Boues Actives Starvation Improves Survival of Bacteria Introduced into Activated Sludge KAZUYA WATANABE, MARIKO MIYASHITA, AND SHIGEAKI HARAYAMA Applied and Environmental Microbiology, Sept. 2000 Benoit DRIENCOURT 19/11/2012 M2 Microbiologie MES 2012/2013 Universit de Lorraine Nancy Bactries + boue active = ! densit bactries " Lessivage " Prdation (protozoaires) Bactries phnol-dgradantes # dbarrasser les eaux uses de cette molcule corrosive pour le vivant Famine de 2 jours amliore survie de R. eutropha E2 dans la boue active " Changement hydrophobicit surface " Changements physiologiques Introduction Matriel " Bactrie " Boue Expriences " Survie " Phnol-oxydase " Changements morphologiques et physiologiques Conclusion Plan Isole depuis boues actives dune raffinerie dhuile Bactrie btonnet Gram-ngative du sol et de leau Classe des -protobacteries Respiration arobie et anarobie (dnitrification)
Fonction phnol hydroxylase grce aux gnes poxABCDEF permettant de crotre avec du phnol comme seule source de carbone Cultive sur milieu MP200 (200 mg phnol/L) et sur milieu LB Ralstonia eutropha E2 Matriel Isole dune station dpuration municipale au Japon Acclimate au phnol par un apport continu en MP200 Principe : bioaugmentation ! carbone organique de leau dans une station dpuration $ floculation pour sparer les particules de leffluent La Boue Active Matriel Survie des cellules E2 dans la boue active Expriences Table 1. Inocula utiliss dans cette tude Inoculum Milieu de culture Priode de famine (jours) Forme des cellules (dimensions [m]) Motilit L-0 LB Pas de famine Cylindrique (1 sur 35) Vigoureuse L-2 LB 2 Ovale (1 sur 2) Quelques cellules motiles L-7 LB 7 Ronde (1) Non P-0 MP200 Pas de famine Cylindrique (1 sur 35) Vigoureuse P-2 MP200 2 Ronde (1) Non P-7 MP200 7 Ronde (1) Non Boue active aclimate au phnol 20 jours avant dtre inocule avec ces inocula au jour 0
Nombre total de cellules dans le rservoir daration durant ltude : 3.10 9 6.10 9 cellules/ml
Les dynamiques de la population de cellules E2 furent analyses par qPCR Croissance de E2 sur milieu (a) LB ou (b) MP200. % Non affames. & Affames pendant 2 jours. Affames pendant 7 jours Parmi les inocula, seules les cellules P-2 ne montrent pas une rapide diminution en nombre durant les premiers jours Survie des cellules E2 dans la boue active Expriences RT-PCR montrant lexpression de lARN m pox dans la boue active inocule avec des cellules P-0 (a) et P-2 (b).
P-0 : dtection aux jours 0 et 1 P-2 : dtection partir du jour 1 et jusquau jour 7 Labsence de dtection ensuite serait due la baisse du nombre de cellules LARN m pox na pas t dtect dans les autres inocula Expression de Pox dans la boue active Expriences Au microscope : Rduction de la taille des cellules, changement de la forme des cellules et perte de motilit durant la famine Croissance sur MP200 # adhsion aux rsines hydrophobes (=hydrophicit) et aux flocs de boue (=capacit dadhsion aux flocs) aprs 2 7 jours de famine Laugmentation de ces caractristiques est moins apparente pour les cellules sur LB
Figure : Pourcentages de cellules adhrant aux rsines (pois) et aux flocs de boue (hachures) Changements physiologiques durant la famine Expriences Mesure des activits mtaboliques durant la famine : (a) Taux de respiration (b) Activit dshydrognase (c) Activit phnol-oxydase (non dtecte pour le LB) % Cellules cultives sur LB & Cellules cultives sur MP200 Influence de la quantit de rserves cellulaires ? Changements physiologiques durant la famine Expriences Dure de la famine # taux de survie en boue active Hydrophobicit # agrgation aux flocs protecteurs " Optimum ? Lexpression de phnol-oxydase semble importante pour la survie des bactries en boue active " Indispensable ? Expression de pox indtectable durant le 1 er jour des P-2 dans la boue mais rapide renversement les jours suivants ! tudes approfondies sur la physiologie de la survie attendre Conclusion Merci de votre attention
![Wastewater Treatment Plant Optimization FR[1]](https://imgv2-1-f.scribdassets.com/img/document/200131909/149x198/8c5ca04279/1420245979?v=1)
