BIOTECNOLOGA

NDICE
APARTADOS

Introduccin

a) Explicacin del ADN combinante.

b) Explicar la obtencin de vacunas.

c) Explicar la obtencin de trans!nicos.

d) "onocer alunos e#emplos de

aplicacin de la aricultura $ la
me#ora del medio ambiente.
INTROD%""I&N
La ingeniera gentica se
define como el estudio y
manipulacin de los genes
de organismos vivos para
mejorar la vida del
hombre. Y actualmente
tiene importantes
aplicaciones en diversas
reas.
A) Explicacin del ADN
El ADN recombinante' o ADN recombinado' es una mol!cula
de ADN arti(icial (ormada de manera deliberada In )itro por
la unin de secuencias de ADN provenientes de dos
oranismos de especies di(erentes *ue normalmente no
se encuentran #untos. Al introducirse este ADN
recombinante en un oranismo se produce una
modi(icacin en!tica *ue permite la adicin de un nuevo
ADN al oranismo conllevando a la modi(icacin de rasos
existentes o la expresin de nuevos rasos. +a produccin
de una prote,na no presente en un oranismo determinado
$ producidas a partir de ADN recombinante se llaman
prote,nas recombinantes.
El proceso de produccin de un ADN recombinante
comien-a con la identi(icacin desde un oranismo de
una secuencia de ADN de inter!s con el (in de
propaarlo en otro oranismo *ue carece de la
secuencia $' por ende' del producto prot!ico de esa
secuencia de ADN. As, se pueden producir cantidades
ilimitadas de la prote,na codi(icada por el susodic.o
en . En t!rminos simples' el procedimiento consiste
en/
+ocali-acin de enes $ sus (unciones.
"lonacin del AD! $ su posterior almacenamiento en
enotecas.
Reaccin en cadena de la polimerasa
0P"R)
Utilizacin de vectores de expresin.
El vector que se utiliza contiene secuencias de ADN que al ser
replicadas confieren resistencia a antibiticos especficos. Esta
tcnica ha sido ampliamente utilizada en el campo de la
medicina ha permitido el desarrollo de importantes avances
teraputicos como por e!emplo la produccin de insulina
recombinante.
"on el uso de ADN recombinante se ha lo#rado obtener plantas
trans#nicas resistentes a insectos$ hon#os$ bacterias
herbicidas$ con me!ores caractersticas de calidad durante
poscosecha con alto contenido.
Produccin y terapia con protenas recombinantes
%ara que estas protenas sean &tiles desde el punto de vista
teraputico tienen que conservar su actividad. Adem's$ se debe
evitar que sean inmuno#nicas para el ser humano. %ara ello es
importante decidir para cada protena recombinante cual es el
or#anismo de expresin m's adecuado.
Produccin en bacterias
Estas protenas recombinantes han intentado expresarse en
bacterias como E. coli$a que son f'ciles de mantener$ crecen
r'pido se conoce bien su #enoma. (in embar#o$ el maor
problema que presenta la produccin en bacterias es que en ellas
no existe #licosilacin proteica$ por lo que al#unas protenas
producidas en bacterias pierden totalmente su funcin. A&n as se
han lo#rado producir con xito al#unas protenas recombinantes
en bacterias.
Produccion en levaduras
Al ser clulas eucariotas por lo tanto m's similares a las humanas que
las bacterias ser mu f'ciles de emplear industrialmente$ las levaduras
constituen otro #rupo de or#anismos susceptibles de producir protenas
recombinantes para uso humano. (in embar#o$ aunque s presentan
#licosilacin proteica$ al contrario que las bacterias$ esta es totalmente
distinta a la humana$ por lo que estas protenas presentan problemas$
en muchos casos incluso inmuno#nicos.
Produccin en clulas de insecto
)'s cercanas a&n a las clulas humanas que las levaduras son las de
insecto$ como las de (podoptera fru#iperda$ que se cultivan f'cilmente
in *itro$ aunque el medio de cultivo es caro. Dicho medio$ adem's$ no
contiene suero$ lo que hace m's f'cil el procesado de la protena. +tra
de las propuestas ha sido el uso no de clulas de insecto$ sino de los
insectos completos para la produccin de estas protenas. %ara ello se
infectan a los insectos con baculovirus modificados para que expresen la
protena recombinante. (in embar#o$ este sistema presenta
exactamente el mismo problema que el de levaduras, que las clulas de
insecto presentan #licosilacin$ pero esta es totalmente distinta a la de
mamferos.
-. /a obtencin de vacunas.
/a vacuna es un preparado de ant#enos que una
vez dentro del or#anismos provoca la produccin
de anticuerpos con ello una respuesta de defensa
