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ASOCIACIN

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA


FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
SEMESTRE 2014 I
I CICLO
GUIA DE PRCTICA DE BIOLOGIA CELULAR Y
MOLECULAR
PROFESOR COORDINADOR:
Mg EDITH RODRIGUE! "UISPE
1
ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRACTICA N1
APLICACIN DEL MTODO CIENTFICO

I. OBJETIVOS :
Dar a conocer los lineamientos bsicos del mtodo cientfico y su aplicacin
Adiestrar al estudiante en el uso del mtodo cientfico para usarlos en el campo de la medicina.
II. MATERIALES :
Lectura (s) seleccionada (s) a partir de revista especializada.

III PROCEDIMIENTO.
- acer una descripcin de las diferentes etapas !ue comprende en mtodo cientfico.
- Leer el artculo seleccionado rpidamente para tener una idea "eneral del mismo.
- #roceda a leer el artculo cuidadosamente y analizarlo con el propsito de establecer lo si"uiente$
%. &econocimiento del problema planteado
'. (ormulacin de la )iptesis
*. (ormulacin de ob+etivos y mtodos
,. #rueba de )iptesis mediante la e-perimentacin
.. Anlisis de resultados y conclusiones.
/0.RESULTADO
- 1ntre"ar el reporte del artculo evaluado considerando todos los pasos del mtodo cientfico.
Artculo de la Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud
Pblica 201# #0$4%:&1&'20
Artculo de la Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud
Pblica 200( 2)$2%:2)0')2
2
ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRACTICA N2
LABORATORIO: INSTRUMENTAL Y BIOSEGURIDAD

III. OBJETIVOS :
Dar a conocer los lineamientos bsicos de or"anizacin2 instrumental y se"uridad en el laboratorio sea de
anlisis clnico o de investi"acin.
IV. MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO :
3ubos de ensayo
#lacas de #etri
#ipetas
4a"uetas o varilla de vidrio
5atraces(1rlenmeyer2 (iolas)
#robetas
#ropipeta
4ea6er (vasos de precipitacin)
#ipetas ("raduadas y volumtricas
5ec)eros de 4unsen y de alco)ol
Asas de 7olle o asa de siembra
4alanza analtica
1stufa o incubadora
1spectrofotmetros o colormetros
p metros
3
4
V. PROCEDIMIENTO :
A D!"#$%&#%'( )! *%&+" )! L,-+$,*+$%+ : #./(%#+0 %(1!"*%2,#%'( 3 ,#,)45%#+
1. ORGANI6ACIN :
8eneralmente los laboratorios funcionan de acuerdo a las actividades !ue )a de realizar se debe
considerar reas2 estructura y dise9o interior2 considerando lo si"uiente$
5esas de traba+o y repisa sobre la mesa
5esa para instrumentales (balanza2 microscopio2 p metro2 etc.)
Armarios para reactivos y material de vidrio
1-tractor de "ases.
2. SECCIONES :
:ada laboratorio puede presentar una o varias secciones dependiendo de la naturaleza de la
actividad. 1n forma "eneral el laboratorio debe contar reas fsicas o secciones$
3oma de muestra
;eparacin y clasificacin de muestras
Lavado y esterilizacin
Almacn
;ala de traba+o
B C.,"%7%#,#%'( 3 D!"#$%&#%'( 3 C8%),)+" )! .+" M,*!$%,.!" )! 59" U"+ !( !. L,-+$,*+$%+.
C+( ., ,38), )!. )+#!(*! &$+#!), , ., )!"#$%&#%'( 3 #.,"%7%#,#%'( 3 )%-8:+ )! ., 5!",; .+" 5,*!$%,.!"
&8!)!( "!$ #.,"%7%#,)+" #+5+: V+.854*$%#+"0 R!#%&%!(*!0 S+&+$*!0 )! 8"+ !"&!#/7%#+.
.1. C8%),)+ )!. 5,*!$%,. )! 1%)$%+:
3odo material de vidrio debe estar ubicado en una zona especfica y codificados. 1l material a
"uardar debe estar completamente limpio2 para lo cual debe ser sometido a un ri"uroso lavado2
dependiendo del caso se usar mezcla sulfocrmica o a"ua re"ia debiendo ser sometidos
posteriormente a numerosos en+ua"ues con a"ua corriente y finalmente con a"ua destilada o
bidestilada2 y otros podrn ser autoclavados. Los materiales sern sometidos a temperaturas de *<-
,.= : para el secado respectivo.
<.2. C8%),)+ )! !=8%&+":
3odo e!uipo o instrumental debe estar ubicado en una zona de poco transito2 alta iluminacin y en
una mesa slida. #ara el mane+o de los mismos se debe tener conocimiento de la manipulacin
debindose contar con el manual respectivo. Antes de comenzar a operar un e!uipo verificar el
volta+e2 resistencia y ampera+e del e!uipo.
3erminado el traba+o el instrumental debe !uedar limpio y apa"ado. Anotar en el cuaderno de
control la fec)a2 )ora de inicio y trmino de uso del e!uipo.

:)BIOSEGURIDAD:
La se"uridad en el laboratorio es de alta responsabilidad. :ual!uier actividad en un laboratorio
tiene ries"os potenciales. Las re"las "enerales son$
%. 1l laboratorio >? es un lu"ar para correr2 empu+ar y bromear.
'. Aprende donde esta y como se usa el e!uipo de se"uridad.
*. Lee todas las instrucciones para la actividad A>31; de empezar a traba+ar. #on atencin a
las notas !ue indican #&1:A@:/?>.
,. :ual!uier accidente2 informar inmediatamente al responsable del laboratorio.
.. >o comer ni beber en el laboratorio. >o probar nin"una sustancia !ue se use en el
laboratorio. Lavarse las manos antes y despus de cual!uier actividad.
A. Llevar a cabo solamente a!uellas actividades !ue se nos asi"na. >unca traba+es solo en el
laboratorio
<. 5antener el rea de traba+o limpia$ sin libros2 ni papeles2 ni e!uipo al"uno innecesario.
B. Ase"urarse de apa"ar las salida de "as2 mec)eros2 )ornillas y de cerrar todas las llaves de
a"ua al terminar la clase.
C. ;i"ue las instrucciones del profesor acerca de la forma adecuada de limpiar y reco"er los
materiales.
%D. @sar 5A>D/L para cubrir la ropa cuando se esta traba+ando en el laboratorio.

%%. Al calentar materiales2 inclinar el tubo de ensayo en direccin fuera de uno y de los dems.
C.1 SMBOLOS 3 PICTOGRAMAS DE SEGURIDAD:
1>R!#+(+#!$ 3 8-%#,$ .+" "/5-+.+" )! -%+"!28$%),) "!2?( ., #.,"%7%#,#%'( )!:
,)1!$*!(#%,0 &$+@%-%#%'(0 ",.1,5!(*+ 3 )! +-.%2,*+$%!),).
2> S%2(%7%#,)+ )! .+" &%#*+2$,5," !( .," !*%=8!*," )! .+" $!,#*%1+".


