Universidad Autnoma Metropolitana

Unidad Iztapalapa

Laboratorio Integral de Ingeniera
Bioqumica

Dra. Flor de Mara Cuervo Lpez

Prctica 5
Determinacin del coeficiente convectivo de transferencia de
oxigeno (k
L
a) y del coeficiente de consumo de O
2
por
microorganismos (QO
2
)


Equipo 1
Adrin Castillo Hernndez
Emanuel Osmar Flores Camargo
Cesar Alejandro Porras Cruz

Introduccin
Los organismos aerobios requieren oxgeno para el desarrollo de sus funciones vitales
(crecimiento, reproduccin, etc.) y para la obtencin de energa. En el cultivo sumergido, el
oxgeno disponible para los microorganismos se encuentra disuelto en el agua (o en el medio de
cultivo). El buen desarrollo de los cultivos microbianos depende, entre otros factores, de la
concentracin de O
2
disuelto. . Este hecho marca pues el tipo de operacin, el oxgeno debe ser
suministrado continuamente al cultivo si se desea mantener una poblacin activa, este oxgeno
debe transferirse desde la fase gas a la lquida, donde puede ser utilizado por el microorganismo.

Los perfiles de concentracin en pelculas de lquido y de gas para la transferencia del compuesto gaseoso A
en la fase lquida. La composicin de la mayor parte del gas y del lquido a granel se supone que es
constante.
El O
2
se disuelve por el contacto del aire con la superficie del agua, hasta alcanzar el punto de
saturacin, que depende de la temperatura y de la concentracin de solutos disueltos en el agua.
As, a 0C, el punto de saturacin de O
2
disuelto en agua pura es de 14.8 ppm. Esta concentracin
disminuye al aumentar la temperatura del agua, por ejemplo, a 15C la concentracin de O
2

disuelto es de 10.4 ppm.

Solubilidad de oxgeno en agua pura a diferentes temperaturas.

Temperatura
(C)
Solubilidad
(mg O
2
/L)
Temperatura
(C)
Solubilidad
(mg O
2
/L)
0 14.64 23 8.68
5 12.80 24 8.53
10 11.28 25 8.36
12 10.83 30 7.63
14 10.37 35 7.30
15 10.20 40 6.65
16 9.95 50 5.50
18 9.54 60 4.70
20 9.14 70 3.80
21 8.97 80 2.80
22 8.83 90 1.60
Existen dos aspectos importantes de considerar en los sistemas aireados. La demanda de O
2
por
los microorganismos y la limitacin que impone su transferencia desde las burbujas de gas hacia el
lquido y posteriormente hacia los microorganismos.

Demanda especifica de oxgeno y concentracin critica de oxgeno disuelto para algunos
microorganismos.



La magnitud del coeficiente de transferencia de O
2
(k
L
a) y del coeficiente respiratorio (o demanda
de oxgeno, QO
2
), indicar las limitaciones del proceso y dar la pauta para resolver problemas de
diseo y escalamiento de bioprocesos. Ambos coeficientes pueden determinarse mediante el
mtodo dinmico en pequeos intervalos de tiempo durante el estado transitorio en un
fermentador, para lo cual se requiere registrar el cambio de concentracin del O
2
disuelto (OD)
con respecto al tiempo.
El k
L
a, es una medida de la capacidad de transferencia de O2 en un reactor e interviene
directamente en su productividad. El valor de k
L
a depende de muchos factores, entre los cuales se
pueden mencionar la capacidad de aireacin, la operacin y geometra del reactor, as como de la
composicin del medio de cultivo. El k
L
a se puede calcular en un sistema abitico a partir de la
ecuacin de balance de O
2

Dnde:

CS* es la concentracin de O
2
disuelto en la saturacin
CL es la concentracin de O
2
disuelto en el seno del lquido en un tiempo dado

La demanda de O
2
de los microorganismos para la respiracin es un indicador de la actividad
microbiana. Este coeficiente respiratorio puede ser calculado en un cultivo microbiano junto con el
k
L
a mediante el mtodo dinmico, cuyo fundamento, es la introduccin de una perturbacin en el
sistema cuando se encuentra en estado estacionario ZONA I, analizando la respuesta. En un
momento determinado (A) se interrumpe el suministro de oxgeno al cultivo, con lo que se obtiene
un descenso lineal de la concentracin de oxgeno disuelto en el fermentador, debido al consumo
de oxgeno por las clulas. Antes que la concentracin crtica de oxgeno se restablece la aeracin
(B). La pendiente del tramo AB o ZONA II nos da la medida del trmino de velocidad de consumo
de oxgeno del cultivo: QO
2
X. Una vez restablecida la aeracin la concentracin de oxgeno vuelve
a aumentar hasta llegar al valor inicial (C), ZONA III.
En ZONA III el aumento en la concentracin de oxgeno disuelto vendr fijado por la diferencia
entre las velocidades de transferencia y de consumo segn el balance:

El trmino de consumo de oxgeno calculado en la ZONA II y sustituido en el balance nos permite
calcular, mediante una simple linealizacin de los datos experimentales, el valor del coeficiente de
transferencia

Dnde:

dC/dt = cambio de concentracin de oxgeno con el tiempo (mgO
2
/L h)
k
L
a = coeficiente convectivo de transferencia de masa (h
-1
)
CS* es la concentracin de O2 disuelto en la saturacin (mg/L)
CL es la concentracin de O2 disuelto en el seno del lquido en un tiempo dado (mg/L)
QO
2
= coeficiente respiratorio (mg O2/ g
clulas
h)
X = biomasa (g/L)

Objetivos
Obtener experimentalmente los valores de coeficiente de transferencia de O
2
aparente (k
L
a) en
agua destilada, as como el k
L
a y el coeficiente respiratorio (QO
2
) de un cultivo microbiano.







Metodologa
Determinacin del k
L
a aparente











Llenar el
reactor con
2 L de agua
destilada.
Establecer
una
velocidad de
agitacin y
un flujo de
aireacin de
trabajo
A las condiciones de
experimentacin
establecidas, registrar la
concentracin de OD
mediante el electrodo,
usando intervalos de
tiempo durante al menos 2
min. Esta zona
corresponder a la Zona I.
Cortar el
suministro
de aire al
reactor.
Remover el OD en el
agua hasta alcanzar 0%
(con adicin de sulfito o
por desplazamiento con
una corriente de
nitrgeno). Registrar la
concentracin de OD a
varios intervalos de
tiempo hasta alcanzar el
cero. Esta zona
corresponder a la Zona
II.
Reanudar la agitacin
y suministrar
nuevamente aire al
fermentador y
registrar la
concentracin de OD
a varios intervalos de
tiempo y hasta
alcanzar al menos
90% de la saturacin.
Esta zona
corresponder a la
Zona III.
Calcular el kLa [h-1]
mediante la grfica
logartmica de la
concentracin de OD (ln1-
CL/C*L) contra el tiempo
(utilizar los datos
obtenidos en la zona III),
de manera que: ln(1-
CL/C*L) = - kLa t
Determinacin dinmica del k
L
a y QO
2
de un cultivo microbiano



Determinacin de biomasa



Preparar 2 L de medio
de cultivo para
Saccharomyces
cerevisiae e inocular el
reactor
Establecer un flujo
de aire y una
velocidad de
agitacin. Registrar
la concentracin de
OD en el reactor
cada 30s hasta los
2min (Zona I).
Suspender el flujo de
aire y la agitacin.
Registrar cada 10
segundos la
concentracin de OD
en el reactor con
respecto al tiempo
hasta alcanzar un
valor cercano a la
concentracin crtica
de oxgeno para este
microorganismo.
Reanudar la aireacin y la agitacin
hasta restablecer una concentracin de
OD similar a la inicial (Zona I). Registrar
el aumento en intervalos de tiempo de
3s (Zona III).
Repetir procedimiento usando
el mismo cultivo con otra
velocidad de agitacin y flujo
de aire para los mismos
tiempos.
Poner a peso
constante el papel
filtro en una estufa a
70C.
Dejar enfriar el papel
filtro en un desecador
y tomar el peso final.
Filtrar a vaco un
volumen conocido de
la muestra a travs del
papel filtro a peso
constante
Meter el papel filtro
con la biomasa a la
estufa a 70C durante
24hrs
Dejar enfriar en un
desecador y
determinar el peso
seco de cada papel
filtro con biomasa.
Calcular la
concentracin de
biomasa (peso seco)
para cada muestra,
mediante la relacin
de pesos entre el
papel filtro con y sin
biomasa.
Resultados
Los siguientes grficos (1, 3, 5, 7 y 9) muestran los resultados obtenidos para determinar el k
L
a
aparente de dos reactores. Se midi el porcentaje de oxgeno disuelto en agua destilada a 21C, a
diferentes flujos de aire y velocidades de agitacin, en ausencia de microorganismos. El mtodo
comenz manteniendo por dos minutos la concentracin mxima de oxgeno a una velocidad de
agitacin y flujo de aire determinados, midiendo el porcentaje de oxgeno disuelto (%OD) cada 30
segundos. Posteriormente el oxgeno fue removido agitando a 700 rpm y con un flujo de
nitrgeno, midiendo el %OD cada 10 segundos. Enseguida se restablecieron las condiciones de
agitacin y aireacin iniciales y se midi el oxgeno disuelto cada 3 segundos. El % OD se midi
con un electrodo de oxigeno de rpida respuesta.
El rector 1 consta de 3 mamparas y dos impulsores tipo Rushton, el reactor 2 no cuenta con
mamparas y tiene un impulsor de hlice.
Al trabajar con reactores en ausencia de microorganismos (QO
2
X

