FACULDADES UNIDAS DO NORTE DE MINAS FUNORTE

FACULDADES DE CIENCIAS BIOLOGICAS E DA SAUDE FACIBIOS

7 PERODO DE FARMCIA
PROF.: RAFAEL
RELATRIO
MICROBIOLOGIA CLNICA
Acadmc!":
Ad#d"!$ D#$#%
B%&$! M!%a#"
B%&$! O'(#%a
Da$#' F#%$a$d#"
G&")a(! G!$*a'(#"
+#')!$ O'(#%a
MONTES CLAROS MG
,&$-! d# .//0
No primeiro dia do ms de Junho, iniciou-se o estgio de microbiologia
clnica, que foi desenvolvido no Campus Amazonas pelas aculdades !nidas
do Norte de "inas,sendo assim desenvolvida por n#s, alunos do $% perodo do
curso de farmcia e administrado pelo professor&'afael, que o encerrou no
d(cimo s(timo dia do mesmo ms do ano de )**+,-endo como ob.etivo
estudar as teorias e as prticas de microbiologia clnica,
P%#1a%! d# "!'&*2#" d#"$3#)a$)#": 41!c'!%)! d# "5d! a /67 8 # a . 89
:'c!!' a 7/ 8 ;1<1=
oi realizado a prtica de /reparo de solu01es desinfetantes6 onde
utilizou-se o hipoclorito de s#dio a *,23 e a )3, sendo que para preparar uma
solu04o percentual de hipoclorito deve-se levar em conta a concentra04o de
cloro ativo indicada no r#tulo do hipoclorito que se tem disponvel, /ara
realiza04o destes utilizou-se as seguintes f#rmulas&
#rmulas para clculo do volume necessrio do hipoclorito disponvel,
uma vez que&volume necessrio do 5d 6 785 9 3 de cloro ativo dese.ado
3 de cloro ativo do 5d
5d 6 hipoclorito disponvel
785 6 volume final da solu04o de hipoclorito no percentual de cloro ativo
dese.ado,
#rmula para clculo do volume de gua a ser adicionado ao 5d para
obter o hipoclorito no percentual de cloro ativo dese.ado, uma vez que &volume
de gua a ser adicionado 6 785 : volume necessrio de 5d 5ipoclorito no
percentual dese.ado 6 volume necessrio de 5d ; volume de gua
'c!!' #)>'c! a 7/8 ;1<1=
oi realizada a prtica preparo de solu0a lcool etlico $*3<p=p> , onde
para se obter um peso final de ?** g de solu04o de lcool etlico a $*3, foi
preciso pesar $* g de lcool etlico /A e completar com gua destilada at(
atingir ?** g , @ peso de $* g de lcool etlico /A corresponde a
apro9imadamente $$ ml, mas para se preparar a solu04o a $*3 admiti-se a
utiliza04o de $$ ml de lcool etlico /a mais )A ml de gua destilada,/ara-se
preparar outros volumes como& 8e $$ ml de lcool est para ?** ml de
solu04o final , quantos ml de lcool ser4o necessrios para preparar ?** ml de
solu04o final,
Bac)#%!"c!1a c!'!%a*?! d# GRAM
oi realizado a observa04o de microrganismos ao microsc#pio #ptico
com a utiliza04o de corantes facilita a visualiza04o da morfologia celular, @s
corantes s4o utilizados para aumentar o contraste das c(lulas em rela04o ao
meio em que se encontram,
Na colora04o de B'A" s4o utilizadas quatro solu01es& cristal violeta,
lugol, lcool e fucsina, as quais s4o aplicadas sequencialmente ao esfrega0o
fi9ado a uma lCmina,
@ primeiro corante a ser utilizado ( o cristal violeta que cora todas as
bact(rias, o lugol fi9a o corante anterior atrav(s da forma04o de cristais, o
lcool descolore as bact(rias B'A" :, que possuem delgada parede celular de
peptdeoglicanaD enquanto as B'A" ; permanecem coradas, por possurem
espessa camada de peptdeoglicana, o que impede a sada do cristal violeta,
Como as B'A" - est4o incolores, h a necessidade da utiliza04o da ucsina,
que tem afinidade pela parede celular das bact(rias B'A" -, corando-as de
rosa, Eevido Fs diferen0as na estrutura qumica e estrutura da parede celular
das bact(rias ( possvel diferenciar estes dois grandes grupos de bact(rias,
