ltimo, la inmersin de semillas en una solucin de cloruro de
7et razolio, revela la presencia de t e"idos muert os, cuya e!tensin y
localizacin se relaciona con el valor como material para siembra de la
semilla.
Pr#b! d& 0r5o
l fundamento t erico de esta prueba es que la condicin fra y
hmeda del suelo retarda la actividad t ant o de la semilla como de los
microorganismos del suelo. 0in embargo, como las semillas estn en
desventa"as relativamente mayor, sern ms susceptibles al ataque de
microorganismos causantes de pudricin. /as semilla vigorosas
producirn plntulas capaces de resistir el at aque de est os
microorganismos en mayor grado que las semillas dbiles.
Procdi%in'o
/a prueba se realiza sembrando las semillas en suelo no esterilizado
t rados del campo donde se piensa sembrar, el cual se coloca sea en
tapers de plstico o como una capa delgada sobre papel t oalla
humedecido. /uego de la siembra, se agrega agua hasta llevar al suelo
hasta el G4: de capacidad de campo segn la A?0A o al ,4: segn la
607A. 6nmediatamente se coloca el t aper, bande"a o el papel t oalla
enrollado con suelo en un ambiente a '451, B.: de humedad relativa y
ba"o obscuridad por G das, t ranscurrido los cuales se t raslada el
recipiente a un ambiente a *.51 para la germinacin y emergencia de
plntulas, donde permanecen de , a > das.
$ara det erminar el contenido de humedad del suelo la 607A
recomienda secar *. gramos de suelo a '4.51 durante + horas y para
det erminar la capacidad m!ima de ret encin de agua o capacidad de
campo &1. 1(, es decir, el peso m!imo de agua que el suelo puede ret ener
en cont ra de la gravedad, la 607A recomienda usar el mt odo de
Ciessman.Pehring.
$ara calcular la cantidad de agua a agregar para elevar el cont enido
de humedad al ,4: de capacidad se usa la frmula%
C K < &'44)E( ! 1. 1. ! $ K < ! E
'4
>
'44
donde%
C K cantidad de agua &cm+( que debe agregarse para llevar
el cont enido de humedad al ,4: de capacidad de campo
< K peso del suelo hmedo &gr(
E K porcenta"e de humedad del suelo hmedo en base
hmeda
11 K capacidad de campo como porcenta"e del suelo seco
$ K porcenta"e requerido de capacidad en campo &" , ,4:(
R"is'ros
7ranscurrido el perodo de e!posicin a *.51, se clasifican las
plntulas en los siguientes grupos%
;rupo '. $lntulas fuertes sin daDo
;rupo *. $lntulas fuertes pero con ligero ret ardo en su desarrollo
o con daDos leves tales como% presencia de races primaria o secundarias
cort as, pices de ho"as, rasgados, coleptilo daDado pero sin daDo a las
ho"as, mesocotilo ligeramente ret orcido.
;rupo +. A. plntula pequeDas o levemente ret orcidas3 presencia de
pocas races laterales. <. plntula fuerte pero de desarrollo
desproporcionado.
;rupo ,. $lntula anormales, segn las reglas de la 607A.
;rupo .. 0emillas muert as.
/os grupos ' y * se consideran como semillas vigorosas.
.. + METODOLOGIA GENERAL PARA PRUEBAS DE SANIDAD
DE SEMILLAS
0anidad de semillas concierne principalmente la presencia o
ausencia de organismos causantes de enfermedades o pestes, pero incluye
adems deficiencias nutricionales de las plantas y ot ras condiciones como
senectud de las mismas. /as pruebas de sanidad de semillas son
import antes por t res razones%
'( l inculo presente en las semillas puede aumentar progresivamente
el desarrollo de la enfermedad y reducir el valor comercial del
cultivo.
*( A t ravs de lotes de semillas, los organismos causantes de
enfermedades pueden ser introducidos a nuevas reas. $ara efect o
de cuarentena este aspect o requiere investigacin y certificacin en
lo que se relaciona con el movimiento internacional de semillas.