= 0), la ecuacin de balance de
oxigeno dentro del reactor ser la siguiente:

Para poder hacer la determinacin del k
L
a con los datos obtenidos, se debe integrar la ecuacin
anterior, quedando de la siguiente manera:

Siendo CS* el 100% OD (9 mg/L a 21C) y la pendiente es - k
L
a, esto nicamente tomando los datos
de la zona III.
La determinacin del k
L
a aparente se muestra en las ecuaciones de los grficos 2, 4, 6, 8 y 10, y
recopilados en la Tabla 1.


Grafico 1. %OD

vs Tiempo en el Reactor 1. Agitacin a 100 RPM, flujo de aire a 996 mL/min, en
ausencia de microorganismos.

Datos proporcionados por el equipo 4

Grafico 2. Determinacin de k
L
a aparente en el Reactor 1. Agitacin a 100 RPM, flujo de aire a 996
mL/min.

Grafico 3. %OD

vs Tiempo en el Reactor 1. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 996 mL/min, en
ausencia de microorganismos.
0
20
40
60
80
100
120
0 200 400 600 800 1000 1200 1400
%

O
D

Tiempo (s)
y = -0.0038x + 0.2838
R = 0.9824
-3.5
-3.0
-2.5
-2.0
-1.5
-1.0
-0.5
0.0
0.5
0 200 400 600 800
L
n
(
1
-
(
C
L
/
C
S
*
)
)

Tiempo (s)

Datos proporcionados por el equipo 4

Grafico 4. Determinacin de k
L
a aparente en el Reactor 1. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 996
mL/min.

Grafico 5. %OD

vs Tiempo en el Reactor 2. Agitacin a 100 RPM, flujo de aire a 996 mL/min, en
ausencia de microorganismos.
0
20
40
60
80
100
120
0 100 200 300 400 500
%
O
D

Tiempo (s)
y = -0.0136x + 0.235
R = 0.9786
-2
-2
-1
-1
0
1
0 20 40 60 80 100 120 140
L
n
(
1
-
(
C
L
/
C
S
*
)
)

Tiempo (s)

Datos proporcionados por el equipo 1

Grafico 6. Determinacin de k
L
a aparente en el Reactor 2. Agitacin a 100 RPM, flujo de aire a 996
mL/min.

Grafico 7. %OD

vs Tiempo en el Reactor 2. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 996 mL/min, en
ausencia de microorganismos.
0
20
40
60
80
100
120
0 200 400 600 800 1000 1200
%

O
D

Tiempo (s)
y = -0.0033x + 0.104
R = 0.9958
-2.500
-2.000
-1.500
-1.000
-0.500
0.000
0.500
0 100 200 300 400 500 600 700
L
n
(
1
-
(
C
L
/
C
S
*
)
)

Timpo (s)

Datos proporcionados por el equipo 1

Grafico 8. Determinacin de k
L
a aparente en el Reactor 2. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 996
mL/min.

0
20
40
60
80
100
120
0 100 200 300 400 500 600 700
%

O
D

Tiempo (s)
y = -0.0068x + 0.2389
R = 0.9847
-2.500
-2.000
-1.500
-1.000
-0.500
0.000
0.500
0 50 100 150 200 250 300 350
L
n
(
1
-
(
C
L
/
C
S
*
)
)

Timpo (s)
Grafico 9. %OD

vs Tiempo en el Reactor 2. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 2496 mL/min, en
ausencia de microorganismos.