P#"@&"a d# Aac'! :'c!!'B:cd! %#"")#$)# B BAAR
'ealizou-se a /esquisa de bacilo lcool-cido resistente tamb(m conhecida
como Giehl-Neelsen, ( uma colora04o diferencial para um grupos de bact(rias
especficos, as micobact(rias,
Hsta t(cnica baseia-se na estrutura da parede celular rica em lipdeos
<cido mic#lico>, destas c(lulas, @ diagn#stico da tuberculose e da lepra ( feito
atrav(s desta t(cnica,
As c(lulas bacterianas quando tratadas com ucsina fenicada a quente,
coram-se de vermelho e persistem mesmo ap#s o descoramento subseqIente
por uma solu04o de lcool-cido forte <diferenciador>, No entanto as outras
bact(rias que n4o s4o lcool-cido resistente descoram-se, por isso, utiliza-se
o azul de metileno que as coram de azul, 8endo possvel diferenciar as lcoo-
cido resistentes das demais bact(rias,
Id#$)3ca*?! Aac)#%a$a
@ procedimento isolamento e a identifica04o de bact(rias au9iliam o
tratamento de doen0as infecciosas, uma vez que s4o causadas por bact(rias
diferentes e que cada uma requerem uma aten04o especial,
A primeira t(cnica utilizada para a identifica04o de cocos B'A"
positivos ( a colora04o diferencial de B'A", Com este procedimento (
possvel diferencial as bact(rias B'A" positivas das B'A" negativas, al(m
da observa04o da morfologia da c(lula bacterianaD diferenciando-as em cocos,
bacilos, espiroquetas, cocobacilos,
Ap#s a identifica04o da forma e do tipo de B'A" a que a bact(ria
pertence, ( possvel identificar a famlia, atrav(s de testes bioqumicos como o
da catalase, Com este teste pode-se diferenciar Staphylococcus que s4o
catalase positivos <libera04o de gases quando tratadas com gua o9igenda > de
Streptococcus que s4o catalase negativos <n4o ocorre libera04o de gases>. A
identifica04o da esp(cie pode ser realizada pela prova da coagulase, como por
e9emplo& Staphylococcus aureus coagulase positiva. @u se.a, esta bact(ria
coagula um plasma ?**3 de protrombina,
Eesta forma, pode-se se concluir que cada bact(ria tem aspectos
qumicos e fsicos diferentes que devem ser considerados nos testes de
identifica04o,
S#c%#*2#" C#$)a"
A preven04o e a melhor alternativa para diminuir a incidncia das
doen0as se9ualmente transmissveis e da aids 84o vrias as doen0as,
causadas por microorganismos, que atacam os #rg4os genitaisD o que .ustifica
a importCncia do hist#rico do paciente e e9ames laboratoriais de secre01es
genitaisD como importantes fontes de informa04o para o tratamento destas
enfermidades,@ paciente deve ser tratado com simpatia e cordialidade, e9plicar
o procedimento, transmitir tranqIilidade,o uso de antibi#ticos<interfere nos
resultados>, 8e estiver usando esperar $ dias para a coleta,
Jdentifica04o de lCminas, placas e tubos e em todas as vias que forem
utilizadas,Clamidia e gonococita& 8ecre04o uretral para homens e mulher
secre04o endocervical e uretralD anal e ocular tamb(m podem ser utilizadas,
7aginal em casos especficos, Hscolha adequada do sKab& depende da
finalidade da coleta, 8Kab n4o tratado& a fresco de bacteriocopia e algumas
culturas bacteriol#gicos, desativam os gonococos por causa dos cidos gra9os,
impedi o crescimento, Bonococo& alginatado ou com carv4o, Jmunoflorecencia
direta Hlisa e Clamidia n4o utilizam alginatado ou carv4o, dei9am resduos e
atrapalha o teste,"eios de cultura temperatura ambiente )* e )L graus,
Jdentifica04o correta do material,
Am!")%a" ma"c&'$a"
/rimeiro fa0a coleta de amostra a fresco& cCndida sp e gardinerela, e
