EDICIN N 87

Los microorganismos del suelo y la biotecnologa en la agricultura

El suelo constituye un sistema complejo que alberga una gran riqueza de
microorganismos, los cuales establecen relaciones muy ariadas y contribuyen a
con!ormar las caracter"sticas propias del suelo, participan en los ciclos del carbono,
nitr#geno, o$"geno, azu!re, !#s!oro, %ierro y otros metales& aportan a la !ertilidad del
suelo y a la degradaci#n de compuestos $enobi#ticos 'cuya estructura qu"mica en la
naturaleza es poco !recuente o ine$istente debido a que son compuestos sintetizados
por el %ombre() *dem+s, el crecimiento de las plantas est+ condicionado por una amplia
gama de microorganismos que ien en el suelo, alrededor de las ra"ces egetales)
Dentro del amplio grupo de microorganismos bene!iciosos, tanto para cultios agr"colas
como !orestales, se pueden di!erenciar,
los que solubilizan o incrementan la absorci#n de nutrientes, aumentando la
!ertilidad del suelo y estimulando el crecimiento egetal,
los que protegen a la planta o eitan el ataque de pat#genos
Estos, a su ez, pueden ser,
bacterias de ida libre o simbi#ticos que !ijan nitr#geno
%ongos micorr"cicos que se asocian con las ra"ces de plantas asculares)
*ctualmente se mani!iesta una tendencia a !aor del ambiente en cuanto a la reducci#n
del uso de !ertilizantes qu"micos y plaguicidas en general, y una mayor sensibilizaci#n
social sobre el potencial riesgo de su empleo indiscriminado) Esto %a abierto nueas
perspectias en el empleo de productos biol#gicos para el manejo integrado de la
agricultura, sobre todo en la protecci#n de cultios 'biocontrol( y como !ertilizantes
-amigos. del medioambiente 'bio!ertilizantes() En tal sentido, di!erentes empresas e
institutos de inestigaci#n ienen trabajando en el estudio de los microbios del suelo
'microbiota(, y en la compleja interacci#n planta/microorganismo) 0a integraci#n de
t1cnicas de estudio de la microbiolog"a tradicional, junto con metodolog"as moleculares,
incluyendo los aances en las t1cnicas de gen#mica, contribuir+ a un mejor conocimiento
del !uncionamiento de las comunidades microbianas del suelo con el consiguiente
potencial de aplicaci#n biotecnol#gica)

La fijacin del nitrgeno
El nitr#geno es !undamental para la ida de las plantas) 2ero, a pesar de encontrarse en
gran cantidad en !orma libre en la atm#s!era 'N
3
(, su disponibilidad para las plantas es
limitada ya que no es !+cilmente asimilable por los organismos) 2or eso, la agricultura
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depende en gran medida del uso de !ertilizantes qu"micos para mantener altas
producciones agr"colas)
El proceso de !ijaci#n del N
3
atmos!1rico, es decir, la reacci#n del N
3
con otros
elementos para !ormar un compuesto qu"mico que lo contenga, puede lograrse mediante
m1todos qu"micos y m1todos biol#gicos,
m1todos qu"micos, la !ijaci#n puede ocurrir por procesos qu"micos espont+neos, como la
o$idaci#n que se produce por la acci#n de los rayos, que !orma #$idos de nitr#geno que,
al reaccionar con el agua de lluia, origina +cido n"trico) Este +cido reacciona con el
amon"aco 'N4
5
( del aire para producir nitrato de amonio 'N6
5
N4
7
() De esta !orma
mediante las precipitaciones llega al suelo una modesta cantidad de nitr#geno)
m1todos biol#gicos, algunos microorganismos procariotas 'bacterias y cianobacterias(
tiene la capacidad de atrapar y aproec%ar el nitr#geno de la atm#s!era, es decir, de
llear a cabo el proceso de fijacin biolgica de nitrgeno %&B'(" 0a manera de usar el
nitr#geno 'N
3
( de la atm#s!era es llear a cabo una reacci#n qu"mica donde se rompen
los enlaces entre los +tomos de nitr#geno 'N( y se incorporan +tomos de %idr#geno para
!abricar amon"aco 'N4
7
8(, un compuesto que los organismos s" son capaces de procesar
metab#licamente) 0as bacterias !ijadoras de nitr#geno poseen una enzima llamada
nitrogenasa, que es la encargada de la ruptura del triple enlace del nitr#geno molecular
y de la !ormaci#n de amon"aco
0os procesos naturales de !ijaci#n biol#gica del N
3
juegan un papel importante en el
desarrollo de sistemas sustentables, agron#mica y ambientalmente)
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0a fijacin de nitrgeno origina
compuestos solubles a partir de N
3
,
y la denitrificacin deuele N
3
a la
atm#s!era 'donde constituye el 79: del aire atmos!1rico()
0os aut#tro!os reducen el nitr#geno o$idado que reciben como nitrato 'N6
5
;
( a grupos amino en
el proceso de asimilacin) 2ara oler a contar con nitrato %ace !alta que los descomponedores lo
e$traigan de la biomasa dej+ndolo en la !orma reducida de ion amonio 'N4
7
8
(, proceso que se
llama amonificacin" 0uego el amonio es o$idado a nitritos y nitratos, en el proceso de
nitrificacin)
&uente) *magen traducida e+trada de http://www.epa.gov/maia/html/nitrogen.html
,icroorganismos fijadores de nitrgeno atmosfrico
E$isten di!erentes tipos de microorganismos procariotas !ijadores de N
3
que se los
