La espectrofotometra es una de las tcnicas experimentales ms utilizadas para la identificacin especfica de compuestos. Se caracteriza por su precisin, sensibilidad y su aplicabilidad a molculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomoleculas, etc.) y estado de agregacin (solido, liquido y gas). Los fundamentos fsico-qumicos de la espectrofotometra son relativamente sencillos.
OBJETIVO
Aprender el uso del espectrofotmetro. Determinar cuantitativamente de la concentracin de Fe en una muestra problema mediante el instrumento del espectrofotmetro. Realizar con los datos obtenidos del espectrofotmetro y determinar la lnea y curva de calibracin en hoja milimetrada.
4
ASPECTO TEORICO
La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y bioqumicas. El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Principio de la Espectrofotometra Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe radiacin de longitudes de ondas que no pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del infrarrojo. La absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida. El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas. La espectrofotometra ultravioleta-visible utiliza haces de radiacin del espectro electromagntico, en el rango UV de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm y en el de la luz visible de 400 a 700 nm , por lo que es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la regin ultravioleta y visible del espectro. Al campo de luz uv de 200 a 400 nm se le conoce tambin como rango de uv cercano , la espectrofotometra visible solamente usa el rango del campo electromagntico de la luz visible , de 400 a 700 nm. Adems, no est de ms mencionar el hecho de que la absorcin y trasmitancia de luz depende tanto de la cantidad de la concentracin como de la distancia recorrida.
5
Ley de Beer La Ley de Beer declara que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la concentracin en la solucin. Por ejemplo, en un vaso de vidrio tenemos agua con azcar disuelta y en otro vaso tenemos la misma cantidad de agua pero con mayor cantidad de azcar en solucin. El detector es una celda fotoelctrica, y la solucin de azcar es la que se mide en su concentracin. Segn la ley de Beer, si hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la cantidad de luz que saldra del otro lado seria mayor que si repitiramos esto en el segundo; ya que en el segundo, las ondas electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos o/y molculas y son absorbidos por estos. Ley de Lambert En la Ley de Lambert se dice que la cantidad de luz absorbida por un objeto depende de la distancia recorrida por la luz. Por ejemplo, retomando el ejemplo de los vasos, pero ahora, pensemos que ambos tiene la misma cantidad de agua y la misma concentracin de azcar, pero, el segundo tiene un dimetro mayor que el otro.
Segn la ley de Lambert, si hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la cantidad de luz que saldra del otro lado seria mayor que si repitiramos esto en el segundo; ya que en el segundo, las ondas electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos o/y molculas y son absorbidos por estos; de la misma forma que se explic en la ley de Beer.
6
PARTE EXPERIMENTAL PREPARACION DE SOLUCION PATRON DE HIERRO Pesar en la balanza analtica 0.3510 g de sulfato ferroso y amnico Luego disolvemos con 50 ml de agua destilada en un vaso precipitado y le aadimos 1,5 ml de acido sulfrico concentrado. Luego calentamos la solucin ligeramente y agregamos unas gotas de permanganato de potasio hasta que la solucin muestre una coloracin ligeramente rosada. Despus lo traspasamos a una fiola de 500 ml y enrasamos con agua destilada. Determinamos la concentracin de la solucin patrn. Calculo: N = W(g) = 0.3543 g N= 0.0018076 N P.eq. * V(l) 392 * 0.5
PREPARACION DE SOLUCION DILUIDA DE Fe Una vez lista la solucin patrn de Fe; sacamos 10 ml de la solucin patrn con la ayuda de una bureta o una pipeta volumtrica y lo traspasamos a un fiola de 100 ml. Y luego lo enrasamos y lo homogenizamos con agua destilada. Finalmente calculamos la concentracin de dicha solucin.
