I TESM, Campus Puebla: Escuela de I ngeniera y Tecnologas de informacin
Periodo Enero-Mayo 2014
Modelado de curva de crecimiento de bacterias *Aldo Betancourt Snchez, Carla Barcel Chong, Ivn Eduardo Tehulos Castillo, Juan Carlos Lpez Medina, Kayra Castillo Cruz (IBTs)* *(Tecnolgico de Monterrey, Campus Puebla);* *Profesor que supervisa el proyecto: Dr. Salvador Lobato Larios*
RESUMEN El objetivo de este proyecto es modelar a partir de datos experimentales una curva de crecimiento bacteriano y posteriormente ajustarla mediante un ajuste de curvas por mnimos cuadrados para poder observar con mayor precisin el comportamiento del microorganismo en las distintas fases de crecimiento. Adems, se determinar el tiempo de crecimiento promedio al calcular el rea bajo la curva, de la fase exponencial, mediante un mtodo de integracin.
INTRODUCCIN El modelo en el cual la poblacin bacteriana se duplica en cada periodo fijo de tiempo se denomina crecimiento exponencial. Una vez que trasladamos este modelo a un sistema de coordenadas se puede generar una curva cuya pendiente aumenta constantemente. Este modelo se puede emplear para modelar el crecimiento de una poblacin bacteriana, lo que resulta de gran inters para la industria que trabaja con bacterias, por ejemplo los lcteos, ya que les permite analizar qu microorganismo prolifera ms rpido y en consecuencia aumenta su produccin. Esta curva de crecimiento puede dividirse en distintas fases: fase de adaptacin, fase exponencial, fase estacionaria y fase de muerte. En cada una de ellas se puede deducir lo que sucede con el microorganismo mediante el comportamiento de la grfica.
METODOLOGA Basndonos en que todas las bacterias presentan un comportamiento similar en su crecimiento, se decidi seleccionar los datos reportados experimentalmente de una bacteria al azar y analizar de manera grfica su comportamiento. A partir de dichos datos se realizaron grficas y para poder estudiarlos con mayor detalle se procedi a realizar un ajuste de curvas para cada fase y as tener una visin ms clara de lo que ocurre en cada una de ellas. La metodologa se divide en cinco pasos, cuatro correspondientes a las fases del crecimiento bacteriano y el ltimo realizado durante la fase exponencial para obtener la cantidad promedio de microorganismos que crecieron en determinado tiempo.
Fig. 1 Grfica de crecimiento microbiano.
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1) Fase de adaptacin o Lag:
Por medio de un ajuste en los datos en la figura 1 se obtuvo la siguiente grfica:
2) Fase Exponencial:
En base a los datos de la figura 4 se model la siguiente curva:
Fig. 2 Datos obtenidos experimentalmente de la Fase de Adaptacin del crecimiento microbiano. Fig. 3 Grfica de comportamiento lineal de la Fase de Adaptacin del crecimiento microbiano. La grfica no se encuentra ampliada. Los puntos azules indican el comportamiento de los datos antes del ajuste. Fig. 4 Datos obtenidos experimentalmente de la Fase Exponencial del crecimiento microbiano. Fig. 5 Grfica de comportamiento exponencial de la Fase Exponencial de la curva de crecimiento microbiano. La grfica no se encuentra ampliada. Los puntos azules indican el comportamiento de los datos antes del ajuste. Esta fase ha mostrado una menor dispersin entre los distintos datos.
