I.

INTRODUCCIN
Para efectuar el estudio de los microorganismos, se han diseado diversos mtodos que
permiten cultivarlos bajo condicione artificiales, en los que es posible cultivarlos bajo
condiciones experimentales y manejar un solo tipo de microorganismo. Una de las
tcnicas ms usadas en el laboratorio de microbiologa consiste en transferir
una muestra microbi olgica de un ambi ente determinado a un medi o de
culti vo, l o que permite obtener culti vos microbianos. A l efectuar este procedimiento,
es necesario considerar que en el rea de trabajo, existen muchos otros
microorganismos; debido a esto, es necesario tomar precauciones para
impedir que stos penetren y contaminen los cultivos en estudio. Por otra parte,
para considerar no slo el aspecto nutricional, sino tambin las condi ci ones
ambi ent al es de su hbi t at nat ur al , por l o que en el medi o de cul t i vo
se debe aj ust ar el pH y concentracin de sales y durante la incubacin condiciones
tales como la temperatura, aireacin la luminosidad .La aplicacin de estos
procedimientos ha permitido propagar a los microorganismos en cultivos mixtos, as
comosu aislamiento y la obtencin de cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio,
caracterizacin, aplicacin y control de los mismos. La forma de sembrarlos y
culti varlos depende del tipo de mi croorganismo y propsito especfico del
estudio.
.

II.OBJETIVOS

Aplicar la tcnica adecuada adecuadamente para preparar el rea de trabajo y
evitar contaminaciones

Organizar el material para su fcil manejo e identificacin

Manipular adecuadamente los cultivos

Seleccionar y aplicar las tcnicas de siembra adecuadas para alcanzar propsitos
especficos

Preparar adecuadamente los los nutrientes con clculos exactos para el
crecimiento de microorganismos que se presentaran en las placas Petri








III.FUNDAMENTO TEORICOS


Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo de
ste en medios de cultivo y condiciones de laboratorio controladas. La poblacin
de microorganismos desarrollada en un medio se denomina cultivo. Cuando ste
contiene una sola especie de microorganismo, se denomina cultivo puro o axnico,
cuando contiene ms de una especie de microorganismos se denomina cultivo
mixto. Un cultivo tipo contiene una especie conocida de microorganismos y es
conservada en el laboratorio para realizar diversos ensayos y estudios.

Un cultivo axnico consiste en una sola especie microbiana, proveniente de una
sola clula. Los cultivos axnicos son muy raros en la naturaleza. En los medios
naturales -por ejemplo, en el suelo, agua, o en el cuerpo humano- existen cultivos
mixtos. En un cultivo mixto, viven muchas y diferentes especies de forma conjunta.
Un cultivo axnico se obtiene artificialmente en el laboratorio. A la hora de obtener
un cultivo axnico se han de tomar precauciones especiales, ya que los
microorganismos estn por todas partes, en la naturaleza, en el laboratorio y en
los instrumentos y recipientes usados en los experimentos. Estos microorganismos
no deseados o contaminantes deben ser eliminados de un cultivo para que ste
pueda ser axnico . El segundo paso para obtener un cultivo axnico es inocular o
introducir, una sola clula de un microorganismo en un medio slido o liquido,
esterilizado previamente. De esta manera, aislamos un solo microorganismo del
resto y se podr multiplicar en condiciones favorables. Un clon est constituido por
una poblacin de clulas descendientes de un solo microorganismo. Una colonia
es un clon lo suficientemente grande como para ser visible sobre la superficie de
un medio slido.

Un cultivo microbiano que ha estado creciendo por cierto tiempo en el mismo tubo
o matraz, debe ser transferido a un medio de cultivo nuevo, de otra manera el
crecimiento y sobrevivencia no pueden continuar. En esta transferencia se deben
considerar dos aspectos bsicos referentes a: no introducir microorganismos
indeseables (contaminantes) y concentracin o carga microbiana de la muestra
(inculo) a sembrar.

Para impedir la contaminacin de los cultivos, es necesario tener plena conciencia
de la ubicuidad de los microorganismos, lo que determina que el are y todas las
superficies estn densamente pobladas por microorganismos, de este modo en la
transferencia de una muestra microbiolgica a otro recipiente, se deben tener una
serie de cuidados que eliminen los riesgos de contaminacin. Estos incluyen el
rea de trabajo, el lavado de las manos, la esterilizacin de todos los utensilios y
medios de cultivo a emplear y realizar la transferencia del microorganismo en una
zona estril, la que se obtiene trabajando cerca de la flama del mechero. Al
conjunto de procedimientos realizados para prevenir o evitar la contaminacin se
le llama tcnica asptica; el seguimiento cuidadoso y detallado de la misma evita
accidentes tales como:

La contaminacin y prdida del cultivo en estudio
La salida y dispersin de microorganismos del cultivo, lo que ocasionara la
contaminacin de utensilios, productos y del personal. Este ltimo aspecto es
particularmente importante cuando se trabaja con cultivos de microorganismos
patgenos.

