TOXICOLOGIA

Apostila adaptada.

CONCEITOS BSICOS


1) TOXICOLOGIA

a cincia que tem como objeto de estudo o efeito adverso de
substncias qumicas sobre os organismos vivos, com a finalidade principal
de prevenir o aparecimento deste efeito, ou seja, estabelecer o uso seguro
destas substncias qumicas.
A toxicologia se apoia, ento, em 3 elementos bsicos:
1) o agente qumico (AQ) capaz de produzir um efeito;
2) o sistema biolgico (SB) com o qual o AQ ir interagir para produzir
o efeito;
3) o efeito resultante que dever ser adverso (ou txico) para o SB.


2) REAS DA TOXICOLOGIA

A toxicologia uma cincia multidisciplinar, que abrange uma vasta
rea de conhecimento, relacionando-se estritamente com diversas outras
cincias, pois sem os conhecimentos interrelacionados, dificilmente poder
atingir seus objetivos: prevenir, diagnosticar e tratar.
A toxicologia desenvolvida por especialistas com diferentes
formaes profissionais, oferecendo cada um contribuies especficas em
uma ou mais reas de atividade permitindo assim, o aperfeioamento dos
conhecimentos e o desenvolvimento das reas de atuao.
No mbito da toxicologia, distinguem-se vrias reas, de acordo com a
natureza do agente ou a maneira como este alcana o organismo.
Destacam-se entre outras:

Toxicologia ambiental: que estuda os efeitos nocivos produzidos pela
interao dos contaminantes qumicos ambientais com os organismos
humanos.
Toxicologia ocupacional: que estuda os efeitos nocivos produzidos pela
interao dos contaminantes do ambiente de trabalho, com o indivduo
exposto e o impacto sobre sua sade.
Toxicologia de alimentos: que estuda os efeitos adversos produzidos por
agentes qumicos presentes nos alimentos, sejam estes contaminantes ou de
origem natural. a rea da toxicologia que estabelece as condies nas
quais os alimentos podem ser ingeridos sem causar danos sade.
Toxicologia de medicamentos: que estuda os efeitos nocivos produzidos
pela interao dos medicamentos com o organismo decorrentes do uso
inadequado ou da suscetibilidade individual.
Toxicologia social: estuda os efeitos nocivos dos agentes qumicos usados
pelo homem em sua vida de sociedade, seja sob o aspecto individual, social
(de relao) ou legal.


3) AGENTE TXICO (AT)

qualquer substncia qumica que interagindo com o organismo
capaz de produzir um efeito txico, seja este uma alterao funcional ou
morte. A maioria das substncias qumicas, consideradas como agentes
txicos, so substncias exgenas conhecidas como xenobiticos.

3.1) Classificao dos agentes txicos

Os AT podem ser classificados de diversas maneiras dependendo dos
critrios utilizados. A seguir so apresentadas classificaes quanto s
caractersticas fsicas e qumicas, e quanto ao tipo de ao txica.

3.1.1) Quanto s caractersticas fsicas:
Gases: so fludos sem forma, que permanecem no estado gasoso em
condies normais de presso e temperatura.
Ex.: CO, NO e NO2, O3 etc.
Vapores: so as formas gasosas de substncias normalmente slidas ou
lquidas nas condies ambientais
Ex: vapores resultantes da volatilizao de solventes orgnicos como
benzeno, tolueno, xileno etc.
Partculas ou aerodispersides: partculas de tamanho microscpico, em
estado slido ou lquido
Ex: poeiras e fumos; neblinas e nvoas

3.1.2) Quanto s caractersticas qumicas:
Esta classificao se baseia na estrutura qumica das substncias que mais
se destacam quanto ao interesse toxicolgicos
Ex: Halogneos; Produtos alcalinos; Hidrocarbonetos alifticos;
Hidrocarbonetos aromticos; Metais; outros

3.1.3) Quanto ao tipo de ao txica (ou rgo onde atuam):
Nefrotxico; Neurotxico; Hepatotxico; Outros


4) TOXICIDADE

a capacidade, inerente a um agente qumico, de produzir danos aos
organismos vivos, em condies padronizadas de uso. Uma substncia
muito txica causar dano a um organismo se for administrada em

quantidades muito pequenas, enquanto que uma substncia de baixa
toxicidade somente produzir efeito quando a quantidade administrada for
muito grande.
O conhecimento da toxicidade das substncias qumicas se obtm
atravs de experimentos em laboratrio utilizando animais. Os mtodos so
empregados com todo rigor cientfico com a finalidade de fornecer
informaes relativas aos efeitos txicos e principalmente para avaliar riscos
que podem ser extrapolados ao homem.
Os agentes qumicos podem ser classificados, segundo HODGES &
HAGGARD, em 6 classes de toxicidade, de acordo com os valores de DL50
(Tabela I ). Esta classificao utilizada para consultas rpidas, qualitativas,
com finalidade de obter informaes relativas toxicidade intrnseca das
substncias.
A falha desta classificao est no fato dela se basear apenas na
toxicidade intrnseca da substncia que um parmetro extremamente
varivel, sendo influenciado por uma srie de fatores, relacionados
principalmente ao agente qumico, organismo e exposio.
Em situaes prticas no se deve conhecer somente a toxicidade das
substncias, representadas geralmente pela DL50, pois to importante como
conhecer a toxicidade dos agentes qumicos, conhecer e saber avaliar o
risco txico de uma substncia qumica.