tricomonas, /e0a que o paciente retraia o prepMcio e em seguida limpe a
glande e a secre04o, que n4o serve para o teste, Na por04o da uretra anterior a
; ou - ) cm do meato uretral e9terno, onde h uma regi4o onde se encontra os
microorganismos, fossa navicular,a uretra deve estar reta, introduzir um sKab
com algod4o n4o tratado no canal uretral at( atingir a fossa navicular e gire o
sKab N a ?* vezes delicadamente para absorver a secre04o , 5omogeneizar
a secre04o com uma gota de solu04o salina em uma lCmina previamente
identificada, cobrir com uma lamnula, Eeve ser feito a anlise do e9ame no
mesmo local da coleta o transporte altera a sensibilidade desse m(todo,Coleta
para bacterioscopia de B'A"& dessa vez utiliza sKab n4o tratado, voc repete
o procedimento anterior e faz um esfrega0o a lCmina e procede com a
colora04o para a anlise,"eio de cultura para Bonococo& sKab alginatado ou
com carv4o e inocule o sKab com a secre04o dentro do meio de -ahOer "artin
modificado e Hrlins,Na coleta para Bonococo e Clamidia deve ser feito de
manh4, ou umas A horas antes do paciente urinar,Clamidia ( uma bact(ria
intracelular utilize sKab com aste de alumnio e algod4o n4o tratado, se
necessrio limpe novamente a glande e a secre04o emergente, Jntroduzir o
sKab mais profundamente, uns P cm e gire de N a ?* vezes, para colher o
m9imo de c(lulas epiteliais, /ara o correto diagn#stico a amostra colhida deve
conter no mnimo 2* c(lulas epitelias
Am!")%a" 3#m$$a"
A coleta de amostras de secre01es uretrais& Bonorr(ia e clamidia,Coleta
uretral& a primeira ser feita, pois ap#s a introdu04o do especulo pode
contaminar a uretra com bact(rias vaginais, azer a e9press4o das glCndulas
para uretrais pressionando com o dedo m(dio, inserir uns ) cm na uretra girar
delicadamente no mnimo de N a ?* vezes, inocule no meio de cultura,N4o
utilize especulo lubrificados, a a04o de lubrificantes podem desativar os
gonococos impedindo seu crescimento no meio de cultura, H a paciente n4o
deve ter urinado no mnimo em A horas,
Jntroduza o especulo vaginal, observe a endocervice e canal endocervical e as
paredes e o fundo do saco vaginal, A coleta da secre04o do fundo do saco
vaginal permite o e9ame a fresco para cCndida sp, tricomonas, gardinerela,
N4o utilize est secre04o para anlise de Clamidia e nem cultura
Bonococo,Colha a secre04o no fundo do saco vaginal para e9ame a fresco,
/ara pesquisa de Neisseria Bonorreia atrav(s de cultura, utiliza a secre04o
endocervical, Qacterioscopia de Bram n4o ( Mtil para a identifica04o de
Bonococo <rendimento apenas de L*3>,Rimpe com gaze est(ril o fundo do
saco vaginal e a endocervice, em seguida sem tocar nas paredes vaginais
introduza o sKab cerca de ? cm no canal endocervical gire de N a ?* vezes
para absorver a secre04o, retire sem tocar nas paredes vasginais, inocule a
amostra em meio de -ahOer "artin modificado e Hrlins, este meio de preserva
a amostra por no m9imo N horas,N4o deve se utilizar al0as bacteriol#gicas
para fazer a coleta, para n4o causar traumatismo na endocervice,/ara anlise
de Clamidia o procedimento ( o mesmo realizado para Bonococo, Eever fazer
um esfrega0o fino e homogeneio para fazer testes de imuno florecncia direta
ou inocular o sKab em meio transporte para e9ame do tipo Hliza,
A coleta para Clamidia deve ser feita antes da coleta para Bonococo se
utilizar sKab com carv4o,Jnocula04o e semeadura e prepara04o de esfrega0o e