puede clasi!icar en, !ijadores libres, !ijadores asociados y !ijadores simbi#ticos)
<ijadores libres
Ciertas bacterias y algunas especies de algas erdeazules 'cianobacterias( que se
desarrollan independientemente tienen la %abilidad de !ijar el N
3
atmos!1rico en sus
c1lulas, sin estar necesariamente asociados a otro organismo) 0as cianobacterias crecen
sobre rocas y sedimentos en las costas de los cursos de aguas, y !ijan N
3
y lo liberan al
medio) 6tro ejemplo son las bacterias del g1nero Clostridium, ampliamente distribuidas
en suelos y aguas salinas, sedimentos, intestinos o %eces, y la bacteria *zotobacter,
presente en suelos alcalinos)
<ijadores asociados
0os !ijadores asociados son aquellos organismos que pueden !ijar N
3
en lugares donde la
concentraci#n de o$"geno es muy baja) =n caso es el de bacterias asociadas a ra"ces de
gram"neas o pastos) Estas bacterias se denominan ep"!itas y colonizan pre!erentemente
la zona del suelo circundante de la ra"z, llamada rizos!era, donde aproec%an az>cares y
otros compuestos e$udados por la planta para !ijar ciertas cantidades de N
3
que
eentualmente son asimiladas por las plantas) Ejemplos de estas bacterias son las
di!erentes especies de *zospirillum asociados a ra"ces de trigo y ma"z)
6tras asociaciones se dan con bacterias endo!itas que penetran y ien en el interior de
gram"neas) En general, estas bacterias colonizan espacios intercelulares y se mueen por
los asos del $ilema pero no penetran en las c1lulas por lo que no puede %ablarse de
simbiosis) Entre ellas est+n el *cetobacter y 4erbaspirillum que son endo!itas de la
ca?a de az>car y las bacterias del g1nero *zoarcus capaces de inadir las ra"ces de
arroz)
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*dem+s de lograr la ganancia de
N
3
por las plantas, estos
microorganismos en determinadas condiciones solubilizan !os!atos y sintetizan
sustancias estimuladoras del crecimiento egetal, tales como, itaminas, +cido
indolac1tico, +cido giber1lico o citoquininas) De all" que estas bacterias se conozcan
como -promotoras del crecimiento egetal.) *dem+s, estos microorganismos son capaces
de sintetizar sustancias !ungist+ticas que, al in%ibir el crecimiento de los %ongos del
suelo que a!ectan a las plantas, promueen indirectamente el desarrollo de las plantas,
especialmente en las etapas tempranas del cultio) Estos compuestos tienen acci#n
sobre %ongos pertenecientes a los g1neros <usarium, *lternaria, 2enicillium y
@%izoctonia, y cobran importancia para ser usados en planes de control biol#gico de
pat#genos 'biocontrol()
<ijadores simbi#ticos
Estos microorganismos se diiden en dos grupos principales,
A( 0as bacterias gen1ricamente llamadas @%izobium que se asocian con un grupo muy
grande de plantas leguminosas 'c%auc%a, areja, poroto, man", lenteja, soja(&
3( 0as bacterias gen1ricamente denominadas <ranBia, capaces de asociarse con m+s de
3CD especies de plantas no leguminosas, denominadas plantas actinorr"cicas) Esta
asociaci#n tiene gran importancia ecol#gica, ya que las especies actinorr"cicas
colonizan suelos pobres en nitr#geno)
E$isten otras asociaciones simbi#ticas como las !ormadas entre plantas asculares y
cianobacterias 'algas erdeazules() 6tra simbiosis muy importante es la de *zolla y
*nabaena& muy aproec%ada para cultios de arroz)
El caso de simbiosis -hi$obium.leguminosas
&oto adatada de)
http://faculty.abe.ufl.edu/~chyn/age2062/lect/lect_12/symbo2.gif
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-a es
'oduladas
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*unque %ay diersas asociaciones
que contribuyen a la !ijaci#n
biol#gica del N
3
, en la mayor"a de los agroecosistemas el 8D: del nitr#geno !ijado
biol#gicamente ocurre a tra1s de la simbiosis @%izobium/leguminosas) Esta asociaci#n
se produce a tra1s de un proceso de reconocimiento espec"!ico entre la bacteria y la
ra"z de la planta) Esto determina el 1$ito de la asociaci#n simbi#tica) El an+lisis gen1tico
de la bacteria @%izobium %a permitido identi!icar m+s de 5D genes cuya !unci#n es
necesaria para el desarrollo de un n#dulo !ijador de N
3
, y que no se necesitan para el
desarrollo propio de la bacteria)
0a asociaci#n se inicia con el proceso de in!ecci#n, cuando las bacterias son estimuladas
por los e$udados radicales y proli!eran) Esto induce un alargamiento y arqueado de los
pelos radicales y posterior !ormaci#n de una estructura tubular por donde @%izobium es
conducido %asta la base del pelo) 0uego atraiesa la pared de la c1lula cortical, se
establece y se engloba por la membrana plasm+tica de la c1lula egetal, lo que resulta en
la !ormaci#n del n#dulo) *ll", en los n#dulos radiculares, las bacterias encuentran un
ambiente que las protege su!icientemente del o$"geno como para poder producir la
enzima nitrogenasa que reduce el N
3
molecular del aire a amonio)
0os dos simbiontes, planta y bacteria, se bene!ician) 0as bacterias reducen N
3
a amonio
'N4
7
(, el cual es e$portado al tejido egetal para su asimilaci#n en prote"nas y otros