+( $ruebas de sanidad de semillas nos dan una idea acerca de las
causas de anormalidades en las plntulas y pude suplementar las
pruebas de germinacin.
/a mayora de los /aborat orios para pruebas de calidad de semillas
realizan pruebas de sanidad nicamente cuando se solicita
especficamente. /a muestra de semillas debe ser representativa del lote
a fin de que los resultados sean vlidos para t odo el lote. /as pruebas
deben ser repetidas y el nmero de repeticiones vara con el laborat ori o3
sin embargo, se recomienda no usar menos de ,44 semillas en cada
prueba. n general la variacin entre repeticiones en pruebas de sanidad
es mayor que en pruebas de germinacin. /a muest ra puede ser
e!aminada para identificacin de ms de un pat geno en una sola
observacin. /a microflora de un lote de semillas cambia
considerablemente durante el almacenamiento3 las condiciones de
almacenamiento de muestras a probar en fechas futuras deber ser seco y
fro.
/os diferentes mt odos para la prueba de sanidad varan en
sensitividad3 por lo tant o es necesario suficiente conocimiento del mtodo
que se emplea a fin de evaluar los resultados.
I. DE0INICIONES
Inc#b!cin
$roceso mediante el cual se provee a las semillas de un ambiente
adecuado para el desarrollo de sntomas o estruct uras de los pat genos.
Pr5odo d inc#b!cin
7iempo t ranscurrido desde el moment o en que se colocan las
semillas en agar, secante, etc. hasta el moment o en que se recolectan los
dat os relativos a la sanidad de las semillas.
Pr'r!'!%in'o
1ualquier trat amient o fsico o qumico que se de a la semilla y que
preceda a la incubacin, el cual se hace nicamente para facilitar la
prueba.
Pr#b! *r&i%in!r
$rueba que rinde informacin provisional sobre las condiciones que
se investigan pero que resulta inadecuada como fuente de informacin
conclusiva.
Pr#b! d s!nid!d
6nvestigacin a travs de mt odos especficos deseados para revelar
la presencia de microorganismos o de condiciones que favorecen el
desarrollo de enfermedades en semillas.
Tr!'!%in'o d s%i&&!s
1ualquier proceso fsico o qumico al cual se someten las semillas.
II. METODOLOGIA
Ins*ccin d &! s%i&&! sc!
Mna muest ra o submuestra puede ser inspeccionada para detect ar la
presencia de estructuras como esclerocios, quistes de nemtodos y
cambios de color debidos a pat genos. 8icroorganismos t ambin pueden
estar presentes en la materia inerte, como la pa"a que acompaDa la
semilla. #ebe darse especial at encin a las semillas que presentan
agu"eros de insect os como gorgo" os y ot ros3 algunas semillas pueden
cont ener insect os vivos. Algunas pestes comunes tales como gorgo" os,
caros, polillas, et c. pueden ocasionalmente encontrarse en semillas de
cereales, leguminosas y ot ras semillas.
/a semilla puede e!aminarse mediante un microscopio de ba"o
aumento cuando se t rat a de identificar hongos por sus cuerpos frustferos
como acrvulos y picnidios en la semilla seca.
E7!%n ds*#=s d s#!:i1!r o s#%r"ir &! s%i&&!
/a semilla puede ser sumergida en agua u ot ro fluido a fin de lograr
que los cuerpos fructferos se t ornen ms visibles o para lograr
&condiciones en las cuales las esporas sean liberadas t ales como e!udados
de picndios, masas de esporas de las glumas de gramneas. n algunos
casos es necesario sumergir la semilla a fin de det ect ar condiciones t ales
como Fcorazn huecoF en $isum spp.
E7!%n d %!'ri!& r%o:ido d &!s s%i&&!s *or &!:!do
sporas de hongos, nematodos, etc. que acompaDan las semillas
adheridos a las mismas pueden ser removidos agitando '44 semillas o
ms, en agua con un agente mo"ante &det ergent e(, o en alcohol. l fluido
se puede ent onces filtrar, cent rifugar o evaporar a un volumen reducido
para luego e!aminar la presencia de microorganismos. n los organismos
que se encuentran en las semillas y que pueden ser det ectados mediante la
aplicacin de este mtodo, se recomienda su empleo nicamente como
prueba preliminar, la cual deber seguirse con una investigacin
completa.
