Brihuega, B. . 2006. PATOGENIA DE LA LEPTOSPIROSIS EXPERIMENTAL.pg165-169. En: Cacchione, R.; Durlach, R.

;
Largho,O. y Martino, P. (ed), Temas de Zoonosis III. Asociacin Argentina de Zoonosis, Buenos Aires, Argentina.

PATOGENIA DE LA LEPTOSPIROSIS
EXPERIMENTAL
Bibiana Brihuega
INTA CICVyA Instituto de Patobiologa-cc 25-1712 Castelar, Argentina
bbrihuega@cicv.inta.gov.ar


El objetivo de este captulo es aportar informacin sobre la epidemiologa y patogenia
de la leptospirosis y demostrar el importante rol que tienen los animales silvestres en
la propagacin de la misma.
Es una enfermedad infecciosa que se presenta con diferentes caractersticas
dependiendo de la serovariedad, la carga bacteriana, el grado de virulencia, la
relacin que establece con su hospedador, y el medio ambiente.
El estudio de la epidemiologa es dificultoso debido al gran nmero de factores que
influyen en su presentacin, lo cual dificulta la extrapolacin entre las diferentes
regiones geogrficas y obliga al conocimiento individualizado de cada pas, regin o
zona(13).
Las cepas patgenas de leptospira pueden afectar potencialmente a los mamferos,
donde algunos actuaran como hospedadores de mantenimiento o accidental en
funcin del serovar considerado.
Los bovinos, equinos, cerdos, ovejas, cabras y camlidos americanos(6), son las
especies de mayor importancia econmica. Pero tambin afecta a otros animales
domsticos como perros y gatos; y a los silvestres, como ciervos(5), mapaches,
zarigeyas, musaraas, canguros, mangostas, murcilagos, peces, caimanes(15),
marsupiales, ranas, liebres, zorros (14), erizos, chacales, peludos(9),ofidios(17), ratas y
ratones.
Es muy importante el papel del hospedador de mantenimiento, el cual asegura la
perpetuacin del microorganismo, sin la intervencin de ningn hospedador
accidental.
La complejidad de la epidemiologa de la leptospirosis esta basada en el gran nmero
de especies de diversas familias de mamferos que tienen la capacidad de mantener
una amplia variedad de serovariedades(7). Los hospedadores de mantenimiento se
caracterizan por la gran receptividad a la infeccin por el serovar frente al que
mantienen como hospedador y la relativa baja patogenicidad del microorganismo en
el hospedador. Tambin es importante la presencia de infeccin renal con
leptospiruria prolongada(2).
La transmisin de la infeccin entre hospedadores de mantenimiento se realiza
independientemente de las condiciones climticas, pero se encuentra beneficiada en el
caso de terrenos hmedos y suelos alcalinos.
Cualquier mamfero puede ser, potencialmente, hospedador accidental de las
leptospiras.
Tericamente cualquier mamfero puede infectarse por cualquier serovar; pero solo
algunas serovariedades pueden ser consideradas como endmicas en una regin. La
Repblica Argentina es un pas endmico.
Hay dos factores decisivos: la eliminacin de leptospiras en la orina de los animales
infectados y la supervivencia de los grmenes fuera del organismo. Muchas
infecciones se producen por la contaminacin con orina de animales enfermos,
portadores o reservorios(10).
Las bajas temperaturas disminuyen la multiplicacin de los microorganismos, pero el
tiempo de supervivencia aumenta y las altas temperaturas favorecen la
multiplicacin, pero tienen menos tiempo de supervivencia. Esto permite que las
leptospiras puedan sobrevivir y mantener sus capacidades infectantes en el agua
durante 22 das y en el barro 5-6 das. Como las infecciones por este agente ocurren
principalmente en zonas pantanosas o de campo anegado, los brotes son frecuentes en
pocas de lluvias y en climas templados(3).
Los factores climticos determinan la presentacin endmica de esta zoonosis.
La contaminacin de aguas, pasturas, barro o bebederos son las vas ms importantes
de contagio(11).
Tambin tenemos que tener en cuenta que los factores asociados a la infeccin no
dependen solamente del agente etiolgico y del medio ambiente, sino del hospedador,
su edad, gestacin, estado inmunitario, factores genticos, etc.
A pesar de que la patogenia de la leptospirosis en el hombre y en los animales ha sido
descripta no estn totalmente aclarados los mecanismos por los cuales se produce el
dao tisular(1).
Las leptospiras son muy invasivas, penetran al organismo por distintas vas,
produciendo una fase septicmica con un compromiso hepato-nefrtico y localizacin
final en rin, convirtiendo a su husped en portador(2)(8). Las leptospiras patgenas
se distribuyen en todos los tejidos(16) entre las 24 y 48 horas de la infeccin,
pudindose aislar de hgado, bazo, pulmn, rin, glndulas adrenales, mdula
sea(12), glndula salival(4). El hallazgo de leptospiras en glndula salival nos permite
pensar en la posibilidad de la transmisin de la enfermedad a travs de las
mordeduras.
La aparicin de anticuerpos especficos detectables a los 10 das de la infeccin junto
a la accin leptospiricida de las beta-macroglobulinas del suero y la accin del
complemento y la lisozima, hacen que desaparezcan las leptospiras en torrente
sanguneo pero, se localizan en diferentes rganos, tales como: la cmara del ojo, las
meninges y el rin donde los anticuerpos tienen poco acceso.
Para el diagnstico de esta zoonosis es muy importante conocer la patogenia de la
enfermedad y la metodologa diagnstica a utilizar en cada etapa de la infeccin.
Tener en cuenta el valor y las limitaciones de las diferentes tcnicas diagnsticas.
Ensayos experimentales realizados en cobayas preadas en distintos estados de
gestacin nos han permitido estudiar la patogenia in vivo.
Previo al estudio, los animales fueron testeados serolgicamente. Se utilizaron
cobayas preadas en estado 3 de gestacin (25 a 35 das), estado 4 (35 a 45 das),
estado 5 (45 a 55 das) y estado 6 (55 das hasta trmino de gestacin). Los animales
fueron inoculados va intraperitoneal con 1,5 ml. de una concentracin de 1x10
7

