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Preparaciones

Microbiolgicas
Preparaciones en fresco (microorganismos vivos)
Preparaciones fijas y teidas (microorganismos muertos)
Frotis
Una capa delgada de muestra extendida sobre un
portaobjetos que permite el paso de la luz a travs de ella.
Impronta
Gota de cultivo
lquido
Cultivo slido
resuspendido
Frotis sanguneo
Cinta adhesiva
transparente
Hisopo
Tinciones
Positivas
Se observa teida la clula
sobre un fondo claro.
Negativas
El fondo se tie de oscuro
para observar clulas o
estructuras refringentes.
Frotis Sanguneo
Cryptococcus neoformans
Tinciones
Simples
Se utiliza un solo colorante
(bsicos).
- Azul de metileno
- Safranina
- Cristal violeta
Compuestas
Se utilizan dos ms
colorantes. Pueden usar
mordentes y decolorantes
- Giemsa
- Wrigth
- May Grnwald
(Eosina-Azul de metileno)
Bacillus
megaterium. Tincin
simple con cristal
violeta.
Frotis sanguneo con
Yersinia pestis.
Tincin de Wrigth.
Mdula sea.
Tincin de May
Grnwald-
Giemsa.
Trypanosoma sp
en sangre.
Tincin de
Wrigth.
Tinciones
Tincin negativa de
Cpsula
Selectivas
Son utilizadas para dar
color y aislar partes
especficas de los
microorganismos
- Endosporas
- Flagelo
- Ncleo
Tincin
negativa de
cpsula.
Streptococcus
pneumoniae.
Tincin de
endosporas.
Bacillus subtilis.
Tincin de
flagelos.
Proteus sp
Tinciones
Diferenciales
Reaccionan de manera
diferente entre las distintas
clases de bacterias.
- Ziehl-Neelsen
- Gram
Tincin de
Ziehl-Neelsen.
Tincin de
Gram.
Tincin de
Gram.
Colorantes
Compuestos coloridos que al combinarse con otras sustancias les
imparten color; estn formados por un grupo cromforo que es la
parte responsable del color, y un grupo auxcromo que al formar
sales le permite disociarse y combinarse. Mordente : compuesto
qumico intensificador de color.
cidos.
El cromforo es el anin de
la molcula.
Bsicos.
El cromforo es el catin
de la molcula.
Br
NaO
Br
O
Br
O
Br
COO
-
Na
+
Eosina
N
S
(CH
3
)
2
N
N(CH
3
)
2
+
Cl
-
Azul de metileno
Tcnicas de tincin
Tincin simple
Colorante bsico
(1 minuto)
Enjuagar con agua
Frotis
Bacillus anthracis
Tincin simple con
cristal violeta.
Staphylococcus
aureus.Tincin
simple con azul
de metileno.
Neisseria
gonorrhoeae.
Tincin simple con
safranina.
Pseudomonas
aeruginosa.
Tincin simple
con safranina.
Tcnicas de tincin
Tincin de cpsula
Extendido
Muestra + tinta china o
nigrosina
Safranina de Gram o
Cristal Violeta (1 minuto)
Secar al aire
Streptococcus pneumoniae
Acinetobacter calcoaceticus
Tcnicas de tincin
Verde de maquila 5% con
emisiones de vapor de
agua (10 minutos)
Lavar con agua
Safranina 0.5% (1minuto)
Tincin de endosporas
Bacillus subtilis
Clostridium tetani
Tcnicas de tincin
Tincin de flagelo
Colorante primario. Para-
rosa anilina
Mordente. Acido
tnico
Colorante de
contraste. Azul de
metileno
Proteus vulgaris
Vibrio cholerae
Colorante primario. Cristal
violeta 1% en solucin de
oxalato de amonio al 0.85%
(1 minuto)
Colorante de contraste.
Safranina 0.25% (1 minuto)
Mordente. Lugol I/KI 1g/2g
en 300 mL de agua (1 minuto)
Decoloracin. Alcohol-Acetona
70:30. Hasta eliminar el exceso
de colorante
Tcnicas de tincin
Tincin de Gram
Streptococcus pyogenes
Bacilos Gram
negativos y levaduras
Tcnicas de tincin
Colorante primario. Fucsina
fenicada con emisiones de
vapor de agua (10 minutos)
Colorante de contraste.
Azul de metileno de Loeffler
(1 minuto)
Decoloracin. Alcohol-Acido
(etanol-HCl) 97:3. Hasta eliminar
el exceso de colorante
Tincin de Ziehl-Neelsen
Mycobacterium tuberculosis
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