SMBOLO SIGNIFICADO SMBOLO SIGNIFICADO
T+ Muy Txico. O Comburente.
T Txico. C Corrosivo.
Xn Nocivo. Xi Irritante.
F Fcilmente Inflamable. E Exlosivo.
F+ Extrema!amente
Inflamable.
N "eli#roso ara me!io
ambiente.
VI.CUESTIONARIO:A!(*$!2,$ ,. %(%#%+ )! ., &$9#*%#, %(#.8%$ $!7!$!(#%," -%-.%+2$97%#,"
%. 1l vidrio es un material de amplio uso en el laboratorio E!u propiedades debe tener este
materialF
'. Dibu+e los smbolos de radiacin2 ries"o biol"ico2 producto cancer"eno.
*. :ules son las caractersticas de los smbolos de obli"atoriedad y de advertencia. Dibu+e % cada
uno de ellos.
,. Gu son los materiales corrosivos y comburentes2 de dos e+emplos de cada uno de ellos.
.. Gu es y cul es su importancia del espectrofotmetro y centrifu"a en la medicina.
V.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
!
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CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
INFORME PRACTICA N2: LABORATORIO: INSTRUMENTAL Y BIOSEGURIDAD
1;3@D/A>31$HHHHHHHHHHHHHHHH..
#&?(1;?&$HHHHHHHHHHHHHHHHH.
/>3&?D@::/?>
"
//. 5A&:? 31?&/:? (' :arrillas)
///. ?4;1&0A:/?>1;$
*.% M,*!$%,.!" )! R!#%&%!(*!
#
%.a) >ombre$HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH
b) :aractersticas-usoHHHHHHHHHHHHHH.

'.a) >ombre
b) :aractersticas-uso
*.a) >ombre
b):aracteristicas-uso
,.a) >ombre
b):aractersticas-uso
<.2 M,*!$%,.!" V+.854*$%#+"
%.a) >ombre
b):aractersticas-uso
'..a) >ombre
b):aracteristicas-uso
*. .a) >ombre
b):aractersticas-uso
<.< M,*!$%,.!" )! 8"+ E"&!#/7%#+:
%.a) >ombre
b):aractersticas-uso
$
'..a) >ombre
b):aractersticas-uso
*.a) >ombre
b):aractersticas-uso
,.a) >ombre
b):aractersticas-uso
.a) >ombre
b):aractersticas-uso
A. a) >ombre
b):aractersticas-uso
<. .a) >ombre
b):aractersticas-uso
B.a) >ombre
b):aractersticas-uso
,.;/54?L?; de ;18@&/DAD
,.% ;alvamento
1%
,.' ?bli"atoriedad
,.* Advertencia
,. #ro)ibicin
CONCLUSIONES:
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PRACTICA N <

RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLGICO DE LOS CARBOHIDRATOS
I. OBJETIVO
11
&econocer las unidades monomricas y macromoleculares como componentes fundamentales de todos los
seres vivos.
II. MATERIALES POR MESA
;olucin de 8lucosa al %I (5onosacrido)
;olucin de fructuosa al %I(5onosacrido)
;olucin de ;acarosa al %I (Disacrido2 azJcar comJn)
;olucin de 5altosa al %I (Disacrido)
;olucin de Almidn al %I (#olisacrido)
;olucin de Lu"ol
Kcido sulfJrico concentrado
&eactivo de 5olis)
&eactivo de 4enedict
3ubos de %*-%DD
3ubos de %A-%.D
#ipeta de vidrio de . ml. "raduada
#ropipeta
#inzas de madera
5ec)eros2 trpode2 re+illa de asbesto
8uantes
#lumn marcador
III. PROCEDIMIENTO
<.1. D!*!$5%(,#%'( G!(!$,. )! G.?#%)+" A$!,##%'( )! M+.%"@:
Los 8lJcidos o idratos de carbono por accin des)idratante del cido sulfJrico ori"inan compuestos
derivados del furfural2 los !ue en presencia del alfa-naftol presente en el R!,#*%1+ )! M+.%"@2 formarn un
compuesto coloreado.
P$!&,$,#%'(:
%. :olocar % ml. De cada solucin del "lJcido al %I (8lucosa2 (ructuosa2 ;acarosa y Almidn) en un
tubo de %*-%DD y roturarlo.
'. Adicionar a cada tubo con "lJcido una (%) "ota del &eactivo de 5olis)2 a"itar suavemente.
*. A"re"ar lentamente por la pared del tubo sin a"itar % ml. de cido sulfJrico concentrado.
,. ?bservar la formacin de un anillo coloreado en la zona de interfase.
<.2. D!*!$5%(,#%'( )! AB?#,$!" R!)8#*+$!":
@n AzJcar reductor al ser sometido a la accin del calor en el medio alcalino del R!,#*%1+ )! B!(!)%#*2
sufre fenmenos de enolizacin y se fra"menta formando cuerpo fuertemente reductores para el cobre del
&eactivo de 4enedict !ue se transforma en /on cuproso (:u
L
) el !ue reaccionar con los iones ?
-
del
medio para formar ?-ido cuproso (:u'?) !ue es de color ro+o ladrillo.
P$!&,$,#%'(:
%. :olocar ' ml. de cada solucin de "lJcido al %I (8lucosa2 (ructuosa2 ;acarosa2 5altosa y Almidn)
en un tubo de %A-%.D mm y roturarlo.
'. Adicionar % ml. de &eactivo de 4enedict a cada tubo.
*. ;ometer los tubos a ebullicin en a"ua )irviendo en un bea6er por . minutos.&etirarlos con ayuda
de una pinza.
,. ?bservar la formacin de color (ro+o ladrillo si es positivo)
<.<. D!*!$5%(,#%'( )! A.5%)'(:
1l yodo del Lu"ol es absorbido por el almidn a nivel de los enlaces "lucosidicos y forma con l compuestos
12
comple+os de color azul ne"ruzco (yoduro de almidn).
P$!&,$,#%'(:
%. :olocar ' ml. de solucin de Almidn al %I en un tubo de %A-%.D mm.
'. Adicionar * "otas de Lu"ol y a"itar.
*. ?bservar la formacin de color (azul ne"ro si es positivo)
,. :alentar el tubo )asta perder el color y lue"o enfriar el tubo.
IV. CUESTIONARIO: A!(*$!2,$ ,. %(%#%+ )! ., &$9#*%#, >%(#.8%$ $!7!$!(#%," -%-.%+2$97%#,"
%. Di"a cuales son las principales fuentes de carbo)idratos en nuestra dieta y cul es el re!uerimiento
diarioF
'. Definir azJcares reductor y no reductor2 de ' e+emplos.
*. 1-pli!ue el si"nificado de deficiencia de disacaridasa2 de un e+emplo.
,. 1stablezca las diferencias estructurales y funcionales entre el almidn y el "luc"eno
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CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
INFORME PRACTICA N< RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLGICO DE LOS
CARBOHIDRATO
1;3@D/A>31$HHHHHHHHHHHHHHHH..
#&?(1;?&$HHHHHHHHHHHHHHHHH.
I./>3&?D@::/?>
13
//.5A&:? 31?&/:?
14
///.?4;1&0A:/?>1; M&1;@L3AD? e />31&#&13A:/N>
1. D!*!$5%(,#%'( G!(!$,. )! G.?#%)+" A$!,##%'( )! M+.%"@ :
&eactivos usados$
a-5uestras$ HHHHH
b-&esultado y 1-plicacin fundamentada de lo ocurrido.$
1
2. D!*!$5%(,#%'( )! AB?#,$!" R!)8#*+$!" AR!,##%'( B!(!)%#*
&eactivos usados$
a. 5uestras$ HHHHH L L
b. &esultado y 1-plicacin o fundamentada de lo ocurrido.$
<.D!*!$5%(,#%'( )!. A.5%)'( :
&eactivos usados$
a. 5uestras$ HHHHH L L
b. &esultado y 1-plicacin o fundamentada de lo ocurrido.$
1!
/0.:?>:L@;/?>1;
0.&1(1&1>:/A; 4/4L/?8&A(/:A;
1"
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PRACTICA N C

RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLOGICO DE LIPIDOS 0 PROTEINAS 3 ADN
I. OBJETIVO
&econocer !ue compuestos or"nicos como los lpidos y protenas son constituyentes importantes en todos
los seres vivos.
II. MATERIALES POR MESA
Aceite comestible
AlbJmina al 'I
Alco)ol
:loroformo
Oter etlico
;olucin alco)lica de ;udam ///
idr-ido de sodio al ,DI
idr-ido de sodio al 'DI
;ulfato de cobre al %I
Kcido ntrico concentrado
1tanol (&/?
;olucin de Lisis$ 1D3A2;D;2>A:l
Azul de metileno
3inta ro+a
A (resas
8asas
4a"uetas
3ubos de %A - %.D mm.
#ipetas "raduadas de . ml.
5orteros
1mbudos
8uantes
#ropipetas
#robeta de %Dml
III. PROCEDIMIENTO
1.DETERMINACION DE LIPIDOS
A. S+.8-%.%),) )! .+" L/&%)+"
Los lpidos son insolubles en a"ua y solubles en solventes or"nicos como el ter y cloroformo.
P$!&,$,#%'(:
%. :olocar % ml. de Aceite en cada tubo y a"itar
1#
'. A"re"ar$
1n el tubo >= %$ % ml de a"ua destilada
1n el tubo >= '$ % ml. de Alco)ol
1n el tubo >= *$ % ml. de cloroformo
1n el tubo >= ,$ % ml. de ter etlico
*. A"itar (con la misma intensidad a cPu) los tubos..
,. ?bservarlos y determinar el "rado de solubilidad de mayor a menor.
B. S+.8-%.%),) 3 T%(#%'( !( S8),5 III
1l ;udam /// es un tinte diazo del tipo lisocromo altamente soluble en lpidos ti9indolos en la
"ama del del ro+o cereza al anaran+ado.
P$!&,$,#%'(:
%. :olocar % ml. de aceite comestible en dos tubos de %*-%DD mm.
'. Adicionar % ml. de ;udam /// a uno de ellos y al otro a"re"ar %ml de tinta ro+a2 a"itar de+ar reposar .
*. ?bservar la coloracin producida en en la zona del aceite en uno de los tubos.
C. S,&+(%7%#,#%'(.
Las "rasas reaccionan en caliente con )idr-ido sdico o potsico descomponindose en "licerina y
cidos "rasos. Ostos se combinan con iones sodio o potasio del )idr-ido para dar +abones2 !ue son por
ende las sales sdicas o potsicas de los cidos "rasos.

%. :olocar en un tubo %A-%.Dmm 'ml de aceite y 'ml de >a? 'DI.
'.A"itar enr"icamente y colocar el tubo en ba9o mara de 'D a '. minutos.
*. ?bserve en el tubo las * fases$ inferior !ue contiene la solucin de soda sobrante +unto con "licerina
formada2
?tra intermedia semislida !ue es el +abn formado y la superior lpidica de aceite inalterado.

1$
2.DETERMINACION DE PROTEINAS
A. REACCION DE BIURET
Los compuestos !ue contienen dos o ms enlaces peptdicos forman un comple+o con las sales de
cobre en un medio fuertemente alcalino2 dando un color pJrpura o violeta.
P$!&,$,#%'(:

%. :olocar ' ml. de la solucin de AlbJmina al %I o solucin :lara de )uevo al %DI en un tubo
de %A-%.D mm.
2. A"re"ar ' ml. de la solucin de H%)$'D%)+ )! "+)%+ ,. CEF y mezclar.
<. A9adir ' "otas de S8.7,*+ )! #+-$! ,. 1F.
,. /ncubar a *<Q : por %D minutos.
.. ?bservar la coloracin producida.
B. REACCIN GANTOPROTECA
;e emplea para determinar la presencia de protenas solubles en una solucin2 empleando cido
ntrico concentrado (>?*). Las protenas !ue presentan aminocidos con anillos bencnicos2 dan
derivados nitro"enados !ue se colorean de amarillo.
P$!&,$,#%'(:

%. :olocar ' ml. de la solucin de AlbJmina al %I o :lara de )uevo al %DI en un tubo de
%A-%.D
'. Adicionar ' ml. de cido ntrico concentrado.
*. ?bservar la formacin de un precipitado blanco y )ervir por * minutos.
,. ?bservar la coloracin producida.
<. EGTRACCIN DE ADN
%.:olocar , ml de solucin de lisis adicionar tres fresas (sin )o+a) en un mortero2 proceder a triturar
por
Aminutos.
'. ;e"uidamente filtre lo triturado con la ayuda de un embudo con "asa en un tubo de %A-%.D.
*. A9adir al filtrado . ml .de etanol frio e introducir rpidamente una ba"ueta del"ada y "irar sobre su
mismo
e+e a fin para recuperar el AD> .
,. &econocer el carcter cido del material obtenido usando un colorante bsico como el azul de metileno.
IV. CUESTIONARIO:
%. Gu son los disolventes or"nicosF
'. :ul es la composicin bsica de AD>
*. Gu es la obesidad y la proteinuria
,. Gu supone la desnaturalizacin de una protenaF
2%
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INFORME PRACTICA NC RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLGICO DE LIPIDOS0
PROTEINA Y ADN
1;3@D/A>31$HHHHHHHHHHHHHHHH..
#&?(1;?&$HHHHHHHHHHHHHHHHH.
/./>3&?D@::/?>
21
II. MARCO TEORICO
22
III. .?4;1&0A:/?>1; M&1;@L3AD? e />31&#&13A:/N>
%.Lpidos
a. ;olubilidad (total2 parcial2 insoluble)
5uestra$
;olventes usados$
&esultado y (undamento$
%.b ;olubilidad y tincin en ;udan ///
5uestra$
&eactivo usado$
&esultado y (undamento$
1.# S,&+(%7%#,#%'(:
5uestra$
&ectivos$
(undamento$
23
2. P$+*!%(,"
2., &eaccin de 4iuret
5uestra$
&eactivos usados$
&esultados y (undamento
2-. &eaccin Rantoproteica
5uestra$
&eactivos usados$
&esultados y (undamento
<.ED*$,##%'( ADN
5uestra$
&eactivos usados$
&esultados y (undamento
24
IV.CONCLUSIONES DE LA PRACTICA
V.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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PRACTICA NHI
MICROSCOPIA: ESTUDIO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO
2
I. OBJETIVO
%. :onocer e identificar correctamente las partes pticas y mecnicas del microscopio compuesto.
'. (amiliarizar al alumno con el uso correcto2 cuidado y conservacin del microscopio.
II. MATERIALES
5icroscopios
Lminas o portaob+etos
Laminillas cubreob+etos
Lminas artrpodo (pio+o2 pul"a2 )
;uero fisiol"ico
#ipeta #asteur
% #lumn indeleble
#apel lente
(ibra de pelo y lana
.
///. PARTES DEL MICROSCOPIO
&econocer cada una de las si"uientes partes del microscopio$
PARTE MECANICA
3ubo portalentes y cremallera
3ornillos macro y micromtrico
&evolver
#latina
:ondensador
4razo y #ie
PARTE OPTICA
?cular
?b+etivos
1spe+o
Lentes de condensador
Diafra"ma