conserva04o, transporte& /ara Bonococo deve-se fazer duas lCminas, para
sempre ter uma de reserva em caso de acidente, utilizar lCminas limpas e
desengorduradas, Birar o sKab sobre a superfcie central da lCmina
delicadamente obedecendo Fs margens, 8ecar a temperatura ambiente nunca
no fogo, pois o calor desidrata as c(lulas dei9ando o esfrega0o inadequado
para a anlise,7ioleta de metila . cont(m fi9ador, Jmuno florecncia direta para
Clamidia <esfrega0o fino e homogneo> com o mesmo procedimento pingando
sobre o esfrega0o com P gotas de etanol para fi9ar, dei9e secar naturalmente e
embrulhe com papel alumnio, Jdentifique e9ternamente a embalagem,
conserve por at( $) horas at( ser levado para o laborat#rio ou congele a
menos )* graus, "eio de transporte a temperatura ambiente em caso de
cultura de gonococo, Jntroduzir completamente o sKab no tubo com meio de
Hmis ou Hsturt apenas por at( N horas e depois semeado no meio de -ahOer
"artin, Assegurar que o meio de -ahOer "artin est bom para o uso e a
temperatura ambiente, Com o sKab fa0a no meio da placa uma estria em forma
de G girando delicadamente durante todo o processo e depois re-estrie com
uma al0a bacteriol#gica no sentido inverso do G, Coloque a placa com o meio
voltado para bai9o dentro de uma lata, Neisseria Bonorrea S fastidiosa
necessita de meio seletivo& atmosfera com C@
)
<entre A a $
3>,
temperatura
controlada e umidade cerca de +*3,
/ara garantir a umidade coloque algod4o embebido com gua, e para
manter a atmosfera de C@
)
& use uma vela colada na parede da lata, aceda a
vela e fei9e a lata e vede com fita adesiva ou esparadrapo, ou um comprimido
efervescente dentro de uma placa com algod4o embebido com gua, tampe a
lata como no m(todo da vela,Hncube em estufa em temperatura de A2 graus
em um perodo de )P a PN horas,
/ara o transporte adequado v-se& todos os tubos, lCminas identificadas e
embaladas corretamente e placas est4o identificadas, 8e as amostras colhidas
no meio de Himins est4o dentro do perodo de seguran0a, 8e as placas
semeadas no meio de -ahOer "artin est4o um perodo de )P e PN horas dentro
de uma lata vedada com temperatura e atmosfera de C@) e umidade
adequadas, Coloque as amostras em cai9as t(rmicas sem gelo,Hm nenhum
caso as amostras devem ser transportadas em bai9as temperaturas porque
inativa o Bonococo, As placas semeadas em Tahyer Martin devem ser
transportadas dentro das latas com atmosfera de umidade e C@
)
adequadas,
As amostras para teste de ChlamOdia por imunoflorecncia direta e teste tipo
Hliza devem transportadas em cai9a t(rmicas com gelo,
TDc$ca" d# "#m#ad&%a
8empre trabalhar atrs da chama do bico de busen,para realizar as
t(cnicas de semeadura,
8emeadura quantitativa com al0a de calibarada <? ou ?* microlitro>&
introduz a al0a calibrada na amostra a ser semeada, faz-se in#culo inicial de
um ponto ao outro da placa, com uma al0a de repicagem faz-se estrias
<t(cnica por esgotamento> por toda a placa, Hsta t(cnica ( comumente utilizada
para urocultura,
8emeadura por esgotamento para semiquantifica04o& semear em uma
rea fazendo estrias, flambar a al0a de repicagemD pegar um in#culo inicial da
rea anteriormente semeada e fazer estrias em uma segunda rea, flambar a
al0aD semear em outra rea, pega-se um in#culo inicial da rea anteriormente
semeada e faz-se estrias, -(cnica utilizada para se obter colTnias isoladas,
