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Este documento resume la investigación reciente en biología molecular del cáncer de próstata. El cáncer de próstata se ha convertido en uno de los tumores más comunes en hombres y una de las principales causas de muerte. Mediante técnicas de biología molecular como microdisección láser, perfiles de expresión génica, y análisis de mutaciones, se han descubierto nuevos aspectos de la enfermedad que pueden ayudar en el diagnóstico y tratamiento. Algunos descubrimientos clave incluyen marcadores mole
Este documento resume la investigación reciente en biología molecular del cáncer de próstata. El cáncer de próstata se ha convertido en uno de los tumores más comunes en hombres y una de las principales causas de muerte. Mediante técnicas de biología molecular como microdisección láser, perfiles de expresión génica, y análisis de mutaciones, se han descubierto nuevos aspectos de la enfermedad que pueden ayudar en el diagnóstico y tratamiento. Algunos descubrimientos clave incluyen marcadores mole
Este documento resume la investigación reciente en biología molecular del cáncer de próstata. El cáncer de próstata se ha convertido en uno de los tumores más comunes en hombres y una de las principales causas de muerte. Mediante técnicas de biología molecular como microdisección láser, perfiles de expresión génica, y análisis de mutaciones, se han descubierto nuevos aspectos de la enfermedad que pueden ayudar en el diagnóstico y tratamiento. Algunos descubrimientos clave incluyen marcadores mole
Marco Antonio Arap. Hospital de Clnicas. Universidad de So Paulo. Ncleo Avanado de Urologa. Hospital Srio Libans. So Paulo. Brasil. Resumen.- El cncer de prstata se ha convertido en uno de los tumores ms frecuentemente diagnosticado en los hombres y es una de las principales causas de muerte en hombres mayores de 50 aos. Debido al desarrollo de tcnicas de biologa molecular utilizadas en estudios de cncer de prstata recientes, se han des- cubierto muchos aspectos nuevos de la enfermedad que pueden ayudar en el diagnstico, tratamiento e incluso para establecer el pronstico de estos pacientes. Por lo tanto, y, a pesar de que an no es comn en la prctica clnica, hay varias tcnicas de biologa molecular que, con frecuencia deberan discutirse con otros mdicos e incluso con el paciente. En este artculo revisamos algu- nos de los instrumentos ms importantes utilizados en biologa molecular y sus descubrimientos recientes en el estudio del cncer de prstata. @ CORRESPONDENCIA Marco Antonio Arap, MD. PhD. Rua Guarara 329 apto 101 01425-001 So Paulo. SP. (Brazil) marcoarap@hotmail.com Aceptado para publicar: 1 de julio 2009. Palabras clave: Cncer de prstata. Biologa molecular. Aplicaciones. Summary.- Prostate cancer has become one of the most frequently diagnosed tumors in men and is one of the leading causes of death in men over 50 years old. Due to the development of molecular biology techniques used in recent prostate cancer studies, many new aspects of the disease are being discovered and may help in diagnosis, treatment and even to establish prognosis for these patients. Therefore, despite not yet common in clinical practice, several molecular biology techniques frequently need to be discussed with other physicians and even with the patient. In this article, we review some of the most important tools used in molecular biology and their recent discoveries in the study of prostate cancer. Arch. Esp. Urol. 2010; 63 (1): 1-9 Keywords: Prostate cancer. Molecular biology. Applications. INTRODUCCIN El cncer de prstata (CP) es uno de los prin- cipales problemas de salud pblica en todo el mun- do. En los Estados Unidos se espera que sern diag- nosticados 190.000 nuevos casos y ms de 27.000 hombres morirn de la enfermedad en 2009 (1). A pesar de la utilizacin actual del antgeno prostti- co especco (PSA) y del tacto rectal, dos estudios recientes informan slo una ligera reduccin de la mortalidad del CP (2) o ninguna reduccin (3) rela- cionadas con esa prctica. Por otra parte, todava no conocemos todos los factores que inuyen en el inicio del cncer de prstata, as como por qu algunos tu- mores de los pacientes progresarn de forma latente a enfermedad invasiva. M. A. Arap. 2 clulas diferentes en un solo tejido, ya sea benigno o maligno. De hecho, incluso se puede diseccionar, aislar y recuperar una sola clula, utilizando la pre- cisin del lser, una mejora importante respecto a la microdiseccin estndar. Despus de la microdisec- cin de tejidos, se pueden amplicar para su poste- rior estudio cantidades muy pequeas de ARN. Las rmas de expresin gentica se han des- crito por primera vez en 2006, para la estadicacin patolgica del PC como una correlacin molecular con el sistema de Gleason. Utilizando la microdisec- cin de tejidos se obtuvieron y combinaron con las clulas prostticas benignas, grupos especcos de clulas cancerosas correspondientes a los patrones de Gleason ms frecuentes (3, 4 y 5), procedentes de 29 muestras de prostatectoma radical. Se identic un panel de 86-genes y capaz de distinguir carcino- mas de grado bajo (Gleason 3) y de alto (Gleason 4 y 5) (13). Adems, este modelo tena un 76% de precisin cuando se valid con un grupo indepen- diente de carcinomas de prstata. En otro estudio, el gen DD3 fue descrito como altamente expresado en la microdiseccin de cncer de prstata (14). El gen DD3 fue posteriormente llamado antgeno de cncer de prstata 3 (PCA3) y, en un estudio diseado para evaluar su potencial de diagnstico en ms de 100 hombres, se detect PC3 en hasta un 95% de las muestras de CP y su expresin result ser ms de 60 veces mayor en los tejidos prostticos malignos que en los benignos (15). A nivel celular, la determi- nacin del PCA3 puede separar las clulas prostti- cas benignas de las malignas con una precisin del 100%. Actualmente se est investigando a fondo la sobreexpresin de este gen en los uidos corporales que contienen material celular prosttico (como el se- men y orina), con los primeros estudios que muestran niveles superiores de PCA3 en orina al PSA en el diagnstico del CP (16-19). Mutaciones en el cncer de prstata Se cree que es crucial la inestabilidad gen- mica en la carcinognesis de la prstata, as como en otros cnceres. La acumulacin de los polimorsmos genticos que regulan la proliferacin y la muerte ce- lular se han observado durante muchos aos en el CP. La heterogeneidad de la expresin gnica en el CP es muy comn y debida a muchas aberraciones cro- mosmicas diferentes. En las ltimas dcadas, estas anomalas han sido estudiadas con muchas tcnicas, como la prdida de heterocigosidad (LOH) y perles de ADN. Las innovaciones en la citogentica mole- cular, tales como la hibridacin genmica compara- da (CGH) y la hibridacin in situ con uorescencia (FISH) han mostrado algunas de las predominantes En cuanto a otros tipos de tumores, se han descrito muchas lesiones pre-malignas en el CP. Neo- plasias intraepitelial prosttica de alto grado (PIN) (4, 5) y la atroa inamatoria proliferativa (PIA) (4) son potencialmente precursoras del cncer de prstata. Es evidente, por tanto, que muchas otras caractersti- cas de la enfermedad, tales como marcadores mole- culares y genes implicados en la progresin, todava estn por descubrir, a n de aclarar los mecanismos de inicio del CP, progresin y, eventualmente, reducir la mortalidad asociada. La biologa molecular ofrece muchas herramientas que pueden ayudar a una me- jor comprensin del CP. Este artculo revisa algunos de los campos ms importantes de la investigacin de biologa molecular en el CP y sus descubrimientos ms recientes.