/0. SISTEMAS QUE COMPRENDE EL MICROSCOPIO


%. ;istema de soporte$ comprende el brazo2 el pie2 el tubo ocular2 el revolver y la platina.
'. ;istema de /luminacin$ comprende el foco2 condensador y diafra"ma.
*. ;istema de A+uste$ comprende el macromtrico2 micromtrico y cremallera
,. ;istema de Aumento$ comprende el ocular "eneralmente de %D - 2 %. - y los ob+etivos de .-2 %D2 ,D2 y
%DD-.
2!
IV.1.1.1.1.1.1.1. PROCEDIMIENTO.
%.#reparar lminas )Jmedas ("ota de suero fisiol"ico mas la muestra) con )ebra de al"odn2 )ebra de cabello2
letra SeT en posicin de lectura .
'. &ealizar las observaciones de dic)as muestras con los ob+etivos,-2 %D- y ,D-
*. 0erificar con la lmina de la letra SeT2 !ue los movimientos en estos sistemas son invertidos.
,.?bservar con los ob+etivos de ,- y %D- las lminas de artrpodos.
/0.%.%.%.%.%.%.'. :@1;3/?>A&/?
%. Definir !ue es una ima"en real y !ue una ima"en virtual
'. :ules son las unidades de medida de lon"itud empleadas en microscopiaF
*. Defina aumento y2 resolucin del microscopio.
,. :mo se define un microscopio electrnico y cules son sus aplicaciones mdicas.
IV111111# RE&ERE'()AS
*)*+),-RA&)(AS
2"
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CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
INFORME PRACTICA NI MICROSCOPIA: ESTUDIO Y MANEJO DEL
MICROSCOPIO
1;3@D/A>31$HHHHHHHHHHHHHHHH..
#&?(1;?&$HHHHHHHHHHHHHHHHH.
/. />3&?D@::/?>
2#
//.5A&:? 31?&/:?
2$
///.?4;1&0A:/?>1;
1. Muestra de Al/od0n

41 1%1
Aumento 3otal$ Aumento 3otal$
:aractersticas$ :aractersticas$
3%
Aumento total$
4%x
:aractersticas$
2.Muestra de (abello

41 1%1
Aumento 3otal$ Aumento 3otal$
:aractersticas$ :aractersticas$
31
Aumento total$
4%x
:aractersticas$
3.Muestra de letra 2e3

41 1%1
Aumento 3otal$ Aumento 3otal$
:aractersticas$ :aractersticas$
32
Aumento total$
4%x
:aractersticas$
4.Muestra de Pediculus humanus 2Pio4o3

41 1%1
Aumento 3otal$ Aumento 3otal$
:aractersticas$ :aractersticas$
33
.Muestra de Pulex irritans 2Pul/a3

41 1%1
Aumento 3otal$ Aumento 3otal$
:aractersticas$ :aractersticas$
/0.:?>:L@;/?>1;
0.&1(1&1>:/A; 4/4L/?8&A(/:A;

34
A;?:/A:/N> @>/01&;/DAD #&/0ADA ;A> U@A> 4A@3/;3A
(A:@L3AD D1 :/1>:/A; D1 LA ;AL@D
1;:@1LA #&?(1;/?>AL D1 51D/:/>A @5A>A
:@&;? D1 4/?L?8/A :1L@LA& V 5?L1:@LA&
#&A:3/:A >= A
?4;1&0A:/?>1; :1L@LA&1;$ #&?:A&/?31; (4A:31&/A;) V 1@:A&/?31; (?>8?;2 #A&K;/3? ).
/. ?4U13/0?
:onocer diversos or"anismos microbianos denominados 4acterias2 #rotozoarios2 )on"os y parsitos !ue estn
formados por una sola o varias clulas y !ue )abitan diversos medios naturales.
0isualizar ciertas caractersticas estructurales en ellas.
5A31&/AL1; #?& 51;A
Laminas con tincin de 8ram de Escherichia coli (bacilos) y ;treptococcus (cocos)
Lminas con 3incin de Wie)l >eesel de Mycobacterium
Laminas de muestra fun"ales (on"os)$ #enicillium
5uestra de 3enia
#alitos mondadientes
;olucin fisiol"ica al D.B.I
;olucin 5ercurio cromo
;olucin de 0ioleta de "enciana
Alco)ol yodado
Lamina portaob+etos
Lamina cubreob+eto
Aceite de inmersin
Depsito para eliminar lminas y laminillas.
5icroscpios
8uantes
#lacas #etri
#&?:1D/5/1>3?
%.?bservacin de 5icroflora bacteriana en cavidad bucal (3incin de 0a")
%. :olocar una "ota de solucin fisiol"ica sobre una lmina.
'. :on el mondadientes obtener una muestra de sarro dental y esparcir con movimientos circulares
en la "ota de solucin fisiol"ica.
*. ;ecar a temperatura ambiente y lue"o cubrir con colorante 5ercurio de cromo por . minutos.
,. 1n+ua"ar y aplicar inmediatamente el colorante 0ioleta de "enciana2 de+ar por * minutos2 para
lue"o lavar con a"ua de ca9o.
.. De+ar secar la muestra preparada por accin del calor o al medio ambiente.
A. ?bservar la lmina de %DD-. e identifi!ue las diferentes formas bacterianas.
'.. ?bservacin de or"anismo procarionte en la lmina de E. coli (tincin de 8ran) con el ob+etivo de
%DD-.
*.?bservacin de or"anismo procarionte en Lmina de Streptococcus(tincin de 8ram) con el ob+etivo
de %DD-.
,.?bservacin de Mycobacterium turbeculosus (tincin Wie)l >eesel) con el ob+etivo de %DD-
3
.. ?bservacin de or"anismo eucarionte del reino fun"i con los ob+etivos de ,- y %D- (lminas
coloreadas con azul de lactofenol)
A. ?bservacin de un parsito (identifi!ue sus partes). @se 8uantes.
CUESTIONARIO
%. 1stablezca diferencias entre un or"anismo #rocarionte y eucarionte.
'. Gu es la tincin o coloracin de 8ram2 como se realizaF
*. :ules son las dos formas tpicas de los )on"os
,. Describa . enfermedades producidas en el )ombre por bacterias y )on"os