E7!%n *os'rior ! &! inc#b!cin
/a muestra puede ser e!aminada para det ectar la presencia de
organismos causantes de enfermedades, plagas y desrdenes fisiolgicos
despus de un perodo de incubacin.
/a prueba llamada de papel secante resulta muy efectiva para ese
propsit o. /as semillas, sin pret rat amient o alguno, son colocadas
ordenadamente a fin de que las plntulas no entren en contact o. /a
temperatura y la humedad debern estandarizarse de acuerdo a los
requisitos del pat geno y de la semilla que acta como husped, aunque
las condiciones frecuentemente son similares a las empleadas para los
estudios de germinacin.
#ebido a que la esporulacin de muchos hongos es estimulada por
la luz en especial s esta es intermitente y contiene radiacin en la regin
del espect ro cercana a ultravioleta &MQ(. 0e recomienda para la mayora
de las semillas perodos de luz de '* horas seguidos de '* horas de
oscuridad. n algunos casos el desarrollo de algunos hongos requiere
condiciones especia les, por e"emplo% =elminthosporium victorias en
avena requiere temperaturas altas &*H51(3 0ept ora nodorum en algunas
variedades de t rigo causa prot uberancias en el coleptilo de las plntulas,
en especial cuando la humedad es escasa y solamente permite la
germinacin. Adems, en el caso de ataque de Eusarium en t rigo que
resulta ms fcilmente detestable si las semillas se incuban en completa
oscuridad. Aunque la presencia de ciert os organismos sin la necesidad de
lentes o sea a simple vista, un microscopio estereoscpico es a menudo
necesario a fin de lograr una identificacin ms precisa y un microscopio
de investigacin a fin de identificar las esporas.
7ambin las semillas pueden colocarse sobre agar, generalmente
despus de un pretrat amient o, a fin de que se desarrollen las colonias
caractersticas de cada organismo3 en est os casos los organismos son
identifica dos microscpicamente, sin embargo a fin de ser precisos es
recomendable la observacin microscpica.
/os daDos ocasionados por insect os pueden a menudo apreciarse
me"or separando los cotiledones o cort ando las semillas. $ara lograr lo
anterior con mayor facilidad las semillas pueden sumergirse en agua para
suavizarlas o cort arlas al final del perodo de incubacin.
?t ro mt odo para el e!amen de semillas es plantndolas en arena o
polvo de ladrillo seguidas de un perodo de incubacin de '4 a ', das,
sin que las semillas hayan recibido pretrat amiento alguno(3 la humedad
ent onces ser alta, lo que permite a los pat genos atacar a las plntulas
en desarrollo.
l mtodo de incubacin puede utilizarse para detect ar los
siguientes grupos de organismos o condiciones%
'( =ongos o bacterias pat ognicas presentes en las semillas,
alo"adas en la misma o que at acan las plntulas.
*( 6nsect os en las semillas incluyendo estados larvales o
evidencia de la presencia anterior de insect os.
+( #esrdenes fisiolgicos como la muerte o manchas en el
cent ro de los cotiledones o la presencia de plmulas
necrticas.
0emillas que han recibido algn t rat amiento pueden ser probadas
siguiendo los procedimientos descritos, algunas veces nicamente con
pequeDas variantes.
/a presencia de organismos saprofticos, aunque no siempre, es una
indicacin de que la semilla no es de buena calidad ya que ha estado
e!puesta a condiciones desfavorables durante la cosecha, beneficio o
almacenamiento3 o t ambin que ha estado almacenada durante un largo
tiempo. /as especies de 8ucor y -hzopus crecen rpidamente e invaden
el sust rat o de papel y pueden llegar a provocar la descomposicin de
plntulas originalmente sanas.