Con relacin a la concentracin del inculo, un error frecuente del principiante
consiste en tomar muestras grandes, lo que es innecesario. Una colonia de
bacterias del tamao de la cabeza de un alfiler contiene varios millones de
microorganismos, es obvio que con una cantidad pequesima (casi invisible) que
se adhiera al asa, ser ms que suficiente para efectuar una transferencia exitosa.

Dispositivos empleados en la transferencia de muestras microbianas: hisopo,
pipeta (para uso microbiolgico son terminales y la parte superior o boquilla debe
estar protegida con filtro de algodn), pipeta pasteur, cable de Kolle o portasa con
alambre de platino dispuesto en forma de: aguja, asa, esptula y/o gancho.

En la transferencia de microorganismos se emplean agujas, asas de inoculacin,
hisopos, pipetas o pipetas pasteur que debern esterilizarse previamente. La
utilizacin de estos dispositivos, as como de los diferentes medios de cultivo
tienen aplicaciones especficas. Por ejemplo: los medios lquidos se preparan en
tubos o matraces que se cubren con tapones de algodn o tapones especiales. Un
cultivo lquido puede ser transferido mediante un asa microbiolgica, un hisopo,
pipeta o pipeta pasteur; el inculo se deposita dentro del caldo o medio lquido. En
este tipo de cultivos los microorganismos presentan un desarrollo particular que se
manifiesta en la superficie o a travs de todo el lquido. Una de las ventajas que
presenta este tipo de cultivo se refiere a la posibilidad de agitarlos acelerando la
velocidad de microorganismos anaerobios, por otra parte, en este tipo de cultivos,
las poblaciones se encuentran suspendidas y e fcil homogenizarlas, lo que
permite estandarizar la concentracin del inculo. La desventaja que presentan, e
que en ellos e difcil detectar contaminacin a simple vista.

Los medios semislidos e preparan en tubos, se inoculan con aguja de siembra
(asa recta) o pipeta pasteur; en este ltimo caso es necesario calentar el medio y
cuando se encuentra en estado lquido y a una temperatura de aproximadamente
42C se agrega el inculo, se homogeniza y se deja solidificar. Estos medios se
emplean para estudiar la movilidad de los microorganismos y para favorecer la
separacin de microorganismos con diferentes requerimientos de oxgeno.

Los medios slidos e preparan en tubos o matraces dependiendo de la cantidad o
de las necesidades, despus de esterilizarlos, estos se inclinan o vierten en cajas
de petri. La siembra se realiza con el asa, inoculando la superficie del agar con
mucha suavidad; en estos medios, los microorganismos al multiplicarse forman
agregados que se hacen visibles a simple vista; a estos agregados se les
denominan colonias, las que presentan caractersticas que varan con el tipo de
microorganismo cultivado y el medio de cultivo empleado.

En cualquier medio de cultivo es de primordial importancia ajustar el pH, ya que
an cuando la mayora de los microorganismos crecen mejor en pH neutro,
algunos requieren de pH alcalino o cido, por lo que al proporcionar un pH
adecuado se favorecer el crecimiento del microorganismo de inters y la
obtencin del cultivo. Con este mismo propsito durante la incubacin se deben
proporcionar las condiciones adecuadas para el microorganismo en estudio. El
crecimiento ptimo de los microorganismos se presenta a temperaturas que la
mayora de las veces estn relacionadas con la de su hbitat natural.

Algunos microorganismos crecen por debajo de 15C, otros requieren
temperaturas ms elevadas (30 a 45C) y algunos hasta 80C. Para alcanzar y
mantener estas temperaturas se puede usar una incubadora microbiolgica o un
bao de agua a temperatura constante, en tanto que para lo microorganismos que
presentan su crecimiento ptimo a temperaturas entre 20 y 25C se pueden
incubar en la gaveta o cajn del laboratorio, a temperatura ambiente.