compuestos nitrogenados) 2or su parte, la glucosa !abricada durante la !otos"ntesis es
transportada a la ra"z donde los bacterias la usan como !uente de energ"a)
/licaciones de las bacterias fijadoras de nitrgeno y romotoras del crecimiento
El reconocimiento de la !ijaci#n biol#gica del N
3
puede remontarse a 5DD a?os antes de
Cristo cuando los romanos utilizaban la rotaci#n de cultios con leguminosas en sus
pr+cticas agr"colas) En la actualidad, adem+s de la rotaci#n de cultios, se emplean
microorganismos como biofertili$antes0 y se aplican m1todos de biocontrol para
proteger a las plantas contra el ataque de pat#genos, plagas y malezas)
Eio!ertilizantes
* pesar de que @%izobium es un %abitante com>n en los suelos agr"colas,
!recuentemente su poblaci#n es insu!iciente para alcanzar una relaci#n ben1!ica con la
leguminosa, o la cantidad de N
3
que !ijan no resulta su!iciente) En estos casos, es
posible inocular la semilla con microorganismos para asegurar la !ijaci#n biol#gica del N
3
)
El proceso de inoculaci#n consiste en agregar a las semillas, antes de la siembra, una
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mezcla de bacterias !ijadoras y
otros ingredientes que !acilitan
el crecimiento de las mismas)
El empleo de inoculantes de @%izobium en las leguminosas es una de las contribuciones
m+s importantes de la microbiolog"a a la agricultura) Estos inoculantes !aorecen la
!ijaci#n simbi#tica de nitr#geno y, en consecuencia, disminuye la dependencia a los
!ertilizantes nitrogenados y la contaminaci#n ambiental por nitr#geno asociada al
empleo de estos productos) 0o ideal es seleccionar un @%izobium altamente in!ectio y
e!ectio para lograr una disminuci#n m+$ima del !ertilizante nitrogenado sin reducir el
rendimiento de la leguminosa)
En la *rgentina e$isten arias empresas e institutos p>blicos que trabajan en
inestigaci#n y desarrollo de inoculantes) 0os objetios de estas inestigaciones son
b+sicamente,
A( Fejorar la e!iciencia de !ijaci#n de nitr#geno mediante el uso de bacterias muy
competitias)
3( Desarrollar bacterias !ijadoras m+s e!icientes y competitias) Gambi1n se inestiga
sobre la obtenci#n de cepas bacterianas con genes capaces de mejorar las
limitaciones que presenta el proceso de simbiosis y de !ijaci#n de nitr#geno)
5( E$tender las entajas de la simbiosis a otros cultios 'arroz, ma"z, etc)() En los
cereales, por ejemplo, se intenta inducir estructuras similares a los n#dulos de
leguminosas) He %an realizado e$perimentos de trans!erencia de genes inductores
de nodulaci#n a plantas de arroz y se %a obserado que se e$presaban en las ra"ces
de las plantas transg1nicas obtenidas)
Eiocontrol
0os m1todos de biocontrol buscan proteger a las plantas de los pat#genos mediante el
uso de agentes biol#gicos, como microorganismos) Hu mecanismo de acci#n puede ser la
competencia nutricional con el pat#geno, o por la inducci#n de resistencia restringiendo
la penetraci#n del pat#geno en la planta, optimizando su de!ensa, o bien por la
producci#n de antibi#ticos, +cido cian%idrico, etc) e!ectios contra en!ermedades
!>ngicas)
Desde el punto de ista %ist#rico, *zotobacter es el microorganismo que de una !orma
m+s amplia %a sido utilizado en la agricultura) 0as primeras aplicaciones de estas
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bacterias datan de A9D3,
alcanzando una amplia utilizaci#n
durante las d1cadas del 7D, CD y ID, particularmente en los pa"ses de Europa del Este)
0a aplicaci#n pr+ctica de la inoculaci#n de este microorganismo %a sido positia,
obser+ndose notables incrementos en los rendimientos en di!erentes cultios,
principalmente en cereales)
De entre las rizobacterias usadas en biocontrol, 2seudomonas !luorescens es de las m+s
conocidas) Gambi1n las bacterias Eacillus y Htreptomyces %an resultado muy e!icaces en
el control de en!ermedades) Estas bacterias producen una amplia gama de metabolitos
con capacidad antimicrobiana)
El Eacillus t%uringiensis 'EG( es un agente de biocontrol que representa el 9D: del
mercado mundial de bioinsecticidas) En los estad"os de esporulaci#n produce unos
cristales constituidos por prote"nas 'endoto$inas( dotadas de propiedades insecticidas)
Esas endoto$inas !orman parte de !ormulaciones comerciales de bioinsecticidas) He %an
obtenido plantas transg1nicas 'como el ma"z EG( que contienen el gen que codi!ica para
endoto$inas, resistentes al ataque de los insectos) Es decir que la misma planta produce
el insecticida espec"!ico, lo que reduce la necesidad de empleo de productos qu"micos
insecticidas)
*ctualmente, cerca de 7D productos est+n disponibles en el comercio para el control de
organismos !itopat#genos) 0a mayor"a de estas bacterias producen antibi#ticos como
mecanismo de control de la en!ermedad, pero se sigue inestigando con el !in de dise?ar
nueos productos para el control biol#gico de pat#genos en la agricultura) 2or lo general,
las mezclas de cepas natias, y la generaci#n de cepas gen1ticamente modi!icadas en las