8emeadura em tubos& esta t(cnica pode ser utilizada para semeadura
em meio lquido, em meio s#lido e em s#lido inclinado, No meio lquido introduz
a al0a com a amostra e homogenezaD em meio s#lido <analise de motilidade>
introduz a agulha <com a amostra> e retira-a do meioD para meios de cultura
s#lidos inclinados, fura com a agulha introduz at( o fundo do meio <at( um fai9a
dependendo do meio> volta e semeia ou repica na com a agulha ou al0a na
superfcie do meio, Hst t(cnica depende da analise a ser realizada e do meio
a ser utilizado,
U%!c&')&%a
oi estudado a cultura de urina de .ato m(dio, cultura de urina com
contagem de colTnias, cultura de urina,
As vias urinrias tanto bai9as quanto altas s4o comumente acometidas
por microorganismos, @s agentes etiol#gicos que mais frequentemente causam
esse tipo de infec04o s4o enterobact(rias, como Hscherichia coli, Ulebsiella
pneumoniae, 8taphOlococcus saprophOticus e enterococcus spp, Eeste modo
v se necessria a utiliza04o de t(cnicas que possam identificar tais parasitas,
como a urocultura,
Coleta da amostra& Colher de preferncia a primeira urina da manh4 em
frasco est(ril de tampa com rosca e de boca larga ou coleta obtida desde que o
paciente retenha a urina por pelo menos trs horas antes de realizar o e9ame,
Antes da coleta deve-se ser realizada higieniza04o da regi4o genital,
Eesprezar o primeiro .ato e coletar o segundo <mais indicado para a
urocultura>, A coleta de .ato qualquer s# ( aceita para crian0as, deve-se
realizar a higieniza04o da regi4o genital da crian0a e depois colocar o saco
coletor est(ril, -rocar o saco de A* minutos a ? hora, repetindo a higiene, !rina
de paciente com sonda vesical n4o ideal para urocultura, 8endo necessria a
higieniza04o na cCnula com lcool <$*3>, !tilizando-se se seringa e agulha
est(reis puncionar ?* mR e enviar imediatamente ao laborat#rio, 5 ainda a
coleta por pun04o suprapMblica, procedimento pouco utilizadoD e amostra de
urina de primeiro .ato, utilizada como substituto de secre04o uretral,
N4o devem ser recebidas amostras de recipientes coletores ou sacos
sondados, frascos su.os, amostras de mulheres em perodo menstrual ou com
quaisquer outras caractersticas que possam atrapalhar a anlise,
@ frasco s# deve ser transportado em temperatura ambiente por no
m9imo ) horas, Ap#s este tempo a amostra deve ser refrigerada e processada
o mais rpido possvel, @ volume depende da metodologia empregadaD para a
urocultura utiliza-se ) mR,
A$)A!C%ama
V a determina04o in vitro da sensibilidade ou resistncia de bact(rias a
um ou vrios antibi#ticosD compostos qumicos produzidos por microrganismos,
que, em pequenas concentra01es, s4o capazes de ocasionar a morte ou
inibi04o do crescimento de outros microrganismos,
@s testes de sensibilidade s4o indicados para qualquer organismo
responsvel por um processo infeccioso que e9i.a terapia antimicrobiana,
quando ( impossvel predizer a sensibilidade desse microrganismo, mesmo
conhecendo a sua identifica04o, Hstes testes s4o indicados, com maior
freqIncia, quando se acredita que o organismo causador pertence a uma
esp(cie capaz de apresentar resistncia aos agentes microbianos normalmente
usados,
/ara a realiza04o do antibiograma em rotina laboratorial utiliza-se
metodologia de difus4o em meio s#lido, utilizando discos impregnados com
doses conhecidas de antibi#ticos e colocados em contato com a bact(ria