Datos proporcionados por el equipo 1

Grafico 10. Determinacin de k
L
a aparente en el Reactor 2. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a
2982 mL/min.

0
20
40
60
80
100
120
0 100 200 300 400 500 600
%

O
D

Tiempo (s)
y = -0.0088x + 0.186
R = 0.9852
-2.000
-1.500
-1.000
-0.500
0.000
0.500
0 50 100 150 200 250
L
n
(
1
-
(
C
L
/
C
S
*
)
)

Timpo (s)
Tabla 1. Valores de k
L
a (h
-1
) aparentes a diferentes velocidades de agitacin y flujos de aireacin.
Reactor 1 Reactor 2
Velocidad de
agitacin
Flujo de aire (mL/min)
996 2496 996 2496
100 13.68 - 11.88 -
500 48.96 - 24.48 31.68
Se hicieron las conversiones correspondientes para presentar los valores de k
L
a en h
-1


Tabla 2. Determinacin de la concentracin de biomasa
papel
filtro (g)
papel filtro +
biomasa (g)
Biomasa (g)
Biomasa
g/L
0.1207 0.1453 0.0246 2.46
0.1208 0.1459 0.0251 2.51
0.1254 0.1525 0.0271 2.71

Promedio 2.56

Desviacin
estndar
0.13

Los siguientes grficos (11, , , y ) muestran los resultados obtenidos para determinar el k
L
a en dos
reactores con un cultivo de Saccharomyces serevisiae. Se midi el porcentaje de oxgeno disuelto
en el medio de cultivo a una temperatura de 21C, a diferentes flujos de aire y velocidades de
agitacin. El mtodo comenz manteniendo por unos minutos la concentracin de oxgeno que
mantiene el estado estacionario, a una velocidad de agitacin y flujo de aire determinados,
midiendo el porcentaje de oxgeno disuelto (%OD) cada 30 segundos. Posteriormente el flujo de
aire y la agitacin fueron detenidos hasta que la concentracin de oxigeno estuviera cerca de la
concentracin critica para la levadura sealada. Enseguida se restablecieron las condiciones de
agitacin y aireacin iniciales y se midi el oxgeno disuelto cada 3 segundos. El % OD se midi
con un electrodo de oxigeno de rpida respuesta.
La ecuacin de balance de oxigeno dentro del reactor cuando hay un cultivo microbiano, es el
siguiente:

Siendo CS* el 100% de OD (9 mg/L a 21C).
La estimacin de k
L
a y QO
2
, en este caso, se har por dos mtodos; el mtodo dinmico y el
mtodo numrico.
En el mtodo dinmico se comienza con la estimacin del QO
2
haciendo una regresin lineal en la
zona II (el k
L
a es prcticamente cero), donde la pendiente es QO
2
x (grficos .). En esta zona el
balance de oxigeno es:

Integrando:

Para la estimacin del k
L
a se debe hace un rearreglo de la ecuacin de balance de oxgeno en la
zona III para linealizarla

Donde la pendiente de la ecuacin de la recta resultante es -1/k
L
a, la variable dependiente es C
L

(graficos) y los valores de la variable independiente (dC/dt + QO
2
x) pueden ser obtenidos
mediante la primer derivada del ajuste polinomial de segundo o, en este caso, tercer grado de la
zona III (graficos), de esta manera se puede conocer el valor de la derivada de la concentracin
de oxigeno con respecto al tiempo a cada momento.

Para el mtodo numrico se hace un rearreglo en la ecuacin de balance de oxgeno en la zona III
(

Haciendo cambios de variable donde: kla=k, (C*-C
L
)= y, QO
2
X

=A, separando variables e integrando
desde y
0
a y y de t=0 hasta t=t nos resulta

)
Regresando a las variables originales
(

Dividiendo el numerador y el denominador, del argumento del logaritmo, entre k
L
a CS*-QO
2
X y
rearreglando podemos definir una nueva constante B, que indicara la concentracin de oxgeno
disuelto que mantiene el estado estacionario bajo ciertas condiciones de flujo de aire y agitacin:

Con esta ltima ecuacin se puede hacer una grfica ln(1-C
L
/B) vs t, donde la pendiente ser -kla,
y posteriormente usar la definicin de B para calcular QO
2
, para este caso la concentracin de
biomasa X=2.56 g
celulas
/mL.