Perl de expresin gentico La investigacin sobre los orgenes genticos del PC se ha incrementado de forma exponencial, de- bido principalmente a los nuevos microarrays gen- ticos de alto rendimiento y tecnologas de secuencia- cin. Despus de la introduccin de microarrays de expresin gentica, estudios con muestras de tumores y lneas celulares se evaluaron aspectos moleculares del cncer de prstata, con el n de poner de relieve las caractersticas genticas de la enfermedad (6-8). Estos estudios identicaron genes que participan en las principales vas de regulacin (9), como la rpli- ca y reparacin del ADN e incluso establecieron la correlacin con los resultados clnicos (10). A n de validar los genes candidatos, los cientcos utilizaron PCR cuantitativo en tiempo real, ADN arrays, inmunohistoqumica, y microarrays de tejidos. En consecuencia, se han publicado muchos estudios importantes de perl de expresin, algu- nos muestran relacin entre el cncer de prstata y factores de crecimiento (11), protenas chaperonas y marcadores tisulares que se utilizan actualmente para la evaluacin de las biopsias de prstata (8, 12). Adems, se ha utilizado la inmunohistoqumica para establecer la regulacin de genes en un intento de identicar los biomarcadores del CP. A pesar de todos los esfuerzos, hasta la fecha no existen marca- dores moleculares o histolgicos utilizados de forma rutinaria que predigan el curso de la enfermedad, quizs debido a otras caractersticas de los pacien- tes y a la importancia de la heterogeneidad del CP a la hora de denir el pronstico. Una posible so- lucin utilizada para superar la heterogeneidad del CP es la captura por microdiseccin lser y los pro- cedimientos de amplicacin adicional. La captura por microdiseccin lser es una tcnica que permite el aislamiento y la recuperacin de poblaciones de BIOLOGIA MOLECULAR EN EL CNCER DE PRSTATA regiones cromosmicas implicadas en la carcinog- nesis del CP. Las alteraciones ms comunes son las prdidas en 1p, 6q, 8p, 10q, 13q, 16q, y 18q y las ganancias en 1q, 2p, 7, 8q, 18q y Xq. Se ha sido utilizado FISH para descubrir los genes objetivos de algunas de estas alteraciones, que podran utilizar- se como marcadores moleculares de la enfermedad, como la AR (Xq12), EIF3S3 (8q23) y MYC (8q24) (20). Ms recientemente, un estudio diseado para comparar la precisin del array comparativo de hibri- dacin genmica (aCGH) con el CGH convencional y el anlisis LOH se ha demostrado que aCGH es un instrumento poderoso y preciso para la deteccin completa de las prdidas en las secuencias de ADN (21). La ventaja de aCGH es la capacidad para pro- bar un mayor nmero de muestras con el n de identi- car las caractersticas genticas comunes, as como una mayor precisin que el CGH convencional (21). En otro estudio, una evaluacin aCGH de lneas de clulas prostticas, xenoinjertos de cncer de prsta- ta y adenocarcinomas identicados primarios y me- tastsicos, identic 3 genes sobreexpresados en el cncer de manera signicativa en comparacin con el tejido prosttico normal, que puede considerarse marcadores putativos de progresin para CP (PDP, situado en 8q22.1, PABPC1 situado en 8q22.3, y KIAA0196 ubicado en 8q24.13) (22). Otro estudio aCGH muy interesante, com- puesto por 64 pacientes previamente sometidos a prostatectoma radical, que estaban en riesgo in- termedio o alto de recurrencia post-operatoria se identicaron 40 marcadores candidatos asociados con potencial metstasis. En concreto, la prdida en 8p23.2 estaba relacionada con la enfermedad en etapa avanzada y el aumento en 11q13.1 result ser un factor predictivo de recidiva postoperatoria, inde- pendientemente de su grado y estadio (23). El mismo grupo compar clones identicados por el aCGH con el nomograma de Kattan, en relacin con los resulta- dos bioqumicos. Este estudio preliminar revel una exactitud de 78% de los clones para detectar rmas genmicas de metstasis en los tumores primarios, en comparacin con una exactitud de 75% del nomo- grama de Kattan (24). Por lo tanto, se deben disear otras cohortes de validacin ms numerosas con el n de evaluar estas alteraciones genticas como mar- cadores de resultados para el CP. Las mutaciones somticas acumuladas du- rante la carcinognesis pueden ser usadas para los tratamientos farmacolgicos especcos, ya que mu- chas protenas expresadas en las clulas del cncer son diferentes a las de correlacin normal. Esto ya est siendo estudiado en la prstata y en otros tipos de cncer (25). El gen KLF6 (Krppel-como factor de transcripcin del dedo de zinc) es un gen supresor de tumores que con frecuencia se inactiva por la prdida de heterocigosidad (LOH), la mutacin somtica y/o disminucin de la expresin en el cncer. Codica una familia de protenas generadas a travs