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INFORME DE LABORATORIO

LABORATORIO N4
BIOENERGIA: FERMENTACION ALCOHOLICA

ASIGNATURA: BIO-002






Nombre Autores: Katherine Gmez, Muriel Quiroga, Javiera Soto

Nombre Docente: Horacio lvarez





Fecha: 29/05/2014



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Introduccin
La fermentacin alcohlica es un proceso anaerbico realizado por las levaduras, bsicamente
pero tambin lo pueden realizar algunas bacterias. De la fermentacin alcohlica se obtienen
muchos productos como: vino, cerveza, alcohol, chocolate, pan, etc.
Las levaduras son microorganismos unicelulares, que consiguen su energa por medio de la
fermentacin alcohlica, en la que rompen las molculas de glucosa para obtener la energa
para sobrevivir y producen el alcohol como consecuencia de la fermentacin. La fermentacin
alcohlica produce gran cantidad de CO
2.
(1)

Objetivos
- Comprobar que la rapidez en cuanto la liberacin de CO
2
depende de la complejidad
de las molculas a las que fermentar la levadura.
- Describir las reacciones qumicas de la fermentacin y mencionar los productos
resultantes
- Analizar y comprender las variaciones de pH obtenidas en los diferentes procesos de
fermentacin alcohlica.
Procedimiento experimental
1. Fermentacin alcohlica en levadura

Para comenzar se rotularon 4 tubos de ensayo y se prepar cada tubo de la siguiente manera:
TUBO1: 1 ml de glucosa + 1 ml de levadura, TUBO: 1 ml de sacarosa + 1 ml de levadura TUBO
3: 1 ml de almidn + 1 ml de levadura, TUBO 4: 1 ml de agua + 1 ml de levadura. Se tomaron 4
pipetas graduadas, con cada una de las pipetas se tom 1 ml de la solucin de cada tubo, se
sell con parafilm en un extremo y esperar a que se genere la reaccin en ausencia de O
2
. En
el transcurso del tiempo se fueron registrando los sucesos ocurridos.

2. Determinacin indirecta de la produccin de CO
2
por fermentacin alcohlica
Se dispuso de cuatro tubos de ensayo donde los dos primeros contenan Azul de Bromotimol
unido al tubo de glucosa al 2% ms levadura al 10% mientras que los otros dos restantes se le
agreg Azul de Bromotimol unido al tubo de sacarosa al 2% ms levadura al 10%. Se
conectaron a travs de una manguera de anaerobiosis y se sellaron con parafilm para generar
un proceso anaerbico. Se sometieron a un bao termorregulador, luego de aproximadamente
15 minutos fueron retirados y se midi el pH del azul de bromotimol.
2




Resultados
1. Fermentacin alcohlica en levadura: En el tubo 4(Agua destilada) nunca se observ
cambios al interior de la pipeta, ya que la levadura jams reaccion con el agua destilada, en el
tubo 3 (Almidn) ocurri algo similar al no presentarse ningn tipo de cambio al llegar a los 15
minutos, que era el tiempo lmite estimado para la reaccin. El tubo 2(Sacarosa) present
cambios en su composicin aunque de menor envergadura que el tubo 1(Glucosa), lo cual es
importante destacarlo. Al interior de las pipetas no se observ cambios de coloracin, solo se
visualiz el aumento del nivel de la mezcla debido a la liberacin de gas.
(Ver anexo tabla 1)
2. Determinacin indirecta de la produccin de CO
2
por fermentacin alcohlica

pH de azul de bromotimol: 8
pH de glucosa: 6 (Ver anexo tabla 2)
pH de sacarosa: 7

Discusin

La levadura necesita degradar la sacarosa para obtener un monosacrido (glucosa). Los
monosacridos son las molculas alimenticias de la clula, la cual es precursora para la
obtencin de ATP (2)
La enzima -amilasa es la encargada de romper los enlaces -1,4- glucosdicos de los
polmeros de la glucosa (3). La sacarosa corresponde a un disacrido, por lo cual se demora
ms en romper los enlaces. (Ver anexo tabla 1)
En los tubos donde haba concentracin de disacridos y monosacridos se present mayor
actividad metablica debido a que el inicio de la glucolisis es de inmediata. En la fermentacin
como ya se mencion, genera CO
2
en forma de gas (burbujas) y etanol a partir de piruvato
generado en la glucolisis (proceso realizado en el citoplasma al igual que la fermentacin),
debido a esta razn en el tubo 1 y 2 se observan gran cantidad de burbujas (gas).
El azul de bromotimol es un indicador de pH, el cual cambia de color dependiendo de la
solucin en la que se va a interactuar. Cuando la solucin es cida toma un color amarillo,
cuando es bsica azul y cuando es neutra verde. En nuestro experimento al hacer interactuar el
azul de bromotimol con la glucosa cambio de color azul a amarillo, lo cual nos indica que la
glucosa es una solucin cida con un valor de pH 6, y la sacarosa tomo un color verde
indicando que es una solucin neutra con un valor de pH 7
3




Conclusin

A partir del experimento de la fermentacin alcohlica, el cual corresponde a un proceso
anaerbico (en ausencia de oxigeno), se puede concluir que dependiendo de la complejidad de
la molcula a la cual es sometida la levadura, es el tiempo que esta demorar en degradar la
glucosa para liberar CO
2
, para obtener como productos: C
2
H
5
OH (Etanol), CO
2
(Dixido de
carbono) y H
2
O (Agua).
A partir de lo mencionado anteriormente, el azul de bromotimol en presencia de glucosa se
torno acida debido a que la concentracin de CO
2
es mayor, ya que el proceso de fermentacin
con este monosacrido es mas rpido a diferencia de la sacarosa que su proceso de
fermentacin es mas lento por tanto la concentracin de CO
2
es menor.















Referencias

(1) Neil A. Campbell, Jane B, (2005) Tipos de fermentacin. En Biologa (pp 175) Buenos
Aires, Editorial medica Panamericana

(2) Iglesias, (2007) Fisiologa gastrointestinal. En Bases de la fisiologa (pp 296).Editorial
Tbar
(3) Bruce, A. (2002). Unidad I: Capitulo 2: Pequeas molculas, energa y biosntesis. En
Biologa molecular de la clula 3
ra
edicin. Espaa: Ediciones Omega.




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Anexo

Tabla 1: Resultados del tiempo en la fermentacin alcohlica con levadura en distintas
soluciones.
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4
Contenido: Glucosa +
levadura
Sacarosa +
levadura
Almidn +
levadura
Agua + levadura
0 minuto
1 minutos 0,01 ml 0,03 ml Sin cambios Sin cambios
3 minutos 0,03 ml 0,04 ml Sin cambios Sin cambios
6 minutos 0,27 ml 0,2 ml Sin cambios Sin cambios
10 minutos 0,6 ml 0,4 ml Sin cambios Sin cambios
15 minutos 0,9 ml 0,6 ml Sin cambios Sin cambios




Tabla 2: pH de las soluciones.










Compuesto PH inicial PH final Color
Tubo con Azul de
Bromotimol unido al tubo
de glucosa+levadura
8 6 Amarillento
Tubo con Azul de
Bromotimol unido al tubo
de sacarosa+levadura
8 7 Verdoso