En general las incubadoras microbiolgicas satisfacen las necesidades en cuanto
a los rangos de temperatura requeridas por los microorganismos. La desventaja
que tienen es que estos aparatos funcionan con are seco, lo que determina la
deshidratacin de los medios de cultivo. Por lo tanto, el crecimiento de cualquier
cultivo experimental que se realice en incubadora no debe prolongare por ms de
nueve das. Con relacin a las necesidades gaseosas, no todos los
microorganismo crecen en presencia de oxgeno atmosfrico; los que slo crecen
en presencia de are se llaman aerobios obligados; los que slo crecen en
ausencia de oxgeno se denominan anaerobios obligados o estrictos, un tercer
grupo se adapta a las dos condiciones y se le conoce como facultativos. Existe
una cuarta categora que comprende bacterias que requieren oxgeno, pero slo lo
utilizan cuando ste existe en concentraciones reducidas; a estos se les llama
microaeroflicos. El desarrollo de estos diferentes grupos e favorece mediante la
agitacin de los cultivos o mediante la exclusin de oxgeno para lo que se
emplean sustancias reductoras o equipos especiales.

Las bacterias son organismos procariticos, se encuentran ampliamente
distribuidas en la naturaleza, habitan en el agua, el suelo, en la superficie o en el
interior de plantas y animales incluyendo al hombre. Pueden vivir en forma libre o
en simbiosis con otros organismos, ya sea como parsitos, comensales o
mutualistas. Fisiolgicamente este grupo presenta caractersticas muy variables,
hay bacterias mviles e inmviles fotosintticas y quimiotrficas, auttrofas y
hetertrofas; se desarrollan en un rango muy amplio de temperatura, pH y
condiciones gaseosas.

En el estudio de cultivos bacterianos algunos de los criterios que se emplean para
caracterizarlas incluyen: tamao, morfologa celular, forma de agrupacin,
reaccin a la tincin de Gram, formacin de esporas, movilidad, presencia de
inclusiones de reserva y caractersticas culturales en medios lquidos y slidos en
los que presentan patrones de desarrollo en cuanto a la forma, tamao, elevacin
y color de las colonias.

3.2.- Tcnicas de siembra:

3.2.1.-El mtodo de siembra por estra en placa

Es el mtodo ms fcil y el ms usado para obtener cultivos axnicos. Para ello,
con un asa de siembra se toma una muestra de la poblacin mixta y a
continuacin se hacen estras sobre la superficie de un medio slido preparado en
una placa Petri (a las placas Petri tambin se les denomina simplemente placas).
Conforme se van haciendo estras en zigzag con el asa, cada vez se van
depositando en la superficie del medio menos microorganismos. A continuacin,
se flamea el asa, se toca en la regin donde se han realizado las ltimas estras y
se contina la siembra con la misma tcnica, en la superficie de medio sin sembrar
an. Repitiendo este proceso varias veces se logra separar clulas individuales. A
continuacin, las placas se incuban en un lugar adecuado, permitiendo que las
clulas aisladas experimenten un nmero suficiente de divisiones para formar
colonias visibles. Aunque cada colonia posiblemente representa un clon derivado
de una sola clula, no podemos asegurarlo. Quizs, dos clulas quedaron
depositadas tan juntas que han originado una nica colonia mixta. Por tanto, para
asegurarnos de que hemos obtenido un cultivo axnico, conviene repetir el
procedimiento a partir de una colonia bien aislada en la primera placa. Las
colonias que se desarrollen la segunda vez, sern, casi con toda seguridad,
cultivos axnicos.



3.2.2.-Los mtodos de vertido en placa y extensin en placa

En estos mtodos, las suspensiones de clulas microbianas se diluyen antes de
su siembra en placa. Se siguen estas tcnicas cuando la muestra contiene tantos
microorganismos, que la dilucin no se puede realizar en una sola etapa. Por
ejemplo, una suspensin con mil millones de clulas por mililitro debe ser diluida
10
7
veces para obtener una suspensin con un centenar de clulas por mililitro,
Por tanto, se realizan diluciones seriadas (en varias etapas), normalmente de diez
en diez, pero a veces de cien en cien. Para realizar diluciones de diez en diez, se
aade 1 ml de la suspensin bacteriana a 9 ml (le medio estril o solucin salina,
igualmente estril. Se agita vigorosamente para diluir las clulas y el proceso se
repite cuantas veces sea necesario. A continuacin, se puede proceder de dos
maneras diferentes.