Grafico 11. %OD

vs Tiempo en el Reactor 1. Agitacin a 400 RPM, flujo de aire a 773 mL/min, en
presencia de Saccharomyces cerevisiae.

Datos proporcionados por el equipo 3

Mtodo Dinmico
Grafico 12. Determinacin de QO
2
X mediante regresin lineal de la zona II
0
10
20
30
40
50
60
0 50 100 150 200 250 300 350
%

O
D

Tiempo (s)

Grafico 13. Ajuste polinmico de tercer grado de la zona III para la determinacin de k
L
a

y = -0.8756x + 165.61
R = 0.9839
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
50.0
0 50 100 150 200
%

O
2

Timpo (s)
y = 2E-05x
3
- 0.019x
2
+ 6.2607x - 647.79
R = 0.9991
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
50.0
198 218 238 258 278 298 318 338
%

O
2

Timpo (s)
Grafico 14. Determinacin de k
L
a. Reactor 1, agitacin a 400 RPM, flujo de aire a 773 mL/min, en
presencia de Saccharomyces cerevisiae.

Mtodo numrico
Grafico 15. Determinacin de k
L
a y QO
2
X. Reactor 1, agitacin a 400 RPM, flujo de aire a 773
mL/min, en presencia de Saccharomyces cerevisiae.

y = -0.0347x + 7.101
R = 0.9997
0.000
1.000
2.000
3.000
4.000
5.000
6.000
7.000
8.000
0.0 10.0 20.0 30.0 40.0 50.0
%

O
2

dCL/dt+QO2X
y = -0.0184x + 3.6768
R = 0.9967
-1.8
-1.6
-1.4
-1.2
-1.0
-0.8
-0.6
-0.4
-0.2
0.0
0 50 100 150 200 250 300
L
n
(
1
-
(
C
L
/
B
)
)

Timpo (s)
B=54.1%

Grafico 16. %OD

vs Tiempo en el Reactor 1. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 773 mL/min, en
presencia de Saccharomyces cerevisiae.

Datos proporcionados por el equipo 3

Mtodo Dinmico
Grafico 17. Determinacin de QO
2
X mediante regresin lineal de la zona II
0
20
40
60
80
100
120
0 50 100 150 200 250 300 350
%

O
D

Tiempo (s)

Grafico 18. Ajuste polinmico de tercer grado de la zona III para la determinacin de k
L
a

y = -0.5796x + 169.05
R = 0.9909
0.0
20.0
40.0
60.0
80.0
100.0
120.0
0 50 100 150 200
%

O
2

Timpo (s)
y = 9E-05x
3
- 0.0833x
2
+ 24.548x - 2333.6
R = 0.9986
0.0
20.0
40.0
60.0
80.0
100.0
120.0
200 220 240 260 280 300 320
%

O
2

Timpo (s)
Grafico 19. Determinacin de k
L
a. Reactor 1, agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 773 mL/min, en
presencia de Saccharomyces cerevisiae.

Mtodo numrico
Grafico 20. Determinacin de k
L
a y QO
2
X. Reactor 1, agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 773
mL/min, en presencia de Saccharomyces cerevisiae.

y = -0.1318x + 24.208
R = 0.9983
0.000
5.000
10.000
15.000
20.000
25.000
0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 120.0
%

O
2

dCL/dt+QO2X
y = -0.0435x + 8.915
R = 0.988
-6.0
-5.0
-4.0
-3.0
-2.0
-1.0
0.0
0 50 100 150 200 250 300
L
n
(
1
-
(
C
L
/
B
)
)

Timpo (s)
B=97.4%

Grafico 21. %OD

vs Tiempo en el Reactor 2. Agitacin a 400 RPM, flujo de aire a 1982 mL/min, en
presencia de Saccharomyces cerevisiae.

Datos proporcionados por el equipo 2

Mtodo dinmico
Grafico 22. Determinacin de QO
2
X mediante regresin lineal de la zona II
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
0 100 200 300 400 500
%

O
D

Tiempo (s)

Grafico 23. Ajuste polinmico de tercer grado de la zona III para la determinacin de k
L
a

y = -0.6011x + 207.21
R = 0.9775
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
50.0
0 50 100 150 200 250 300 350
%

O
D

Tiempo (s)
y = 1E-05x
3
- 0.0184x
2
+ 8.5868x - 1303.9
R = 0.9979
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
330 350 370 390 410 430 450 470 490
%

O
D

Tiempo (s)
Grafico 24. Determinacin de k
L
a. Reactor 2, agitacin a 400 RPM, flujo de aire a 1982 mL/min, en
presencia de Saccharomyces cerevisiae.