Tabela I : Classificao Quanto ao Grau de Toxicidade


Categoria de Toxicidade DL50 Rata (via Oral)

Extremamente txico
Altamente txico
Moderadamente txico
Ligeiramente txico
Praticamente no txico
Relativamente atxico
< 1mg/kg
1-50 mg/kg
50-500 mg/kg
0,5-5 g/kg
5-15 g/kg
> 15 g/kg


4.1) Fatores que influem na toxicidade

4.1.1) Fatores ligados ao agente qumico
Propriedade fsico-qumica (solubilidade, grau de ionizao, coeficiente de
partio leo/gua, pka, tamanho molecular, estado fsico, etc.);
Impurezas e contaminantes;
Fatores envolvidos na formulao (veculo, adjuvantes).
4.1.2) Fatores relacionados com o organismo
Espcie, linhagem, fatores genticos;
Fatores imunolgicos, estado nutricional, dieta;
Sexo, estado hormonal, idade, peso corpreo;
Estado emocional, estado patolgico.
4.1.3) Fatores relacionados com a exposio
Via de introduo;
Dose ou concentrao;
Freqncia.
4.1.4) Fatores relacionados com o ambiente
Temperatura, presso;
Radiaes;
Outros (luz, umidade, etc.).


5) RISCO E SEGURANA

O risco associado uma substncia qumica se define como a
probabilidade de que uma substncia produza um efeito adverso, um dano,
sob condies especficas de uso.
Nem sempre a substncia de maior toxicidade a de maior risco, ou
seja, de maior perigo para o homem. Dependendo das condies de uso,
uma substncia classificada como muito txica (elevada toxicidade
intrnseca) pode ser menos perigosa do que uma pouco txica. Existindo
um risco associado ao uso de uma substncia qumica, h a necessidade de
estabelecer condies de segurana. Portanto define-se como segurana, a
certeza prtica de que no resultar efeitos adversos para um indivduo
exposto a uma determinada substncia em quantidade e forma recomendada
de uso. Ou seja, quando fala-se em risco e segurana, significa a
possibilidade ou no da ocorrncia de uma situao adversa.
Um problema srio, no entanto, estabelecer o que um risco
aceitvel no uso de substncia qumica. Esta deciso bastante complexa e
envolve o binmio risco-benefcio, ou seja, altos riscos podem ser aceitveis
no uso das chamadas life saving drugs, ou seja, os frmacos essenciais
vida e no serem aceitveis no uso de aditivos de alimentos, por exemplo.
Na utilizao das substncias qumicas para diversos fins, alguns
fatores devem ser considerados na determinao de um risco aceitvel:
Necessidade do uso da substncia;
Disponibilidade e a adequao de outras substncias alternativas para o
uso correspondente;
Efeitos sobre a qualidade do ambiente e conservao dos recursos
naturais;
Consideraes sobre o trabalho (no caso dela ser usada nvel
ocupacional);
Avaliao antecipada de seu uso pblico (ou seja, o que ela poder
causar sobre a populao em geral, onde existe por exemplo: crianas,
velhos, doentes, etc.);
Consideraes econmicas.
6) INTOXICAO

um conjunto de efeitos nocivos representado pelos sinais e sintomas
que revelam o desequilbrio orgnico produzido pela interao do agente
qumico com o sistema biolgico. Corresponde ao estado patolgico
provocado pelo agente txico, em decorrncia de sua interao com o
organismo.
Logicamente, o efeito txico s ser produzido, se a interao com o
receptor biolgico apropriado ocorrer em dose e tempo suficientes para
quebrar a homeostasia do organismo. Existem, ento, na grande maioria das
vezes, uma srie de processos envolvidos, desde o contato do agente txico
com o organismo, at o sintoma clnico que revela esta interao. Isto
permite dividir a intoxicao em 4 fases distintas, a saber:

Fase de Exposio: corresponde ao contato do agente txico com o
organismo. Representa a disponibilidade qumica das substncias qumicas
e passveis de serem introduzidas no organismo.
Fase Toxicocintica: consiste no movimento do AT dentro do organismo.
formada pelos processos de absoro, distribuio, armazenamento e
eliminao (biotransformao e excreo). Todos esses processos envolvem
reaes mtuas entre o agente txico e o organismo, conduzindo
disponibilidade biolgica.
Fase Toxicodinmica: corresponde ao do AT no organismo. Atingindo o
alvo, o agente qumico ou seu produto de biotransformao interage
biolgicamente causando alteraes morfolgicas e funcionais, produzindo
danos.
Fase Clnica: corresponde manifestao clnica dos efeitos resultantes da
ao txica. o aparecimento de sinais e sintomas que caracterizam o efeito
txico e evidenciam a presena do fenmeno da intoxicao.




6.1) Classificao dos efeitos txicos

6.1.1) Efeito idiossincrtico
As reaes idiossincrticas correspondem s respostas
quantitativamente anormais a certos agentes txicos, provocados por
alteraes genticas. O indivduo pode ter uma resposta adversa com doses
baixas (no-txicas) ou ento ter uma resposta extremamente intensa com
doses mais elevadas. Exemplo: sensibilidade anormal aos nitritos e outros
agentes metemoglobinizantes, devido a deficincia, de origem gentica, na
NADH-metemoglobina redutase.

6.1.2) Efeito alrgico
Reaes alrgicas ou alergia qumica so reaes adversas que
ocorrem somente aps uma prvia sensibilizao do organismo ao AT, ou a
um produto quimicamente semelhante.
Na primeira exposio, a substncia age como um hapteno
promovendo a formao dos anticorpos, que em 2 ou 3 semanas esto em
concentraes suficientes para produzir reaes alrgicas em exposies
subsequentes.
Alguns autores no concordam que as alergias qumicas sejam efeitos
txicos, j que elas no obedecem ou apresentam uma relao dose-
resposta (elas no so dose dependente). Entretanto, como a alergia
qumica um efeito indesejvel e adverso ao organismo, pode ser
reconhecido como efeito txico.