inoculada na superfcie do meio, A determina04o do grau de sensibilidade com
ou resistncia da bact(ria est relacionada com o diCmetro das zonas de
inibi04o formadas em torno dos discos-difus4o,
Mc!'!Ca
"icologia ( a cincia que estuda os fungos, estes s4o organismos
pertencentes ao 'eino ungiD podem e9istir como c(lula Mnica, ou formar um
corpo multicelular dito mic(lio, que consiste em filamentos denominados hifasD
s4o encontrados preferencialmente em ambientes Mmidos,
@s fungos s4o responsveis por diversas patologias que acometem o
ser humano, As ta9as de infec01es por estes microrganismos aumentaram na
Mltima d(cada,
As micoses s4o as les1es causadas por fungos mais conhecidasD sendo
a pele em condi01es adversas, canal de entrada para os agentes causadores
destas infec01es, As superficiais s4o as mais incidentesD em que o fungo atinge
a superfcie da pele ou das mucosas, 8endo caracterizadas por vermelhid4o,
descama01es ou esbranqui0amento do local acometido, Comumente atingem
as unhas, p(, couro cabeludo, virilha, no tronco, pesco0o, na fase e nos
membros,
Eiante das inMmeras infec01es que podem ser causadas por fungos, v-
se a importCncia de m(todos que identifiquem tais agentes patol#gicos,
Hstes agentes podem ser identificados pela cultura e pelo e9ame a
fresco <t(cnica realizada em aula>,
Instrues de coleta:
Antes da realiza04o da t(cnica ( preciso das algumas orienta01es gerais
ao paciente, como& retirar o esmalte, fazer a higiene da unha <se for o local
acometido>D n4o fazer o uso de pomadas e ou cremesD em caso do uso de
antifMngicos ou o uso de outros produtos <desinfetantes, gua sanitria dentre
outros>, suspender o uso do medicamento ou produto, trinta dias antes da
coleta do material,
No momento da coleta da amostra, preencher corretamente o protocolo
de coletaD e9trair algumas informa01es e9tras do paciente, como& profiss4oD se
tem contado com animaisD contato com o solo, tempo de evolu04o da les4o,
"arcas no verso do protocolo, a regi4o acometida onde ser realizada a
coletaD registrar, o mais detalhadamente possvel, o aspecto das les1esD colher
separadamente com identifica04o adequada, mais de um stio no mesmo
paciente, quando houverD o pre0o do e9ame ( por coleta, ou se.a, dois stios de
coleta, dois e9ames a serem pagos pelo cliente, 8e necessrio comunicar ao
paciente a possibilidade de nova coleta, para confirma04o de resultado,
Eescri01es e termos utilizados em micologia deacordo com a parte do corpo
onde ser realizada a coleta, H9& entre o )W dedo indicador e o AW dedo
mediano& coleta entre o )W quirodctilo e o AW quirodctiloD coleta no pesco0o&
cervicalD coleta atrs do .oelho& coleta na fossa poplteaD entre outros, /egou a
amostra colocou na lCmina com ?gota de U@5 e observou na ob.etiva de
P*,aumento de P** vezes,
@ que poder ser observado na anlise #ptica&
No e9ame micol#gico direto poder observar a presen0a de c(lulas
leveduriformes isoladas ou em brotamento, hifas ialinas <claras> e demcias
<escuras>D hifas aceptadas <sem cepto> ou ceptadas <com cepto> com
estruturas de reprodu04o <artroconid(o> ou sem artrocondeo Hm caso de
anlise de plo& observar se o fungo ( ectotri9 ou endotri9D
REFERENCIA
-@'-@'A, B, J, et al, Mc%!A!'!Ca. /orto Alegre, Artmed Hditora, )***,
"!''AX, /, ', et al. Mc%!A!'!Ca MDdca, 'io de Janeiro& Hd, Buanabara
Uoogan, )***,
Eisponvel em Y http&==KKK,laboratorioreacao,com,br=
procedimentos-para-e9ames=baar-pesquisa-?Z,