En el mtodo de vertido en placa, las muestras diluidas se mezclan con agar
fundido y se vierten en placa. Algunas colonias quedarn embebidas en el agar y
otras crecern en la superficie. Las colonias superficiales se extendern y sern
ms grandes. En el segundo mtodo (extensin en placa), las muestras diluidas se
siembran directamente en la superficie de la placa de agar, extendindolas con
avuda de un asa de Diralsky de cristal estril. La suspensin se absorbe en el
agar, dejando las clulas microbianas sobre la superficie. En ambas tcnicas las
placas se incuban hasta la aparicin de las colonias. Como en el mtodo de
siembra por estra, no existe la seguridad de que las colonias que aparecen en las
placas sembradas por extensin o en el agar solidificado sembrado por el mtodo
del vertido en placas sean cultivos axnicos hasta que se repita el proceso.

Las dos tcnicas de siembra por dilucin presentan la ventaja de que permiten
obtener un mayor nmero de colonias aisladas que el mtodo de siembra por
estra, por tanto se eligen cuando se ha de seleccionar una cepa a partir de una
mezcla con varios tipos de microorganismos.

3.2.3.-Para obtener un cultivo axnico mediante este mtodo:

(a) Hacer diluciones seriadas de la suspensin bacteriana hasta obtener una muestra con
slo unos pocos cientos de bacterias
(b) verter la muestra en un tubo con agar a sobrefusin, mezclar y verter el contenido en
una placa Petri.
(c) Despus de la incubacin, se desarrollan colonias en el agar (ms pequeas) y en su
superficie (ms grandes).

Mtodo de aislamiento por siembra por estra en placa: Para obtener un cultivo axnico:

(a) esterilizar un asa de siembra por flameado en la llama de un mechero
(b) introducirla en la suspensin bacteriana para recoger una muestra
(c) sembrar haciendo estras sobre la superficie de un medio slido en una placa Petri, y
(d) volver a esterilizar el asa, tocar en la zona de la placa ya sembrada y hacer un
segundo grupo de estras en una regin nueva de la placa. Repetir el proceso una tercera
y una cuarta vez, hasta conseguir que los grupos de clulas se diluyan y se separen
clulas aisladas.
(e) Despus de la incubacin, se desarrollan colonias aisladas. Para estar seguro de que
el cultivo es puro, repetir el proceso entero; para ello tomar una colonia aislada y sembrar
por estras una segunda placa.


3.2.4.-El crecimiento de los cultivos axnicos

Una vez que se obtiene un cultivo puro, normalmente se ha de propagar (se le
hace crecer de nuevo). Para cultivar microorganismos en el laboratorio, se ha de
preparar un medio de cultivo, lquido o slido, con todos los nutrientes necesarios
para su crecimiento. Los medios slidos se hacen generalmente, aadiendo agar a
los lquidos.

3.2.5.-Tipos de medios de cultivo

El tipo de medio que utiliza un microbilogo depende del microorganismo que est
cultivando y el porqu de dicho cultivo. Los microorganismos presentan una
enorme variedad de requerimientos nutricionales. Se utiliza un medio mnimo para
determinar los requerimientos nutricionales de un organismo y un medio rico si se
desea obtener masa celular de una forma rpida. Los medios se pueden formular
para el desarrollo de una especie o para distinguir entre especies o cepas. Por
tanto, los medios se clasifican en definidos, complejos o indefinidos, selectivos,
diferenciales, selectivos-diferenciales y de enriquecimiento, dependiendo de su
composicin y uso.

3.2.6.-Medios definidos

Un medio definido es aquel del cual conocemos su composicin qumica exacta,
porque ha sido preparado a partir de compuestos qumicos puros. Echerichia coli
es capaz de crecer en un medio qumicamente definido, de composicin bastante
sencilla. Este microorganismo requiere una fuente de carbono orgnica (por
ejemplo, glucosa), pero puede obtener el resto de los nutrientes esenciales a partir
de sales minerales. En cambio, otros organismos, denominados exigentes,
requieren medios qumicamente muy complejos. Por ejemplo, la bacteria
Leuconostoc citrovorum es extraordinariamente exigente ya que requiere un medio
con muchos ingredientes. Los medios definidos se usan generalmente para
realizar estudios genticos, pero sus inconvenientes a menudo sobrepasan sus
ventajas. As, se requiere un tiempo considerable para preparar un medio definido
y las bacterias crecen ms despacio en ellos. Adems, no conocemos los
requerimientos nutricionales de todas las bacterias y, por tanto, no siempre
pueden utilizarse.