6.1.3) Efeito imediato, crnico e retardado
Efeitos Imediatos ou agudos so aqueles que aparecem imediatamente
aps uma exposio aguda, ou seja, exposio nica ou que ocorre, no
mximo, em 24 horas. Em geral so efeitos intensamente graves.
Efeitos crnicos so aqueles resultantes de uma exposio crnica, ou
seja, exposio a pequenas doses, durante vrios meses ou anos. O
efeito crnico pode advir de dois mecanismos:
(a) Somatria ou Acmulo do Agente Txico no Organismo: a velocidade
de eliminao menor que a de absoro, assim ao longo da exposio o
AT vai sendo somado no organismo, at alcanar um nvel txico.
(b) Somatria de Efeitos: ocorre quando o dano causado irreversvel e,
portanto, vai sendo aumentado a cada exposio, at atingir um nvel
detectvel; ou, ento, quando o dano reversvel, mas o tempo entre cada
exposio insuficiente para que o organismo se recupere totalmente.
Efeitos retardados so aqueles que s ocorrem aps um perodo de
latncia, mesmo quando j no mais existe a exposio. Exemplo: efeitos
carcinognicos que tm uma latncia a 20-30 anos.

6.1.4) Efeitos reversveis e irreversveis
A manifestao de um ou outro efeito vai depender, principalmente, da
capacidade do tecido lesado em se recuperar. Assim, leses hepticas so
geralmente reversveis, j que este tecido tem grande capacidade de
regenerao, enquanto as leses no sistema nervoso central (SNC) so
geralmente irreversveis, uma vez que as clulas nervosas so pouco
renovadas.

6.1.5) Efeitos locais e sistmicos
O efeito local refere-se quele que ocorre no local do primeiro contato
entre o AT e o organismo. J o sistmico exige uma absoro e distribuio
da substncia, de modo a atingir o stio de ao, onde se encontra o receptor
biolgico. Existem substncias que apresentam os dois tipos de efeitos. (ex.:
Benzeno, chumbo tetraetila, etc.).




6.1.6) Efeitos resultantes da interao de agentes qumicos
O termo interao entre substncias qumicas utilizado todas as
vezes em que uma substncia altera o efeito de outra. A interao pode
ocorrer durante a fase de exposio, toxicocintica ou toxicodinmica. Como
conseqncia destas interaes podem resultar diferentes tipos de efeitos:
Adio: aquele produzido quando o efeito final de 2 ou mais agentes
quantitativamente igual soma dos efeitos produzidos individualmente.
Ex.: Chumbo e arsnio atuando a nvel da biossntese do heme (aumento da
excreo urinria da coproporfirina).
Sinergismo: Ocorre quando o efeito de 2 ou mais agentes qumicos
combinados, maior do que a soma dos efeitos individuais.
Ex.: A hepatotoxicidade, resultante da interao entre tetracloreto de carbono
e lcool muito maior do que aquela produzida pela soma das duas aes
em separado, uma vez que o etanol inibi a biotransformao do solvente
clorado.
Potenciao: Ocorre quando um agente txico tem seu efeito aumentado
por atuar simultaneamente, com um agente no txico
Ex.: O isopropanol, que no hepatotxico, aumenta excessivamente a
hepatotoxicidade do tetracloreto de carbono.
Antagonismo: Ocorre quando dois agentes qumicos interferem um com
a ao do outro, diminuindo o efeito final. , geralmente, um efeito
desejvel em toxicologia, j que o dano resultante (se houver) menor
que aquele causado pelas substncias separadamente. Existem vrios
tipos de antagonismo:
(a) Antagonismo qumico: (tambm chamado neutralizao) ocorre
quando o antagonista reage quimicamente com o agonista, inativando-o.
Este tipo de antagonismo tem um papel muito importante no tratamento das
intoxicaes. Ex.: Agentes quelantes como o EDTA, BAL e penicilamina, que
seqestram metais (As, Hg, Pb, etc.) Diminuindo suas aes txicas.
(b) Antagonismo funcional: ocorre quando dois agentes produzem
efeitos contrrios em um mesmo sistema biolgico atuando em receptores
diferentes. Ex.: Barbitricos que diminuem a presso sangnea, interagindo
com a norepinefrina, que produz hipertenso.
(c) Antagonismo no-competitivo, metablico ou farmacocintico:
quando um frmaco altera a cintica do outro no organismo, de modo que
menos AT alcance o stio de ao ou permanea menos tempo agindo. Ex.:
Bicarbonato de sdio que aumenta a secreo urinria dos barbitricos;
fenobarbital que aumenta a biotransformao do tolueno, diminuindo sua
ao txica.
(d)Antagonismo competitivo, no-metablico ou farmacodinmico:
ocorre quando os dois frmacos atuam sobre o mesmo receptor biolgico,
um antagonizando o efeito do outro. So os chamados bloqueadores e este
conceito usado, com vantagens, no tratamento clnico das intoxicaes.
Ex.: Naloxone, no tratamento da intoxicao com opiceos. Atropina no
tratamento da intoxicao por organofosforado ou carbamato.

7. FASES DA INTOXICAO


Desde o momento em que o agente qumico entra em contato com o agente
biolgico, at o momento em que a intoxicao visualizada atravs dos
sinais e sintomas clnicos, ocorrem uma serie de etapas metablicas que
compem a chamada Fases da Intoxicao que so quatro:
Fase de Exposio,
Fase Toxicocintica
Fase Toxicodinmica
Fase Clnica
essencial lembrar que:
Mais do que da dose administrada, a resposta funo da
concentrao do AT que interage com o receptor biolgico; e que,
a concentrao do AT no stio de ao dependente das duas primeiras
fases da intoxicao.