4A:31&/A; (#rocarionte)


?>8?; (1ucarionte)
3!
Penicillium
"$%$&ITO 'E(C$%IONTE)


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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
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CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
3"
PRACTICA N J

OBSERVACION DE MEMBRANA Y PARED CELULAR: CELULA ANIMAL Y VEGETAL
I. OBJETIVO
#oder diferenciar al microscopio las caractersticas !ue presentan la membrana celular de la clula animal
y la pared celular de la clula ve"etal.
//. MATERIALES POR MESA
5uestra de clula epitelial de la mucosa bucal
5uestra de catfila de cebolla (Allium cepa)
Lmina de )on"os$ Penicillium y Aspergillius
5icroscopios
Lminas portaob+etos
Laminillas cubreob+etos
4istur
#inza de punta recta
5ec)ero de alco)ol
:olorante Azul de metileno
:olorante Lu"ol
Alco)ol yodado
;olucin fisiol"ica
#apel secante
#apel lente
///. PROCEDIMIENTO
A OBSERVACION DE CELULA ANIMAL ARASPADO DE MUCOSA BUCAL
%. :olocar una "ota de solucin fisiol"ica sobre dos lminas portaob+etos.
'. :on la ayuda de un )isopo )acer un raspado de la mucosa bucal.
*. :olocar la muestra obtenida sobre las lminas !ue tienen la "ota de solucin fisiol"ica2
,. A"re"ar a una lmina una "ota de suero fisiol"ico y a la otra aplicar una "ota del colorante azul
de metileno.
.. :ubrir las preparacines con una laminilla cubreob+eto.
A. ?bservar las lminas con ob+etivo de %DR y ,DR.
3#
1> M!5-$,(, &.,"59*%#,0 2> M%*+#+()$%,0
<> R!*/#8.+ !()+&.9"5%#+ $82+"+0 C> R%-+"+5,"0
I> N8#.!+.+0 K> C$+5,*%(,0
J> C%*+"+. AL@%,.+&.,"5,0 M> D%&.+"+5, AL#!(*$%+.+"0
N> R!*/#8.+ !()+&.9"5%#+ .%"+0 1E> A&,$,*+ )! G+.2%
B OBSERVACION DE CELULA VEGETAL ACATAFILA DE CEBOLLA
%. :on ayuda de la pinza separe una de las catfila de la cebolla y e-tindalo sobre la lmina
portaob+eto.
'. :on el bistur corte cuadritos de medio centmetro de catfila.
*. Dispon"a de dos lminas y colo!ue en ella un cuadradito de catfila.
,. A"re"ar a una lmina una "ota de suero fisiol"ico y en l otra una "ota del colorante lu"ol
,. :ubrir las preparacines con una laminilla cubreob+eto.
.. ?bservar con ob+etivos de %D- y ,D-
C OBSERVACION DE UNA CELULA FUNGICA
%. 1n una lmina preparada observar un cultivo de )on"o coloreada con Azul de Lactofenol.
'. ?bservar con ob+etivos de menor y mayor aumento
*. &econocer sus partes y precisar su pared celular. .
HONGOS PLURICELULARES

Aspergillius
3$
Penicillium :
%. :onidiforo '. 5tula *. (ilide ,. 1sporas
/0. CUESTIONARIO
%. Gu es una clula epitelial2 !u funcin tienen y cuantos tipos se reconocen.
'. :ules son los componentes de las paredes celulares de las bacterias2 )on"os y ve"etales
*. Defina tincin vital y supravital
,. Gu es el lu"ol 2 cual es formula y cules son sus aplicaciones.
4%
AS,()A()5' 6')7ERS)8A8 PR)7A8A SA' 96A' *A6:)S:A
&A(6+:A8 8E ()E'()AS 8E +A SA+68
ES(6E+A PR,&ES),'A+ 8E ME8)()'A ;6MA'A
(6RS, 8E *),+,-)A (E+6+AR < M,+E(6+AR

PRA(:)(A '= #

&E',ME',S &)S)(,S 8E +A (E+6+A> 8)&6S),'? ,SM,S)S
,*9E:)7,
,bservar los @en0menos de di@usi0n y 0smosis y su importancia
para la cAlula.
)). MA:ER)A+ES

+Bminas portaob4eto
+aminillas cubreob4etos
:ubos de prueba
+ancetas Cematol0/icas
Soluci0n de 'a(l al %.4D Emedio ;)P,:,')(,F
Soluci0n de 'a(l al %.$D Emedio )S,:,')(,F
Soluci0n de 'a(l al 2.%D Emedio ;)PER:,')(,F
A/ua destilada
AlcoCol corriente
Al/od0n estAril
Pipetas de 1 ml.
-radillas
Microscopios
Papel lente
))). PR,(E8)M)E':,
AF Experimento con eritrocitos EcAlula animalF>
1. Recepcionar tubos de prueba per@ectamente rotulados
conteniendo>
En el 1er. tubo> 3 ml. de Sol. 'a(l al %.4 D
En el 2do. tubo> 3ml. de Sol. 'a(l al %.$ D
En el 3er. tubo> 3ml. de Sol. 'a(l al 2.% D
2. (olocar 1 /ota de cada concentraci0n de la sol.'a(l en
lBminas portaob4etos.? previamente rotular.
3. 8esin@ectar el dedo cordial EterceroF con al/od0n
Cumedecido en alcoCol y realiGar una punci0n con ayuda de
la lanceta descartable? en el pulpe4o del dedo.
4. 8e4ar caer 1 /otas de san/re a cada lBmina y con la
ayuda de la laminilla meGclar suavemente? de4ar en reposo
por 2 minutos.
41
. (olocar el cubreob4eto o laminilla y observar en el
microscopio.

*F Experimento con catB@ila de cebolla EcAlula ve/etales>
1. (olocar 1 /ota de cada concentraci0n de 'a(l en lBminas
0 portaob4eto previamente rotuladas.
2. A/re/ar a cada lBmina trocitos de cata@ila de cebolla.
3. 8e4ar en reposo dos minutos? para lue/o cubrirla con
una laminilla.
4. ,bservar al microscopio 1%x y 4%x
)7. RES6+:A8,>
5@1;3&A 51D/? (1>?51>?
%
;ol.>a:lD.,I L san"re

' ;ol.>a:l D.C I L san"re /sotnica
*
;ol. >a:l ' I L san"re

ipertnica
,
;ol2>a:l D., L 1!2!*,. ipotnica
. ;ol.>a:l D.C L ve"etal /sotnica
A ;ol.>a:l ' L ve"etal

ipertnica
VI. CUESTIONARIO
%. EGu tipo de difusin es la osmosis y !u es presin osmticaF.
'. Defina !ue es$ Dilisis2 3ur"encia y #lasmlisis.
*. EGu si"nifica )omeostasisF
,. 1n !u consiste los fenmenos de crenacin y citlisis
42
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PRACTICA NN