leptospiras por ml., conteo efectuado con cmara cuentabacterias de Petroff-Hauser.
La cepa utilizada fue Leptospira. interrogans Pomona aislada y clasificada, por
nosotros, a partir de orina de porcino.
Las cobayas estadio 5 y 6 abortaron a los 10 y 12 das post-inoculacin y los estados 3
y 4 murieron a la semana.
Cuando se produjo la muerte de los animales se procedi al estudio de los tejidos de
las madres y fetos, mediante las tcnicas de tincin de Warthin-Starry, Hematoxilina-
eosina y con tcnicas de inmunofluorescencia.
Las lesiones observadas en las cobayas preadas fueron hemorragias petequiales en
mucosas y rganos, pulmn en mariposa, esplenomegalia, hepatomegalia. El
microorganismo emigr al intersticio, a los tbulos renales y al lumen tubular,
causando nefritis intersticial y necrosis tubular.
En el hgado se observo necrosis centrilobular. La ictericia ocurri como resultado de
la hemlisis y la disfuncin hepatocelular.
Las leptospiras invadieron el msculo esqueltico, causando edema, vacuolizacin de
las miofibrilllas y necrosis focal. Esto da lugar a una alteracin de la microcirculacin
muscular y aumento de la permeabilidad capilar con salida de fluido y con
hipovolemia resultante.
En el tejido placentario se observ necrosis del sinciciotrofoblasto, depsito de
material fibrinoide y tromboembolismo en senos y vasos sanguneos. Las pequeas
arterias presentaban arteritis fibrinoide y haba coagulacin intravascular
diseminada.
El rea de unin tero-placentaria mostraba necrosis, hemorragias, infiltracin de
macrfagos y degeneracin vacuolar en grandes arterias. Las cepas inoculadas fueron
recuperadas en medio Fletcher a partir de placenta, rin, hgado y bazo materno.
Con la tcnica de Warthin- Starry se observaron leptospiras en placenta y en rin
materno (ver Lmina 1).
La tcnica de inmunofluorescencia directa con conjugado polivalente dio positiva en
los tejidos placentarios.
Se demostr la presencia del microorganismo con las tinciones de Warthin- Starry y
la inmunofluorescencia directa. Se logr el aislamiento recuperndose la cepa
inoculada. Todas las tcnicas directas utilizadas sirvieron para confirmar el
diagnstico de leptospirosis.
Se utilizaron tambin mtodos in vitro para el estudio de la patogenicidad;
inoculndose la cepa L. i. Pomona en BHK21 C13 (rin de hamster dorado bebe),
BoMac (macrfagos bovinos) y RK13 (clulas de rin de conejo).
A las 48 horas post-inoculacin se observaron efectos citopticos. En el BHK21 C13,
abalonamiento, vacuolizacin, prdida de integridad celular y lisis. En BoMac,
aumento del tamao celular y puntillado intracelular. En el RK13 no se observaron
cambios hasta las 96 horas. Todos los cultivos celulares testigos conservaron su
confluencia e integridad.
Las leptospiras produjeron agresin celular con distintos efectos citopticos.
Debemos tener en cuenta ante qu etapa de la enfermedad nos encontramos para
poder hacer un diagnstico correcto y una toma de muestra apropiada.
Las tcnicas bacteriolgicas nos brindaron resultados muy importantes, tales como la
observacin, el aislamiento y la identificacin del agente etiolgico.
El diagnstico de los casos de leptospirosis humana y animal puede ser complicado,
debido principalmente , a las caractersticas intrnsecas de las leptospiras y a la
epidemiologa. El diagnstico debe basarse en el aislamiento, pero dadas las
caractersticas de las leptospiras tales como el crecimiento difcil y lento se utilizan
otros mtodos ms sencillos como los serolgicos. Pero debemos tener en cuenta que
el diagnstico confirmativo de leptospirosis es el aislamiento(1).
El conocimiento sobre la patogenia y las tcnicas diagnsticas a utilizar nos permiten
tomar conciencia del impacto en la salud pblica y las graves prdidas econmicas en
las explotaciones ganaderas que produce la leptospirosis.
La prevalencia de esta importante zoonosis vara entre los distintos continentes y
pases y regiones.
La OMS informa que en humanos la tasa de incidencia tiene su variabilidad
notificndose entre 4 -100 casos por 100.000 habitantes en casos de pases tropicales y
subtropicales.
De la educacin sanitaria y de un buen diagnstico depender su control.



REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS



(1). Adler B., de la Pea Moctezuma A. Leptospira. In Pathogenesis of Bacterial
Infections of Animals. Blackwell Publishing, Iowa, USA. 2004; 385-396.
(2). Adler B., Faine S. Leptospira In Topley and Wilsons Microbiology and
Microbial Infections 10
th
Ed.( Borriello P., Murray P., Eds.) London, UK.
2005; 1865-1884.
(3). Alexander A. D., Lessel E. F., Evans L. B. et al. Leptospira. Manual of
Clinical Microbiology 5
th
Edition, American Society for Microbiology,
Washington DC., 1991; Cap. 53: 554-559.
(4). Brihuega B., Auteri C., Romero G. y col. Aislamiento de Leptospira de
glndula salival. Actas XVII Congreso Latinoamericano de Microbiologa X
Congreso Argentino de Microbiologa, Buenos Aires, Arg. 17-21 Noviembre
2004.
(5). Brihuega B.,Cacchione R., Auteri C. y col. Estudio de Leptospirosis en
Ciervos de la Provincia del Neuqun. Revista Acta Bioqumica Clnica Latino
Americana. 2003; 1: 102.
(6). Brihuega B., Martnez Vivot M., Craig L. Leptospirosis en llamas (Lama
Glama): Estudio serolgico. Revista Argentina de Produccin Animal; 1996;
16: 393-396.
(7). Cacchione R. Epidemiologia: un complejo capitulo en la leptospirosis. Rev.
Arg. de Zoonosis. 2005 ,2:116-121
(8). Cacchione R. A., Cascelli E., Sarav M. A. y col. Brote de Leptospirosis en
nios de Longchamps, Provincia De Buenos Aires, Argentina: Diagnstico de
Laboratorio. Rev. Arg. Microbiol. 1977; 9: 126-128.
(9). Cacchione R. A., Cascelli E., Zuberbuhler J. y col. Leptospirosis en animales
silvestres, aislamiento de una cepa de L. cancola de un peludo
(Chaetophractus villosus). Rev. Med. Vet. 1966; 47: 363-366.
(10). Faine S., Adler B., Bolin C.,y col. Leptospira and Leptospirosis. Second
Edition. 2000. Melbourne, Australia.
(11). Faine S. Leptospira and Leptospirosis. C. R. C. Press, Boca Raton. 1994;
353.
(12). Kronhaus A. Barriola J. y Sarav M. Aislamiento y Deteccin de Leptospira
interrogans a partir de mdula sea femoral de hamster inoculados
experimentalmente. Rev. Med. Vet. 1989; 70: 82-84.
(13). Levett P. N. Clinical Microbiology Reviews. 2001; 296-326.
(14). Martino P. E., Stanchi O., Arias D. O. y col. Riesgo de la Salud Pblica por
exposicin a animales de peletera. Analecta Veterinaria. 2000; 20, 1: 14-19
(15). Rossetti C. A., Uhart M., Romero G. y col. Detection of Leptospiral
antibodies in caimans from the Argentinean Chaco. Veterinary Record 2003;
153, 632-633.
(16). Stanchi N. O. y col. Familia Leptospiceae. Temas de Microbiologa
Veterinaria, Ed. Sur, La Plata. 1996; 159-175.
(17). Stanchi N. O., Grisola C. S., Martino P. E. y col. Presencia de Anticuerpos
Antileptospira en Ofidios de Argentina. Rev. Arg. de Microbiol. 1986; 18: 127-
130.