7.1) FASE DE EXPOSIO

Exposio a medida do contato entre o AT e a superfcie corprea do
organismo e sua intensidade depende de fatores, tais como:

Via ou local de exposio

As principais vias de exposio, atravs das quais os AT so
introduzidos no organismo so:
- via gastrintestinal (ingesto)
- via pulmonar (inalao)
- via cutnea (contato)
Embora no to importante para a Toxicologia como estas trs, existe
tambm a via parenteral. A via de introduo influi tanto na potncia quanto
na velocidade de aparecimento do efeito txico. A ordem decrescente de
eficincia destas vias : via endovenosa > pulmonar > intraperitoneal > sub-
cutnea > intra muscular > intra-drmica > oral, cutnea.
Estas vias ganham maior ou menor importncia, de acordo com a rea
da Toxicologia em estudo. Assim, a via pulmonar e a cutnea so as mais
importantes na Toxicologia Ambiental e Ocupacional, a via gastrointestinal na
Toxicologia de Alimentos, de Medicamentos, em casos de suicdios e
homicdios, e a via parenteral tem certa importncia na Toxicologia Social e
de Medicamentos (Farmacotoxicologia).
Durao e freqncia da exposio
A durao de uma exposio importante na determinao do efeito
txico, assim como na intensidade destes. Geralmente a exposio pode ser
classificada, quanto durao em:
- exposio aguda: exposio nica ou mltipla que ocorra em um
perodo mximo de 24 horas
- exposio sub-aguda: aquela que ocorre durante algumas semanas
(1 ms ou mais)
- exposio sub-crnica: aquela que ocorre durante alguns meses
(geralmente por 3 meses)
- exposio crnica: ocorre durante toda a vida.
Quanto freqncia da exposio observa-se que, geralmente, doses
ou concentraes fracionadas podem reduzem o efeito txico, caso a
durao da exposio no seja aumentada. Assim, uma dose nica de um
agente que produz efeito imediato e severo, poder produzir menos do que a
metade ou nenhum efeito, quando dividida em duas ou mais doses,
administradas durante um perodo de vrias horas ou dias. No entanto,
importante ressaltar que a reduo do efeito provocado pelo aumento de
freqncia (ou seja, do fracionamento da dose) s ocorrer quando:
- a velocidade de eliminao maior do que a de absoro, de modo
que os processos de biotransformao e/ou excreo ocorram no espao
entre duas exposies;
- o efeito txico pela substncia parcial ou totalmente revertido antes
da exposio seguinte.
Se nenhuma destas situaes ocorrerem, o aumento de freqncia
resultar em efeitos txicos crnicos.


7.2) FASE TOXICOCINTICA

Nesta fase tem-se a ao do organismo sobre o agente txico,
procurando diminuir ou impedir a ao nociva da substncia sobre ele. de
grande importncia, porque dela resulta a quantidade de AT disponvel para
reagir com o receptor biolgico e, consequentemente, exercer a ao txica.
A fase toxicocintica constituda dos seguintes processos:
- absoro
- distribuio
- eliminao: biotransformao e excreo
Pode-se notar que nesta fase o agente txico dever se movimentar
pelo organismo e para tal ter que, freqentemente, transpor membranas
biolgicas. Assim, muito importante o conhecimento dos fatores que
influem no transporte das substncias qumicas pelas membranas.
2.1) Fatores que influem no transporte por membranas
Estes fatores podem ser agrupados em duas classes distintas:

Fatores relacionados com a membrana
- Estrutura da membrana
- Espessura da membrana
- rea da membrana
Destes 3 fatores, destaca-se a estrutura da membrana. Sabe-se que a
membrana biolgica constituda de camada lipdica bimolecular, contendo
em ambos os lados, molculas de protenas que penetram e s vezes
transpem esta camada. Os cidos graxos presentes na camada lipdica no
possuem uma estrutura cristalina rgida, ao contrrio, na temperatura
fisiolgica eles tem caractersticas quase fludas. Portanto, o carter fludo
das membranas (e portanto sua permeabilidade) determinado
principalmente pela estrutura e proporo relativa de cidos graxos
insaturados presentes na regio. Este modelo denominado de mosaico
fludo, foi proposto por SINGER & NICOLSON em 1972 e o mais aceito
atualmente.


7.2) Absoro

a passagem do AT do meio externo para o meio interno,
atravessando membranas biolgicas. O meio externo na absoro pode ser
o estmago, os alvolos, o intestino, ou seja, dentro do organismo, mas fora
do sangue. Existem trs tipos de absoro mais importantes para a
Toxicologia.


7.3) Distribuio

Aps a entrada do AT na corrente sangnea, seja atravs da absoro
ou por administrao direta, ele estar disponvel para ser distribudo pelo
organismo. Normalmente a distribuio ocorre rapidamente e a velocidade e
extenso desta depender principalmente do:
Fluxo sangneo atravs dos tecidos de um dado rgo;
Facilidade com que o txico atravessa a membrana celular e penetra nas
clulas de um tecido.
Assim, aqueles fatores que influem no transporte por membranas,
discutidos anteriormente, sero importantes tambm na distribuio. Alguns
agentes txicos no atravessam facilmente as membranas celulares e por
isto tem uma distribuio restrita enquanto outros, por atravess-las
rapidamente, se distribuem atravs de todo organismo. Durante a
distribuio o agente alcanar o seu stio alvo, que o rgo ou tecido onde
exercer sua ao txica, mas poder, tambm, se ligar a outros
constituintes do organismo, concentrando-se em algumas partes do corpo.
Em alguns casos, estes locais de maior concentrao so tambm os
stios de ao e disto resulta efeitos altamente prejudiciais. o caso do
monxido de carbono (CO), para o qual o sangue representa, tanto o local de
concentrao quanto o de ao txica. Felizmente para o homem, no
entanto, a grande maioria dos AT atingem seus maiores nveis em locais
diferentes do stio alvo (exemplo: Pb armazenado nos ossos e atua nos
tecidos moles). Este acmulo do AT em outros locais que no o de ao,
funciona como uma proteo ao organismo, uma vez que previne uma
elevada concentrao no stio alvo. Os agentes txicos nos locais de
concentrao esto em equilbrio com sua forma livre no sangue e quando a
concentrao sangnea decai, o txico que est concentrado em outro
tecido liberado para a circulao e da pode atingir o stio de ao.
A importncia do sangue no estudo da distribuio grande, no s
porque o principal fludo de distribuio dos AT, mas tambm por ser o
nico tecido que pode ser colhido repetidamente sem distrbios fisiolgicos,
ou traumas orgnicos. Alm disto, como o sangue circula por todos os
tecidos, algum equilbrio pode ser esperado entre a concentrao do frmaco
no sangue e nos tecidos, inclusive no stio de ao. Assim, a concentrao
plasmtica fornece melhor avaliao da ao txica do que a dose (a no ser
quando a concentrao plasmtica muito baixa em relao concentrao
nos tecidos).

