Introduccin

Los enzimas son catalizadores muy potentes y eficaces, qumicamente son protenas Como
catalizadores, los enzimas actan en pequea cantidad y se recuperan indefinidamente. No
llevan a cabo reacciones que sean energticamente desfavorables, no modifican el sentido
de los equilibrios qumicos, sino que aceleran su consecucin.
Las enzimas son grandes protenas que aceleran las reacciones qumicas. En su estructura
globular, se entrelazan y se pliegan una o ms cadenas polipeptdicas, que aportan un
pequeo grupo de aminocidos para formar el sitio activo, o lugar donde se adhiere el
sustrato, y donde se realiza la reaccin. Una enzima y un sustrato no llegan a adherirse si
sus formas no encajan con exactitud.
2. Accin De Enzimas
La accin enzimtica se caracteriza por la formacin de un complejo que representa el
estado de transicin.
El sustrato se une al enzima a travs de numerosas interacciones dbiles como son: puentes
de hidrgeno, electrostticas,
hidrfobas, etc, en un lugar especfico , el centro activo. Este centro es una pequea porcin
del enzima, constituido por una serie de aminocidos que interaccionan con el sustrato.
Con su accin, regulan la velocidad de muchas reacciones qumicas implicadas en este
proceso. El nombre de enzima, que fue propuesto en 1867 por el fisilogo alemn Wilhelm
Khne (1837-1900), deriva de la frase griega en zyme, que significa 'en fermento'. En la
actualidad los tipos de enzimas identificados son ms de 2.000.
3. Clasificacin de las enzimas
1. xido-reductasas ( Reacciones de oxido-reduccisn).
2. Transferasas (Transferencia de grupos funcionales)
3. Hidrolasas (Reacciones de hidrlisis)
4. Liasas (Adicisn a los dobles enlaces)
5. Isomerasas (Reacciones de isomerizacisn)
6. Ligasas (Formacisn de enlaces, con aporte de ATP)
1.Oxido-reductasas: Son las enzimas relacionadas con las oxidaciones y las reducciones
biolgicas que intervienen de modo fundamental en los procesos de respiracin y
fermentacin. Las oxidoreductasas son importantes a nivel de algunas cadenas metablicas,
como la escisin enzimtica de la glucosa, fabricando tambin el ATP, verdadero almacn
de energa. Extrayendo dos tomos de hidrgeno, catalizan las oxidaciones de muchas
molculas orgnicas presentes en el protoplasma; los tomos de hidrgeno tomados del
sustrato son cedidos a algn captor.
En esta clase se encuentran las siguientes subclases principales: Deshidrogenasas y
oxidasas. Son ms de un centenar de enzimas en cuyos sistemas actan como donadores,
alcoholes, oxcidos aldehidos, cetonas, aminocidos, DPNH2, TPNH2, y muchos otros
compuestos y, como receptores, las propias coenzimas DPN y TPN, citocromos, O2, etc.
2.Las Transferasas: Estas enzimas catalizan la transferencia de una parte de la molcula
(dadora) a otra (aceptora). Su clasificacin se basa en la naturaleza qumica del sustrato
atacado y en la del aceptor. Tambin este grupo de enzimas actan sobre los sustratos mas
diversos, transfiriendo grupos metilo, aldehdo, glucosilo, amina, sulfat, sulfrico, etc.
3.Las Hidrolasas: Esta clase de enzimas actan normalmente sobre las grandes molculas
del protoplasma, como son la de glicgeno, las grasas y las protenas. La accin cataltica se
expresa en la escisin de los enlaces entre tomos de carbono y nitrgeno (C-Ni) o carbono
oxigeno (C-O); Simultneamente se obtiene la hidrlisis (reaccin de un compuesto con el
agua)de una molcula de agua. El hidrgeno y el oxidrilo resultantes de la hidrlisis se unen
respectivamente a las dos molculas obtenidas por la ruptura de los mencionados enlaces.
La clasificacin de estas enzimas se realiza en funcin del tipo de enlace qumico sobre el
que actan.
A este grupo pertenecen protenas muy conocidas: la pepsina, presente en el jugo gstrico, y
la tripsina y la quimiotripsina, segregada por el pncreas. Desempean un papel esencial en
los procesos digestivos, puesto que hidrolizan enlaces ppticos, estricos y glucosdicos.
4.Las isomerasas: Transforman ciertas sustancias en otras ismeras, es decir, de idntica
formula emprica pero con distinto desarrollo. Son las enzimas que catalizan diversos tipos
de isomerizacin, sea ptica, geomtrica, funcional, de posicin, etc. Se dividen en varias
subclases.
Las racemasas y las epimerasas actan en la racemizacin de los aminocidos y en la
epimerizacin de los azcares. Las primeras son en realidad pares de enzimas especficas
para los dos ismeros y que producen un solo producto comn.