que se acelera la producci#n de metabolitos antimicrobianos, son las dos estrategias
m+s atractias para mejorar la capacidad de las bacterias como agentes de biocontrol)
La micorri$a0 una asociacin entre hongos y lantas
Ciertos %ongos del suelo desarrollan interacciones ben1!icas, como es la asociaci#n
mutualista llamada micorri$a, que establecen con las ra"ces de las plantas asculares)
Esta asociaci#n se %a registrado en el 9D: de las plantas terrestres) 0os distintos tipos
de micorrizas se pueden clasi!icar en ectomicorrizas y endomicorrizas, seg>n la
relaci#n de las %i!as del %ongo con las c1lulas de las ra"ces del %ospedador)
En las ectomicorrizas el %ongo inade la ra"z sin entrar en el interior de las c1lulas) 2or
el contrario en las endomicorrizas el micelio penetra en el interior de las c1lulas
radicales) Este >ltimo tipo de micorrizas es muy !recuente y est+ e$tendido en todo el
planeta) He la encuentra en la mayor"a de los +rboles de las zonas tropicales y algunos
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+rboles de bosques templados,
como el arce y el !resno, y
algunas con"!eras como la araucaria) 0a mayor"a de las plantas arbustias y %erb+ceas
tambi1n poseen este tipo de asociaci#n, y casi la totalidad de las plantas cultiadas)
=n tipo particular de endomicorriza, la micorriza arbuscular, es la m+s abundante en los
sistemas tropicales) El e!ecto positio se puede obserar en la planta %ospedadora al
incrementarse su reproducci#n, superiencia y producci#n de biomasa) El %ongo se
introduce en la ra"z de la planta %asta llegar al interior de una c1lula egetal, donde un
!ilamento del %ongo '%i!a( se rami!ica !ormando estructuras semejantes a arbolitos
'arb>sculos( dentro de la c1lula o !ormando es"culas) Dic%os %ongos act>an como
e$tensiones del sistema radical 'e$iste una cone$i#n continua entre el suelo y el interior
de la planta( y !acilitan la toma de agua y nutrientes poco disponibles por su baja
solubilidad) 2or otro lado, protegen a las plantas contra estr1s %"drico y pat#genos del
suelo y otorgan entajas competitias con otras plantas)
En la simbiosis micorriza/planta, al igual que en la simbiosis @%izobium/leguminosa se
pone de mani!iesto un intercambio de se?ales entre los simbiontes de reconocimiento y
aceptaci#n mediados por la e$presi#n de genes)
*ctualmente la preparaci#n de inoculantes comerciales de micorrizas est+ limitada por
la imposibilidad de cultiar estos %ongos simbiontes obligados en laboratorio) Es por ello
que las mismas ra"ces de plantas micorrizadas mezcladas con la tierra donde crecen,
constituyen la mejor !uente que se utiliza para inocular nueas plantas)
0a inestigaci#n b+sica podr"a proeer de nueas %erramientas para producir inoculantes
en mayor cantidad, con adecuados controles de calidad y con mayor capacidad in!ectia
y de colonizaci#n
Los beneficios de las asociaciones
En presencia de simbiosis,
- los cultios agr"colas necesitan menor adici#n de !ertilizantes ya que se aproec%an
mejor los nutrientes del suelo& en promedio se reduce la adici#n de !ertilizante en
3C: y de !#s!oro en CD:)
- 0a reducci#n del uso de !ungicidas y bactericidas es tambi1n importante,
considerando que la planta es menos susceptible a in!ecciones)
- *umenta la calidad y cantidad de !lores o !rutos ya que la planta %a tenido una
inducci#n en su crecimiento)
La microbiologa del suelo en la era de la biotecnologa moderna
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En los >ltimos 3D a?os,
inestigadores en todo el mundo,
%an realizado numerosos es!uerzos con el !in de %acer m+s e!iciente la !ijaci#n de N
3
en
la simbiosis @%izobium/leguminosa) 0a integraci#n de t1cnicas de estudio de la
microbiolog"a tradicional, junto con metodolog"as moleculares, incluyendo los aances
que suponen las t1cnicas de gen#mica contribuir+ a un mejor conocimiento del
!uncionamiento de las comunidades microbianas del suelo) * su ez, los estudios sobre la
bioqu"mica de las asociaciones microbianas, %an abierto un nueo %orizonte que est+
cambiando la percepci#n de la diersidad microbiol#gica) 2or otro lado, la ingenier"a
gen1tica tiene un enorme potencial para mejorar la e!iciencia de los inoculantes en la
inducci#n de simbiosis y mejorar el proceso de !ijaci#n o la capacidad de las plantas
para asimilar nitr#geno)
0as secuencias gen#micas permiten realizar estudios comparatios entre rizobios, as"
como entre bacterias !ijadoras y no !ijadoras de nitr#geno) Es posible analizar genes
!uncionales clae en procesos importantes en suelo tales como la desnitri!icaci#n,
nitri!icaci#n y !ijaci#n de nitr#geno) Gambi1n se puede determinar la diersidad de
estos genes en di!erentes suelos o di!erentes condiciones)
=no de los principales objetios actuales es determinar la !unci#n que cumplen los
di!erentes microorganismos y las interacciones planta/ microorganismo) Ganto para
bacterias como para plantas asociadas, la construcci#n de microarreglos 'microarrays o
c%ips( de *DN est+ permitiendo abordar estudios de interacci#n planta/microorganismo