ante microor#anismos pat#enos. Esta respuesta
#enera$ en al#unos casos$ cierta memoria
inmunitaria produciendo inmunidad transitoria
frente al ataque pat#eno correspondiente. /a
primera vacuna descubierta fue la usada para
combatir la viruela por Ed0ards 1enner en 2345.
"/A(676"A"68N,
9 *acunas vivas o atenuadas.
Una vacuna atenuada consiste en utilizar uno o varios a#entes
infecciosos vivos homlo#os cua virulencia haa sido atenuada$ de
manera que sin producir nin#una lesin secundaria al animal$ induzca
inmunidad duradera frente al a#ente homlo#o virulento.
9*acunas muertas o inactivadas.
/as vacunas inactivadas est'n formadas por el o los microor#anismos
completos pero inactivado por al#&n mtodo fsico o qumico. Estas
vacunas$ presentan como principales venta!as$ frente a las vacunas
atenuadas$ su estabilidad se#uridad$ as como su conservacin. (in
embar#o$ suelen inducir una respuesta inmunitaria menor que las
vacunas atenuadas.
):;+D+ DE +-;EN"68N,
1. Vacunas avirulentas preparadas a partir de formas no peligrosas del
microorganismo patgeno.
2. Vacunas posificadas a partir de organismos muertos o inactivos.
3. Antgenos purificados: Teniendo en cuenta que las bacterias y virus
contienen numerosos antgenos constitutivos de los cuales solo algunos
est!n relacionados con los fenmenos de inmunidad adquirida es evidente
que la vacuna ideal seria la preparada e"clusivamente con los antgenos
inmuni#antes eliminando los dem!s antgenos y sustancias que no solo no
intervienen en la inmuni#acin sino que adem!s pueden interferir y ser
causa de acciones secundarias. $os avances logrados en el %ltimo decenio
en el campo de la inmunoquimica &an permitido obtener los antgenos
inmuni#antes de algunas especies bacterianas con un elevado grado de
pure#a lo que &a &ec&o posible la preparacin de nuevas vacunas.
'. Vacunas gen(ticas.
Fase preparatoria de la vacunacin:
normas generales
!Comprobar las caractersticas del producto "ue se va a administrar#
!$odo de conservacin.
!%orma de administracin.
!&a de administracin.
!'u(ar de administracin.
!%ec)a de caducidad.
!Comprobar el aspecto *sico de la vacuna
!Al(unos productos biol(icos lio*ili+ados tienen, tras su reconstitucin, una
valide+ limitada y son vulnerables a la lu+ y al calor.
!A(itar enr(icamente las vacunas )asta conse(uir la )omo(enei+acin del
producto .
!Ele(ir la a(u-a adecuada se(.n la va de administracin, la edad del paciente,
el lu(ar anatmico y el tipo de vacuna.
!/tili+ar -erin(as y a(u-as estriles de un solo uso desec)0ndolas tras su
utili+acin.
!No me+clar varias vacunas en las mismas -erin(as.
!Para la limpie+a de la piel se utili+ar0 a(ua destilada.
!En un mismo acto vacunal slo se administrar0 una inyeccin por miembro.
".DE76"68N DE +<=AN6()+(
;<AN(=:N6"+(
/a obtencin de un trans#nico implica la participacin de
un or#anismo que dona el #en de inters un
or#anismo receptor del #en que expresar' la nueva
caracterstica deseada.
/A( E;A%A( DE/ ;<A-A1+
1) Corroborar "ue existe un (en "ue codi*ica para la caracterstica de inters
"uando se encuentra una caracterstica en un or#anismo que resulta interesante
para transferir a otro or#anismo debe verificarse que es producto de un #en.
2) Clonado del (en
Una vez que se determin que el or#anismo donante posee un #en que codifica
para la caracterstica de inters$ los bilo#os moleculares se lanzan a la tarea de
conse#uir ese #en$ es decir, >clonar? el #en. /a tarea de clonar involucra varias
tcnicas que se describen a continuacin,
i) Extraccin de ADN.
ii) -&squeda de un #en entre la mezcla de #enes del ADN. /a tcnica de %"<
permite amplificar la cantidad de ADN esto facilita el clonado del #en de inters.
iii) (ecuenciacin.
iv) "onstruccin del vector recombinante
/A( E;A%A( DE/ ;<A-A1+
@. )odificar el #en
/a venta!a de tener el #en clonado en un vector$ es que se puede transferir a
una bacteria que$ al multiplicarse en el laboratorio$ tambin multiplica al
vector que porta.
A. ;ransferir el #en al or#anismo receptor
El #en de inters se puede introducir en clulas ve#etales o animales dar
lu#ar a la formacin de un or#anismo #enticamente modificado B+=). o
trans#nico. En la produccin de estos cultivos ha una primera etapa en la
que se introduce el #en de inters en las clulas ve#etales. Este proceso
tambin se denomina transformacin. /a se#unda etapa consiste en