Las isomerasas cis trans modifican la configuracin geomtrica a nivel de un doble
ligadura. Los xidos reductasas intramoleculares catalizan la interconversin de aldosas y
cetosas, oxidando un grupo CHOH y reduciendo al mismo tiempo al C = O vecino, como en
el caso de la triosa fosfato isomerasa, presente en el proceso de la gluclisis; en otros casos
cambian de lugar dobles ligaduras, como en la (tabla) isopentenil fosfato isomerasa,
indispensable en el cambio biosintico del escualeno y el colesterol. Por fin las transferasas
intramoleculares (o mutasas) pueden facilitar el traspaso de grupos acilo, o fosforilo de una
parte a otra de la molcula, como la lisolecitina acil mutasa que transforma la 2
lisolecitina en 3 lisolecitina, etc. Algunas isomerasa actan realizando inversiones muy
complejas, como transformar compuestos aldehdos en compuestos cetona, o viceversa.
Estas ultimas desarrollan una oxidorreduccin dentro de la propia molcula (oxido
reductasa intramoleculares)sobre la que actan, quitando hidrgeno, a algunos grupos y
reduciendo otros; actan ampliamente sobre los aminocidos, los hidroxcidos, hidratos de
carbono y sus derivados.
5.Las Liasas: Estas enzimas escinden (raramente construyen) enlaces entre tomos de
carbono, o bien entre carbono y oxigeno, carbono y nitrgeno, y carbono y azufre. Los
grupos separados de las molculas que de sustrato son casi el agua, el anhdrido carbnico,
y el amoniaco. Algunas liasa actan sobre compuestos orgnicos fosforados muy txicos,
escindindolos; otros separan el carbono de numerosos sustratos.
6.Las Ligasas: Es un grupo de enzimas que permite la unin de dos molculas, lo cual
sucede simultneamente a la degradacin del ATP, que, en rigor, libera la energa necesaria
para llevar a cabo la unin de las primeras. Se trata de un grupo de enzimas muy
importantes y recin conocidas, pues antes se pensaba que este efecto se llevaba a cabo por
la accin conjunta de dos enzimas, una fosfocinasa, para fosforilar a una sustancia A (A +
ATP A - + ADP) y una transferasa que pasara y unira esa sustancia A, con otra, B (A -
+ B A B + Pi ). A este grupo pertenecen enzimas de gran relevancia reciente, como las
aminocido ARNt ligasas conocidas habitualmente con el nombre de sintetasas de
aminocidos ARNt o enzimas activadoras de aminocidos que representan el primer paso
en el proceso biosinttico de las protenas, y que forman uniones C-O; las cido-tiol ligasas,
un ejemplo tpico de las cuales es la acetil coenzima. A sintetasa, que forma acetil coenzima.
A partir de cido actico y coenzima A ; las ligasas cido amoniaco (glutamina sintetasa),
y las ligasas cido-aminocido o sintetasas de pptidos, algunos de cuyos ejemplos ms
conocidos son la glutacin sintetasa, la carnosina sintetasa, etc.
4. Importancia del ATP (Trifosfato de adenosina)
Es importante ya que es la principal fuente de energa de los seres vivos y se alimenta de
casi todas las actividades celulares, entre ellas el movimiento muscular, la sntesis de
protenas, la divisin celular y la transmisin de seales nerviosas.
Esta molcula se encuentra en todos los seres vivos y constituye la fuente principal de
energa utilizable por las clulas para realizar sus actividades. Se origina por el metabolismo
de los alimentos en unos orgnulos especiales de la clula llamados mitocondrias.
Composicin Del ATP
El ATP se comporta como una coenzima, ya que su funcin de intercambio de energa y la
funcin cataltica (trabajo de estimulacin) de las enzimas estn ntimamente relacionadas.
La parte adenosina de la molcula est constituida por adenina, un compuesto que contiene
nitrgeno (tambin uno de los componentes principales de los genes) y ribosa, un azcar de
cinco carbonos. Cada unidad de los tres fosfatos (trifosfato) que tiene la molcula, est
formada por un tomo de fsforo y cuatro de oxgeno y el conjunto est unido a la ribosa a
travs de uno de estos ltimos.
Los dos puentes entre los grupos fosfato son uniones de alta energa, es decir, son
relativamente dbiles y cuando las enzimas los rompen ceden su energa con facilidad. Con
la liberacin del grupo fosfato del final se obtiene siete kilocaloras (o caloras en el lenguaje
comn) de energa disponible para el trabajo y la molcula de ATP se convierte en ADP
(difosfato de adenosina).
La mayora de las reacciones celulares que consumen energa estn potenciadas por la
conversin de ATP a ADP, incluso la transmisin de las seales nerviosas, el movimiento de
los msculos, la sntesis de protenas y la divisin de la clula.
Por lo general, el ADP recupera con rapidez la tercera unidad de fosfato a travs de la
reaccin del citocromo, una protena que se sintetiza utilizando la energa aportada por los
alimentos. En las clulas del msculo y del cerebro de los vertebrados, el exceso de ATP
puede unirse a la creatina, proporcionando un depsito de energa de reserva.