A distribuio do AT, atravs do organismo ocorrer de maneira no
uniforme, devido a uma srie de fatores que podem ser reunidos em dois
grupos: Afinidade por diferentes tecidos e Presena de membranas
O papel da ligao s protenas plasmticas e do armazenamento na
distribuio desigual dos xenobiticos so, dentre os supracitados, os mais
estudados, atualmente


7.3.1.3) Armazenamento
Os agentes txicos podem ser armazenados no organismo,
especialmente no tecido adiposo e sseo.

7.4) ELIMINAO

Aceita-se, atualmente, que a eliminao composta de dois processos
distintos: a biotransformao e a excreo.


7.4.1) Biotransformao
O organismo vivo apresenta mecanismos de defesa, que buscam
terminar ou minimizar a ao farmacolgica ou txica de um frmaco sobre
ele, destacando-se o armazenamento, a biotransformao e a excreo.
A intensidade e durao de uma ao txica determinada,
principalmente, pela velocidade de biotransformao do agente no
organismo. Segundo alguns autores, se no existisse a biotransformao, o
organismo humano levaria cerca de 100 anos para eliminar uma simples
dose teraputica de pentobarbital, que um frmaco muito lipossolvel.
Pode-se conceituar Biotransformao como sendo o conjunto de
alteraes maiores ou menores que um agente qumico sofre no organismo,
visando aumentar sua polaridade e facilitar sua excreo.

7.4.1.1) Mecanismos da Biotransformao

A biotransformao pode ocorrer atravs de dois mecanismos:
chamado Mecanismo de Ativao da Biotransformao, que produz
metablitos com atividade igual ou maior do que o precursor. Ex.: a
piridina biotransformada ao on N-metil piridnico que tem toxicidade
cinco vezes maior que o precursor. O mesmo ocorre com o inseticida
parathion que biotransformado a paraoxon, composto responsvel pela
ao txica do praguicida e
Mecanismo de Desativao, quando o produto resultante menos ativo
(txico) que o precursor. o mais comum de ocorrer para os xenobiticos.
comum encontrar-se na literatura cientfica, os termos Metabolizao
e Detoxificao, como sinnimos de biotransformao. Hoje, no entanto, se
guarda o termo metabolizao para os elementos essenciais endgenos do
organismo e sabe-se que detoxificao no sinnimo de Biotransformao.
Isto porque detoxificao significa diminuio de toxicidade e nem todas as
reaes de biotransformao, como citado acima, produziro metablitos
menos txicos ou ativos que o seu precursor.
importante ressaltar que, na maioria das vezes:
Nenhum frmaco deixar de ser, no mnimo, parcialmente
biotransformado;
Nenhum frmaco sofrer apenas um tipo de biotransformao;
Duas espcies animais no biotransformaro um frmaco de maneira
idntica;
Nenhuma biotransformao permanecer inalterada com doses repetidas
do frmaco.
A biotransformao pode ocorrer em qualquer rgo ou tecido orgnico
como por exemplo no intestino, rins, pulmes, pele, etc. No entanto, a grande
maioria das substncias, sejam elas endgenas ou exgenas sero
biotransformadas no FGADO.
O fgado o maior rgo humano, tendo diversas e vitais funes,
destacando-se entre elas, as transformaes de xenobiticos e nutrientes. A
biotransformao executada geralmente por enzimas, principalmente
aquelas existentes nos chamados microssomas hepticos, que so vesculas
presentes no sistema retculo endotelial liso (REL). Algumas reaes de
biotransformao no so microssmicas, embora sejam enzimticas e um
nmero ainda menor pode ocorrer sem o envolvimento de enzimas.

7.4.1.2) Fases da Biotransformao

As reaes envolvidas na biotransformao dos xenobiticos podem
ser agrupadas em duas fases distintas:
- Fase Pr-Sinttica ou Fase I, onde ocorrem reaes de oxidao,
reduo e hidrlise.
- Fase Sinttica, de Conjugao ou Fase II, onde ocorrem reaes de
conjugao.