Mtodo numrico
Grafico 25. Determinacin de k
L
a y QO
2
X. Reactor 2, agitacin a 400 RPM, flujo de aire a 1982
mL/min, en presencia de Saccharomyces cerevisiae.

y = -0.0354x + 9.1744
R = 1
7.8
8.0
8.2
8.4
8.6
8.8
9.0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
%

O
D

dCL/dt+QO2X
y = -0.0179x + 5.8262
R = 0.9886
-2.5
-2.0
-1.5
-1.0
-0.5
0.0
0 100 200 300 400 500
L
n
(
1
-
(
C
L
/
B
)
)

Tiempo (s)
B=42.4%

Grafico 26. %OD

vs Tiempo en el Reactor 2. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 1982 mL/min, en
presencia de Saccharomyces cerevisiae.

Datos proporcionados por el equipo 2

Mtodo Dinmico
Grafico 27. Determinacin de QO
2
X mediante regresin lineal de la zona II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 100 200 300 400 500 600
%

O
D

Tiempo (s)

Grafico 28. Ajuste polinmico de tercer grado de la zona III para la determinacin de k
L
a.

y = -0.6358x + 244.07
R = 0.9745
0.0
10.0
20.0
30.0
40.0
50.0
60.0
70.0
80.0
90.0
100.0
0 50 100 150 200 250 300 350
%

O
D

Tiempo (s)
y = 1E-05x
3
- 0.022x
2
+ 11.106x - 1782.8
R = 0.9976
0.0
10.0
20.0
30.0
40.0
50.0
60.0
70.0
80.0
90.0
100.0
330 380 430 480 530 580
%

O
D

Tiempo (s)
Grafico 29. Determinacin de k
L
a. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 1982 mL/min, en presencia
de Saccharomyces cerevisiae.

Mtodo numrico
Grafico 30. Determinacin de k
L
a y QO
2
X. Agitacin a 500 RPM, flujo de aire a 1982 mL/min, en
presencia de Saccharomyces cerevisiae.

y = -0.0408x + 11.675
R = 0.9998
0
2
4
6
8
10
12
0 20 40 60 80 100
%

O
D

dCL/dt+QO2X
y = -0.0208x + 6.7789
R = 0.9902
-4.5
-4.0
-3.5
-3.0
-2.5
-2.0
-1.5
-1.0
-0.5
0.0
0 100 200 300 400 500 600
L
n
(
1
-
(
C
L
/
B
)
)

Tiempo (s)
B=87.5%

Tabla 3. Valores de k
L
a y QO
2
a diferentes velocidades de agitacin y flujos de aireacin.

Reactor 1 Reactor 2
velocidad de
agitacin
(RPM)
Mtodo
Flujo de aire (L/min)
0.5 2
k
L
a (h
-1
)
QO
2

(mgO
2
/g
cel
h)
k
L
a (h
-1
)
QO
2

(mgO
2
/g
cel
h)
400
Dinmico 124.9 110.8 127.4 76.1
Numrico 66.2 106.9 64.4 130.5
500
Dinmico 474.5 73.4 145.1 80.5
Numrico 156.6 14.3 74.9 32.9
Se hicieron las converciones correspondientes para presentar los datos de k
L
a en h
-1
y de QO
2
en mgO
2
/g
cel
h
sabiendo que el 100% de oxgeno disuelto es 9 mgO
2
/L.
Discusin y Conclusin
Siendo el QO
2
el parmetro del consumo de oxigeno de una microorganismo,
se reporta en la literatura un valor de 8 mMO2/gcel*hr sin embargo en los
resultados reportados a diferentes velocidades de agitacin y de suministro
de aire no alcanza este valor. Conociendo que el valor de QO
2
esta
directamente relacionado con la fase de crecimiento microbiano, se acepta
como primera premisa que la levadura no se encontraba en la la fase
exponencial de crecimiento, que es cuando sus necesidades energticas y de
consumo de oxigeno son superiores. As mismo existe la posibilidad de haber
llevado la concentracin de oxigeno disponible para el microorganismo caer
en niveles crticos, en los cuales altera su metabolismo microbiano, dando
como resultado un valores de QO2 bajos.
Se observa como el valor del coeficiente Kla es afectado significativamente al
aumentar la agitacin y la aeracin, siendo su incremento ms significativo
de 300% al aumentar de 400rpm a 500rpm la velocidad de agitacin
manteniendo un flujo de aireacin pequeo (773mL/min). Sin embargo a
flujos de aireacin ms grandes (1982mL/min) el impacto sobre la
concentracin de oxgeno disuelto apenas es de 13% aumentando las mismas
rpm del caso anterior. Corroborando as que el tamao de burbuja es un
parmetro mucho ms influyente sobre la concentracin de oxigeno disuelto
en agua que el flujo de aireacin.
As mismo el parmetro QO2 se ve afectado por la velocidad de agitacin del
sistema, obteniendo los valores bajos al aumentar significativamente esta
velocidad, este fenmeno puede ser explicado tanto por el estrs celular,
tanto como por muerte por accin mecnica, ya que al determinar la
concentracin de biomasa, esta se hizo por peso seco y no por clulas
activas.
Es importante recalcar que al disminuir el consumo de oxgeno disuelto, y
aumentar la velocidad de agitacin de un reactor nos conduce directamente
a la formula,