E7!%n d &!s *&-n'#&!s n crci%in'o.
Mna forma conveniente de det ectar la presencia de hongos,
bacterias y virus en la semilla es plantndola y observando las plntulas a
fin de detect ar en las mismas, sntomas de alguna enfermedad. /as
semillas de los lotes sospechosos pueden sembrarse, o tambin inculo
obt enido de las semillas atacadas usado para inducir la infeccin en
plantas sanas. /as plantas pueden colocarse en el invernadero o
directamente en el campo, pero recordando siempre, en especial en el
ltimo caso, que deben ser prot egidas a fin de impedir la infeccin
fort uita por pat genos.
VI. TRABAJOS DE ENSA?OS
E33c' o3 s*!r!'in" "i!n' 3o7'!i& @S'!ri! 3!bri9 sds 3ro%
soi& #sin" *o'!ssi#% c!rbon!' !nd cn'ri"#'ion on :i!bi&i'< !nd
"r%in!'ion.
1hanges in \eed seedban@ composition are often monitored by
removing seeds from soil samples. ?ne e!traction method accomplishes
this by creating a slurry of soil and a concentrat ed inorganic salt solution.
1ent rifugation is then used t o separat e constituents of differing densities.
Ce have found that centrifugation of giant fo!tail seeds in +. * 8
pot assium carbonate solution as conduct ed in a cent rifugationIflotation
e!traction method can reduce viability as measured by germination and
tet razolium test . 6n one e!periment, cent rigationIflotaiin separation
reduced germination of giant fo!tail seeds from B, t o .*:. 7he li@ely
cause of seed damage \as the high p= of the pot assium carbonate
solution in con"unction \ith the increased hydrostatic pressure due t o
cent rifugation. Chile centrifugation affected quantitativa measures of
seed viability, it did not alter qualitative viability estimates using a
pressure t est .
L!c'ic !cid c&!rin" o3 "r!ss sds in ''r!1o&i#% 's'
/act ophenol is rountinely used as a clearing agent for grass seeds
in the tet razolium test . <ecause of the t o!ic nature oflactophenol, a non)
t o!ic replacements is highly desirable. /actic acid \as compared \ith
lact ophenol in over *44 samples of grass seeds, including many varieties
of si! seed @inds. 0even analysts participated in rating the t \o reagents
for clearing ability, safety, ease of preparation, odor, and glare. 6n all
factors evaluated, lactic acid \as equal t o or superior t o lact ophenol. Ce
conclude that lactic acid may be substitut ed for lactophenol as a clearing
agent for grass seeds in the tet razolium test .
R!*id "r%in!'ion o3 !s'rn do"Aood #sin" %br<o 7'r!c'ion>
c#' co'<&dons !nd "ibbr&&ic !cid
Pormal seed germination of 1ornus florida /. cv. 0mall requires a
moist prechill t reatment at +). degress 1 for B4)'*4 days foll\ed by *4)
+4 days of germination at *4)+4 degress 1. !pect ed germination using
this procedure is +4),.:. 7his lo\ germination percentage is primarily
due t o slo\ seedling gro\th and high fungal cont amination. 7o decrease
the prechill period and increase germination, seeds from three locations
\ere evaluated using embryo e!traction, cut cotyledons, and gibberellic
acid &;A+( treatments. 0t orability in liquid nitrogen &/P*( \as also
e!amined. Qiabilities based on tet razolium test results \ere correlated
\ith germination percentages obt ained using these procedures for seeds
from all locations. 7he prechill t reatment &B4)'*4 days( \as eliminated
and the germination period \as decreased form *4)+4 days t o >)', days
by performing embryo e!t racti on, clippings cot yledons, and placing
embryos on blot ters soa@ed \ith 'm8 ;A+. ;ermination using this
method \as as high as '44:. ;ermination rat es of /P*)e!posed seeds
ranged from ,.)H*:, and seed death \as associated \ith fungus or
bacteria and not due t o mechanical damage from e!posure t o cryogenic
temperature.