Fase Pr-Sinttica
Oxidao:
A essncia bioqumica de vida animal a oxidao e qualquer
xenobitico que possa ser modificado por via idntica ou anloga ser
facilmente biotransformado no organismo, embora nem sempre o produto
resultante seja menos txico. As oxidaes so, geralmente, catalisadas por
uma classe de enzima denominada oxidase de funo mista, que so
enzimas complexas, inespecficas (oxidam diferentes tipos de compostos) e
que necessitam de NADPH e O2 para agirem. Durante a oxidao elas
exigem uma molcula de oxignio para cada molcula de frmaco a ser
oxidado (um tomo de oxignio incorporado ao frmaco ocorrendo a
oxidao e outro , geralmente, combinado com H2, formando gua).
A enzima ou sistema enzimtico principal na oxidao de xenobiticos
o chamado Citocromo P450. Esta enzima um citocromo (complexo de
protena e heme) chamado de P450 porque em sua forma reduzida ligado
ao monxido de carbono, ter um pico (P) de absorbncia no comprimento
de onda de 450nm. O cit P450 parece estar localizado nas camadas
profundas na membrana do retculo endotelial liso (REL), mais
especificamente, nos microssomas hepticos. Esta enzima a oxidase
terminal do sistema de oxidases mistas. Ela recebe os eltrons provenientes
de outras fases da reao, se reduz e se liga ao O2 e ao frmaco,
promovendo de fato a oxidao do composto. Isto demonstrado na Figura
6 apresentada a seguir:
Outras enzimas esto presentes nos microssomas hepticos e, embora
menos conhecidas e importantes que o Cit P450 podem, tambm,
biotransformar xenobiticos. o caso por exemplo do citocromo b5, que est
localizado fora das membranas do REL.
O sistema enzimtico Cit P450 influenciado por uma srie de
substncias, que podem induzir ou inibir a sua atividade, alterando a
biotransformao de determinados compostos. Ex.: a) fenilbutazona
(antiinflamatrio e antireumtico) e o cloranfenicol podem inibir a
biotransformao enzimtica da tolbutamida, medicamento antidiabtico.
Com isto, uma dose teraputica deste medicamento poder causar crises de
hipoglicemia srias, devido diminuio excessiva do acar no sangue; b)
Fenobarbital e lcool so exemplos de indutores enzimticos, que aumentam
a biotransformao de outros frmacos como a metadona, fenilbutazona, etc.
Parece que nestes casos tanto o fenobarbital como o lcool, aumentam a
concentrao do Cit P450 e, consequentemente, aumenta a biotransformao
dos frmacos.


Reduo:
A reduo de xenobiticos muito menos comum do que a oxidao
uma vez que a mesma contrria tendncia geral das reaes bioqumicas
dos tecidos vivos, ou seja a oxidao. Deve-se considerar que toda a reao
enzimtica , fundamentalmente, reversvel sendo sua direo dependente
do equilbrio qumico. Assim, se a forma reduzida no equilbrio mais
excretvel que a forma oxidada, a lei de ao das massa tende a deslocar a
reao no sentido da reduo.

Fase Sinttica ou de Conjugao
Um fator importante na toxicidade de um xenobitico a sua
capacidade de ser excretado, e parece que os rins dos vertebrados
constitudo de maneira e excretar eletrlitos mais facilmente que no
eletrlitos. Assim, quanto mais ionizado estiver um cido orgnico no pH do
meio, mais rapidamente ele ser excretado pelos rins. A ionizao, por sua
vez, depende do chamado momento dipolo (ou grau de polaridade), ou
seja, da distncia entre o centro geomtrico de todas as cargas positivas e
de todas as cargas negativas. claro que molculas com momento dipolo
baixo (carga positiva perto da carga negativa) tero uma simetria maior e,
portanto, uma ionizao mais difcil. J molculas com grandes dipolos (ou
seja, molculas onde as cargas positivas e negativas esto distantes) tero
uma menor simetria e, consequentemente, maior ionizao.


7.4.1.3) Fatores que influem na Biotransformao
Alm da induo e inibio enzimtica estudada anteriormente, outros
fatores podem alterar a biotransformao dos xenobiticos. So eles:

Dose e Freqncia:
A dose geralmente altera a via de biotransformao. Certas enzimas
possuem elevada afinidade, mas baixa capacidade para biotransformar
substncias exgenas. Por isto, sero rapidamente saturadas, quando doses
elevadas do txico so administradas e outras vias secundrias passam a ter
um papel mais importante. Exemplo: o acetaminofem em doses baixas (15
mg/Kg) 90% biotransformado atravs da conjugao com sulfato. Em
doses elevadas (300 mg/kg) apenas 43% ser excretado como tal, passando
a ser significativa, as excrees como glicurondeo e cido mercaptrico
(conjugao com glutation).
Em relao freqncia, ela pode levar a uma sensibilizao ou
induo de receptores enzimticos, aumentando a biotransformao.
Dieta e estado nutricional:
O estado nutricional bastante importante para a biotransformao;
podendo alterar a atividade do Cit P450 (oxidase ou redutase). As deficincias
em vitaminas, especialmente a C, E e do complexo B, reduzem a velocidade
de biotransformao. Elas esto direta ou indiretamente envolvidas na
regulao do Cit P450. Alm disto, suas deficincias podem alterar a energia e
o estado redox das clulas, diminuindo a produo de cofatores, necessrios
para a fase de conjugao. Uma dieta rica em lpides diminui, geralmente, a
biotransformao, uma vez que estes podem aumentar a suscetibilidade
peroxidao lipdica. Esta maior suscetibilidade pode se estender aos lpides
das membranas biolgicas, e com isto destruir os sistemas enzimticos
intracelulares levando a um aumento da toxicidade dos frmacos. Este papel
desenvolvido, tambm, pelas dietas pobres em protenas, visto que a
menor concentrao protica diminuir a sntese enzimtica e,
consequentemente, a biotransformao.
Algumas substncias naturalmente presentes nos alimentos podem
aumentar a biotransformao dos xenobiticos. o caso dos compostos
indlicos e dos hidrocarbonetos policclicos aromticos; estes ltimos
presentes em carnes assadas, que induzem Fase I da biotransformao.
Sexo, Idade, Peso:
J foi demonstrado que, para algumas substncias, existem diferenas
entre as respostas txicas de animais macho e fmea. Estudos feitos em
ratos demonstraram que as fmeas so mais suscetveis a uma dose de
hexobarbital do que os machos (elas dormem por um tempo maior). Este fato
explicado pela menor capacidade do fgado das fmeas em biotransformar
xenobiticos tornando-as mais suscetveis ao da maioria dos agentes
txicos. A menor atividade heptica destes animais fmeas no entanto, ir
diminuir a ao de frmacos que so biotransformados pelo mecanismo de
ativao (ex.: o tetracloreto de carbono e halotano). Acredita-se que estas
diferenas entre sexo sejam causadas pelos hormnios sexuais, posto que,
ao se administrar testosterona s fmeas, houve aumento na capacidade de
biotransformao e com a castrao de machos ocorreu diminuio desta
capacidade. A influncia do sexo sobre a biotransformao ocorre tambm
em processos que ocorrem em outros rgos como por exemplo nos rins.
Ex.: animais machos so mais suscetveis ao txica do clorofrmio,
provavelmente, por biotransformar mais rapidamente este solvente,
originando o fosgnio, metablito intermedirio ativo. Embora as diferenas
entre sexo sejam mais pronunciadas em ratos, outras espcies entre elas o
homem, tambm apresentam estas modificaes (ex.: nicotina, cido
acetilsaliclico, heparina, etc.).
Idade, tanto os animais jovens, quanto os velhos, apresentam menor
capacidade de biotransformar xenobiticos e, consequentemente, so mais
suscetveis aos seus efeitos txicos. Geralmente, o Cit P450 dos recm-
nascidos tem apenas 20% a 50% da atividade observada em adultos. Em
relao aos idosos, no s a atividade diminuda do Cit P450, mas tambm
outros fatores, tais como menor fluxo sangneo, menor eficincia no sistema
da excreo renal e biliar, contribuem para a menor biotransformao dos
xenobiticos.

