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La biologa de la rizosfera a travs de La biologa de la rizosfera a travs de

un papel de cromatografa un papel de cromatografa


Cd. Guerrero, Chih., Febrero 2009
M.C. Armenia Velzquez Gurrola
Gerente de Agrobiolgicos
InnovakGlobal
Ehrenfried Pfeiffer Ehrenfried Pfeiffer
(1899 (1899- -1961) 1961)
Desarroll los mtodos de formacin de
imgenes: imgenes:
Cristalizacin sensible: amplia investigacin,
aplicacin en medicina y en sanidad vegetal
Dinamlisis capilar: utilizada para distinguir
entre productos orgnicos y convencionales
Cromatografa en papel circular Cromatografa en papel circular
(cromas): (cromas): Amplia aplicacin en
agricultura, composteo y manejo de suelos
Cromatografa
La cromatografa en papel es un proceso
utilizado en los laboratorios como anlisis
cualitativo
La fase estacionaria se constituye por una
tira de papel de filtro.
La muestra se deposita en un extremo y
luego el solvente empleado se hace luego el solvente empleado se hace
ascender por capilaridad.
Se coloca la tira de papel verticalmente y
con la muestra del lado de abajo dentro de
un recipiente que contiene el solvente en el
fondo.
Despus de unos minutos cuando el
solvente deja de ascender, se retira el
papel y seca.
Cromatografa en papel horizontal: Cromatografa en papel horizontal:
CROMAS CROMAS
La muestra sube por
capilaridad por un pistilo,
y se extiende
horizontalmente a travs
del papel
PASO 1.
Deshidratar la muestra a 70C por 24 h (Suelo o tejido vegetal)
Moler en mortero con pistilo (suelo)
Moler en licuadora hasta obtener un polvo fino y homogneo (tejido vegetal)
PASO 2.
Preparar una solucin de
nitrato de plata al 0.5 %
Preparar una solucin de
Hidrxido de Sodio (sosa
custica), al 0.1-0.5 %
El nitrato de plata puede almacenarse e incluso reciclarse, pero la
solucin alcalina deber prepararse al momento de utilizarse para que
sea lo ms fresca posible
PASO 3.
Mezclar 5 g de la muestra seca y molida en 50 mL de la solucin
alcalina al 0.1-0.5%
PASO 4.
Agitacin manual
TIEMPOS DE AGITACIN MANUAL
A tiempo 0
Reposo Reposo
A los 15 minutos de iniciada la extraccin
Reposo
A los 60 minutos despus de la ltima
agitacin
Reposo de 4 horas
PASO 5.
Impregnar con nitrato de plata el papel filtro, hasta la primera marca, dos
horas antes de que finalice el ltimo reposo
Cmara hmeda Cmara hmeda
Puede fabricarse de diferentes
materiales, o formas para correr
dos o ms cromas al mismo
tiempo
Humedad relativa constante
entre 70 y 80 %
21-26C de temperatura
Altura de 12-15 cm
PASO 6.
Colocar la muestra en la caja pequea
Impregnar el pistilo con la muestra y dejar correr en
cmara hmeda, hasta que toque la segunda marca
del papel
Aplicaciones
Qu pasa en el suelo? Qu pasa en Qu pasa en el suelo? Qu pasa en
la rizosfera? la rizosfera?
Anlisis nutricionales (foliares y suelo)
Anlisis microbiolgicos, microorganismos
benficos y patgenos
?
Qu pasa en el suelo? Qu pasa en Qu pasa en el suelo? Qu pasa en
la rizosfera? la rizosfera?
Manejo convencional
1 ao con t de composta
+
4 aos con t de composta
+
Cromas del suelo rizosfrico de manzano.
Muestran el mismo patrn de formacin de imagen.
Los anlisis microbiolgicos tampoco mostraron diferencias significativas
Qu pasa en el suelo? Qu pasa en Qu pasa en el suelo? Qu pasa en
la rizosfera? la rizosfera?
Manejo convencional
1 ao con t de composta
+
4 aos con t de composta
+
Cromas de la rizosfera: raz + suelo rizosfrico
Diferencias evidentes y congruentes con lo observado en campo
Cambios en la rizosfera a travs de los aos.los microorganismos se
mueren, pero dejan su obra.
Lo que ocurre en la rizosfera, impacta el Lo que ocurre en la rizosfera, impacta el
estado general de salud del cultivo estado general de salud del cultivo
Cromas de peciolo de tomate: manejo convencional vs t de composta + ExuRoot
Lo que ocurre en la rizosfera, impacta el Lo que ocurre en la rizosfera, impacta el
estado general de salud del cultivo estado general de salud del cultivo
Cromas de tallo de tomate: manejo convencional vs t de composta + ExuRoot
Gua de interpretacin de cromas Gua de interpretacin de cromas
1. Zona central. Indicador del contenido de oxgeno en las
sustancias.
2. Zona interna. Indicador de materia orgnica y formacin
humus.
3. Zona media. Indicador de procesos de transformacin en
las sustancias.
4. Zona externa o final. Indicador de nitrgeno enlazado y
de formas estables de coloides del humus del suelo
(humatos estables).
5. Formacin de picos. Indicador de rompimiento y
procesos de formacin de molculas.
6. Hoyos en forma de cereza. Indicador de materia viva,
no aparece en materiales sintticos.
7. Radiacin. Indicador de actividad enzimtica y/o
actividad biolgica en una muestra
8. Manchas oscuras. Indicador de protenas y nitrgeno
orgnico.
Interpretacin de cromas Interpretacin de cromas
Importante hacer cromas patrn o cromas de referencia
-Suelo frtil
-Suelo estril
-Suelo compacto
-Suelo enfermo, etc. -Suelo enfermo, etc.
La gua de interpretacin anterior,
No aplica para cromas de tejidos vegetales.
Tambin es necesario hacer cromas patrn
Plantas sanas, enfermas, productivas, etc.
La rizosfera vista a travs de un
papel de cromatografa..
Luis Medina Vega (QEPD)
Gracias!

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