ORGANISMOS MOVILES: PSEUDOPODOS0 CILIOS Y FLAGELOS.
/. OBJETIVOS
%. 0erificar y comprender el movimiento de la clula de vida libre.
'. ?bservar y comprobar la e-istencia de estructuras para el movimiento celular.
*. Lle"ar a diferenciar las diferentes estructuras !ue intervienen en el movimiento celular2 )acer una
comparacin entre ellas.
//. MATERIALES
A. MATERIAL DE LABORATORIO
5icroscopios
#lacas #etri
#ipetas pasteur %ml
8uantes
Lminas portaob+etos
Laminillas cubreob+etos
8otero o #ipeta de % ml.
:olorantes$ -Lu"ol al ,I
-0erde de metilo
- ro+o neutro


4. MATERIAL BIOLOGICO
:ultivo de #rotozoarios.
///. PROCEDIMIENTO
:ultivo de #rotozoarios$
1n un frasco mediano de boca anc)a2 con a"ua estancada2 preparar$ arroz2 zana)oria2
lec)u"a picada y levadura
5antener abierto al aire libre durante A das2 en un lu"ar donde no )aya luz directa.
43
IV. OBSERVACION
A) M+1%5%!(*+ ,5!-+%)!+ &+$ "!8)'&+)+"$ A5+!-, &$+*!8" (:lase ;arcodina)
%. ;obre una lmina portaob+etos2 con un "otero colo!ue una "ota del cultivo de protozoarios !ue
conten"a Amoeba2 cubrirlo lue"o con una laminilla cubreob+etos.
2. A9adir despus de )aber observado una "ota de V!$)! )! 5!*%.+ o L82+..
*. Dibu+ar las observaciones realizadas a %D-2 'D- y ,D-.
4) M+1%5%!(*+ 7.,2!.,$ &+$ 7.,2!.+"$ E82.!(, 1%$%)%" (:lase 5asti"op)ora)
%. ;obre una lmina portaob+etos2 colocar una "ota de cultivo !ue conten"a 1u"lena y cubrir con una
laminilla cubreob+etos.
'. A9adir despus de )aber observado una "ota de verde de metilo o Lu"ol.
*. Dibu+ar las observaciones realizadas.
44
:). M+1%5%!(*+ #%.%,$ &+$ #%.%+"$ P,$,5!#%85 #,8),*85 (:lase :iliop)ora)
%. ;obre una lmina portaob+etos2 colocar una "ota de cultivo !ue conten"a #aramecium2 y cubrirlo con
una laminilla cubreob+eto.
'. A9adir despus de )aber observado la muestra anterior2 una "ota de verde de metilo o Lu"ol.
*. Dibu+ar las observaciones realizadas.
V. PROTOCOLO : REALI6AR ESQUEMAS DE LO OBSERVADO
A@51>3?
A5+!-, &$+*!8" E82.!(, 1%$%)%" P,$,5!#%85 #,8),*85
4
(;arcodina) (5asti"op)ora) (:iliop)ora)
%D R
'D R
,D R
VI. CUESTIONARIO
%. A !ue atribuye la "ran movilidad de los #rotozoarios.
'. 1-pli!ue las diferencias entre los diferentes tipos de movimientos$ por seudpodos2 fla"elos2 cilios.
*. Gue es el ;ndrome de 7arta"ener y su importancia mdica.
,. 1-pli!ue tres enfermedades producidos por protozoarios2 fla"elados y no fla"elados.
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PRACTICA N H 1E

4!
ESTUDIO DE ORGANELOS CELULARES: MITOCONDRIAS0 LISOSOMAS0 CLOROPLASTOS Y
PLASTIDOS.
I. OBJETIVO :
5ediante el empleo de la tcnica de coloracin vital se observarn las mitocondrias presentes slo
en el citoplasma de las clulas 1ucariotas2 !ue vienen a constituir las Scentrales de ener"aT por!ue
producen y almacenan ener"a ba+o la forma de A3#.
Las clulas tienen vesculas membranosas !ue contienen enzimas )idrolticas !ue permiten la
di"estin intracelular y !ue corresponden a los lisosomas los cuales pueden pueden ser
identificados en protozoarios con una tincin vital.
:on el uso de suero fisiol"ico observar &.,"*%)+" en las clulas ve"etales eucariticas2 los !ue
contienen pi"mentos y pueden sintetizar y acumular diversas sustancias2 como los L!8#+&.,"*+"
!ue son plastidos incoloros2 los A5%.+&.,"*+" !ue acumulan almidn2 los P$+*!%(+&.,"*+" !ue
acumulan protenas2 los E.,%+&.,"*+" !ue acumulan "rasas y aceites esenciales. Los C$+5+&.,"*+"
son plastidos coloreados como el C,$+*!(+ !ue presenta un pi"mento de color naran+a2 el
L%#+&!(+ de color ro+o2 la G,(*+7%., de color amarillo y los C.+$+&.,"*+" !ue presentan un
pi"mento de color verde y cuya funcin principal es realizar la fotosntesis.
II. MATERIALES POR MESA $
5uestra de$
:lulas de epitelio bucal
o+a de 1lodea (:loroplastos)
A+ amarillo (Rantofila)
Wana)oria (caroteno)
#apa (Amiloplastos)
4etarra"a (Antocianina)
:ultivo de protozoarios con ro+o neutro
5icroscopios
o+a de bisturi
#inzas en punta
Laminas portaob+eto
Laminillas cubreob+eto
;olucin 0erde Uanus %P%D2DDD
(rascos con Lu"ol
(rasco con ;uero (isiol"ico
8oteros con c)upn de +ebe
isopos
5ec)eros de alco)ol
III. PROCEDIMIENTO :
A OBSERVACION DE MITOCONDRIA EN EPITELIO BUCAL$
%. :on una lmina limpia y mediante un raspado suave obtener una muestra de la mucosa bucal2
'. &ealizar un frotis e-tendiendo la muestra sobre otra lmina2
*. De+ar secar la lmina con la muestra al medio ambiente2
,. :ubrir la muestra con 0erde Uanus durante . minutos2
.. 1liminar el e-ceso de colorante y de+ar secar al medio ambiente2
A. ?bservar al microscopio con ob+etivos de %D- y ,D-.
B OBSERVACION DE LISOSOMAS !( PROTO6OARIOS
%. :olocar en una lmina dos "otas cultivo de protozoarios.
'. :ubrir con una laminilla y observar los lisosomas a %D- y ,D-.
:.OBSERVACION DE PLASTIDOS EN VEGETALES$
CLOROPLASTOS $ ;e localizan en las )o+as deba+o de la epidermis superior.
4"
%. ;eleccionar una )o+a +oven de 1lodea2 colocarla sobre una "ota de a"ua en una lamina portaob+eto.
'. :ubrir la muestra con una laminilla.
*. ?bservar al microscopio con ob+etivo de menor y mayor aumento.
CROMOPLASTOS $ ;on or"anelas coloreados y presentan formas variadas (redondas2 elpticas2 o
aciculares).
%. &ealizar cortes finos de zana)oria2 a+ amarillo2 betarra"a sobre una lmina portaob+etos
'. :olocar una "ota de a"ua sobre el corte.
*. :ubrir con una laminilla.
,. ?bservar al microscopio con ob+etivos de menor y mayor aumento.
AMILOPLASTO $ ;on or"anelas !ue contienen almidn como sustancia de reserva.
%. ;obre una lmina portaob+etos colocar una "ota de Lu"ol.
'. A"re"ar un corte transversal fino de papa .
*. :ubrir con una laminilla.
,. ?bservar al microscopio con ob+etivo de menor y mayor aumento.
IV. PROTOCOLO $