3.2.7.-Medios complejos

Se desconoce la composicin qumica exacta de un medio complejo. Estos medios
se preparan a partir de extractos de productos naturales tales como carne, sangre,
casena (la protena de la leche), levaduras o soja. Un medio lquido complejo se
denomina caldo. La casena u otras protenas que se aaden a los medios son
usualmente hidrolizadas con enzimas o en medio cido, para hacerlas ms
solubles y, por tanto, ms fciles de utilizar nutricionalmente. Una hidrlisis parcial
rompe las protenas en pptidos. Una hidrlisis total las degrada hasta
aminocidos. A las protenas parcialmente hidrolizadas se les denomina peptonas.
Entre las peptonas comerciales se encuentra la proteosa-peptona, la triptona y la
triptosa. A la casena totalmente hidrolizada se le denomina hidrolizado de
casena.

Los diversos componentes de un medio complejo se venden como polvos
deshidratados. Tambin existen ya cientos de mezclas complejas que se
comercializan como medios complejos especficos. Uno de estos medios es el
caldo nutritivo, probablemente el medio complejo que ms se utiliza. Cuando este
medio se solidifica con agar, se denomina agar nutritivo. Generalmente se prefiere
la utilizacin de los medios complejos, ya que son fciles de preparar y permiten
un crecimiento rpido de los microorganismos.

3.2-8Medios selectivos

Un medio selectivo favorece el crecimiento de ciertos microorganismos, mientras
suprime el crecimiento de otros. Los medios selectivos se utilizan para aislar
especies particulares a partir de una mezcla compleja. Por ejemplo, se utiliza un
medio selectivo, para aislar Salmonella typhi, agente causal de la fiebre tifoidea, a
partir de heces donde existen cientos de microorganismos diferentes. Algunos
medios son selectivos porque contienen un producto qumico, como la azida
sdca, el telurito potsico o el cristal violeta, que inhiben el desarrollo de algunos
microorganismos pero no de otros. El agar SPS (denominado de esta forma
porque contiene sulfadiacina y sulfato de polimixina) se utiliza para identificar
Clostridium botulinum, agente causal de una grave intoxicacin alimentaria. El
medio SPS permite el crecimiento de esta bacteria, pero inhibe el de otras
especies de Clostridium. otros medios de cultivo selectivos utilizan un valor
extremo de pH o una fuente de carbono poco comn.

3.2.9.-Medios diferenciales

Se utiliza un medio diferencial para identificar las colonias de un determinado
microorganismo. Por ejemplo, para identificar Streptococcus pyogenes, la bacteria
que causa la escarlatina, se utiliza el medio de agar sangre es un agar que
contiene hemates. Las colonias de esta bacteria muestran a su alrededor una
zona transparente debido a que producen hemlisis (muerte y lisis de los
hemates). Escherichia coli y las bacterias relacionadas con ella se identifican en
medios con un indicador de pH porque originan productos metablicos cidos, que
cambian el color del indicador y por tanto de sus colonias.

3.2.10.-Medios selectivos-diferenciales
Algunos medios son selectivos y diferenciales al mismo tiempo. El agar
MacConkey es un ejemplo de medio selectivo-diferencial, utilizado para detectar
cepas de Salmonella y Shigella, bacterias entricas (del intestino) que causan
disenteras. Cualquier muestra de heces enviada al laboratorio esta plagada de
bacterias pertenecientes a muchas especies. El agente selectivo del MacConkey
acta como una especie de tamiz grosero que disminuye el campo de
identificacin. El cristal violeta y las sales del medio inhiben el crecimiento de la
mayora de las bacterias Gram positivas (Salmonella y Shigella son Gram
negativas). A partir de aqu, el componente diferencial del medio, en este caso la
lactosa, comienza a ser importante. Salmonella y Shigella no fermentan la lactosa,
pero la mayor parte de las enterobacteras s lo hacen. Por tanto, las colonias de
estas dos bacterias sern rojas, mientras que las restantes no lo sern.

3.2.11.-Medios de enriquecimiento
Un medio de enriquecimiento se utiliza para aislar un tipo particular de
microorganismo a partir de una poblacin mixta de gran tamao. Por ejemplo, las
bacterias formadoras de endosporas pueden aislarse hirviendo una muestra de
suelo y cultivando los supervivientes. Solamente las endosporas resistirn el
tratamiento y podrn crecer. Las bacterias lijadoras de nitrgeno pueden
seleccionarse cultivando el inculo de suelo en un medio libre de nitrgeno, donde
slo ellas podrn crecer porque obtienen el nitrgeno de la atmsfera. Los
eclogos microbianos usan frecuentemente medios de enriquecimiento. Por
ejemplo, para encontrar un microorganismo que degrade un determinado
compuesto qumico txico, se puede inocular la muestra de suelo en un medio en
el cual la nica fuente de carbono sea dicho compuesto. El microorganismo que
prospere en l podr ser utilizado en biorremediacin.