Assssin" :i!bi&i'< in consr:d A,!' "n'ic rso#rcs b<
#sin" di33rn' *,<sio&o"ic!& !nd bioc,%ic!& 'c,ni6#s
;erminability of B4H \heat accessions \as test ed using different
germination t ests. 7he germination percentage ranged from 4 t o '44.
8ore than H4: of the material test ed sho\ed germination above H4:.
0ome of the accessions sho\ed lo\er germination percentage a the time
of st orage but this percenta"e increased in 'BB+. 7his might be due t o the
seed dormancy since the seeds \ere st ored "ust after harvesting.
1omparison of germination methods revealed that germination t ray
method &7$( is one day earlier than the paper t o\el method &<$(. ?n the
other hand, some seed viability tests \ithout sprouting \ere also tried.
lect rical 1onductivity &. 1. ( of the test ed material ranged from *.. G t o
*,*. 4 8e\ 0Icm and it \as observed \as found very suitable \hile seed
e!udate method does not seem t o be suitable for t esting seed viability of
the \heat crop.
E%br<o 7cisio,n :rs#s &on"i'#di n!& c#' in ''r!1o&i#%
:i!bi&i'< d'r%in!'ion o3 cr!& sds
-esults of a comparative t est on germination and viability of si!
samples of \heat and barley involving '+ participating stati on are
presented. 7hese demonstrat e the equivalence of the t\o preparation
methods Rlongitudinal cutS and Rembryo e!cisionS in t et razolium t esting
of cereal seeds for the practical purposes of seed t esting. Eurthermore,
the results sho\ed the \ell)higher viability by t et razolium testing than
germination in samples infected by pathogens or acceleratedly aged. <lind
replicates \ithin the stati on sho\ed that there \as a higher precision in
germination testing than in either of the t\o t et razolium t esting methods.
Msing a very det ailed evaluation scheme \ith '+ different classes,
advantages \ere found for the embryo e!cision method in assessing the
viability of the root tip and the scutellum. 7he results obtained by the
respective standard 79 preparati on method of the stati on sho\ed a higher
accuracy than the results obt ained by the method that the stations had
first t o learn prior t o conducting the test . =o\ever, the e!perience of the
stati ons \ith tet razolium testing, as indicated by the number of samples
test ed per year, sho\ed no significant correlation t o the accuracy of
viability det erminations. 6t must be assumed that it is rather the individual
diligence and st ringency in evaluation \hich det ermines the accuracy. 7he
dependence of the coefficiente of correlation on the range of the viability
results and on the sample size is discussed, because this dependence may
impair the appropriateness of correlation analysis for testing the
equivalence of methods.
Pro"n< 's'in" 3or sd 6#!&i'< *!r!%'rs in D!&br"i! sissoo
Ro7b.
Eorty)three t reesof #albergia sissoo -o!b \ere selected from
natural populations in Mt t ar, $radesh, $un"ab, =aryna, -a"asthan and
<ihar stat es on 6ndia on the basis of desirable t raits for agroforest ry
plantation, and seeds \ere collected for evaluation. 0t andard germination
and t et razolium tests sho\ed viability above H4: for all the progenies
e!cept $7 '+H from -anchi. 7here \ere significant differences in
germination bet\een the progenies of different locations, \hereas
progenies from the same location sho\ed no significant differences.
Pursery germination and establishment can be predicted on the basis of
laborat ory germination and t et razolium test . 0ignificant differences
bet\een progenies \ere observed for germination after acelarated ageing.
Qigour inde! and germination after accelarated ageing \ere positively
correlated. Qigour inde! measured \hen seeds \ere selected \as
significantly higher than \hen seeds \ere randomly ta@en.
Gr%in!'ion !nd :i"o#r o3 b&!cB "r!%
$lants \ere t o maturity in + pot t ed soils \ith or \ithout added <.
Po symptoms of < deficiency \ere observed during gro\th3 on * soils,
lo\ < increased the percentage of abnormal seeds3 on one, the percentage
non)viable \as also increased, on the other, a lo\ tet razolium rating for
feed vigor \as recorded.
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