7.4.1.4) Importncia da Biotransformao para as Anlises
Toxicolgicas
Esta reside no fato de que a forma mais comum de se encontrar o
agente txico em material biolgico como produto biotransformado. Assim,
conhecendo a biotransformao do AT, sabe-se o que procurar na amostra
enviada ao laboratrio. Alm disto, conhecendo-se a biotransformao e os
metablitos formados, fica mais fcil saber que tipo de amostra a mais
indicada para ser requisitada. Exemplo: a metanfetamina, um anorexgeno do
grupo anfetamnicos usado como bolinha biotransformada no organismo,
produzindo anfetamina, que excretada pelos rins. Assim, quando da
ingesto ou intoxicao com a metanfetamina, o produto principal a ser
pesquisado na urina dever ser a anfetamina. Os solventes clorados do tipo
CHCl3 e CCl4 so muito pouco biotransformados no organismo e quando isto
ocorre o produto formado geralmente o CO2, que ser, assim como os
precursores, eliminados pelo ar expirado. Logo no adianta solicitar ou
receber amostras de urina para serem analisadas.
J um outro solvente clorado, o tricloretileno, muito biotransformado
no organismo produzindo principalmente cido tricloactico (TCA) e
tricloetanol (TCE), eliminados na urina. Para este xenobitico a urina
amostra biolgica adequada.


7.4.2) Excreo

Este processo , muitas vezes, denominado Eliminao, embora pelo
conceito atual a eliminao tambm o processo de biotransformao. A
excreo pode ser vista como um processo inverso ao da absoro, uma vez
que os fatores que influem na entrada do xenobitico no organismo, podem
dificultar a sua sada. Basicamente existem trs classes de excreo:
eliminao atravs das secrees, tais como a biliar, sudorpara, lacrimal,
gstrica, salivar, lctea.
eliminao atravs das excrees, tais como urina, fezes e catarro.
eliminao pelo ar expirado.
O processo mais importante para a Toxicologia e a excreo urinria.

2.4.2) Excreo Urinria
Sabe-se que a capacidade de um rgo em realizar uma determinada
funo est intimamente relacionada com sua anatomia e que os rins
possuem um elevado desenvolvimento anatmico, voltado para a excreo
de substncias qumicas.
Os glomrulos renais filtram cerca de 20% do fluxo cardaco (os rins
recebem 25% deste fluxo) e apresentam poros bastantes largos (cerca de 40
A enquanto o de outros tecidos medem cerca de 4 A). Assim, os glomrulos
filtram substncias lipossolveis ou hidrossolveis, cidas ou bsicas, desde
que tenham PM menor do que 60.000. A filtrao glomerular um dos
principais processos de eliminao renal e est intimamente ligado a um
outro processo que a reabsoro tubular. As substncias, aps serem
filtradas pelos glomrulos, podem permanecer no lmem do tbulo e ser
eliminada, ou ento podem sofrer reabsoro passiva atravs da membrana
tubular. Isto vai depender de alguns fatores, tais como o coeficiente de
partio leo/gua; o pKa da substncia e pH do meio. De modo geral, as
substncias de carter alcalino so eliminadas na urina cida e as
substncias cidas na urina alcalina. Isto porque nestas condies as
substncias se ionizaro, tornando-se hidrossolveis e a urina , em sua
maior parte, formada de gua.
Outro processo de excreo renal a difuso tubular passiva.
Substncias lipossolveis, cidas ou bsicas, que estejam presentes nos
capilares que circundam os tbulos renais, podem atravessar a membrana
por difuso passiva e carem no lmem tubular. Dependendo do seu pKa e
do pH do meio, elas podem, ou no, se ionizarem e, consequentemente,
serem excretadas ou reabsorvidas.
O terceiro processo de excreo renal a secreo tubular ativa.
Existem dois processos de secreo tubular renal, um para substncias
cidas e outro para as bsicas estando estes sistemas localizados,
provavelmente, no tbulo proximal. A secreo tubular tem as caractersticas
do transporte ativo, ou seja, exige um carregador qumico, gasta energia,
um mecanismo competitivo e pode ocorrer contra um gradiente de
concentrao. Algumas substncias endgenas, tais como o cido rico, so
excretadas por este mecanismo e a presena de xenobiticos excretados
ativamente, pode interferir com a eliminao de substratos endgenos. A
Penicilina um exemplo de xenobitico secretado ativamente pelos tbulos.
O uso de Probenecid (frmaco excretado pelo mesmo sistema) evita que
este antibitico seja secretado muito rapidamente do organismo. Geralmente,
o que ocorre no organismo uma combinao dos trs processos de
excreo renal, para permitir uma maior eficcia na eliminao dos
xenobiticos.