3.2.12.-Condiciones ambientales idneas para el cultivo en el laboratorio

Un medio se formula para suministrar todos los nutrientes que un microorganismo
necesita para crecer, pero esto no es suficiente. En el laboratorio, tambin es
preciso aportar las condiciones ambientales adecuadas. Tanto la temperatura
como el pH deben estar dentro del intervalo apropiado; con respecto al oxigeno,
segn el caso, ser aportado o eliminado.


3.2.13.-Temperatura

Cada especie bacteriana se caracteriza por un intervalo de temperatura en el cual
presenta su crecimiento ptimo. Pero, en general, los microorganismos crecen
ms rpidamente cuando se aumenta la temperatura, sin llegar hasta un punto en
el cual se daan las protenas. As pues, para favorecer un crecimiento rpido, las
bacterias se suelen cultivar a la temperatura ms alta a la cual crecen bien, y que
suele ser la de su medio natural. Escherichia coli la bacteria que ms
frecuentemente se utiliza en investigacin, se encuentra en el intestino humano y
de otros mamferos. Este microorganismo crece ptimamente a 37C, la
temperatura del cuerpo humano.

Los cultivos se mantienen a temperatura constante en incubadores o en baos de
agua, ambos controlados termostticamente. Los incubadores, o estufas, son
cmaras con aire adecuados para el crecimiento tanto de cultivos slidos como
lquidos, preparados en cualquier recipiente, incluyendo placas Petri, tubos de
ensayo, o matraces. Los medios lquidos, distribuidos en tubos o matraces,
tambin pueden ser incubados en baos de agua caliente. Estos baos resultan
cmodos para incubar los cultivos que tienen que manipularse con frecuencia, en
la misma mesa de trabajo.

IV.MATERIALES Y EQUIPOS


























V.-PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL





















VI.-RESULTADOS
En los resultados obtenidos en las unidades de formacin de colonia podemos
decir lo siguiente:

1era placa Petri : negativo no hubo concentracio
2do placa Petri : positivo se encontr 5 menor unidades mas probable
3era placa Petri : negativo no hubo concentracin
4ta placa Petri : negativo no hubo concentracin

En los resultados podemos mencionar que en la primera placas Petri debe haber
muchas unidades de formacin de colonia , en el segundo disminuye un poco , en
el tercero sigue disminuyendo , hasta que en el cuarto no se halle nada de
unidades de formacin de colonia. Pero en esta ocasin habido resultados pocos
son optimos .






VII.-DISCUSIONES

SEGN Atkinson Lucy en unidades de formacin de colonias de un refresco debe
contener un promedio de 10 menor mas probable generalmente ya que presentan
microorganismos patgenos por eso es necesario pasteorizar para eliminar y para luego
haerle un anlisis microbiolgico para que asi todas las personas que lo van a ingerir este
muertos los microorganismo patgenos que hacen dao al organismo de los seres
humanos.




VIII.-BIBLIOGRAFIA

Atkinson Lucy Tcnicas de microbiologia , Nueva Editorial Interamericana S.A.
Mxico 1993

Dugas Beverly Tratado de microbiologia Prctica Nueva Editorial Interamericana
Mxico 1999

http://www.ucv.ve/Farmacia/Micro_web/Catedras02/metodesteri l.pdf :
Mtodo estril y Medi os decultivo por la Prof. Sofa Gutirrez de Gamboa
(Octubre 2001)

Black, J. 1999. Microbiology Principles and Exploration. Fourth edition. John
Wiley-Son, Inc. Clavell,L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiol oga.
Manual de Mtodos General es (2da edicin).Facultad de Farmacia.
Universidad Central de Venezuela.

Murray, P. 1993, Manual of Clinical Microbi ology. 7th edition.
American Society for Microbiology.Washington, DC. Standards
of Sterili zati on. 2001. Monitoring the Steril i zation Process.
OnlineEducation.

IX.-CONCLUSIONES

En conclusin de se podido trabajar con 4 placas Petri dentro de las cuales se
podido observar minima cantidad de unidades de colonias en la segunda placa
Petri 10
-2
ya que presentan de esta manera 5 menor mas probable por lo dicho
que habido pocas unidades formacin de colonia .