5. Funciones de las enzimas
En su estructura globular, se entrelazan y se pliegan una o ms cadenas polipeptdicas, que
aportan un pequeo grupo de aminocidos para formar el sitio activo, o lugar donde se
adhiere el sustrato, y donde se realiza la reaccin.
Una enzima y un sustrato no llegan a adherirse si sus formas no encajan con exactitud. Este
hecho asegura que la enzima no participa en reacciones equivocadas.
La enzima misma no se ve afectada por la reaccin. Cuando los productos se liberan, la
enzima vuelve a unirse con un nuevo sustrato.







El presente artculo cientfico es el producto de la investigacin acerca de la elaboracin de
indicadores cido-base a partir de sustancias naturales como son los vegetales, con los
objetivos de elaborar indicadores naturales para determinar las variaciones de pH en
diferentes soluciones cidobsicas, sin la necesidad de utilizar indicadores sintticos, as
como tambin determinar si se logra los rangos de pH a travs de dichos indicadores
encontrados, adems de realizar una comprobacin de las variaciones de pH de las diferentes
soluciones.

En los resultados obtenidos, se observ que los indicadores elaborados varan entre los
colores: rosa suave, verde, amarillo, caf suave, incoloro, calipso, fucsia y crema y, adems,
que los valores de pH -responsables de estas variaciones- oscilan entre 1.45 (el valor ms bajo
y, por lo tanto, el ms cido) y 8 (valor ms alto y, por lo tanto, el ms bsico).

Palabras claves: Titulacin cidobase, Pigmentos Vegetales, pH, Indicador cidobase

INTRODUCCIN

Un indicador se usa para indicacin visual del pH de una solucin. Se encuentra presente en la
solucin en concentraciones tan bajas que no afectan el pH de la misma. El color de las
soluciones que los contienen presenta variaciones; en medio cido, presenta un color,
mientras que en un medio bsico, la misma solucin muestra otro color diferente (1).

La presente investigacin cientfica ha sido realizada desde el inicio hasta su conclusin,
durante los meses de marzo de 2009 hasta junio de 2009.

De los indicadores cidobase existentes y utilizados en los laboratorios, se destacan los
denominados Indicadores Sintticos. stos son productos industrializados, elaborados por
grandes empresas y su costo es un tanto elevado. Si bien estos indicadores permiten que los
trabajos realizados con stos sean ms rpidos y, de cierta forma, influyan en la disminucin
de la utilizacin de los dems materiales usados en titulaciones cidobase, los Indicadores
Sintticos no se encuentran a disposicin de todas las personas interesadas en realizar
estudios y experimentos referentes al tema. Por otro lado, estn los Indicadores Naturales
cuya obtencin casera es bastante econmica y utiliza mtodos de extraccin bastante
sencillos.