5@1;3&A; OBSERVACIN DE MITOCONDRIA2 :L?&?#LA;3?; V #LA;3/D/?;
'D R ,D R 3/#? D1 ?&8A>1LA N
#LA;3/D/?
1#/31L/? 4@:AL
:@L3/0?
#&?3?W?A&/?
?UA D1 1L?D1A
AU/ A5A&/LL?
WA>A?&/A
413A&&A8A
#A#A
0. :@1;3/?>A&/?
%. EGu son las patolo"as mitocondrialesF.
'. EGu relacin tiene los lisosomas y la autofa"iaF
*. #or!ue las mitocondrias fi+an el verde de Uanus.
,. Gue funcin cumplen los plastidios en las clulas.
4#
AS,()A()5' 6')7ERS)8A8 PR)7A8A SA' 96A' *A6:)S:A
&A(6+:A8 8E ()E'()AS 8E +A SA+68
ES(6E+A PR,&ES),'A+ 8E ME8)()'A ;6MA'A
(6RS, 8E *),+,-)A (E+6+AR < M,+E(6+AR
PRACTICA N H 11
ACCION EN6IMATICA
I. OBJETIVO :
4$
:onocer el mecanismo de accin de las enzimas durante una reaccin !umica.
:onocer como actJa un catalizador.
//. MATERIALE S$
8radilla
5ortero con piln "ado de pollo
3ubos de prueba de %A -%.D P%*-%DD isopos
A"ua o-i"enada (sforos
Di-ido de 5an"aneso #ipetas pasteurss
Azul de metileno #ipetas%ml
Aceite :loruro de sodio
;uccinato sodio D2%5 8radilla
4uffer (osfato p<., #lacas #etri
>a:l D2CI
4isturi

///. FUNDAMENTACION $
Las 1nzimas tienen como funcin acelerar la velocidad de una reaccin !umica. 1l mecanismo de accin
se realiza de la si"uiente manera$
@nin de un ;ustrato a la 1nzima para formar un :omple+o 1nzima- ;ustrato y desdoblamiento del
comple+o formado para liberar los #roductos.
E O S P E > S Q E O P
/0. PROCEDIMIENTO $
1. A#*%1%),) )! ., E(B%5, C,*,.,",
5n?' L ' '?' ------ ' '? L ?' L 5n?'
:atalasa L ' '?' ------ ' '? L ?' L :atalasa

%) >umerar los tubos del % al *
') :olocar en cada tubo ' ml. de #er-ido de )idr"eno (A"ua o-i"enada).
*) A"re"ar al$
3ubo %$ X cuc)arita de "ado de pollo entera
3ubo '$ X cuc)aradita de i"ado de pollo triturado
3ubo *$ ' ". Di-ido de 5an"aneso

,) :olocar a cada tubo el palito de /"nicin encendido en la boca del tubo


.) ;i el palito de /"nicin aumenta la intensidad del fue"o2 la reaccin es positiva.
-. A#*%1%),) )! ., E(B%5, S8##%(,*+ D!"@%)$+2!(,",
%) #reparar )omo"enizado de )"ado con cloruro de sodio.
') Disponer de ' tubos de %*-%DD y roturarlos(tubo % y tubo ')
*) :olocar en cada tubo % ml de ;uccinato y lue"o % ml de buffer .
,) A9adir ' "otas de azul de metileno2 a"itar2 anotar el color.
.) /ncorporar al tubo % D2.ml de aceite las paredes y de+ar en la "radilla >? 5?01&
A) A"re"ar al tubo ' %ml de )omo"enizado de )"ado e inmediatamente a9adir D2.ml de aceite por las
paredes2 >o 5?01&2 de+ar en la "radilla.
<)acer el se"uimiento de la decoloracin de los tubos por 'Dminutos2
B) Analize lo ocurrido .
.
V. CUESTIONARIO :
%
%) Defina !ue es un catalizador
') EGu se entiende por sitio activo.F
*) EGu tipo de enzima es la catalasa2 y cul es su importancia en el metabolismo F
,) E:ul es el rol de la des)idro"enasa succnica y por!ue se relaciona con el sndrome de 7earns
;AyreF
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PRACTICA N H 12

CICLO CELULAR: D/1%"%'( C!.8.,$ : LA MITOSIS
I. OBJETIVO :
;e estudiar la mitosis y el ciclo de divisin celular en las clulas meristemticas de la raz de A..%85 #!&,
(cebolla).
1n este sistema la poblacin celular esta en e!uilibrio dinmico y los cromosomas son relativamente
"randes2 con un nJmero diploide ( 'n Y%A ).
1
//. MATERIALES $
4ulbos de cebolla
#lacas #etri
1stiletes y pinzas
#apel de (iltro
#ortaob+etos
:ubreob+etos
Aceite de inmersin
5ec)ero de Alco)ol
?rcena actica- clor)drica
Aceite de inmersin
#apel lente
5icroscopios
III. PROCEDIMIENTO :
%. :ultivar los bulbos de cebolla en vasos pe!ue9os conteniendo a"ua corriente2 la !ue deber cambiarse
cada ', )oras2 mantener los bulbos en oscuridad a '.=: y sometidos a aireacin constante.
'. Despus de ,B a <' )oras2 arrancar con ayuda de una pinza ' a * races del bulbo2 cortar ' cm. de la parte
apical y colocarla sobre una placa #etri !ue conten"a ?rcena.
*. :alentar la placa en la llama de un mec)ero de alco)ol )asta apro-imadamente AD=: y se observe la
emisin de vapores blancos2 evitar la ebullicin del colorante.
,. De+ar enfriar y repetir esta operacin cuatro veces.
.. 1nfriar y de+ar reposar durante %. minutos.
A. :olocar la raicilla en la lmina portaob+eto2 cortar ' mm de la punta2 a9adir una a"ota de ?rcena fra2
cubrir la preparacin con laminilla.
<. :on la punta de un lpiz "olpear suavemente la preparacin describiendo crculos concntricos para
permitir la e-tensin del te+ido meristemtico.
B. 1liminar el e-ceso de colorante usando una tira de papel filtro.
C. ?bservar la preparacin a mayor aumento y lente de inmersin.
IV. PROTOCOLO :
1s!uematizar las diferentes fases !ue se observan$
/nterfase$ Los cromosomas no se observan al microscopio debido a !ue son demasiados del"ados y no
puede absorber suficiente colorante para ser visible.
#rofase$ (ase en la cual los cromosomas se observan con sus dos cromtidas.
5etafase$ ;e observa el )uso acromtico2 los cromosomas estn mas condensados y cortos.
Anafase$ Los cromosomas se diri"en a los polos
3elofase$ Los cromosomas estn en los polos2 empieza la formacin de la membrana nuclear
0. CUESTIONARIO $
%. Gue es mitosis.
'. Gue )ay de comJn entre mitosis y meiosis.
*. Gue es /ndice mittico e ndice interfsico
,. Defina cariocinesis y citocinesis
2
REALI6AR ESQUEMAS$
(A;1 D1 LA 5/3?;/; 1;G@15A;
3
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4
PRACTICA N 1<

