UNIVERSIDAD SALVADOREA ALBERTO MASFERRER

FACULTAD DE QUMICA Y FARMACIA-BIOLOGA

Catedrtico: Dr. Jorge Collazo Asignatura: Anlisis Instrumental 1
Carrera: Licenciatura en Qumica y Farmacia Ciclo: V - 2014

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Prctica de laboratorio No. 4: Separacin de aspirina y cido saliclico mediante TLC.



Introducin:

La cromatografa plana es un tipo de cromatografa lquida en la que la FE est extendida sobre
una superficie y la FM fluye a travs de ella. Es un mtodo relativamente simple, rpido y que
necesita un equipamiento sencillo. Si la FE est compuesta por un slido adsorbente como el
silicagel el procedimiento se clasifica como TLC (cromatografa en capa fina, por sus iniciales en
ingls). En esta prctica se utiliza la TLC para separar aspirina y cido saliclico con recursos
muy simples y suficiente resolucin entre las manchas de los dos compuestos.



Objetivos:

-preparar correctamente (activar) una placa comercial de silicagel antes de efectuar la aplicacin
de la muestra
-aplicar la muestra cuidadosamente, de forma que no se produzca deformacin de las manchas al
ascender la FM
-poder revelar e identificar las manchas correspondientes a los compestos separados
-calcular el valor de Rf para cada mancha en la placa revelada
-presentar de forma ordenada y correcta los resultados del trabajo experimental mediante la
elaboracin de un informe de laboratorio, que ser entregado en el plazo acordado



Equipos, reactivos y materiales:

-placas de silicagel G de 250 m de espesor, con indicador fluorescente, sobre lmina de Al
como soporte, de dimensiones 40 x 100 mm
-cmara cromatogrfica adecuada al tamao de las placas
-puntas plsticas desechables o capilares de vidrio que permitan aplicar volmenes pequeos de
la muestra (en el orden de 3 - 5 microlitros)
-fase mvil compuesta por un alcohol, cloroformo y un cido (su composicin exacta se
informar durante la prctica)
-cmara de revelado con lmpara ultravioleta
-estufa a 105 C para activar la placa antes de utilizarla



UNIVERSIDAD SALVADOREA ALBERTO MASFERRER
FACULTAD DE QUMICA Y FARMACIA-BIOLOGA
Catedrtico: Dr. Jorge Collazo Asignatura: Anlisis Instrumental 1
Carrera: Licenciatura en Qumica y Farmacia Ciclo: V - 2014

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Procedimiento:

-colocar la placa en la estufa y calentarla a 105 C durante 30 min, para activarla

-aadir el volumen adecuado de FM a la cmara cromatogrfica y taparla rpidamente. Dejarla en
reposo de forma que se sature con los vapores de la FM

-marcar con lpiz la lnea de aplicacin de la muestra a 15 mm del borde inferior de la placa y
hacer otra marca a 80 mm (a partir de la lnea de aplicacin de la muestra) para controlar la altura
hasta la que debe ascender la FM

-aplicar cuidadosamente la muestra, sin daar la superficie de silicagel, de forma que al tocar
levemente la placa con el medio para aplicar se depositen volmenes pequeos, que originen
manchas que no se extiendan innecesariamente. El proceso de aplicacin se repite varias veces,
secando la placa al aire cada vez que se aplique la muestra

-colocar la placa en la cmara cromatogrfica, observar que la FM ascienda de manera uniforme,
dejar en reposo la cmara con la placa mientras se desarrolla el cromatograma

-despus que la FM ascienda hasta de la longitud de la placa, extraerla de la cmara cromato-
grfica y RPIDAMENTE marcar con lpiz la posicin del frente del solvente. Eliminar bajo
cmara de extraccin los residuos de solventes que humedecen a la placa

-una vez seca la placa, colocarla bajo la lmpara UV en la cmara de revelado y con lpiz marcar
el contorno de las manchas que se observen



Trabajo con los resultados y clculos:

-medir las distancias correspondientes al frente del solvente y a las manchas que se observen en
la placa, tomando como referencia el punto de aplicacin de la muestra

-calcular los valores de Rf correspondientes a cada mancha

-identificar las manchas de aspirina y de cido saliclico






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Contenido del informe de laboratorio:

-breve introduccin sobre el tema de la prctica de laboratorio (mximo una cuartilla)

-clave de los viales con solucin que utiliz para aplicar muestras a la placa

-descripcin del sistema cromatogrfico empleado (tipo de placa, dimensiones, forma de aplicar
la muestra, forma en que se desarrolla el cromatograma, forma de revelado)

-esquema de la placa despus de reveladas las manchas

-conclusiones y bibliografa utilizada



Autopreparacin (trabajo antes de realizar la prctica)

-es necesario haber estudiado la teora correspondiente a los mtodos cromatogrficos, revisando
los captulos 26 y 28 del libro de texto de Anlisis Instrumental (5. edicin)


Bibliografa:

-libro de texto de la asignatura: Skoog Holler Nieman. Principios de Anlisis Instrumental, 5.
edicin, McGraw-Hill, 2001