I Conferencia

Nociones Bsicas en
Biologa Molecular,
Gentica y Genmica
A. Brayan Campos S.
6to Ao FFBB
Asistente de Investigacin
Clonamiento y expresin de genes por
tecnologa del ADN recombinante
CONTENIDO
Tcnicas bsicas empleadas en Biologa
Molecular: PCR - Electroforesis
Knockout de protenas transportadoras
de membrana del cido pirazinoico en
M. smegmatis
EXTRACCIN
DE ADN
REACCIN EN CADENA
DE LA POLIMERASA
ELEMENTOS
Solucin tampn o
Buffer de PCR


dNTPs

Cloruro de Magnesio

Cebadores (Primers)

ADN polimerasa

ADN molde
5 - 10 mM Tris (pH 7 - 8).
La electroforesis es una tcnica bsica en biologa molecular
y biotecnologa que consiste en la separacin de
macromolculas bajo un campo elctrico, de acuerdo a su
tamao, carga y forma.
Nos permite la separacin de molculas
cargadas como ADN, ARN y/o protenas.
La matriz ms empleada es la
Agarosa.
ELECTROFORESIS
Y para qu amplificar el
DNA?
Aplicaciones
Biomdicas
Ciencias
Forenses
Investigacin
Ciencias de
los Alimentos
Oncogenes

Enfermedades
genticas

Paternidad

Terapia gnica
Genetic
Fingerprinting
Mutagensis
dirigda
Clonamiento
Filogenia
Expresin gnica
Determinacin de
especies animales
Dr. Lawrences talk was spellbinding, and her idea to silence the third
chromosome 21 of Down syndrome is perhaps the most brilliant idea Ive
heard in my many years of writing about genetics.
Clonamiento y expresin de genes por
tecnologa del ADN recombinante
CONTENIDO
Tcnicas bsicas empleadas en Biologa
Molecular: PCR - Electroforesis
Knockout de protenas transportadoras
de membrana del cido pirazinoico en
M. smegmatis
CONOCIMIENTOS EN
BIOINFORMTICA
BSQUEDA DE
SECUENCIAS Y DISEO
DE PRIMERS
gen pncA
Enzima Pirazinamidasa (PZAsa)
Mecanismo de resistencia a
Pirazinamida en Mycobacterium
tuberculosis
Qu clonamos?
*PURIFICACIN
DEL AMPLICN
*PURIFICACIN
DEL AMPLICN
VECTORIZACIN
DIGESTIN
ENZIMTICA Y
LIGACIN
REACCIN DE LIGACIN
TRANSFORMACIN
EN CLULAS DE CLONACIN
Verificacin de presencia de inserto (gen pncA) en el
vector
TRANSFORMACIN
EN CLULAS DE EXPRESIN
INDUCCIN Y
EXPRESIN
Clonamiento y expresin de genes por
tecnologa del ADN recombinante
CONTENIDO
Tcnicas bsicas empleadas en Biologa
Molecular: PCR - Electroforesis
Knockout de protenas transportadoras
de membrana del cido pirazinoico en
M. smegmatis
El bloqueo de genes (en ingls, gene knockout) es una tcnica
gentica que consiste en suprimir la expresin de un gen especfico
en un organismo, sustituyendo el gen original en su locus (Posicin
en el cromosoma) por una versin modificada del mismo,

Esta versin modificada puede ser el mismo gen pero al cual se le
han extrado exones, secuencias codificantes, etc. Y por ende la
protena que codificaba originalmente ya no sera funcional.
Knockout de protenas transportadoras
de membrana del cido pirazinoico en
M. smegmatis
Vectores de
clonaje
Vectores de
expresin
Vectores
Integrativos
Shuttle
vectors
Vector
Suicida
Vector
Suicida
Cassetes de
Contraseleccin
GRACIAS POR SU GENTIL
ATENCIN!!
Biopharm.grupodeinvestigacion@gmail.com
antonybcampos@gmail.com

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