re#enerar una planta completa a partir de la &nica clula transformada.
Existen varias tcnicas para transferir #enes a clulas de mamferos con el
ob!etivo de que se inte#re al #enoma. Una de ellas es la microineccin del
ADN de inters directamente en un vulo fecundado.
/A( E;A%A( DE/ ;<A-A1+
C. "aracterizar el or#anismo receptor transformado.
Una vez obtenido el +=)$ se debe demostrar$ entre otras cosas$ si
tiene una Bo m's. copias del trans#n$ cmo en qu te!idos se
expresa el #en. %ara lo#rarlo se extrae el ADN del or#anismo se
lo analiza. . /a tcnica de %"<$ a explicada$ permite amplificar el
trans#n$ si es que est' en el #enoma del or#anismo$ es una
tcnica r'pida para verificar si el or#anismo ha sido transformado
o no.
D) E-emplos de aplicacin de la a(ricultura y la me-ora
del medio ambiente.
/a biotecnolo#a ve#etal es una extensin de la tradicin de modificar las
plantas$ con una diferencia mu importante, la biotecnolo#a ve#etal permite la
transferencia de una maor variedad de informacin #entica de una manera
m's precisa controlada. Al#unas aplicaciones de la biotecnolo#ia como la
alimentacion el malteado$ se han utilizado durante milenios. +tras son m's
recientes$ pero est'n i#ualmente consolidadas. %or e!emplo$ durante decenios
se han utilizado microor#anismos como f'bricas vivas para la produccin de
antibiticos destinados a salvar vidas humanas$ entre ellos la penicilina$
obtenida a partir del hon#o %enicillium$ la estreptomicina$ obtenida a partir
de la bacteria (treptomces. /os deter#entes modernos se basan en enzimas
producidas por medios biotecnol#icos$ la produccin de queso de pasta dura
se basa en #ran medida en cua!o producido mediante levaduras
biotecnol#icas la insulina humana para los diabticos se produce
actualmente #racias a la biotecnolo#a.
'a biotecnolo(a y la me-ora del medio ambiente
/a biotecnolo#a ofrece muchas posibilidades para la me!ora del
medio ambiente.
Una de las aplicaciones m's
interesantes es la eliminacin de
metales pesados en los ecosistemas.
Existen microor#anismos capaces de
metabolizarlos hacerlos
desaparecer.De la misma forma$ la
eliminacin de las mareas ne#ras se
puede llevar a cabo por bacterias
capaces de di#erir los hidrocarburos
del petrleo$ con una #ran eficacia.
Estas mismas bacterias son aplicables
al tratamiento de diferentes tipos de
contaminacin asociados a la industria
del petrleo$ as como a las
separaciones selectivas de mezclas de
hidrocarburos.
;ambin en relacin con la lucha contra los contaminantes$ es
posible utilizable microor#anismos para el tratamiento de la
contaminacin producida por herbicidas$ pesticidas e insecticidas$
as como para el procesado de diferentes tipos de residuos
urbanos e industriales.
Existen microor#anismos que podran ser utilizados para ensaos
sobre la toxicidad de diversos compuestos en la naturaleza$
deteccin de metales$ recuperacin de metales preciosos$ etc.
%or &ltimo$ una aplicacin de la maor importancia es el uso de
diversas especies de microor#anismos seleccionados mediante
tcnicas biotecnol#icas$ para la produccin de ener#a. (e
conse#uira as una fuente de ener#a barata no contaminante.
/a biotecnolo#a ambiental se ocupa de la aplicacin de los
procesos biotecnol#icos para prote#er mantener la calidad del
medio ambiente.
$icroor(anismos y medio ambiente
Diversas tcnicas biotecnol#icas permiten resolver$ de diferentes
novedosas maneras$ el problema de la contaminacin ambiental.
(e pueden utilizar diversos microor#anismos para afrontar
problemas de tratamiento control de la contaminacin qumica
en los ecosistemas$ a que al#unos de ellos$ principalmente
bacterias$ tienen la capacidad de eliminar del medio o de#radar
con enzimas #ran n&mero de compuestos txicos peli#rosos.
En la actualidad en los laboratorios se est'n creando bacterias$
levaduras enzimas especficas para conse#uir la de#radacin
de los residuos mediante las si#uientes tcnicas,
3iometani+acin. Es un proceso de
di#estin anaerobia Bsin ox#eno. de la
materia or#'nica por microor#anismos$
que la descomponen dando lu#ar a una
mezcla de #ases$ principalmente metano
dixido de carbono.
'a(unas de estabili+acin. (e utilizan bacterias al#as para
depurar residuos lquidos por procesos naturales.
%iltros percoladores. "on filtros que contienen una poblacin
de microor#anismos que de#radan la materia or#'nica que haa
en el residuo.
76N
45E END