INTRODUCCION

En esta prctica observaremos que la fagocitosis es el proceso por

el cual algunas clulas especializadas eliminan entes patgenos
que entran a nuestro organismo. Es un modo de defensa del
sistema inmunolgico que el nuestro organismo posee. Tiene cinco
etapas: Quimiotaxis, Adherencia, Ingestin, Digestin y Excrecin,
cada una cumpliendo su funcionamiento especfico elimina con los
entes patgenos produciendo as el equilibrio del cuerpo.


OBJETIVOS
Reconocer los sistemas de inmunidad especficos (adaptativos) frente a
la invasin de agentes extraos.


MARCO TEORICO

FAGOCITOSIS

La lnea celular de defensa est ntimamente asociada con la lnea humoral. La
fagocitosis o el englobamiento de partculas extraas por ciertas clulas es un
fenmeno no especfico, pero se incrementa cuando intervienen anticuerpos
especficos o complementos. Entre las clulas fagocticas se encuentran los
polimorfonucleares y los macrfagos (monocitos libres). A estas sustancias
que demuestran habilidad para hacer a los antgenos ms susceptibles a la
fagocitosis se les llama OPSONINAS.

PASOS DE LA FAGOCITOSIS

1. pasaje de clulas al torrente sanguneo

Se inicia con la adherencia de clulas al endotelio vascular. Las clulas irn al
lugar de la amenaza. Estas son clulas especializadas, que pueden
ser macrfagos o linfocitos. Los mismos sern estimulados para que produzcan
citoquinas (IL-1, TNF, IFN). Es todo lo que se encuentra aqu activado por
las citosinas), a travs de uniones moleculares de baja afinidad entre
receptores en el leucocito y selectinas sobre la superficie endotelial (selectina
E y selectina P, por ejemplo).

2. Adherencia
Otros receptores sobre la membrana de los leucocitos y otros fagocitos actan
como mecanismos de adherencia sobre los microorganismos, sea a productos
microbianos especficos o sobre opsoninas del sistema inmune
del hospedador.


3. Ingestin

La unin a receptores de adherencia promueve seales
de comunicacin intracelular que resultan en la evaginacin de la membrana
del fagocito rodeando al receptor y su ligando patogenico. Al rodear por
completo al complejo receptor:molcula, la membrana se une en sus extremos
y libera al interior de la clula un fagosoma. Esto puede ocurrir en ms de un
punto de la membrana celular.


4. Digestin
Una vez que el fagosoma est en el citoplasma comienza la desintegracin del
mismo, proceso que se realiza por mecanismos dependientes o independientes
de oxgeno. El primero se da tras activarse rutas metablicas que consumen
oxgeno, lo cual produce la liberacin de radicales libres del oxgeno, que son
txicos para los microorganismos. En el segundo caso es donde intervienen los
lisosomas, los cuales se unen al fagosoma conformando un fagolisosoma, y
liberando enzimas hidrolticas que destruirn al antgeno.

5. Excrecin

En el proceso de digestin queda una vescula que contiene desechos (o el
mismo antgeno, ya que no siempre puede ser desintegrado), por lo que debe
estar fuera de la clula para no traer futuros inconvenientes. La forma de
deshacerse de estos residuos es mediante la exocitosis.
Un ejemplo de esto se da cuando esputamos o tosemos, dado que lo que
estamos haciendo en verdad es deshacernos de clulas que contienen un
antgeno que no pueden degradar. Dichas clulas son
los macrfagos alveolares, que al entrar una partcula exgena y no poder
degradarla se vuelven una amenaza para el organismo, por lo que es
conveniente deshacerse de ella en algunos casos no muy estrictos. Es la
traduccin de partculas como: bacterias, virus, desechos, etc.


FAGOCITOSIS IN VITRO

Las pruebas OPSONOCITOFAGICAS son difciles de realizar, en comparacin
con otras pruebas serolgicas, pero en ciertos sistemas es la nica a ser
utilizada. El antgeno y la sangre total (conteniendo los anticuerpos,
complemento y leucocitos) se incuban juntos y luego, muestras de estas
mezclan se colorean. El ndice fagoctico es el nmero promedio de partculas
ingeridas por cada 100 Neutrfilos de la sangre.
MATERIAL

Cultivo en caldo de Staphylococcus y/o Klebsiella
Tubos de 13x100 con 0.5 ml de EDTA sdica al 1%
Una jeringa de 5 ml con aguja N 20
Pipetas Pasteur con perilla de jebe
Lminas portaobjetos
Colorante Wright
Agua tamponada
Bao Mara a 37C
Centrfuga
Gradilla
Microscopio con objetivo de inmersin
Aceite de cedro
PROCEDIMIENTO

Con la jeringa hipodrmica
recolectar 5 ml de sangre venosa
Colocar en el tubo la sangre
venosa
Mezclar suavemente
Colocar en el tubo 0.5 de
Estafilococus aerus y mezclar
suavemente
Llevar los tubos a Bao Mara por
30 minutos, mezclando
suavemente cada 10 minutos.
Centrifugar a 3000 r.p.m. por 5
minutos, cada tubo.
Recolectar con una pipeta Pasteur
los elementos formes de la capa de
glbulos blancos de cada tubo.
Realizar los frotices y colorear con
Wright:



Exparcir el frotis Cubrir el frotis con colorante Wright .
Exparcir el colorante y dejar secar por
3 minutos
Aadir agua tamponada y soplar
suavemente realizando una buena
mezcla. Despues de 15 min lavar con
agua de cao y observar.
RESULTADO

Se observar la presencia de grmenes intracelulares que han sido
fagocitados.

CONCLUSIONES

Se reconoci los sistemas de inmunidad especficos (adaptativos) frente
a la invasin de agentes extraos.