de spli- cing alternativo que participa en la regulacin del de- sarrollo y progresin del cncer. El empalme alterna- tivo del gen KLF6 tiene como resultado la produccin de al menos cuatro isoformas de corte y empalme alternativo. La variante de empalme KLF6 1 (KLF6- SV1) es una variante oncognica sobreexpresada en la prstata y otros cnceres, que ha demostrado ser biolgicamente activa y que promueve el creci- miento y difusin del tumor. En un estudio multi-insti- tucional de 3411 hombres, una lnea germinal KLF6 polimorsmo de un solo nucletido se asoci con un aumento del riesgo relativo de cncer de prstata en los hombres (26). La KLF6-SV1 tambin conduce a la disminucin de la expresin de p21 y a aumentar el crecimiento celular, as como una regulacin as- cendente en el tumor en comparacin con el tejido prosttico normal. Adems, otros estudios demostra- ron que KLF6 induce la apoptosis en las clulas de CP (27), y la inhibicin del KLF6-SV1 da como resultado la regresin del tumor in vivo (28). En conjunto, estos datos sugieren que la familia KLF6 puede ser utilizada para el tratamiento especco de cncer de prstata. Utilizando un enfoque bioinformtico (atpi- co perl de anlisis de cncer - COPA), Tomlins et al., identicaron los genes que estn sobreexpresados en un subgrupo de tumores de prstata (29). Utili- zando el COPA, se encontr que el 5 UTR del gen TMPRSS2 andrgeno-regulado se fusion con genes de la familia ETS de transcripcin, dando lugar a la sobreexpresin de los factores de transcripcin on- cognico. Tambin demostraron en una lnea celular de cncer de prstata que la expresin de ERG est regulada por los andrgenos. Por otra parte, un estu- dio reciente mostr una tendencia signicativa en la frecuencia de las fusiones TMPRSS2-ERG en diversos tejidos: 2,4% en la hiperplasia benigna de prstata, 20% en neoplasia de alto grado intraepitelial prost- tica y el 50% en CP localizado (30). Otros autores tambin han conrmado la presencia de las fusiones recurrentes de genes (31-34), apoyando su papel po- tencial como marcadores precoces del CP.
Epigentica Muchas alteraciones epigenticas contribu- yen a la formacin del cncer de prstata, como con otros cnceres humanos. Tal vez una de las caracte- rsticas ms interesantes de los cambios epigenticos 3 M. A. Arap. es la reversibilidad, ya que la secuencia de ADN se mantiene intacta. Cabe destacar que los cambios epi- genticos generalmente aparecen antes y ms consis- tentemente durante la carcinognesis. La hipermetila- cin del ADN es la anomala epigentica ms comn del cncer. Se piensa generalmente que la carcinog- nesis puede estar inuenciada por el silenciamiento de genes supresores de tumores, especialmente debi- do a la hipermetilacin de islas CpG en sus regiones promotoras (35). En consecuencia, la hipermetilacin del ADN puede ser utilizado como un objetivo para la clonacin de nuevos genes supresores de tumor. La hipermetilacin es responsable de la in- activacin de muchos genes en el cncer de prs- tata, como el APC (36), CDH1 (37), MDR1 (38) y RASSF1A (39). Sin embargo, slo unos pocos genes son candidatos potenciales, como marcadores tumo- rales para el diagnstico precoz y la evaluacin de riesgo de CP. Chung et cols., utilizando ampliacin de isla CpG metilada, junto con el anlisis represen- tativo de la diferencia, de 8 genes seleccionados (NKX2-5; SPOCK2 r; GALR2; LSTN1; NSE1; DPYS; FOXN4; SLC16A12) con ms metilacin en cncer de prstata en comparacin con la prstata normal adyacente. La combinacin de algunos de estos ge- nes fue capaz de diferenciar cncer de la prstata normal hasta con un 96% de precisin, ofreciendo nuevos posibles biomarcadores para la deteccin del CP (40). Ellinger et al., tambin estudiaron la hiper- metilacin en el PC utilizando una metilacin-espec- ca por reaccin en cadena de la polimerasa (41). Se evaluaron controles de nueve localizaciones ge- nticas en 80 pacientes con CP y 26 con hiperplasia benigna de la prstata (HPB). La hipermetilacin fue ms frecuente en el CP que en las muestras de HPB. La hipermetilacin en una nica localizacin genti- ca no se correlacion con ninguna variable clnico- patolgicas. Por otra parte, la hipermetilacin en dos genes se correlacion signicativamente con el esta- dio patolgico y/o escala de Gleason. La hipermeti- lacin de TIG1 y GSTP1 fue capaz de distinguir el CP de la HBP con 85% especicidad y 93% de sensibili- dad. Adems, la hipermetilacin del ADN en ms de cinco genes, se correlaciona signicativamente con la tasa de recurrencia de PSA tras la prostatectoma radical (41). Muchos otros genes candidatos tambin se han asociado con la susceptibilidad del CP (HPC1 (42), HPC2 (43), PCAP (44)) y progresin (Hepsin (45), GST-pi (46), p27 (47, 48), E -cadherina (49- 51), NKX3.1 (52)), utilizando diferentes tcnicas de biologa molecular. Creemos que en un futuro prxi- mo, se utilizar de forma habitual un perl molecular de los tumores de prstata para el pronstico y tal vez para ayudar en la orientacin del tratamiento. Fagos Los bacterifagos (o simplemente fagos) son virus de ADN de cadena simple que infectan a las bacterias gram negativas. Las partculas ms comu- nes del fago utilizadas para la investigacin es la cadena Fd, que consiste en una cpside cilndrica de protena que encierra un genoma ADN de cadena simple con 11 genes y alrededor de 6400 nucleti- dos. La partcula de virus est formado por protenas pVIII (cuerpo viral) y protenas PIII, PVI, PVII y pXIX (vi- ral nal) (53). En la mayora de los casos, la protena PIII protena se utiliza para exponer pptido. La tecnologa de fagos fue originalmente in- troducida para rastrear los puntos de unin de las inmunoglobulinas (54, 55). La tecnologa se basa en un enfoque combinatorio que permite la presentacin de colecciones de pptidos en la supercie de fagos lamentosos, que conducir a la seleccin de prote- nas, incluyendo anticuerpos, con una alta anidad y especicidad a casi cualquier objetivo, sin nocio- nes preexistentes sobre la naturaleza de los objetivos (56). Hasta 1010 variantes de pptidos exgenos pueden ser introducidos en el genoma del fago y expresados por las protenas del fago. Adems, las partculas del fago puede resistir muchas condiciones difciles, tales como el pH bajo y bajas temperaturas, sin perder infectividad. De hecho, la mayora de los protocolos usan pH bajo para disociar fago de un objetivo. La investigacin de los bacterifagos ofrece la posibilidad de distinguir la especicidad de unin de pptidos de diferentes objetivos, tales como pro- tenas, tejidos, rganos o incluso animales vivos. Normalmente la seleccin de anidad de los ppti- dos de una biblioteca de fagos (llamada ciclo de seleccin) se dene en 5 pasos fundamentales: la creacin de una biblioteca principal o ampliacin de una biblioteca existente, la exposicin del fago a un objetivo especco, la eliminacin de aglutinan- tes no especcos (lavado/perfusin), recuperacin del fago dirigido a un objetivo por elucin o infec- cin bacteriana directa y la amplicacin de los fa- gos recuperados. Esta panormica se repite, por lo general, varias veces hasta que se selecciona una poblacin de mejores aglutinantes. Al secuenciar el genoma codicando el pptido mostrado, es posible determinar y reproducir su secuencia como pptido recombinante o sinttico. De esta manera uno puede determinar nalmente los ligandos especcos y se- lectivos a los receptores de destino (57). 4 BIOLOGIA MOLECULAR EN EL CNCER DE PRSTATA Durante los ltimos aos se ha estudiado la seleccin de los receptores-ligandos en sistemas biol- gicos complejos, tales como clulas vivas y animales. Uno de los objetivos ms importantes de la prstata que se identic usando ciclos de seleccin de los cultivos de clulas es la protena-78(GRP78) glucoso- regulada (58). La GRP78 es una protena chaperona que se inicialmente result expresada en el retculo endoplsmico de varios tipos de clulas (59-61), y que ms tarde se demostr que estaba presente en la membrana celular, y que es responsable de la pre- sentacin antignica (62). La GRP78 de induccin est considerablemente aumentada en una variedad de condiciones de tensin celular, tales como glucosa y falta de oxgeno (63). Reeja una respuesta protec- tora contra la tensin (64, 65) que podra evitar la apoptosis (66).La sobre-expresin GRP78 en los cn- ceres humanos se puede explicar por el ambiente re- lativamente hipxico que se encuentra en los tumores slidos. Esta sobre-expresin GRP78 desencadena una respuesta inmune contra la protena que haba resultado estar relacionada con el cncer de prsta- ta andrgeno-independiente, y tambin a una menor supervivencia en general de los pacientes (58). Por lo tanto, aparte de la presencia de anti- cuerpos contra la GRP78 al utilizarse como marcador serolgico de cncer de prstata, la propia protena podra utilizarse como un objetivo molecular para el tratamiento de la enfermedad. Para evaluar esta hip- tesis, se evalu las interacciones de la protena-prote- na basada en GRP78 en pocillos de microtitulacin, las lneas de clulas del cncer de prstata, y xeno- injertos y modelos de tumor isognico en ratones, as como muestras humanas de cncer de prstata (67). Demostramos que los fagos seleccionados vinculados especcamente a recombinante GRP78 en pocillos de microtitulacin, que el origen del fago a xenoin- jertos de cncer de prstata humanos en vivo a travs de la administracin sistmica y tambin que recono- ce las metstasis del cncer de prstata humano en el hueso, todo especcamente a travs de GRP78 (67).