dando como resultado un cambio

de concentracin con respecto al tiempo negativo, re arreglando

como consecuencia se establece

,
identificando as un impedimento bioqumico de las levaduras para procesar
el oxgeno disuelto en agua.
Conclusiones:
Se detecta en el experimento un impedimento de tipo bioqumico al
suministrar una cantidad de aire innecesaria en el reactor
Se aprueba como condiciones optimas de trabajo para sachharomiceas C.
que se utilize un bajo flujos de aire bajos y velocidades de agitacin altas.


Cuestionario
1.- Cmo se afecta el valor de K
L
a con respecto a la agitacin?
La velocidad de agitacin afecta positivamente sobre el K
L
a hasta que se alcanza un valor mximo
a una velocidad de agitacin especfica, a partir del cual se estabiliza e incluso disminuye.
2.- Cmo se puede aumentar el valor de K
L
a en un reactor?
Se aumenta de dos maneras:
Agitacin
La agitacin aumenta el rea de intercambio por ruptura de las burbujas por lo que aumenta rea
por unidad de volumen, adems disminuye el espesor de la pelcula (L) por lo que aumenta el K
L
.
Aireacin
Si se aumenta el nmero de burbujas, aumenta el a y disminuye el L. Entre las burbujas sean ms
pequeas, hay un aumento del rea y por lo tanto del K
L
a
3.- Que mtodos experimentales existen para determinar KLa y QO2. Cul es su principio y
cules son sus ventajas y desventajas?
o Mtodo del sulfito
Es un mtodo para determinar K
L
a en ausencia de microorganismos. Se basa en que el Na
2
SO
3

(0.015 M) en presencia de Cu
++
o Co
++
reacciona rpidamente con el O
2
disuelto en el seno del
lquido.
o Mtodo de balance de oxigeno
Este mtodo de medida de K
L
a se basa en un balance de materia en estado estacionario para el
O2, en el cual se mide el contenido de 02 de las corrientes gaseosas hacia o desde el fermentador.
Esta tcnica se basa en la ecuacin 1 mencionada anteriormente que defina la transferencia de
materia gas-lquido. En este mtodo se mide desde el fermentador. De un balance de materia en
estado estacionario, la diferencia entre el flujo de oxgeno a la entrada y a la salida debe ser igual a
la velocidad de transferencia de oxgeno desde el gas hacia el lquido
QO
2
= K
La
(C*- C)
Ventajas del mtodo:
El mtodo de balance de oxgeno en estado estacionario es el procedimiento ms fiable
para medir k
L
a
Permite su determinacin con tan solo una medida
El mtodo puede aplicarse a los fermentadores durante la operacin.