que %asta %ace pocos a?os eran imposibles) '=n microarreglo, microarray o c%ip de *DN
es una serie ordenada de muestras de *DN que se pueden estudiar para determinar
patrones en la e$presi#n de los genes transcriptos() El adenimiento de 1stas y otras
t1cnicas permitir+n a!rontar el reto de la biotecnolog"a de la !ijaci#n de nitr#geno)
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C1'#*2E-/C*1'E# ,E3121L45*C/#
F+s all+ del aspecto biotecnol#gico, y de los aportes que realiza esta disciplina a los
procesos biol#gicos, este Cuaderno permite abordar en clase el concepto de ecosistema
y las asociaciones que all" se establecen)
6curre, en ocasiones, que se de!ine el ecosistema como la suma de los componentes
bi#ticos y abi#ticos) @esulta !undamental al tratar este tema destacar que el
ecosistema no es simplemente la suma del espacio !"sico y de los seres ios que lo
%abitan 'incluida la materia org+nica en descomposici#n(, sino que incluye tambi1n las
relaciones que se establecen entre ellos) 0a in!luencia mutua entre las condiciones del
ambiente y los seres ios, y entre los seres ios entre s", %ace posible las
trans!ormaciones de la materia y de la energ"a que mantienen al ecosistema en
!uncionamiento) En este concepto se incluyen las relaciones de simbiosis y mutualismo
que trata el Cuaderno, y m+s ampliamente las relaciones tr#!icas, las redes tr#!icas, el
ciclo de la materia y el !lujo de la energ"a)
Es interesante trabajar tambi1n que estas relaciones que se establecen entre los
componentes de un ecosistema, !orman parte de 1l, pero no podemos erlas) Es decir,
podemos er a un animal comi1ndose a otro, pero no emos la relaci#n presa/predador)
2odemos er a una aca comiendo pasto, pero eso no signi!ica que estemos iendo a un
productor y a un consumidor, ya que estos t1rminos %acen re!erencia a la relaci#n entre
ellos) Del mismo modo es posible er los n#dulos en las ra"ces de las leguminosas pero no
se e la relaci#n de simbiosis) Estos conceptos surgen de la interpretaci#n y del estudio
del sistema, y permiten su e$plicaci#n) En este sentido, y re!erido a cualquier tema que
se aborde en biolog"a, es importante di!erenciar entre lo que se -e. y lo que se
-interpreta.) En este sentido, es interesante trabajar con los alumnos que la de!inici#n
de sistema o de ecosistema 'como sistema ecol#gico( est+ dada por el inter1s y el
objetio de quien lo estudia) De esta !orma, un bosque completo puede considerarse un
ecosistema, pero tambi1n un >nico +rbol de ese bosque puede considerarse en s" mismo
un ecosistema) 0os l"mites del ecosistema los de!ine quien lo estudia)
@especto del empleo de m1todos biol#gicos de control y !ijaci#n de nutrientes, es
interesante plantearlo desde un espectro amplio de la agricultura, como parte de un
proceso de desarrollo social y econ#mico de las >ltimas d1cadas) * partir de esto, es
posible interpretar mejor las entajas y los aportes que puede %acer la microbiolog"a, la
gen1tica, y la biotecnolog"a al desarrollo de una agricultura sustentable)
En las >ltimas d1cadas, la necesidad de aumentar la producci#n de alimentos %a lleado a
pol"ticas de desarrollo agr"cola que promueen el uso de aportes e$ternos en reemplazo
de los recursos y procesos naturales de control) 2or ejemplo, los pesticidas sustituyeron
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en gran medida a los medios biol#gicos para controlar plagas, malezas y en!ermedades,
mientras que los !ertilizantes inorg+nicos sustituyeron al esti1rcol, el abono egetal y la
!ijaci#n biol#gica de nitr#geno) Este reemplazo introdujo problemas tales como altos
costos energ1ticos, erosi#n, contaminaci#n, p1rdida de productiidad, disminuci#n de los
ingresos y riesgos para la salud de la poblaci#n) 0a alternatia de la agricultura
sustentable se plantea como un modelo de organizaci#n econ#mica y social, que requiere
una participaci#n actia de los agricultores y un conocimiento sobre el !uncionamiento
del ecosistema) Hus objetios son,
la producci#n de una cantidad adecuada de alimentos que contemple la protecci#n de
los recursos, la conseraci#n del suelo, el agua, la energ"a y los recursos biol#gicos, y
la seguridad del ambiente&
una mejora del equilibrio entre los m1todos de e$plotaci#n, la capacidad productia, y
las limitaciones ambientales para garantizar que los nieles de producci#n sean
sostenibles a largo plazo&
un acceso m+s equitatio a los recursos y la transici#n a !ormas de agricultura m+s
justas desde el punto de ista social, y un incremento de la autosu!iciencia de los
agricultores y de los pueblos rurales)
0a agricultura sustentable combina t1cnicas tradicionales de conseraci#n con m1todos
modernos, y se basa en,
mayor incorporaci#n de los procesos naturales, como el ciclo de los nutrientes, la
!ijaci#n biol#gica del nitr#geno y el control biol#gico de plagas&
rotaci#n y diersi!icaci#n de los cultios que permiten recuperar la !ertilidad del