A continuacin, hemos tratado de evaluar si los pptidos sintticos podran tener un efecto anti- tumoral in vivo. Usando la sntesis de pptidos de Merrield, Los vnculos de pptidos-GRP78 fueron quimerizados con el D (klaklak)2 motivo proapopt- tico (68, 69) y dado a ratones desnudos que tenan xenoinjertos de DU145 derivados de cncer de prs- tata y a ratones Balb/c inmunocompetentes de que tenan tumores isognicos derivados de mama (70). Las dosis semanales por va intravenosa de pptidos especcos, o bien los controles fueron administrados y los volmenes tumorales fueron evaluados peridi- camente. Los volmenes tumorales post tratamiento fueron signicativamente menores en los ratones tra- tados con los pptidos especcos cuando se com- pararon con los controles tratados con los pptidos revueltos y con el vehculo solo. El efecto antitumoral de las quimeras, fue igual en ambos modelos, xenoin- jertos de tumores de prstata y de mama isognicos (67). Estos datos son importantes y relevantes ya que muestran que los efectos no dependen del tipo de tumor (de mama y prstata), origen (humano y del ratn) o estado inmune del husped. Juntos, estos estudios han demostrado que el descubrimiento de los sistemas receptor-ligando es la clave para el desarrollo de terapias dirigidas. Ade- ms, muestran que la GRP78 es un blanco molecular del tumor que puede ser utilizado para el tratamien- to del cncer de prstata metastsico y cncer de mama, ambas enfermedades incurables. En conso- nancia con esta investigacin, otros grupos tambin han mostrado inters en las protenas de respuesta a la tensin en la prstata (71) y otros cnceres urolgi- cos (71), as como en las enfermedades no malignas (72). DISCUSIN Con los aos, los mtodos ms renados de estudio de los cnceres humanos han contribuido a una notable mejora en la comprensin no slo la ini- ciacin del tumor, sino tambin de su progresin y heterogeneidad. Debido a los avances de biologa molecular, los cientcos entienden ahora que proba- blemente todos los cnceres se desarrollan a partir de mltiples causas factoriales. En circunstancias normales, hay un equilibrio en el reemplazo de clulas dentro de un rgano o teji- do. Las nuevas clulas se generan slo para reempla- zar las antiguas que se pierden debido a cualquier tipo de estrs, como lesiones o hipoxia. La divisin celular, est muy regulada por las protenas codica- das por los genes que controlan el crecimiento. En el caso de las aberraciones de ADN, las clulas pueden perder su equilibrio regulador, que es responsable de la divisin celular slo despus de recibir una seal adecuada. En el cncer, los proto-oncogenes y genes supresores de tumores estn generalmente mutados, lo que lleva a un crecimiento celular incontrolado. Sin embargo, las clulas de cncer, probablemente necesitan tener varias caractersticas con el n de eludir los mecanismos de defensa del husped y pro- mover cncer clnico: autosuciencia en las seales de crecimiento y /o insensibilidad a las seales anti- crecimiento (por ejemplo a travs de la protena del retinoblastoma), la evasin de la apoptosis (por lo general debido a la protena p53 mutada), auto-sos- 5 M. A. Arap. tenido angiognesis autosostenida(como en el factor de regulacin del crecimiento vascular endotelial), la invasin de tejidos y el potencial metastsico (por ejemplo a travs expresin anormal de E-cadherina). Como se ilustra en esta revisin, se han des- crito los marcadores de candidatos diferentes para la carcinognesis prosttica (Tabla I). Aunque el con- cepto original de un oncogn simple o gen supresor de tumores ha cambiado debido a la descripcin de nuevas mutaciones somticas y las variantes de empalme alternativo que se traducen en diferencias signicativas en funcin de las protenas, varias vas fueron aclaradas mediante las clsicas y las nuevas tcnicas de biologa