Los indicadores cidobase resultan de difcil acceso para las personas interesadas en realizar
prcticas, debido a condiciones econmicas. Se ve entonces la necesidad de efectuar esta
investigacin cientfica con una significacin prctica de brindar factibilidad y utilidad de
nuevos conocimientos, naciente de una curiosidad que a su vez logra de cierta forma el avance
de la ciencia y contribuye tambin, de manera ms apacible, en el aspecto socioeconmico de
las personas.

MARCO CONCEPTUAL

Indicadores cido-base: "Los indicadores cido-base son cidos o bases orgnicos dbiles que
pueden usarse para detectar el punto de equivalencia en una reaccin de neutralizacin
cidobase, en virtud de que sus formas ionizadas y no ionizadas presentan colores diferentes"
(2).>

Indicador natural: Los indicadores cidobase naturales son aqullos extrados directamente
de fuentes vegetales, como ser los ptalos de las flores mediante medios de extraccin casera
como la infusin (3).

pH: "La concentracin molar de H+ (ac) en una disolucin acuosa es por lo comn muy
pequea. En consecuencia, y por comodidad, [H+] se expresa habitualmente en trminos del
pH, que es el logaritmo negativo de base 10 de [H+]" (4).

Titulacin: "Cuando se agrega una base poco a poco a una solucin de un cido, el pH de la
solucin aumenta con cada adicin de la base. Cuando se hace la grfica del pH contra la
cantidad de base agregada, el aumento ms notable ocurre en el punto de equivalencia,
cuando el cido ha sido exactamente neutralizado. Esta regin de mximo ascenso se conoce
como Punto Final, y el proceso completo de la adicin de la base y la determinacin del punto
final se llama Titulacin" (5).

Flavonoides: "Los flavonoides son pigmentos vegetales que poseen un esqueleto carbonado
C6-C3-C6 como se encuentra en la flavonona, aurona, chalcona, flavona, flavanonol, flavonol,
flavandiol 3, 4 (Leucoantocianidina), antocianidina, catequina, isoflavona y neoflavona (6).
Si los ptalos blancos de una flor se ponen amarillos en presencia de vapores de amoniaco,
deben contener flavonas y/o flavonoides. Las charconas y las auronas se viran de amarillo a
rojo. Los ptalos contienen antocianinasa viran a rojo intenso en presencia de amoniaco. Los
extractos acuosos de pigmentos tambin muestran variaciones en color cuando se les adiciona
un lcali, las flaconas, y los flavonoles se ponen amarillos, las flaconas e isoflavonas varan de
diversos tonos de rojo, las charconas a prpura rojizo, las flavoles a caf-anaranjado y las
antocianinas a azul" (7).

Se deben fundamentalmente a la proporcin que contengan de los pigmentos naturales
conocidos como antocianinas y antoxantinas. La antocianina es roja en medio cido, prpura
en medio neutro y azul en medio bsico, sin embargo la antoxantina es amarilla en medio
bsico. La proporcin en que se encuentre la mezcla de pigmentos hace que las flores tengan
distintos colores y que se puedan modificar segn el pH del medio (3).

FUENTES PRIMARIAS

Observacin: Se recoge informacin descriptiva de primera mano- acerca de los factores que
inciden en la elaboracin de indicadores naturales.

FUENTES SECUNDARIAS

Textos impresos y virtuales.

Lista de Cotejo: Herramienta impresa utilizada para la confrontacin de datos establecidos en
diferentes bibliografas respecto de los indicadores cido-base, sus variaciones de pH, adems
de sus cambios de colores (8).

PROBLEMA

La difcil accesibilidad a los Indicadores Sintticos para realizar estudios relativos al rea, cuyos
costos econmicos pueden constituirse en impedimentos para llevar a cabo con frecuencia
investigaciones cientficas.

OBJETIVOS

Objetivo General

Elaborar Indicadores Naturales a partir de sustancias vegetales, para determinar las
variaciones de pH en diferentes soluciones cidobsicas sin la necesidad de utilizar costosos
Indicadores Sintticos.