OBSERVACION DE ELEMENTOS FORMES DE LA SANGRE
I. OBJETIVOS
Determinar la presencia de elementos fi"urados presentes en una muestra de san"re perifrica
)umana2 mediante el uso de una coloracin diferencial.
?bservar la presencia de nJcleos en su interior.
II. MATERIALES
5icroscopios
:olorante Zri")t o 8iemsa
Alco)ol yodado
A"ua destilada
Lminas portaob+etos limpias y desen"rasadas
Lancetas )ematol"icas
Al"odn estril
0arillas de coloracin
III. PROCEDIMIENTO
A. O-*!(#%'( )! ",(2$! #,&%.,$
%. Desinfectar el dedo anular con alco)ol yodado y al"odn y con una lanceta estril punzar el
dedo y de+ar caer una "ota de san"re sobre un e-tremo de la lmina portaob+etos.
'. :on ayuda de otra lmina portaob+eto formar un n"ulo de ,.= y realizar un frotis2 tratando de
esparcir )omo"neamente la "ota de san"re sobre la superficie de la lmina.
*. De+ar secar la preparacin y proceder lue"o a la coloracin con Zri")t o 8iemsa.
B. :oloracin
%. :ubrir el frotis con colorante Zri")t o Leis)man por % minuto.
'. ;in eliminar el colorante a"re"ar a"ua destilada y de+ar actuar por %D minutos.
*. 1liminar lue"o el colorante y lavar suavemente con a"ua de ca9o.
,. De+ar secar la lmina coloreada.
.. @na vez !ue la lmina coloreada a secado2 observar al microscopio con el ob+etivo de %DD R
y aceite de inmersin.
IV. PROTOCOLO
(1s!uematice los si"uientes elementos !ue aba+o se indican y !ue sern observados con ayuda del
microscopio).
%. LEUCOCITOS GRANULARES $
, >eutrfilos se"mentados $ presenta un nJcleo con varios lbulos ('-.) unidas por bandas de
cromatinas.
- >eutrfilos en banda o abastonado $ presenta un nJcleo no dividido en forma de ; o en cayado
?.
# 1osinfilos $ redondos2 voluminosos2 con "ranulaciones acidfilas de color anaran+ado2 nJcleo
con dos lbulos.

) 4asfilos $ son escasos de D-%2 presenta un nJcleo difcil de observar2 pues se )alla cubierto
por una "ranulacin de color violeta o morado oscuro .
'. LEUCOCITOS AGRANULARES $
, Linfocitos $ De forma redonda o irre"ular2 su nJcleo es morado2 voluminoso y ocupa la mayor
parte de la clula2 el citoplasma es azul y sin "ranulaciones. ;u nJmero aumenta con las
infecciones.
- 5onocitos $ De forma redonda u ovalada2 nJcleo variable "eneralmente en forma de ri9n2
citoplasma sin "rnulos. #resenta una "ran actividad fa"ocitaria.
*. PLAQUETAS $
Las ms pe!ue9as de las clulas de la san"re2 de forma redonda y no contienen )emo"lobina. ;on
esenciales en la coa"ulacin de la san"re.
,. HEMATIES O ERITROCITOS $
De forma "eneralmente redonda2 sin nJcleo2 de color rosa intenso2 contiene )emo"lobina. La
protena !ue se encar"a del transporte de o-"eno y an)drido carbnico.
N!8*$+7%.+"
E+"%('7%.+"
!
B,"'7%.+
Monocitos
L%(7+#%*+"
IV.1.1.1.1.1.1.C. CUESTIONARIO
%. E:ul es la diferencia entre plasma y sueroF.
'. Di"a !ue es la formula leucocitaria2 cules son los valores normales en el adulto y !u si"nificado
tiene los valores anormales.
*. EGu es la )istidina y cul es su importanciaF.
,. Gue es la anemia2 y cul es su ori"en
ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRACTICA N H 1C

GRUPO SANGUINEO Y FACTOR R@
I. OBJETIVO :
Al finalizar la prctica el alumno debe saber !u es el "rupo san"uneo2 sus aplicaciones en el campo de la
medicina y el "rupo san"uneo al !ue pertenece.
"
II. GENERALIDADES :
1l serlo"o 7arl Landsteiner2 en %CDD-%CD% fue el primero en demostrar la e-istencia de "rupos san"uneos
y en %C*B el :omit de i"iene de la Li"a de la ?>@2 el :on"reso de 5icrobiolo"a de %C*D en Londres y
la /nternacional de 3ransfusin ;an"unea de #ars2 se adopt definitivamente la clasificacin de los "rupos
san"uneos )umanos )eredables2 desi"nados como A2 42 A42 ?.
GRUPOS SANGUINEOS RESULTANTES
8&@#? ;A>8@/>1? A>3/81>? 1> 8L?4@L?;
&?U?;
(AGLUTINOGENOS)
A>3/:@1&#?; 1> #LA;5A ?
;@1&? ;A>8@/>1?
(AGLUTININAS)
A A Anti-4
4 4 Anti-A
A4 A4 >in"uno
(&eceptor universal)
? >in"uno Anti-A L Anti-4
(Dador universal)
///. MATERIAL Y METODOS $
Lminas portaob+etos
Lancetas )ematol"icas
;ueros Anti-A2 Anti-42 Anti-D o &).
Al"odn
Alco)ol yodado
RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUINEOS$
La tcnica de reconocimiento de "rupos san"uneos se basa en la a"lutinacin o no de los )emates cuando
se mezclan con la a"lutinina Anti-A o Anti-4.
PROCEDIMIENTO :
%. Limpie con al"odn embebido en alco)ol la yema del dedo anular.
'. &ealizar la puncin utilizando una lanceta )ematolo"a estril.
*. :olo!ue dos "otas de san"re por separado sobre la lmina portaob+etos2 de la persona a la cual se va
a realizar la prueba y en otra lmina otra "ota de san"re.
,. A"re"ar a cada "ota de san"re una "ota de suero Anti-A y Anti-4 y Anti-D o Anti-&) por separado.
.. ?bservar la reaccin e identificar a !ue "rupo pertenece y !ue factor 1)2 si es positivo o ne"ativo
METODO DE RECONOCIMIENTO PRACTICO $
8&@#? A 8&@#? 4

Anti-A Anti-4 Anti-A Anti-4
#

8&@#? A4 8&@#?
?
&)$ Anti MD o &) (L) Anti- D o &) (-)
/0$ CUESTIONARIO :
%. A !uienes se les llama receptores y donadores universales2 por !uF
'. 1-pli!ue la 1ritroblastosis fetal.
*. 1n !ue se basa el reconocimiento de los "rupos san"uneosF
,. 1-pli!ue como se puede )acer el descarte de paternidad
$

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