molecular en los ltimos aos . Otras tcnicas moleculares emergentes como la bio- informtica y la protemica se estn aplicando a las muestras de suero, con el n de identicar los per- les de protenas (73). De hecho, hay diferentes enfo- ques de la protemica que se utilizan para un perl 6 de CP, incluyendo la electroforesis bidimensional y la protemica SEDI-TOF. El primer enfoque utiliza el tamao y la carga elctrica de la protena para sepa- rar grandes cantidades de protena, mientras que la SEDI-TOF permite la caracterizacin de muestras muy pequeas, como las obtenidas con microdiseccin lser. Ambos mtodos obtendrn perles de prote- nas que requeriran identicacin adicional. Todas las tcnicas y los marcadores mencio- nados anteriormente representan importantes avan- ces. Tal vez la cuestin ms difcil es la traduccin entre el trabajo de laboratorio y la comercializacin nal de tales marcadores. Hasta la fecha, slo unos pocos est disponibles, como una prueba de orina molecular para el CP3. Por lo tanto, teniendo en cuenta todos los mecanismos que en ltima instancia conducen a diferentes patrones de expresin gni- ca, es evidente que los urlogos, onclogos y otros mdicos tambin necesitarn poseer un conocimiento Marcador Potencial DD3 AR, MYC, EIF3S3 PDP, PABPC1, KIAA KLF6 TMPRSS2-ERG fusion NKX2-5, r SPOCK2, GALR2, LSTN1, NSE1, DPYS, FOXN4, SLC16A12 TIG1, GSTP1 HPC1 HPC2 PCAP Hepsin GST-pi P27 E-cadherin NKX3-1 GRP78 Posible papel en el cncer de prstata (CP) CP diagnstico CP diagnstico CP diagnstico CP tratamiento CP marcador precoz CP exploracin CP diagnstico CP susceptibilidad CP susceptibilidad CP susceptibilidad CPprogresin CP progresin CP progresin CP progresin CP progresin Marcador para enfermedad avanzada Referencias 14-19 20 22 26-28 29-34 40 41 42 43 44 45 46 47,48 49-51 52 58,67 TABLA I. MARCADORES MOLECULARES CANDIDATOS DESCRITOS EN ESTA REVISIN Y SU PAPEL POTENCIAL EN LA EVALUACIN DEL CNCER DE PRSTATA. BIOLOGIA MOLECULAR EN EL CNCER DE PRSTATA detallado de tcnicas moleculares para el desarrollo de ensayos clnicos. CONCLUSIONES El cncer de prstata es una de las patolo- gas ms importantes en oncologa. No existe una terapia ideal para cualquiera de sus etapas y, an hoy, muchos pacientes sufren por la propia enferme- dad o por los efectos secundarios del tratamiento. La biologa molecular abarca diferentes tipos de in- vestigacin, tales como la genmica, la protemica, la epigentica y de fagos, que puede mostrar en el futuro cercano los detalles especcos de la inicia- cin y progresin de la enfermedad. Los cientcos estn buscando mejores maneras de diagnosticar el CP, para predecir qu pacientes tendrn recurrencia despus del tratamiento inicial, y a establecer mejo- res marcadores del inicio, progresin y pronstico de la enfermedad. En este artculo se examinan breve- mente algunas de las tcnicas de biologa molecular implicadas en la investigacin del CP. 7 Jemal A, Siegel R, Ward E, Hao Y, Xu J, Thun MJ. Cancer Statistics, 2009. CA Cancer J Clin. 2009 27. Schroder FH, Hugosson J, Roobol MJ, Tammela TL, Ciatto S, Nelen V, et al. Screening and pros- tate-cancer mortality in a randomized European study. N Engl J Med. 2009 26;360(13):1320-8. Andriole GL, Crawford ED, Grubb RL, 3rd, Buys SS, Chia D, Church TR, et al. Mortality results from a randomized prostate-cancer screening trial. N Engl J Med. 2009 26;360(13):1310-9. De Marzo AM, Marchi VL, Epstein JI, Nelson WG. Proliferative inammatory atrophy of the prostate: implications for prostatic carcinogene- sis. Am J Pathol. 1999;155(6):1985-92. Putzi MJ, De Marzo AM. Morphologic transitio- ns between proliferative inammatory atrophy and high-grade prostatic intraepithelial neoplasia. Urology. 2000 1;56(5):828-32. Chaib H, Cockrell EK, Rubin MA, Macoska JA. 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