2.4.2.2) Excreo Fecal e Catarral
No so processos muito importantes para a Toxicologia. Os AT
encontrados nas fezes correspondem frao ingerida e no absorvida ou
ento ao AT que sofreu secreo salivar, biliar ou gstrica. As partculas que
penetram pelo trato pulmonar podem ser eliminadas pela expectorao no
TGI e, se no forem reabsorvidas, sero, tambm, excretadas pelas fezes.

2.4.2.3) Secreo Biliar
Dentre as secrees orgnicas, a mais significativa para a excreo de
xenobiticos a biliar. O fgado tem uma posio vantajosa na remoo de
substncias exgenas do sangue, principalmente daquelas absorvidas pelo
trato gastrintestinal. Isto porque, o sangue proveniente do TGI, atravs da
circulao porta, passa inicialmente pelo fgado, e somente depois entra na
circulao sistmica. No fgado parte do xenobitico pode ser
biotransformado e os metablitos ou mesmo o produto inalterado podem ser
secretados pela bile no intestino.
Existem, sabidamente, trs sistemas de transporte ativo para a
secreo de substncias orgnicas na bile, a saber, para substncias cidas,
bsicas e neutras. quase certa a existncia de um outro sistema para os
metais. Uma vez secretado no intestino, os xenobiticos podem sofrer
reabsoro ou excreo pelas fezes.

o chamado ciclo entero heptico e a morfina um exemplo tpico de
xenobitico que apresenta tal ciclo. Ela conjugada com cido glicurnico no
fgado e o glicurondeo de morfina secretado pela bile no intestino. Neste
local, pela ao da enzima -glicuronidase, a morfina liberada e
reabsorvida. O glicorondeo que no for lisado ser excretado pelas fezes.

2.4.2.4) Outras secrees
A eliminao atravs da secreo sudorpara j conhecida h alguns
anos. Desde 1911 sabe-se que substncias tais como iodo, bromo, cido
benzico, cido saliclico, chumbo, arsnio, lcool, etc., so excretadas pelo
suor. O processo parece ser o de difuso passiva e pode ocorrer dermatites
em indivduos suscetveis, especialmente quando se promove a sudorese
para aumentar a excreo pela pele.
A secreo salivar significativa para alguns xenobiticos. Os
lipossolveis podem atingir a saliva por difuso passiva e os no
lipossolveis podem ser eliminados na saliva, em velocidade proporcional ao
seu peso molecular, atravs de filtrao. Geralmente as substncias
secretadas com a saliva sofrem reabsoro no TGI.
Existe um interesse em relao secreo de xenobiticos no leite,
pois este acaba sendo ingerido por recm-nascidos. Geralmente as
substncias apolares sofrem difuso passiva do sangue para o leite e como
esta secreo mais cida do que o sangue (ela tem pH = 6,5), os
compostos bsicos tendem a se concentrarem mais a. J os compostos
cidos tem uma concentrao lctea menor que a sangnea. Vrias
substncias so, sabidamente, eliminadas pelo leite: DDT, PCB (difenil
policlorados), Pb, Hg, As, morfina, lcool, etc.




2.4.2.5) Excreo pelo ar expirado
Gases e vapores inalados ou produzidos no organismo so
parcialmente eliminados pelo ar expirado. O processo envolvido a difuso
pelas membranas que, para substncias que no se ligam quimicamente ao
sangue, depender da solubilidade no sangue e da presso de vapor. Estes
xenobiticos so eliminados em velocidade inversamente proporcional
reteno no sangue, assim, gases e vapores com K elevado (pouco solveis
no sangue) so rapidamente eliminados, enquanto os de K baixo (muito
solvel no sangue) so lentamente excretados pelo ar expirado. A freqncia
cardaca e respiratria influem na excreo destes agentes: a primeira nos
de K alto e a segunda nos de K baixo. Em relao presso de vapor, os
lquidos mais volteis sero, quase exclusivamente, excretados pelo ar
expirado.

Fatores que influem na velocidade e via de excreo
Via de Introduo: a via de introduo influi na velocidade de absoro, de
biotransformao e, tambm, na excreo.
Afinidade por elementos do sangue e outros tecidos: geralmente o agente
txico na sua forma livre est disponvel eliminao.
Facilidade de ser biotransformada: com o aumento da polaridade a
secreo urinria est facilitada.
Freqncia respiratria: em se tratando de excreo pulmonar, uma vez
que, aumentando-se a freqncia respiratria, as trocas gasosas
ocorrero mais rapidamente.
- Funo renal: sendo a via renal a principal via de excreo dos
xenobiticos, quaisquer disfuno destes rgos interferir na velocidade e
proporo de excreo.


8) FASE TOXICODINMICA

Esta a terceira fase da intoxicao e envolve a ao do agente txico
sobre o organismo. O AT interage com os receptores biolgicos no stio de
ao e desta interao resulta o efeito txico. O rgo onde se efetua a
interao agente txico-receptor (stio de ao) no , necessariamente, o
rgo onde se manifestar o efeito. Alm disto, de um AT apresentar
elevadas concentraes em um rgo, no significa obrigatoriamente, que
ocorrer a uma ao txica. Geralmente os AT se concentram no fgado e
rins (locais de eliminao) e no tecido adiposo (local de armazenamento),
sem que haja uma ao ou efeito txico detectvel.
Quando se considera a complexidade dos sistemas biolgicos (do
ponto de vista qumico e biolgico), pode-se imaginar o elevado nmero de
mecanismos de ao existentes para os agentes txicos. Alguns destes
mecanismos, os principais em Toxicologia, so resumidos a seguir:


4) BIBLIOGRAFIA

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