RESUMEN

La cromatografa es un mtodo fsico de separacin de los diferentes componentes que conforman una mezcla; en
esta cromatografa la fase mvil es una fuerza de arrastre y la fase estacionaria es una fuerza de retencin, que se
mueven una con respecto de la otra manteniendo un contacto ntimo.
El mecanismo de separacin consiste, colocando la muestra en la fase mvil y los componentes de la muestra se
distribuyen entre la fase estacionaria y la fase mvil; los componentes de la mezcla a separa invierten un tiempo
diferente para recoger cada una de las fases.
Los criterios de separacin de cromatografa en columna son:
Separacin por exclusin molecular
Separacin por intercambio inico
Separacin por afinidad
Separacin basados en diferencias de solubilidad
Mtodos basados en la adsorcin diferencial a determinadas matrices
Tras la salida de cada fraccin de componente de la columna, se mide la seal o la concentracin y se representa
en funcin del volumen de la fase mvil, o desde el tiempo transcurrido desde la introduccin de la muestra y se
grafica, esta grafica se denomina cromatograma.

En esta prctica se trabajo con una mezcla de colorantes, en la que se tena el objetivo de separar los colorantes
que contena, mediante el empleo de la tcnica de cromatografa en columna y como resultado se concluyo que
esta mezcla contena tres colorantes: naranja, azul marino, violeta flor.

Palabras clave: adsorcin, retencin, arrastre, cromatografa, cromatograma, separacin.

INTRODUCCIN
CROMATOGRAFIA EN COLUMNA.
La cromatografa en columna utiliza una columna de
vidrio vertical que se llena con un soporte slido
adsorbente (fase estacionaria: los ms utilizados son
gel de slice (SiO2) y almina (Al2O3)). La muestra
que se quiere separar se deposita en la parte
superior de este soporte. El resto de la columna se
llena con el eluyente (disolvente que constituye la
fase mvil) que, por efecto de la gravedad, hace
mover la muestra a travs de la columna. Se
establece un equilibrio entre el soluto adsorbido en la
fase estacionaria y el disolvente eluyente que fluye
por la columna. Debido a que cada uno de los
componentes de una mezcla establecer
interacciones diferentes con la fase estacionaria y la
mvil, sern transportados a diferentes velocidades y
se conseguir su separacin.



















As, de manera similar a otros tipos de
cromatografa, las diferencias en las velocidades de
desplazamiento a travs del medio slido se





corresponden con diferencias en los tiempos de
elucin por la parte inferior de la columna para cada
uno de los componentes de la muestra original, que
se recogern en fracciones diferentes.
La polaridad del eluyente afecta las velocidades
relativas con las que los diferentes componentes de
la mezcla se mueven en la columna. Los disolventes
polares compiten ms eficientemente con las
molculas polares de una mezcla por los lugares
polares del adsorbente. Por lo tanto, un disolvente
polar desplazar las molculas, incluyendo las ms
polares, rpidamente a travs de la columna. Si el
disolvente es muy polar la elucin ser muy rpida y
generalmente habr poca separacin de los
componentes de la mezcla. Si por el contrario el
disolvente es muy apolar, no eluirn los compuestos
de la columna. Por lo tanto, la eleccin del eluyente
es crucial para el xito de la cromatografa en
columna.
A menudo se utiliza un gradiente creciente de
polaridad para la elucin. La CCF se utiliza para
determinar y elegir el sistema solvente adecuado
para cada separacin.











ANLISIS DE LOS ELUATOS DE LA COLUMNA.
Si los compuestos separados en una cromatografa
en columna son coloreados, el progreso de la
separacin se puede monitorizar visualmente. No
obstante, a menudo los compuestos que deben ser
aislados suelen ser incoloros. En este caso, se
recogen secuencialmente pequeas fracciones de
eluatos en tubos rotulados y la composicin de cada
fraccin se analiza por cromatografa en capa fina.
Una vez identificadas las diferentes fracciones que
contienen el mismo producto, se renen, se elimina
el disolvente y se analiza la identidad de los
componentes por mtodos espectroscpicos.











CARACTERISTICAS DE LA CROMATOGRAFIA
EN COLUMNA.
El adsorbente ms utilizado para cromatografa de
columna es gel de slice, aunque tambin se puede
emplear almina y florisil. La elucin de la
cromatografa puede realizarse por gravedad o
mediante presin (Flash chromatography), la
diferencia en ambos casos est en el tamao de las
partculas de gel de slice (0,063-0,200 nm, slice de
columna, 0,040-0,063 nm, slice flash). Debido a que
la disminucin del tamao de las partculas de
adsorbente conduce a una separacin ms eficaz, la
cromatografa a media presin (flash) proporciona
mejores resultados, adems de ser ms rpida.
Las variables que ms influyen en la eficacia de la
separacin en cromatografa de columna y utilizando
gel de slice como adsorbente son las siguientes;
a) Dimetro de la columna y cantidad de gel de
slice. La altura del adsorbente est relacionada con
la diferencia de Rf de los componentes de la mezcla.
El dimetro de la columna con la cantidad de
producto a separar.
b) Eleccin del disolvente. El disolvente tiene que
conducir a una buena separacin de los
componentes de la mezcla en capa fina, utilizndose
en muchos casos mezclas de disolventes y se realiza
una elucin en gradiente. Una de las mezclas ms
utilizadas es hexano/acetato de etilo.



V. BIBLIOGRAFIA:
GUIA DE LABORATORIO de anlisis por
instrumentacin. 2013.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archiver
o/M.Cromatogrficos_6700.pdf
http://ocw.uv.es/ocw-formacio-
permanent/2011-1-35_Manual.pdf
https://sites.google.com/site/grupodepolim
eros/cromatografia-en-columna