suelo, reducir las poblaciones de malezas y plagas y, en consecuencia, la necesidad de
pesticidas y %erbicidas&
incorporaci#n de plantas regeneradoras del suelo en la rotaci#n de cultios que !ijan
y protegen el suelo y, al ser enterradas con el arado, le aportan materia org+nica,
aumentan la retenci#n de agua y reducen la erosi#n&
reducci#n del uso de aportes e$ternos no renoables como !ertilizantes sint1ticos,
pesticidas y aditios para el alimento del ganado&
mayor uso productio del potencial biol#gico y gen1tico de las especies egetales y
animales)
C1'CEP31# -EL/C*1'/21#
Indiiduo) 2oblaci#n) Comunidad) Ecosistema 'sistema ecol#gico() Ciclo de la materia)
<lujo de la energ"a) Cadena alimentaria) @edes tr#!icas) @elaciones en la comunidad,
"El Cuaderno de PorquBiotecnologa" es una herramienta didctica creada y desarrollada or el equio
edaggico del Programa Educati!o PorquBiotecnologa" #u reroduccin est autori$ada bajo la
condicin de que se aclare la autora y roiedad de este recurso edaggico or arte del Programa
Educati!o PorquBiotecnologa"
EDICIN N 87
depredaci#n, competencia, simbiosis, mutualismo, parasitismo) Ficroorganismos,
estructura, clasi!icaci#n) 2lantas, clasi!icaci#n)
/C3*6*2/2E#
/cti!idad 7) /licaciones de microorganismos en la /rgentina" Lectura y anlisis de
un te+to
<uente, %ttp,JJKKK)unrc)edu)arJunrcJnLcomp)cdcMnotaNAI5AC) =niersidad Nacional de @"o Cuarto)
Heptiembre de 3DDI)
El objetio de esta actiidad es repasar los conceptos trabajados en el Cuaderno a
partir del an+lisis de un caso argentino)
He propone leer el te$to en la p+gina siguiente y responder a las consignas que !iguran a
continuaci#n,
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2reguntas para analizar el te$to,
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8ni!ersitarios locales mejoran un inoculante natural ara soja y lo transfieren a una emresa
santafesina
nvestigadores de la !acultad de "iencias #$actas% &ue vienen prestando servicios a distintas empresas del
pa's% me(orar)n la formulaci*n de un inoculante natural para so(a% producido por la compa+'a ,ova -... de la
ciudad de "a+ada de /*me0 1-anta !e.
#l convenio espec'fico fue aprobado por el "onse(o -uperior y ser) firmado en los pr*$imos d'as para dar
continuidad a los traba(os &ue se vienen reali0ando para el perfeccionamiento del mencionado inoculante a
base de Bradyrhizobium japonicum% a la ve0 &ue establecer un sistema eficiente de producci*n y control de
calidad.
2#s un inoculante biol*gico% a base de una bacteria &ue es un simbionte de so(a. #ste inoculante le aporta
nitr*geno a la planta. #s una f*rmula con ingredientes de veh'culo% &ue le sirven a la bacteria para poder crecer%
multiplicarse y sobrevivir3% e$plic* el microbi*logo 4scar 5arsciarelli% &uien (unto con el doctor !abricio "assan%
son los responsables t6cnicos de esta iniciativa.
2. la me(ora la llevamos a cabo nosotros en nuestro laboratorio y le transferimos a la empresa los resultados.
7icimos el estudio% logramos la me(ora y actualmente los estamos asesorando en cuanto a la manera de
implementar estas sugerencias3% coment*% por su parte% la doctora 5ar'a 8irginia 9una% docente del
:epartamento de "iencias ,aturales% &ue viene llevando adelante estos traba(os en el 9aboratorio de !isiolog'a
8egetal e nteracci*n ;lanta<5icroorganismo.
9a investigadora es la responsable y coordinadora de esta iniciativa% respecto de la cual asegur*: 2-e me(or* la
calidad de un producto comercial &ue se aplica a campo% en particular en so(a. .l reformular el medio de cultivo%
me(oramos la supervivencia de los microorganismos% la reproducci*n de los mismos dentro del medio y la
producci*n de compuestos o metabolitos% &ue van a ayudar a la planta a crecer me(or3.
2#l inoculante viene en una bolsa de pl)stico o en un envase con un contenido &ue puede ser s*lido o l'&uido.
,osotros evaluamos si la composici*n &u'mica de ese medio es la adecuada para asegurar la supervivencia de
la bacteria y un adecuado crecimiento% es decir &ue produ0ca los factores de desarrollo &ue la planta va a
necesitar3% detall* 9una. = acot*:
27acemos ese tipo de an)lisis y le sugerimos a la empresa modificar determinadas metodolog'as o composici*n
del medio. #n el caso particular de ,ova% adem)s de la reformulaci*n del medio de cultivo nos ocupamos de
controlar in situ si los biorreactores est)n en condiciones y si est)n funcionando a la temperatura adecuada3.
El producto se comercializar el ao que viene
4scar 5asciarelli% &ue es investigador del "4,"#>% al igual &ue sus dos compa+eros de laboratorio% adelant*
&ue 2este producto saldr) al comercio el a+o &ue viene3. = sostuvo: 2#sto comen0* con un traba(o a escala de
laboratorio. :espu6s se hi0o una primera visita a la empresa para trasladar a escala piloto. = ahora hemos
vuelto al laboratorio para hacer algunos reto&ues de la f*rmula% y posteriormente volver a la empresa. #stamos
en un proceso con el &ue se procura llegar a un producto final &ue pueda ser comerciali0ado en la pr*$ima
campa+a3.