Objetivos Especficos

Obtener indicadores a partir de sustancias naturales (vegetales).

Determinar si se logra los rangos de pH a travs de los indicadores naturales encontrados.

Comprobar las variaciones de pH de las diferentes soluciones.

MATERIALES Y MTODOS

Los ptalos de Flores lilas, de Jacarand, de Cucarda rosada, de Llamarada, de Rositas
perfumadas, de Trompetitas de Oro y de las hojas del Repollo morado fueron el ingrediente
principal para la extraccin de pigmentos. Agua caliente, agua destilada e instrumentos de
laboratorio (14) como bureta 50 ml, vaso de precipitados, soporte universal, pipeta, varillas de
vidrio, vidrio de reloj, esptulas, matraz Erlenmeyer 250 ml, cido clorhdrico 0,1 N, hidrxido
de Sodio 0,1N, ftalato cido de potasio.

MTODOS DE INVESTIGACIN

Tericos

Mtodo Analtico: Consisti en la extraccin de las partes tericas de los temas: Titulaciones
cidobase e indicadores naturales, con el objeto de estudiarlos y examinarlas por separado,
para ver, por ejemplo las relaciones, propiedades, aplicaciones y utilidades de los mismos.
Estas operaciones se realizaron dependiendo la una de la otra; su estudio se efectu entonces
a partir de la relacin entre los elementos que conforman dichos temas como un todo; a su
vez, el anlisis se produce sobre la base de los resultados previos a ste (9).

Mtodo Sinttico: Es el proceso mediante el cual se relacionan ciertos hechos como las
propiedades y utilidades de los pigmentos vegetales, a partir de los cuales se formul una
teora acerca de sus aplicaciones como indicadores cidobase y se estableci una explicacin
tentativa que someti a prueba (10).

Mtodo Lgico: Consisti en inferir la semejanza de algunas caractersticas entre dos objetos
como ser las variaciones de colores tabuladas, propias de los indicadores sintticos y las
esperadas y obtenidas de los indicadores naturales, la probabilidad de que las caractersticas
restantes sean tambin semejantes (10).

Empricos

Observacin: Es la tcnica que consiste en observar atentamente el fenmeno, hecho o caso,
tomar informacin y registrarla para su posterior anlisis. La observacin es un elemento
fundamental de todo proceso investigativo; a travs de ella, cuidadosamente se consigui
obtener datos, claros, definidos y precisos (11).

Medicin: Se desarrolla con el objetivo de obtener la informacin numrica acerca de los
procesos y de los resultados de la investigacin, donde se compararon magnitudes medibles y
conocidas acerca de los pH tabulados en bibliografas establecidas, con los resultados
obtenidos a partir de los experimentos realizados atribuyndoles valores y sus respectivas
unidades (10).

Descriptivo: Forma de estudio utilizada para saber quin, cmo, dnde, cundo y por qu del
sujeto del estudio. En otras palabras, la informacin obtenida en un amplio estudio basado en
varias bibliografas ya existentes (sin caer en error de tener una simple idea vaga respecto al
tema) para conocer y explicar perfectamente al tema de investigacin, conceptos, etc. (12).

Para la etapa especficamente prctica-experimental, se utilizaron:

Mtodo de Decoccin: Consiste en colocar la hierba (hojas o flores) en un vaso de recipiente,
aadir agua fra, hervir durante 10 a 20 minutos, dejar reposar por ms de 10 minutos y filtrar
(13).

Mtodo de Infusin: Consiste en hervir agua y verter sta sobre la hierba en un recipiente;
tapar el recipiente, dejar reposar por 15 minutos y filtrar (14).

RESULTADOS

A continuacin, se detallan los 7 Indicadores Naturales elaborados a partir de las hojas y
ptalos de diferentes especies vegetales, segn sus caractersticas ms llamativas:

Flores Lilas
Las variaciones que sufren, tanto en el color y como en el pH durante la Titulacin, viran desde
color rosado suave en presencia de un pH cido igual a 1.62 hasta el color verde en presencia
de un pH neutro igual a 7.

Jacarand
Las variaciones que sufren, tanto en el color y como en el pH durante la Titulacin, viran desde
color rosado suave en presencia de un pH cido igual a 1.6 hasta el color verde en presencia de
un pH igual a 6 muy prximo al neutro.