Desventajas del mtodo:
Depende de la precisin en la medida de la composicin de gas, caudal, presin y
temperatura.
Pueden cometerse errores de ms o menos el 100% si las tcnicas de medicin no son
adecuadas.

o Mtodo Dinmico
Este mtodo de medida de K
L
a se basa en un balance de materia en estado no estacionario para el
oxgeno.
Existen varias versiones diferentes del mtodo dinmico. Inicialmente, el fermentador contiene
clulas en un cultivo discontinuo. Como se muestra en la figura, en un determinado instante t
o
el
caldo es desoxigenado bien por introduccin de nitrgeno en el recipiente o parando el flujo de
aire si el cultivo consume oxgeno. La concentracin de oxgeno disuelto CAL disminuye
drsticamente durante este perodo. Posteriormente se bombea aire en el cultivo con un caudal
tiempo. Es importante que la concentracin de oxgeno permanezca siempre por encima de C
crit

para que la velocidad de consumo de oxgeno existente. Suponiendo que la re oxigenacin del
caldo es suficientemente rpida para permitir el crecimiento de la clulas, el nivel de oxgeno
disuelto alcanzar pronto un valor en estado estacionario CAL promedio que refleja un balance
entre el suministro de oxgeno y el consumo existentes en el sistema. CAL
1
y CAL
2
son dos
concentraciones de oxgeno medidas durante la re oxigenacin a tiempos t
1
y t
2
, respectivamente.
De esta manera puede desarrollarse una ecuacin para K
La
en funcin de estos datos
experimentales.



Durante la etapa de re oxigenacin, el sistema se encuentra en estado no estacionario. La
velocidad con que vara la concentracin de oxgeno disuelto durante este perodo es igual a la
velocidad de transferencia de oxgeno desde el gas hasta el lquido menos la velocidad de
consumo de oxgeno por las clulas






Donde: qox --> Velocidad de consumo de oxgeno.
De esta manera puede determinarse una expresin para qox considerando el estado final de
concentracin de oxgeno disuelto, C*AL. Cuando CAL=C*AL, dCAL/dt= 0 por que no existe
variacin en CAL con el tiempo. Por lo tanto, de la ecuacin anterior

Sustituyendo este resultado en la ecuacin y cancelando los trminos K
L
a C*AL se obtiene:

Suponiendo que k
L
a constante en el tiempo la ecuacin puede integrarse entre t
1
y t
2
utilizando las
reglas de integracin. La ecuacin resultante para k
L
a es:

Ventajas del mtodo:
o Menor coste del equipo utilizado.
Desventajas del mtodo:
o no tiempos de respuesta rpido de las sonda de 02
o tiempo de respuesta de electrodo similar a tiempo necesario para transferencia de
materia.
o valores de CAL medidos no reflejan conc. Instantnea de oxgeno.
o tiempo medio de residencia del gas en el sistema cuando a la desoxigenacin le sigue la
aireacin (gases residuales).
o media de CA no refleja la cintica de la transferencia de 02 hasta que se establece de
nuevo el contenido total de ste.
o medicin de k
L
a se encuentra restringido a recipientes con alturas menores a 1m.
o inapropiados para caldos viscosos por grandes tiempos de residencia de las burbujas.




4.-Diga que correlaciones tericas se pueden utilizar para el clculo de KLa

AUTOR CORRELACION TIPO DE
FERMENTACION
Cooper KLa=0.0635 Pv
0.95
Vs
0.67
SULFITO
Richards KLa=KPv
0.4
Vs
0.5
N
0.5
SULFITO
Fukuda KLa=(2+2.8)NiPv
0.56
Vs
0.7
N
0.5
x10
-3
SULFITO
Hospodka KLa=0.56 Pv
0.72
Vs
0.11
C. utilis
Taguchi KLa=1.78 Pv
0.33
Vs
0.56
Endomyces
Humphrey KLa=(+)(N
4/3
Di
1/4
Vs
1/2
) SULFITO
Westertep
KLa=K[1-/H(ND
1
-N
0
D
i
)] N
O
D
i
=(g/)
1/4
(K
1
+K
2
T/D
i
)
SULFITO
Hatch KLa=KVs
0.65
C. utilis
C. intermedia

5.- Si la cintica de consumo de oxigeno por los microorganismos siguiera una cintica de tipo
Monod, explique cmo sera la ecuacin que describa este comportamiento y que significado
tendran los parmetros incluidos.
Ecuacin sin inhibicin:
QO
2
= (QO
2
) max CL/km + CL
Ecuacin con inhibicin:
QO
2
= (QO
2
)max CL/km+CL + CL
2
/ki
Dnde:
QO2= concentracin de oxigeno consumido
CL= concentracin de oxigeno diluido en el medio
Km= constante de afinidad del microorganismo
por el oxigeno
Ki= concentracin critica


Referencias
[1]QUINTERO, INGENIERIA BIOQUIMICA, ALHAMBRA MEXICANA, 1993, PP 81-95.