2,os encontramos en un proceso intermedio. #stamos traba(ando con pruebas de laboratorio% para luego pasar
a una escala industrial% lo cual re&uiere de metodolog'as distintas. 7ay &ue probar si lo &ue se hace en el
laboratorio es ?til a la planta y% de esa forma% e$trapolarlo a nivel industrial% con los necesarios rea(ustes y
me(oras3% e$plic* el (oven investigador.
Trayectoria en determinaciones hormonales
#l laboratorio de !isiolog'a 8egetal de la !acultad de "iencias #$actas de la @,A" cuenta con una dilatada
trayectoria en el estudio bio&u'mico de fitorreguladores% &ue son hormonas &ue promueven el crecimiento
vegetal. -us integrantes desde hace cuatro a+os vienen recibiendo consultas por parte de distintas empresas y
ofrecen servicios a empresas de Buenos .ires% "*rdoba% -anta !e.
2:ebido a la trayectoria en el estudio de hormonas vegetales% &ue hasta el a+o pasado no lo hacia ning?n otro
laboratorio en la .rgentina% nuestro laboratorio comen0* a ser referencia en materia de control de calidad de
inoculantes en el pa's3% subray* 5ar'a 8irginia 9una% al tiempo &ue agreg*: 2!ormamos parte de una red
nacional de control de calidad de inoculantes% &ue se re?ne una ve0 por mes para fi(ar pautas uniformes% &ue
permitan determinar la efectividad y durabilidad de los inoculantes comerciales3.
EDICIN N 87
A) OCu+l es el objetio del trabajo de inestigaci#n realizadoM @ta) Fejorar un inoculante
natural que se aplica a campo) 0o que %icieron !ue re!ormular el medio de cultio en el que
crecen los microorganismos)
3) OPu1 bene!icios traer+ este desarrolloM @ta) *l re!ormular el medio de cultio, mejora la
superiencia de los microorganismos, su reproducci#n dentro del medio y la producci#n de
compuestos o metabolitos, que an a ayudar a la planta a crecer mejor) Esto, a su ez, trae
bene!icio al productor)
5) OC#mo bene!icia este producto al sueloM @ta) Es un bio!ertilizante) Es decir, un
!ertilizante obtenido a partir del uso de microorganismos, constituyendo una alternatia
sustentable a los !ertilizantes qu"micos, con el consecuente bene!icio para el medio ambiente
y para el productor)
7) OPu1 tipo de microorganismo es utilizado en este productoM @ta, Eacterias de la
especie Eradyr%izobium japonicum)
C) O2or qu1 se %abr+ elegido este tipo de bacterias para !abricar el inoculanteM @ta) He
eligen bacterias que establecen espec"!icamente una relaci#n de simbiosis con el cultio de
inter1s, en este caso la soja)
I) OCu+l es la !unci#n de las bacterias del inoculanteM @ta) Hon bacterias !ijadoras de
nitr#geno) Es decir que tiene la capacidad de incorporar N
3
y trans!ormarlo a una !orma que
puede ser aproec%ada por la planta) De esta !orma, ayudan a que la planta obtenga el
nitr#geno que no puede incorporar del aire)
7) I/OPu1 aporte %acen los inestigadores de la =niersidad de @"o Cuarto a la
industriaM @ta, 0os inestigadores mejoraron en el laboratorio la calidad de un inoculante y
trans!irieron estos resultados a una empresa santa!ecina que emplea estos productos en
cultios de soja) 0os asesoran en la manera de implementar estas mejoras, de establecer un
sistema e!iciente de producci#n y control de calidad, y controlaron el estado y !uncionamiento
de los biorreactores)
8) 8/OPu1 son y para qu1 se utilizan los biorreactoresM @ta, Hon grandes !ermentadores
donde se cultian en medio l"quido las bacterias que an a usarse para !ormular el
bio!ertilizante)
9) OPu1 sericio o!rece este laboratorio a niel nacionalM @ta) *sesoran en el control de
calidad de los inoculantes, determinan su e!ectiidad y durabilidad)
/cti!idad 9" /cti!idad e+erimental" &ijacin biolgica de nitrgeno
6bjetio, Comprobar los bene!icios de la <ijaci#n Eiol#gica de Nitr#geno atmos!1rico y
de la inoculaci#n)
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He sugiere diidir el curso en tres
grupos)
Faterial por grupo de alumnos,
3D semillas de poroto o soja
AD !rascos de pl+stico con tapa para usar como macetas
Gierra 'su!iciente para llenar AD !rascos(
Inoculante 'se puede conseguir una muestra en una semillera o productora de
inoculantes(
0aandina comercial
*gua %erida durante AC minutos

2rocedimiento por grupo,
/ Esterilizar la mitad de la tierra) =na !orma sencilla de esterilizarla consiste en %erir
la tierra disuelta en agua durante AC minutos en una olla de presi#n o durante 5D
minutos en una olla com>n)
/ <iltrar la tierra con una tela y dejarla en!riar)
/ 4acer peque?os agujeros en la base de los !rascos para permitir que drene el agua de
riego de las macetas)
/ 0lenar dos de las macetas con tierra est1ril y dos con tierra no est1ril)
/ 4acer cuatro agujeros en cada una de las tapas 'su!icientemente grandes como para
que entren las semillas( y tapar las macetas)
/ Esterilizar las semillas, diluir el cloro al 3D: 'un olumen de cloro por cuatro de agua(
y sumergir las semillas en esta soluci#n durante 3D minutos) 0uego enjuagarlas con agua
%erida o desin!ectada)
- H#lo dos de los tres grupos usar+n el inoculante) Inocular la mitad de las semillas seg>n
recomendaciones del !abricante)
- Hembrar las semillas seg>n los siguientes tratamientos,
A, Hembrar AD semillas no inoculadas en C macetas con tierra est1ril '3 semillas por
maceta()
3, Hembrar AD semillas no inoculadas en C macetas con tierra no est1ril '3 semillas por
maceta()
5, Hembrar AD semillas inoculadas en C macetas con tierra est1ril '3 semillas por
maceta()
7, Hembrar AD semillas inoculadas en C macetas con tierra no est1ril '3 semillas por
maceta()
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Nota: cuidar que las semillas
queden cubiertas con tierra.