Cucarda rosada
Las variaciones que sufren tanto en el color y como en el pH durante la Titulacin, viran desde
incoloro en presencia de un pH cido igual a 1.6 hasta el color verde en presencia de un pH
neutro igual a 7.

Llamarada
Las variaciones que sufre, tanto en el color y como en el pH durante la titulacin, viran desde
color caf suave en presencia de un pH cido igual a 1.6 hasta el color amarillo en presencia de
un pH igual a 6 muy prximo al neutro.

Rositas perfumadas
Las variaciones que sufren, tanto en el color y como en el pH durante la titulacin, viran desde
color rosado suave en presencia de un pH cido igual a 1.5 hasta el color verde en presencia de
un pH igual a 5.

Repollo morado
Las variaciones que sufren, tanto en el color y como en el pH durante la titulacin, viran desde
color fucsia en presencia de un pH cido igual a 1.45 hasta el color calipso en presencia de un
pH igual a 6 muy prximo al neutro.

Trompetitas de oro
Las variaciones que sufren, tanto en el color y como en el pH durante la Titulacin, viran desde
color crema en presencia de un pH cido igual a 1.45 hasta el color amarillo en presencia de un
pH bsico igual a 8.

Tabla #1



Fuente: Elaboracin propia, 2009

DISCUSIN

Mientras que los Indicadores Sintticos presentan un rango de pH desde 0 11,7 con la
variacin de colores desde amarillos, violeta, rojo, azul, rosado e incoloro, los Indicadores
Naturales presentan un rango de pH ms pequeo que va desde los 1,45 8 con la variacin
de colores desde rosado, verde, incoloro, caf, amarillos, fucsia, crema y calipso.

En una primera instancia, este experimento fue realizado por Mtodo de Decoccin con
alcohol. La extraccin de los pigmentos vegetales fue ms notoria a simple vista, pero los
resultados de las titulaciones realizadas con stos resultaron ms variables e inestables. Valga
destacar este aspecto para investigaciones y/o mejoras futuras.

En segunda instancia, realizamos la extraccin de los pigmentos mediante el mtodo de
infusin (agua caliente) junto con una gran variedad de plantas y sus partes como las flores y
hojas que contienen colores vistosos. Sin embargo, de todos los indicadores obtenidos slo un
75% funcion correctamente; el 25% restante de estos indicadores no presentaron ningn
cambio de color en presencia de soluciones cidas o alcalinas: Esto se debe a que -a nivel
celular (de los vegetales)- diferentes tipos de pigmentos se hallan en diversas estructuras
celulares y algunos de stos cumplen funciones distintas a la de los pigmentos, que son tiles
como indicadores cidobase. Como ejemplo, se menciona los pigmentos antocianos que le
dan colores rojos o azules a las flores y hojas y sirven perfectamente como indicadores cido
base. Por otro lado, los carotenos que dan los colores rojos, anaranjados a frutos y races como
la zanahoria, son precursores de la vitamina A y no son tiles como Indicadores Naturales.

Esta investigacin, que result ser muy didctica, interesante e importante, permiti tener una
visin ms amplia acerca de los recursos naturales que tenemos a nuestro alcance, y muchas
veces, menospreciamos. Cabe destacar este aspecto para que los lectores tomen conciencia de
nuestros valiossimos recursos naturales y se atrevan a realizar nuevas incursiones en estos
campos.

CONCLUSIONES

Los objetivos planteados en esta investigacin fueron exitosamente cumplidos:

Se logr extraer indicadores naturales a partir de sustancias vegetales y determinar sus
variaciones de pH en diferentes soluciones cido bsicas.

Se determin varios rangos de pH a travs de los indicadores naturales encontrados.

Se comprob las variaciones de pH de las diferentes soluciones.

RECOMENDACIONES

Se recomienda:

Usar soluciones de acido clorhdrico 0,1 M e hidrxido de sodio 0,1 M estandarizadas.

No preparar Indicadores Naturales con alcohol porque se observan cambios bruscos del pH.

Ilustrarse acerca de las propiedades y los usos de las plantas antes de realizar experimentos
con ellas.

AGRADECIMIENTOS