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3) Fase Estacionaria:
A partir de los datos mostrados en la figura 6 se model la grfica siguiente:
4) Fase de Muerte:
A partir de la figura 8 se model el siguiente grfico:
5) Crecimiento promedio Se utiliz la curva generada por el ajuste exponencial de los datos de la figura 4 para encontrar el nmero promedio de clulas generadas por unidad de tiempo. Por esto nos referimos a la cantidad de bacterias generadas en cierto tiempo. Fig. 6 Datos obtenidos experimentalmente de la Fase Estacionaria del crecimiento microbiano. Fig. 7 Grfica de comportamiento lineal de la Fase Estacionaria del crecimiento microbiano. La grfica no se encuentra ampliada y los puntos azules muestran la dispersin de los datos antes del ajuste. Fig. 9 Grfica de comportamiento lineal de la Fase de Muerte del crecimiento microbiano. La grfica no se encuentra ampliada y los puntos azules muestran la dispersin de los datos antes del ajuste. Fig. 8 Datos obtenidos experimentalmente de la Fase de Muerte del crecimiento microbiano.
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Los datos arrojaron que en siete horas, la poblacin fue de 160,273.58 cl./mL y por lo tanto el crecimiento promedio de clulas por hora es de 2,662.39 cl./hr. DISCUSIN DE RESULTADOS Gracias a la tcnica de ajuste de curvas pudimos obtener una mejor aproximacin de los datos recolectados en el conteo de clulas. Al principio los datos recolectados estaban un poco dispersos y no se poda apreciar la curva de crecimiento de manera apropiada o presentable. En los resultados, los datos se logran observar de manera adecuada. Fase de adaptacin o Lag: Esta fase vara para cada tipo de microorganismo. En este caso, los datos estaban muy dispersos debido a que el microorganismo est asimilando los nutrientes a los que se le expone, sin embargo se sabe que esta fase es representada por una lnea recta, dado que al estarse adaptando no se espera que haya crecimiento. Por esta razn, el ajuste se puede considerar adecuado. Fase exponencial: Esta es la fase de crecimiento bacteriano, y como el nombre lo indica, es representada por un crecimiento exponencial. Esto se debe a que los microorganismos ya han asimilado los nutrientes del medio y sigue un crecimiento celular y una posterior divisin de los mismos. Se puede apreciar en la grfica ya ajustada que los resultados embonan perfecto al ajuste. Fase estacionaria: Esta fase comienza cuando los nutrientes y el espacio se van agotando, o el microorganismo comienza a producir toxinas, lo que ya no permite el crecimiento de los mismos. Por esta razn, se puede observar que tambin es un tiempo donde las bacterias se quedan estticas, lo cual puede representarse con una lnea recta, tal y como se hizo en el modelado. Al igual que en la fase de adaptacin, los datos pueden presentarse dispersos debido a que el microorganismo puede encontrar reservas de nutrientes y agotarlas en muy poco tiempo. Fase de muerte: La muerte bacteriana tambin es exponencial debido a que despus de que los nutrientes se terminan por completo comienzan a morir. Se puede representar adecuadamente con un ajuste exponencial. Crecimiento promedio: Con una estimacin del rea bajo la curva de la fase exponencial, se obtuvo el tiempo promedio de crecimiento de la poblacin de microorganismos, estimando cada clula como un microorganismo. CONCLUSIONES El anlisis del crecimiento microbiano es muy importante para el estudio de cualquier microorganismo dado que ste nos brinda mucha informacin sobre las necesidades del mismo y de cmo se comporta en distintos ambientes y bajo ciertas condiciones. As mismo, es necesario tener las herramientas adecuadas para lograr que el estudio de los datos sea preciso y poder realizar conclusiones bien justificadas. Es por eso que para el estudio de las curvas de crecimiento microbianas, se utilizan los ajustes de curvas que ayudan al investigador a comprender mejor la naturaleza de los datos y su comportamiento. Por otra parte, aunque ya se sabe que en el crecimiento bacteriano se encuentran fases con caractersticas exponenciales y otras de caractersticas lineales, lo importante es saber con qu velocidad ocurren dichos procesos y la relacin que hay entre el
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nmero de microorganismos generados por unidad de tiempo. Por lo tanto, obtener la ecuacin de los ajustes lineales es muy importante para conocer dichos datos a travs de las pendientes e intersecciones generadas. REFERENCIAS -Roger Stainer, J. I. (1992). Microbiologa. Barcelona: Revert.