PREPARACION DE SOLUCION DILUIDA DE Fe. N * V = N* V 0.0018076 N * 0.01 litro = N * 0.1 litro N = 0.00018076 N
7
Primero medimos con una pipeta volumtrica o en este caso con una bureta 1,2,5,8,y 10 ml de la solucin de Fe y colocarlos en cada fiola de 100 ml cada uno. Fiola 1 1 ml Fiola 2 2 ml Fiola 3 5 ml Fiola 4 8 ml Fiola 5 10 ml Luego aadimos agua destilada para llegar a 10 ml de solucin en cada fiola. En otra fiola que estar marcada como B, en la cual servir como blanco de reactivos y se colocara 10 ml de agua destilada. Por ltimo aadimos a las 6 fiolas incluyendo al BLANCO 2,5 ml de HCl 1:1 y 5 ml de sulfocianuro de potasio al 5 % que tenemos que preparar y lo enrasamos a cada fiola y calcularemos las concentraciones de cada fiola. Fiola 1
Fiola 2
Fiola 3
N * V = N * V 0.00018076 * 0.001 litro = N * 0.1 litro N = 0.0000018076 N * V = N * V 0.00018076 * 0.002 litro = N * 0.1 litro N = 0.0000036152 N * V = N* V 0.00018076 * 0.005 litro =N * 0.1 litro N = 0.000009038 8
Fiola 4
Fiola 5
ESPECTRO DE ABSORCION DATOS: TECNICA DEL ESPECTROFOTOMETRO LONGITUD DE ONDA ABSORBANCIA 230 340 nm 0.004 abs 231 405 nm 0.036 abs 232 446 nm 0.042 abs 233 495 nm 0.019 abs 234 525 nm 0.015 abs 235 550 nm 0.019 abs
N * V =N * V 0.00018076 * 0.008 litro = N * 0.1 litro N= 0.00001446 N * V = N* V 0.00018076 * 0.01 litro= N * 0.1 litro N=0.000018076 9
CONCLUSIONES
He concluido que el mtodo de espectrofotometra es una tcnica que nos servir para determinar alguna concentracin de una muestra. He aprendido la buena manipulacin del instrumento Y por ultimo he concluido que en la espectrofotometra existe varias tcnicas que pertenece a diferentes longitudes de onda. CUESTIONARIO 1 ) Explique algunos reactivos colorimtricos utilizados para la determinacin de metales Los mtodos colorimtricos figuran entre los procedimientos analticos de mayor sensibilidad. As, puede procederse con estas tcnicas, en general, a la determinacin de iones metlicos en el campo de concentracin de 10-4 a 10 g/L. Adems muchos de los reactivos utilizados en el trabajo colorimtrico presentan un grado notable de selectividad, como resultado, el anlisis de un in dado se puede realizar frecuentemente en presencia de concentraciones muy elevadas de otros iones [3]. El mtodo de tiocianato es adecuado para la determinacin de cantidades relativamente grandes de cobalto, sin embargo, los mtodos con nitroso- naftoles o nitroso-R sal son mucho ms especficos [4]. Nitroso-R sal es un derivado de 1-nitroso-2naftol. Ambos reactivos son especficos para el cobalto. Los grupos sulfonato en la molcula de nitroso-R sal hacen que este reactivo y su complejo de cobalto sea soluble en agua pero insoluble en solventes no polares. Por lo tanto, nitroso-R sal se utiliza para determinar espectrofotomtricamente cobalto en un medio acuoso.
2 ) Que complejo forma el sulfocianuro con el Fe. La constante del equilibrio que se establece en disolucin acuosa, entre el in hierro (III), el in sulfocianuro y uno de los compuestos complejos que pueden formar, el FeSCN +2 . Podemos representar tal equilibrio mediante la ecuacin (1) adjunta: Fe 3+ + SCN - FeSCN 2+
10
3) Cual es la funcin que cumplen los siguientes reactivos: a) Acido sulfrico en la preparacin de la solucin patrn. El acido sulfrico hace que la solucin patrn cambie la concentracin al momento de agregar el permanganato de potasio ya que en la espectrofotometra se debe encontrar varios tipos demuestras pero con concentraciones diferentes. b) Solucin del sulfocianuro de potasio en las soluciones de Fe. El ion sulfocianuro y el ion hierro muestran una constante de equilibrio y eso hace que que formen un complejo llamado FeSCN +2