/ Cultiar las plantas durante 3D
d"as, reg+ndolas con agua %erida '!r"a()
- Holicitar a los alumnos que escriban los resultados que esperan obtener al momento de
%acer la siembra)
- *nalizar los resultados obtenidos) Comparar las 7 tratamientos, buscar presencia de
n#dulos, tama?o de las plantas, color de las %ojas, actiidad de los n#dulos 'una
coloraci#n rojiza indica que estos n#dulos son actios) 6tros colores, como erde o
blanco indican ausencia de actiidad)(
- Contrastar los resultados obtenidos con los esperados)
/ Cada alumno escribir+ en su cuaderno la conclusi#n que sacan a partir de los resultados
obtenidos)
@esultados esperados, en los tratamientos 3, 5 y 7 las plantas deber"an crecer m+s que
las del tratamiento A, deber+n ser de un color erde m+s intenso y presentar n#dulos en
sus ra"ces, debido a la presencia de bacterias !ijadoras de nitr#geno pree$istentes en
la tierra o por causa de la aplicaci#n de inoculantes) 0as semillas inoculadas deber"an
presentar mayor n>mero de n#dulos que en el tratamiento sin inoculaci#n) En el
tratamiento A no deber"an isualizarse n#dulos porque los microorganismos
pree$istentes deber"an %aberse degradado por la esterilizaci#n)
Importante, si la tierra es muy rica en nitr#geno o es muy +cida, las di!erencias no
podr+n obserarse con !acilidad, ya que ambos !actores act>en in%ibiendo la nodulaci#n,
por lo cual se recomienda que las pruebas se realicen con tierra de di!erentes zonas,
para asegurar el 1$ito de esta actiidad)
,/3E-*/L 2E C1'#8L3/
0a !ijaci#n simbi#tica de nitr#geno en soja) Nodulaci#n, Inoculante y F1todos de Inoculaci#n)
0eticia * <ern+ndez) Ciencia 4oy) Qol AC / N 8C) 3DDC)
%ttp,JJKKK)ciencia%oy)org)arJlnJ%oy8CJsoja)%tm
0ibro electr#nico) Ciencias de la Gierra y del medio ambiente) 0uis Ec%arri 2rim) Espa?a)
%ttp,JJKKK)esi)una)esJasignaturasJecologiaJ4iperte$toJindice)%tml
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2la ntas, bacterias, %ongos, mi mujer, el
cocinero y su amante. Sobre
interacciones biolgicas, los ciclos
de los elementos y otras historias. 0uis R) Sall Colecci#n Ciencia que 0adra) =NP) Higlo TTI)
3DDC)
@eista @ed Escolar) 0a ciencia en todas partes) 0a !ijaci#n biol#gica de nitr#geno y su
importancia) Centro de Inestigaci#n sobre <ijaci#n de Nitr#geno) =niersidad Nacional de
F1$ico) %ttp,JJredescolar)ilce)edu)m$JredescolarJ@eistaJDIJarticulosJDI)%tml)
@eino <ungi, Ficorrizas) Hitio Keb con temas en %iperte$to de Eiolog"a
%ttp,JJ!ai)unne)edu)arJbiologiaJ!ungiJmicorrizas)%tmUinicio
Ecolog"a de las comunidades) Hitio Keb con temas en %iperte$to de Eiolog"a
%ttp,JJKKK)biologia)edu)arJecologiaJEC606RI*:3DDE:3D0*H:3DC6F=NID*DEH)%tm
Hitio Keb en ingl1s con !otos y t1cnica de obseraci#n de micorrizas
%ttp,JJKKK)!!p)csiro)auJresearc%Jmycorr%izaJam)%tmlUlooB
@ed Iberoamericana De Eio!ertilizantes Ficrobianos 2ara 0a *gricultura
%ttp,JJKKK)cyted)orgJFenuCJ@edConsul)aspMCod@edN377
Documento -<ertilizantes.) @ub1n Iglesias Rarc"a/ Enero 3DDA
%ttp,JJcoli)usal)esJSebJeducatioJbiotecLmicrobJtemasJ39@ubenIglesiasRarcia)pd!
Documento Empresa Eiagro) %ttp,JJKKK)biagrosa)com)arJespJimagesJreista3)pd!
Ru"a de inoculaci#n) Documento con in!ormaci#n te#rica y t1cnica sobre inoculantes
%ttp,JJKKK)nitragin)com)arJguiainoc)asp
Hitio Keb con animaciones sobre microarrays de *DN
%ttp,JJKKK)bio)daidson)eduJCoursesJgenomicsJc%ipJc%ipP)%tml
Hitio Keb de Fodelo an+logico para educadores del genoma
%ttp,JJKKK)entm)purdue)eduJe$tensiongenomicsJR*FEJspanis%Jlesson7)%tml
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